紫癜方对ITP模型小鼠TGF-β1和TLR4表达的影响

目的：观察两种制备方法获取的紫癜方提取物对特发性血小板减少性紫癜（ITP）模型小鼠TGF-β1和TLR4表达的影响。方法：免疫法建立ITP模型,设立正常组（C）、模型组（M）、醋酸泼尼松组（DC）、血美安组（X）、紫癜水提组（S）和紫癜醇提加水提组（G）,采用RT-PCR和Western Blot检测各组小鼠脾TGF-β1和TLR4的表达。结果：与M组比较,DC组、X组、S组和G组脾TGF-β1和TLR4 mRNA和蛋白表达升高;与DC组比较,S组和G组脾TGF-β1 mRNA和蛋白表达升高,G组脾TLR4蛋白表达水平升高;与X组比较,S组和G组脾TGF-β1、TLR4 mRNA和蛋白表达升高。结论：两种制备方法的紫癜方治疗ITP可能与上调脾组织TGF-β1和TLR4的表达有关。     

CD4+Treg细胞在急性髓细胞白血病中的变化及其意义

目的 研究Treg细胞在急性髓细胞白血病(AML)中的表达及其意义,并探讨Treg细胞在AML治疗前与缓解后的区别和联系.方法 流式细胞仪检测AML初治组(23例)、AML完全缓解(CR)组(23例)及正常对照组(22例)CD4+CD25+T细胞和CD4+FOXP3+T细胞分别占CD4+T细胞的比例,采用直接免疫荧光法标记T细胞特征抗原.结论 CD4+ FOXP3+T细胞占CD4+T细胞的比例:AML初治组明显高于正常对照组(P<0.01)和完全缓解组(P<0.01),而完全缓解组与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05);CIM+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例:经检验在各组中差异没有统计学意义(P>0.05).结论CD4+Treg细胞数量在初治AML中明显升高,治疗达完全缓解后恢复正常.     

紫癜方对ITP模型小鼠TGF-β1和TLR4表达的影响

目的:观察两种制备方法获取的紫癜方提取物对特发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠TGF-β1和TLR4表达的影响。方法:免疫法建立ITP模型,设立正常组(C)、模型组(M)、醋酸泼尼松组(DC)、血美安组(X)、紫癜水提组(S)和紫癜醇提加水提组(G),采用RT-PCR和Western Blot检测各组小鼠脾TGF-β1和TLR4的表达。结果:与M组比较,DC组、X组、S组和G组脾TGF-β1和TLR4 mRNA和蛋白表达升高;与DC组比较,S组和G组脾TGF-β1 mRNA和蛋白表达升高,G组脾TLR4蛋白表达水平升高;与X组比较,S组和G组脾TGF-β1、TLR4 mRNA和蛋白表达升高。结论:两种制备方法的紫癜方治疗ITP可能与上调脾组织TGF-β1和TLR4的表达有关。     

自身免疫调节因子对CD4+CD25+Treg细胞的影响

目的：观察自身免疫调节因子（AIRE）对CD4+CD25+Treg细胞的影响,探讨其在外周免疫耐受中的作用及机制。方法：pEGFPC3-AIRE质粒通过脂质体介导转染RAW264.7细胞;通过流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的数量;采用半定量RT-PCR法检测Foxp3和转化生长因子β（TGF-β）mRNA的表达;采用ELISA法检测TGF-β1水平。结果：AIRE转染的RAW264.7细胞可直接或间接诱导CD4+CD25+Treg细胞的产生及Foxp3 mRNA表达增强(P<0.05)。结论：表达在外周抗原提呈细胞（APCs）上的AIRE可直接和（或）间接影响CD4+CD25+Treg细胞的诱导产生及功能,从而可能在外周免疫耐受中发挥重要作用。     

益髓方对环磷酰胺致血小板计数减少模型小鼠的影响

目的 观察医院制剂益髓方对环磷酰胺致血小板计数减少模型小鼠的影响。方法 将72只健康KM小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、益血生胶囊对照组与益髓方大、中、小剂量组。分别予腹腔注射环磷酰胺,制备血小板减少症小鼠模型,观察益髓方大、中、小剂量对模型小鼠外周血血小板计数的影响。结果 与模型对照组比较,益髓方大、中、小剂量组小鼠外周血血小板计数均明显提升(P＜0.05)。与模型对照组比较,益血生胶囊对照组小鼠外周血白细胞计数明显升高(P＜0.05),益髓方各剂量组白细胞计数变化不明显。与正常对照组比较,用药各组小鼠骨髓增殖程度比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 益髓方大、中、小剂量组对环磷酰胺致血小板计数减少有治疗作用,且可能有降低化疗致骨髓损伤作用,益血生胶囊对环磷酰胺致白细胞计数减少有治疗作用,均值得进一步深入研究并推广应用。     

CD4^＋T细胞在ITP发病机制中的作用

免疫性血小板减少性紫癜（immune thrombocytopenic purpura, ITP）是一种免疫介导的获得性疾病,临床以广泛皮肤黏膜及内脏出血、血小板减少、骨髓巨核细胞发育成熟障碍、血小板生存时间缩短及抗血小板抗体出现等为特征。     

紫癜颗粒对ITP小鼠外周血小板调控因子影响

目的：原发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP）是临床常见的出血性疾病,其发病机制尚未明确。该文从血小板计数和细胞因子考察ITP的发病机制以及紫癜颗粒对ITP小鼠的影响。方法：采用免疫造模法,建立慢性ITP模型。空白组、模型组按0.3 mL/20 g体重剂量胃饲蒸馏水,各给药组分别按12 g/kg体重剂量分别胃饲中药对照药、西药对照药和紫癜颗粒,每日1次,连续给药14 d。血细胞计数仪测定小鼠外周血血小板计数,双抗体夹心ELISA法检测骨髓白介素3（IL-3）、白介素6（IL-6）、白介素11（IL-11）、转化生长因子（TGF-β1）、血小板生成素（TPO）浓度。结果：各给药组药物均能提高ITP小鼠外周血血小板计数,有统计学意义（P〈0.05）;与模型组比较,各给药组血IL-3浓度明显降低,IL-6浓度明显降低,IL-11浓度明显降低,中药对照组和治疗组TGF-β1浓度明显降低,中药对照组和治疗组TPO浓度明显升高,有统计学意义（P〈0.05）;与各给药组比较,治疗组优于其他给药组,有统计学意义（P〈0.05）。结论：中药对照药、西药对照药和紫癜颗粒均能够治疗ITP小鼠,以紫癜颗粒效果最优。紫癜颗粒能够升高ITP小鼠外周血小板计数,降低IL-3、IL-6、IL-11浓度和TGF-β1浓度,升高TPO浓度。     

紫癜颗粒对ITP模型小鼠外周血细胞因子IL-2、IL-6、IL-8的影响

目的观察紫癜颗粒对特发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠外周血细胞因子IL-2、IL-6、IL-8的变化,以及细胞因子IL-2、IL-6、IL-8与ITP发病的关系.方法采用放免法测定IL-2、IL-6、IL-8.结果ITp模型小鼠外周血细胞因子IL-2、IL-6、IL-8均上升,与正常对照组有明显差异(P＜0.05).结论紫癜颗粒对ITP模型小鼠外周血细胞因子具有明显的调节作用,提示细胞因子IL-2、IL-6、IL-8与ITP的发病、临床进展及预后有关.     

人初始CD4+CD25+调节性T细胞的功能分析

目的:分离人CD4 CD25 Treg细胞,并进行功能分析。方法:应用免疫磁珠分离正常人外周血中CD4 CD25 Treg细胞,流式细胞仪检测细胞内因子IL-4、IFN-γ和IL-10表达,与CD4 CD25-T细胞共同培养,加或不加入中和抗体抗IL-10和抗TGF-β,检测其抑制功能。结果:CD4 CD25 Treg细胞约占正常外周血中CD4 T细胞的6%(2.4%￣18.9%,n=15),主要合成IL-10,能够以依赖剂量和非依赖IL-10和TGF-β方式抑制CD4 CD25-T细胞的增殖。结论:CD4 CD25 Treg细胞是一群具有免疫抑制功能的T细胞亚群细胞。     

紫癜颗粒对免疫性血小板减少性紫癜模型小鼠骨髓细胞白介素-6及其蛋白表达的影响

目的 通过观察免疫性血小板减少性紫癜（ITP）模型小鼠骨髓细胞白介素-6（IL-6）含量及其蛋白表达的变化,探讨IL-6含量及其蛋白表达变化与ITP发病之间的内在联系.方法 采用酶联免疫方法检测ITP模型小鼠骨髓细胞IL-6含量变化;实时定量PCR法检测骨髓细胞IL-6mRNA表达.结果 模型组小鼠骨髓细胞IL-6含量及其蛋白表达明显升高,均有统计学意义（P《0.05）.结论 调节巨核细胞的作用因子IL-6参与了ITP的发病过程并发挥重要作用,紫癜颗粒通过调控骨髓细胞IL-6含量变化而达到有效治疗ITP的目的 .     

CD4＋CD25＋调节性细胞在特发性血小板减少性紫癜中发病机制中的作用

CD4＋CD25＋调节性T细胞（regulatory Tcell,Treg）是一群具有独特的免疫调节或免疫抑制作用的T细胞亚群,系维持机体自身耐受的重要组成部分,其功能紊乱或数目下降是导致自身免疫性疾病的重要原因之一。本文对CD4＋CD25＋Treg细胞的特征和作用、ITP的发病机制及CD4＋CD25＋Treg细胞在ITP发病中的作用等的研究进展作一综述。     

左归丸对小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞的影响

目的:观察左归丸制剂对小鼠脾细胞中Treg亚群及其相关细胞因子表达的影响。方法:BALB/c小鼠给予不同剂量左归丸处理后,利用流式细胞术检测小鼠脾细胞中Treg亚群(CD4+/CD25+)的变化;采用RT-PCR法检测小鼠脾细胞中IL-10、TGF-β、IFN-γ及Foxp3的表达水平;采用ELISA法检测小鼠外周血中IFN-γ的分泌水平。结果:小剂量左归丸对小鼠脾脏Treg亚群及相关细胞因子的表达没有显著影响;中剂量左归丸可明显上调小鼠脾脏Treg亚群比例(P<0.05),提高Treg特异性胞内信号Foxp3及相关细胞因子IL-10、TGF-β的转录水平,同时抑制IFN-γ的表达;大剂量左归丸可显著降低Treg细胞亚群比例,对Foxp3I、L-10、TGF-β、IFN-γ的表达均有明显的抑制作用(P<0.05)。随着中、大剂量左归丸处理小鼠IFN-γ的转录下调,血清中IFN-γ的水平也明显下降(P<0.05)。结论:左归丸可上调Treg细胞及相关细胞因子的表达水平,抑制IFN-γ的表达,但这种免疫效应有剂量限制性,大剂量应用时显示抑制作用,提示左归丸对Treg亚群有剂量依赖性的双向调节作用。     

免疫性血小板减少性紫癜患者CD4~＋CD25~（high）CD127~（dim）调节性T细胞检测及其意义

目的探讨调节性T细胞（Treg）在ITP患者发病中的作用机制及其与PAIgG之间的相关性。方法采用流式细胞术（FCM）分别检测ITP患者和健康体检者外周血CD 4＋CD 25highCD 127dimTreg细胞占CD 4＋T细胞比例及PAIgG的表达水平。结果 ITP组CD 4＋CD 25highCD 127dimTreg细胞比例较正常对照组明显下降（P〈0.05）;ITP组PAIgG表达水平明显高于正常对照组（P〈0.05）;Treg细胞与PAIgG之间呈负相关（r=-0.57,P〈0.05）。结论 ITP患者CD 4＋CD 25highCD 127dimTreg细胞水平显著下降,免疫抑制作用减弱,引起自身反应性T、B细胞活化增殖,T细胞亚群改变,PAIgG产生增加,并最终导致ITP发病。     

雾化吸入变应原对支气管哮喘外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg的影响

目的探讨CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在哮喘变应原雾化吸入减敏治疗的作用。方法粉尘螨和屋尘螨点刺阳性的支气管哮喘患者随机分为A组(常规治疗)和B组(变应原吸入减敏),各20例。B组雾化吸入特异性变应原,A组雾化吸入以生理盐水代替,两组给予相同的基础治疗。治疗前、后用流式细胞术(FCM)检测外周血中CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例;进行哮喘控制评分和肺功能、气道反应性测定。结果治疗后B组ACT评分高于A组,两组肺功能均有明显增加。B组支气管激发试验转阴率明显高于A组。B组外周血中CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例较A组明显升高(P<0.05)。结论 CD4+CD25+Foxp3+T细胞在变应原雾化吸入减敏防治支气管哮喘中发挥免疫调节作用。     

CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg调节性T细胞与移植肾长期存活的关系

[摘要] 目的 探讨肾移植术患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T 细胞( regulatory T cell , Treg) 百分含量,血清细胞因子IL-10的水平变化对移植肾远期存活的影响及其作用机制。 方法 肾移植术受者30例按肾移植术后恢复情况分为移植肾长期存活组16例,急性排斥组14例。健康志愿者20 例。分别检测外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg 百分含量、血清IL-10 水平、血清肌酐水平,所得结果进行相关分析。 结果　移植肾长期存活组CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量较正常组及急性排斥组均显著升高。CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量和血清IL-10 水平呈正相关(r=0.604,p<0.05),移植肾长期存活组的血清肌酐水平明显低于急性排斥组,CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量和血清肌酐水平呈负相关（r=-0.534,p<0.05）。结论 CD4+CD25+Foxp3+ Treg 有可能参与移植术后受者对同种异体移植肾免疫耐受,与受者长期存活密切相关;外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量可作为临床反映移植受者免疫功能状态的指标之一。     

溃疡性结肠炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的临床意义

目的 研究溃疡性结肠炎(UC)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量、相关细胞因子的水平以及Foxp3的表达,分析它们在UC发病中的作用.方法 收集UC患者及健康对照组外周抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞.分析UC患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率, RT-PCR检测T细胞Foxp3mRNA的表达.结果 与正常对照组相比,UC患者外周血CD4+T、CD25+T、CD4+CD25+T/CD4+T细胞百分率均显著下降(P﹤0.05),血清中细胞因子IL-10、TGF-β1的水平也明显低于对照组,T细胞Foxp3mRNA的表达也明显降低(P﹤0.05),并且CD4+CD25+T/CD4+T细胞百分率和Foxp3mRNA水平与UC患者疾病的活动指数呈负相关.结论 UC患者外周血存在细胞免疫功能失调,CD4+CD25+调节性T细胞数量与功能状态发生改变,T淋巴细胞耐受机制的破坏可能与UC的疾病活动状态和发病机制有关.     

Lewis肺癌小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞和TGF-β1与肺癌的相关性

目的:探讨Lewis肺癌模型小鼠脾脏组织中CD4+CD25+调节性T细胞和TGF-β1的表达水平与肺癌发生的关系。方法:采用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞的比例,ELISA法检测TGF-β1的表达水平。结果:荷瘤小鼠CD4+CD25+调节性T细胞表达水平为(21.91±12.34)%,高于对照组的(14.39±4.51)%(P<0.05),荷瘤小鼠TGF-β1表达水平(3.39±1.62)μg/L,高于对照组的(2.47±0.35)μg/L(P<0.05)。结论:荷瘤小鼠CD4+CD25+调节性T细胞比例和TGF-β1表达水平增高,提示二者可能参与Lewis肺癌的发生。     

ITP患儿免疫球蛋白、淋巴细胞亚群及Th17/Treg的表达分析

目的 探究免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患儿血小板相关免疫球蛋白(PAIg)、淋巴细胞亚群及辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)表达情况及其临床价值。方法 回顾性分析2018年9月至2021年9月徐州市儿童医院收治的92例ITP患儿作为病例组,另根据患儿性别、年龄为配伍原则,选取同期84例健康体检儿童为对照组。比较两组PAIg(PAIgG、PAIgA、PAIgM)、淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD19、CD16、CD56)及Th17/Treg水平,以Pearson相关性分析PAIg、淋巴细胞亚群及Th17/Treg的相关性,以受试者工作特征(ROC)曲线评估PAIg、淋巴细胞亚群及Th17/Treg对ITP患儿的预测价值。结果 与对照组比较,病例组PAIgG、PAIgA、PAIgM、CD8、CD19水平更高,CD3、CD4、CD4/CD8、CD16+CD56、Th17、Treg及Th17/Treg水平更低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性显示,PAIgG、PAIgA、PAIgM、CD8、CD19与Th17、Treg均呈负相关,CD3...     

CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭中作用

目的:探讨CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭发病过程中的表达。方法:采用流式细胞仪检测36例慢加急性肝衰竭患者、38例慢性乙型肝炎患者、40例无症状乙肝病毒携带者及40例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平,并追踪慢加急性肝衰竭组患者转归,评价好转组与未恢复组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分率差异。结果:慢加急性肝衰竭组、慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组及健康对照组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞分别为(5.14±1.03)%、(9.86±1.72)%、(7.93±1.67)%及(7.06±1.61)%,慢加急肝衰竭组外周血Treg细胞百分率显著低于慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组和健康对照组(P<0.01)。慢性乙型肝炎组外周血Treg百分率明显高于慢加急肝衰竭组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而无症状乙肝病毒携带组与健康对照组外周血Treg百分率比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的百分率与患者血清HBVDNA呈正相关。慢加急性肝衰竭好转组与未恢复组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢加急性肝衰竭患者发病可能与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达过低有关,Treg细胞表达水平不能预示慢加急性肝衰竭患者预后。