正常人外周血单个核细胞白细胞介素-2受体荧光定量方法研究(简报)

本文探索了应用荧光分光光度计定量测定正常人外周血单个核细胞白细胞介素-2受体(IL_2R)的方法及其条件。以PHA与ConA诱导单个核细胞IL_2R表达的最适细胞浓度为3×10~6/ml。PHA和ConA最适浓度分别为100μg/ml和10μg/ml,PHA诱导较ConA为优。PHA诱导细胞IL_2R表达24小时达到高峰,尔后逐渐下降。第一抗体(抗—Tac)与第二抗体(荧光抗体)的最适浓度分别为1:50和1:32,两种抗体与单个核细胞孵育时间分别以20和10分钟为好。检测了同一标本不同复管的细胞(1×10~6)IL_2R结合荧光抗体M为(5.22±0.45)×10~(-10),变异     

人外周血单个核细胞白细胞介素-2受体的荧光定量法研究

本文探索了应用荧光分光光度计定量测定正常人外周血单个核细胞介素-2受体(IL_2R)的方法及其条件.以PHA与ConA诱导单个核细胞IL_2R表达的最适细胞浓度为3×10~6/ml:PHA和ConA最适浓度分别为100μm/ml和10μg/ml,PHA诱导较ConA为优.PHA诱导细胞IL_2R的表达24h达到高峰,尔后逐渐下降.第一抗体(抗—Tao)和第二抗体(荧光抗体)与单个核细胞孵育时间分别以20min和10min为好.检测同一标本不同复管的细胞(1×10~6)IL_2R结合荧光抗体mol(简称M)为5.22±0.45×10~(10),变异系数(CV)为8.6％,表明该法稳定性较好.测定5例正常人细胞(1×10~6)IL_2R结合荧光抗体M为4.8±0.97×10~(10).CV为20.2％,结果表明该法能较客观检测出不同个体IL_2R表达.     

白细胞介素-2和干扰素诱生的相互调节作用

探讨人外周血单个核细胞(PBMC)在丝裂原刺激后产生白细胞介素-2(IL_2)和干扰素(IFN_s)的关系。PHA、SPA、ConA、PolyI:C均可诱导IL_2的产生。如联合采用PolyI:C PHA、PolyI:C ConA在IL_2的诱生中有明显诱生协同作用。IFN-α PHA、IFN-γ PHA对IL_2的诱生也能明显提高效应。IL_2还能明显增强IFN-α和IFN-γ的生成。若将IL_2 PHA联合刺激可加强IFN-γ生成作用,IL_2 NDV联合刺激可提高IFN-α的生成。     

再生障碍性贫血T淋巴细胞功能异常

采用白细胞介素-2依赖细胞株MTT代谢法,甲基纤维素半固体培养法和间接免疫荧光法,测定并观察15例再生障碍性贫血(简称再障)患者外周血单个核细胞的白细胞介素-2(IL_2),T淋巴细胞集落(CFU-TL)和CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+和CD_(2 5)~+引细胞。研究发现:患者外周血中CD_8~+和CD_(2 5)~+细胞增加、IL_2产生增加、CFU-TL数减少。患者CD_(2 5)~+细胞与自身的CFU-TL数呈负相关。提示患者T淋巴细胞功能异常,激活淋巴细胞的增加可能是体外CFU-TL生成低下和体内淋巴细胞减少的原因之一。     

广西1999年医药卫生科研进展(上)

1.CD_3AK/IL-2加中药治疗原发性肝癌的研究:广西肿瘤防治研究所(肿瘤医院)采用正常人外周血单个核细胞(淋巴细胞)经加用抗CD_3单克隆抗体辅助以少量的基因重组人白细胞介素2(IL_2)和植物血凝素(PHA)诱导外周血淋巴细胞,成功地研制出一种能识别并具有抗瘤活性和免疫效应的抗CD_3单克隆抗体激活的杀伤细胞(CD_3AK细胞)。体外研究显示有显著抗肿瘤活性且毒副反应低,对140例中、晚期肝癌治疗观察,CD_3AK细胞 化疗 中药组,其疗效显著高于其他单纯对照组。CD_3AK细胞是继LAK细胞后又一种有效的杀瘤细胞,为治疗中、晚期肝癌提供一种有效手段。 2.癌患者肿瘤细胞、外周血白细胞体内外药敏相关性研究:广西肿瘤防治研究所为改善化疗效果及减少骨髓抑制,进行癌症患者肿瘤细胞、外周     

白细胞介素-2受体的研究进展

白细胞介素-2(IL_2)是T淋巴细胞产生生的一种重要的淋巴因子,在免疫反应中起重要调节作用,可直接或间接调节T和B细胞的增殖反应,活化杀伤细胞和增强B细胞抗体分泌等。IL_2发挥生物学活性的前提是必须结合到激活的免疫细胞白细胞介素-2受体(IL_2R)。近几年来,对IL_2R的化学组成、分类、基因控制与表达及影响因素、IL_2R的功能与某些疾病的关系等均有较深入的研究,本文仅就上述问题作一综述。     

老年人末梢血T淋巴细胞分泌淋巴因子的能力

测定了39份老年人末梢血淋巴细胞(PBL)产生白细胞间介素2(IL_2)及γ-干扰素(IFNγ)的能力。供者年龄介于56～79岁间,取血时未患病,经分层液分离的PBL(1×10~5ml),在植物血凝素(PHA,100ug/ml)刺激下,37℃48小时培养,获含细胞因子的上清液(CK-SN)。39份CK-SN中,平均含IL_2活性为9.7±9.8μ/ml(用IL_2-依赖细胞株CTLL滴定)。与正常中、青年组(145份,IL_2活性为34.2±8.3μ/ml)相比,老年人PBL产生IL_2的能力要低3.6倍,且在老     

乙型肝炎患者白细胞介素2水平测定

观察了30例乙型肝炎患者和20例正常人外周血单个核细胞(PBMC)在PHA 刺激下产生白细胞介素2(IL_2)能力。发现乙肝IL_2水平明显下降,尤以慢性活动性肝炎为著,同时还发现患者对HBsAg 应答产生IL_2能力下降。提示免疫调节功能的紊乱可能在乙肝发病中起重要作用,辅助性T 细胞功能下降,IL_2水平低下可能易使乙肝向慢性化方向发展。     

血吸虫病患者白细胞介素1、2诱生水平的变化及其相互关系

作者对56例血清HBsAg和抗-HBc IgM均阴性的各期血吸虫病患者(急性组17例,慢性组14例,晚期组25例),检测了外周血单核细胞体外诱生白细胞介素1(IL_1)、单个核细胞诱生白细胞介素2(IL2)的水平。结果;急性组IL_1和由血吸虫成虫可溶性抗原(SWAP)及虫卵可溶性抗原(SEA)诱生的IL2水     

香加皮羽扇豆烷乙酸酯对人外周血淋巴细胞免疫调节功能的影响

目的 研究香加皮中提取的羽扇豆烷乙酸酯(CPLA)对正常人外周血淋巴细胞和吞噬细胞免疫调节功能的影响.方法 无菌分离人外周血淋巴细胞和巨噬细胞,加入PHA和不同质量浓度的CPLA,MTT法检测其对淋巴细胞增殖及巨噬细.胞对食管癌细胞株ECA-109生长的影响;RT-PCR法检测CPLA对γ-干扰素(INF-γ)mRNA表达的影响;ELISA法检测CPLA作用后淋巴细胞和巨噬细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)等细胞因子分泌的变化.结果 5～40μg/mL CPLA能明显增强PHA活化的人外周血淋巴细胞的增殖(P<0.01);20、40 μg/mL的CPLA能使淋巴细胞IFN-γ mRNA的表达水平明显升高(P<0.01);用CPLA处理后的巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤功能明显增强(P<0.01),并证实了该作用可能与CPLA促进巨噬细胞分泌TNF-α增多有关;CPLA能促进淋巴细胞产生IL-2和TNF-α,并呈现浓度依赖性(P<0.01).结论 CPLA能增强人外周血淋巴细胞和巨噬细胞的免疫功能,发挥抗肿瘤作用.     

白细胞间介素1(IL_1)和白细胞间介素2(IL_2)在人类T克隆形成中的作用

测定 T 克隆的形成对研究 T 细胞分化具有重要意义。作者用 PHA 刺激人外周血淋巴细胞(PBL),研究了 IL_1千日 IL_2对这种活化后的 PBL 形成 T 克隆的作用.实验材料来自健康供血者的PBL。首先制备纯化的T细胞,     

肺结核患者可溶性白细胞介素-2受体水平、膜白细胞介素-2受体表达和T淋巴细胞亚群的研究

青岛医学院刘成玉等,为探讨可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)、膜白细胞介素-2受体(mIL-2R)水平及T淋巴细胞亚群的变化在肺结核发生发展中的作用,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法和碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法检测了78例肺结核     

可溶性白细胞介素2受体对淋巴细胞转化的影响

可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)与IL-2介导的免疫反应及一些疾病的病情变化密切相关,已日益引起医学界的重视。本实验在体外观察了sIL-2R对正常人淋巴细胞转化的抑制作用,并探讨其发生机制。 1 材料与方法 sIL-2R:sIL-2R标准品由长春白求恩医科大学基础医学院免疫学教研室提供。淋巴细胞:抽取正常人肘部血,抗凝,分离淋巴细胞,调至5×10~6/ml。淋巴细胞分离液:上溜市试剂二厂,质量密度在20℃为1.077。植物血凝素(PHA):上海市医学化验所。~3H-TdR:中国科学院原子能研究所,比活性81.4×10~(10)Bq/μmol。培养基:为IMDM无血清培液(简称培液)内加二疏基乙醇5×10~(-5)mol/L、庆大霉素200kU/L、丙酮酸钠110mg/L,无菌滤过。     

阿尔茨海默病血清IL-12、IFN-γ和IL-10检测及其临床意义

目的 探讨阿尔茨海默病 (AD)患者血清白细胞介素_12(IL_12)、干扰素_γ(IFN_γ)和白细胞介素_10(IL_10)检测的临床意义。方法 分离24例阿尔茨海默病患者血清 ,采用双抗体夹心ELISA方法检测血清IL_12、IFN_γ和IL_10水平。结果 轻中度AD组和重度AD组血清IFN_γ水平分别为 (17.72±18.25)ng/L和(25.31±46.38)ng/L,较正常对照组(5.95±2.72)ng/L显著增高 (均P<0.01) ;重度AD组血清IL_12、及IL_10水平分别为(62.23±65.45)ng/L和(17.10±8.08)ng/L,均较正常对照组水平明显增高 (均P<0.05) ;重度AD组血清IL_10水平较轻中度AD组(9.28±2.41)ng/L明显增高 (P<0.01)。结论 AD患者血清IL_12、IFN_γ和IL_10水平升高可能与患者的脑免疫病理性损伤有关。检测AD患者上述血清细胞因子水平 ,可在一定程度上了解AD患者的免疫应答程度和特点     

PHA激活的人外周血单个核细胞对丝裂原应答反应的特性

我们用植物血凝素(PHA)体外激活正常人外周血单个核细胞(PBMC)作应答细胞,研究丝裂原再刺激时淋巴细胞增生反应和分泌功能的变化。PHA激活3～6d的PBMC对丝裂原再刺激的应答反应与初刺激的应答相比,结果显示:①对PHA再刺激的增生反应强度变化很大,从明显高于到显著低于初次反应,决定于激活的淋巴细胞在体外休止时间的长短;②再次激活的淋巴细胞产生白细胞介素2(IL-2)的量显著高于初次激活的淋巴细胞,尤以体止1d的细胞为最高;③再次激活的淋巴细胞中膜IL-2受体(mIL-2R),又称Tac阳性细胞百分率显著降低和培养上清液中可溶性IL-2受体(sIL-2R)含量明显增高;④美州商陆有丝分裂原(PWM)不能诱导已激活的PBMC分泌IgG。     

白细胞介素2基因的表达及热休克对它的影响

研究人外周血T淋巴细胞中白细胞介素2(IL-2)mRNA的表达和分泌IL-2的活力,实验结果表明植物血凝素(PHA)单独诱导IL-2的能力很弱,诱导过程较长;加入促癌剂12-0-十四酰佛波-13-乙酯(TPA)后能诱导IL-2的早期转录,并增强16h后PHA诱导的转录作用和培养细胞的上层液中IL-2的活力。45℃,10min的热休克不影响IL-2的诱导合成。在分析、比较PHA,TPA和/或热休克影响的基础上,对T淋巴细胞激活过程中IL-2基因表达的调控机制进行了讨论。     

电针对中老年带状疱疹患者细胞免疫功能及早期血液流变学的影响

目的:探讨电针对中老年带状疱疹患者细胞免疫功能与早期血液流变学的影响。方法:选择中老年带状疱疹患者100例,随机分为治疗组、对照组各50例,采用双抗体夹心ELISA法检测血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R);流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+)及红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR)和红细胞免疫复合物花环(RBC-ICR);同时检测血液流变学。结果:与对照组比较,治疗组sIL-2R明显降低(P<0.01),T淋巴细胞亚群CD3+,CD4+,CD8+明显升高(P<0.01),CD4+/CD8+升高(P<0.05),RBC-C3bRR明显升高(P<0.01),RBC-ICR明显降低(P<0.01),血液流变学检测指标改善(P<0.05,P<0.01)。结论:电针疗法对中老年带状疱疹患者细胞免疫功能及早期血液流变学有一定的改善作用。     

外周血T淋巴细胞激活与哮喘发病的关系

目的：探讨外周血T淋巴细胞激活释放的细胞因子在哮喘发病中的作用。方法：采用酶联免疫法检测30例哮喘患者及20名健康人血清可溶性白细胞介素-2受体（sIL-2R)、白细胞介素（IL）-4、IL-5、肿瘤坏死因子（TNF）-α水平。结果：哮喘患者血清sIL-2R、IL-4、IL-5及TNF-α浓度均明显高于正常对照组。经糖皮质激素治疗后sIL-2R、IL-4、IL-5和TNF-α浓度显著下降。结论：T淋巴细胞激活释放的细胞因子在哮喘发病中起重要作用,糖皮质激素抗气道炎症作用,可能是通过抑制T淋巴细胞活化,减少细胞因子释放来实现的。     

大鼠脾内微量免疫法制备sIL-2R抗血清

将少量可溶性白细胞介素-2受体(Soluble interleukin 2 receptor,sIL-2R)吸附于葡聚糖Sephadex G-75和硝酸纤维薄膜,分别对两只大鼠进行脾内免疫,由此获得大鼠抗SIL-2R的多克隆抗体,此抗体对激活正常人外周血淋巴细胞的增殖、淋巴细胞转化具有抑制作用。     

白血病细胞培养上清液中肿瘤免疫抑制因子的分离与初步鉴定

从HL_(60)人早幼粒细胞白血病细胞株培养上清液(HL_(60)-SUP)中,经10％～50％饱和硫酸铵沉淀、DEAE-52(DE-52)阴离子交换柱层析、凝胶过滤及聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离出一种肿瘤免疫抑制因子(TDSF),分子量约为87kD(1D=0.992 1μ)。该因子是瘤细胞恶性增殖过程中的基因产物,但其分泌不完全被抗急非淋白血病药物所阻断。肿瘤细胞培养上清液无细胞毒作用。TDSF有兔疫抑制作用:能够抑制T淋巴细胞对PHA的增殖反应,抑制T淋巴细胞分泌IL_2,抑制外源性IL_2的淋巴细胞的增殖反应,其化学本质为蛋白质。