高效液相法测定二甲双胍格列吡嗪片中盐酸二甲双胍含量

目的建立高效液相法测定二甲双胍格列吡嗪片中盐酸二甲双胍含量。方法应用Grace Alltima TMC18(5um4.6*250mm)色谱柱,以甲醇-5mmol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(含有10mmol·L~(-1)十二烷基磺酸钠,用磷酸调节pH至3.5)(64:36)为流动相,进样量:20μl;流速为1.0mL/min;波长为231nm;柱温25℃。结果二甲双胍在10.21μg/ml-30.25μg/ml范围内呈现良好的线性关系,平均回收率为100.3%。结论本法专属性强、灵敏度高,为二甲双胍格列吡嗪片的质量控制提供依据。     

LC-MS和HPLC法测定人血浆中格列本脲和二甲双胍方法的建立

目的建立人血浆中盐酸二甲双胍的高效液相色谱和格列本脲的液相色谱-质谱测定方法.方法二甲双胍血浆样品经乙腈直接沉淀蛋白进样.分析柱:EC 250/4.6 NUCLEOSIL 100-5(4.6mm×250mm,5μm);流动相:0.03 mol/L(NH4)H2P04:乙腈(75:25,pH 7.0),流速1.0 ml/min;检测波长240 nm.格列本脲血浆中加入格列吡嗪为内标,经乙酸乙酯提取,进行LC-MS测定.色谱柱为ORBAX SB300C18柱(2.1 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈:0.1%乙酸铵(55:45),流速为0.2 ml/min;ESI选择性正离子检测.结果格列本脲浓度为2～200 ng/ml线性关系良好(r=0.999 8),盐酸二甲双胍浓度为6.25～4 000 ng/ml线性关系良好(r=0.999 9).二甲双胍和格列本脲方法的日内和日间RSD＜5%.结论所建立的人血浆中格列本脲的HPLC-MS测定方法和二甲双胍的HPLC测定方法灵敏、准确、简便,可用于格列本脲、二甲双胍的人体药代动力学研究.     

HPLC法测定人血浆中二甲双胍的浓度

目的建立测定人血浆中二甲双胍浓度的方法。方法反相高效液相色谱法,0.15 mL血浆加入内标,再加入饱和氢氧化钠水溶液碱化后,用2 mL正丁醇-正己烷(体积比2∶1)混合物萃取,再用适量质量分数为1%的甲酸反萃浓缩,以乙腈-磷酸二氢钾水溶液[磷酸二氢钾浓度:10 mmol/L,十二烷基磺酸钠(SDS)浓度:6 mmol/L,三乙胺0.12%,磷酸调pH=3.50](体积比30∶70)为流动相,用依利特Kypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)进行分离,检测波长为233 nm,柱温40℃。结果标准曲线的线性范围为10~1000 ng/mL,最低定量限为10 ng/mL。低、中、高3个质量浓度的质控样品的绝对回收率均大于78.0%(n=5),日内RSD均小于5.3%,日间RSD均小于8.7%(n=3)。结论该方法灵敏度高,准确、可靠,可用于二甲双胍药动学和生物等效性的研究。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中盐酸二甲双胍和罗格列酮浓度及其药代动力学

目的:建立LC-MS/MS同时测定人血浆中盐酸二甲双胍及罗格列酮浓度的方法,测定志愿者单次和多次顿服二甲双胍罗格列酮胶囊后盐酸二甲双胍和罗格列酮的血药浓度,估算其药代动力学参数。方法:血浆中加入盐酸苯乙双胍为内标,经乙腈沉淀蛋白,取上清直接进行LC-MS/MS测定。色谱柱为Phenomenex Luna CN 100A(150 mm×2.0 mm ID),流动相为CH3OH-30 mmol/L NH4Ac,pH 5.0(80∶20),流速为0.2 mL/min;ESI-MS/MS选择性反应正离子检测。临床试验方案采用拉丁方试验设计。结果:盐酸二甲双胍和罗格列酮的血浆线性范围分别为5~3 000 ng/mL和1.5~500 ng/mL,检测限均为1ng/mL。测定了12名志愿者单次和多次顿服二甲双胍罗格列酮胶囊后的血药浓度经时过程。结论:本方法操作简单,专属性强,灵敏度高,准确性好。盐酸二甲双胍和罗格列酮体内动力学行为符合线性药物动力学特征。     

用高效液相色谱-质谱-质谱法测定小鼠血浆和大脑中的石杉碱甲及药动学

目的建立小鼠血浆和大脑中石杉碱甲的液质联用测定法,测定灌胃给药后小鼠血浆和大脑中石杉碱甲浓度的动态变化以及药动学参数。方法小鼠血浆及大脑样品经液液萃取,用高效液相色谱-质谱-质谱(LC-MS-MS)联用法检测。色谱柱:PHENOMENEX C18柱,100mm×2mm,5micron;流动相为甲醇∶水(1%甲酸溶液)=60∶40;用于定量的离子为m/z243→154(石杉碱甲)和m/z278→203(内标:克仑特罗)。结果所建立的血浆的方法线性范围为1~1 000ng/mL,脑的方法线性范围为1~1 000ng/mL,它们最低检测限为1ng/mL,(r=0.999 0),RSD<7%,可以检测小鼠灌胃后石杉碱甲在血和脑中的浓度;血浆石杉碱甲浓度-时间变化可用一室模型拟合,主要药动学参数分别为Tmax=6min,Cmax=281ng/mL,AUC(0→tn)=35 266ng.L-1.min-1,AUC(0→∞)=38 056ng.L-1.min-1,t1/2=99min;在大脑中的药物浓度-时间变化用非房室模型拟合,主要药动学参数分别为Tmax=60min,Cmax=224ng/mL,AUC(0→tn)=44 344ng.L-1.min-1,AUC(0→∞)=58 571ng.L-1.min-1。结论该方法灵敏度高,简便快速,可用于药代动力学及相关研究;石杉碱甲在小鼠大脑中的消除速度比血浆缓慢。     

用RP-HPLC法测定血浆中盐酸二甲双胍的血药浓度

目的建立用RP-HPLC法测定盐酸二甲双胍血药浓度的分析方法。方法用RP-HPLC法将二甲双胍同血浆杂质分离,以二甲双胍峰高对其浓度进行线性回归,计算血药浓度。结果建立了用RP-HPLC法测定盐酸二甲双胍血药浓度的色谱条件。色谱柱为Dikma公司的DiamonsilC18柱(150mm×4.6mm,5μm);柱温为室温;流动相为V(CH3CN):V[0.02mol/LKH2PO4(每100mL含18%SDS0.32mL,85%H3PO4调pH=4.0)]=71:29;流速为1mL/min;紫外检测波长为230nm。标准曲线回归方程为C=0.0498H-0.00002,r=0.9999,n=3,线性范围为0.030-4.000mg/L。方法回收率为98.2%-99.0%,日内RSD为0.7%-4.6%,日间RSD为1.2%-5.8%。结论样品处理简便快速,测定方法准确可靠,可用于盐酸二甲双胍的血药浓度分析。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆和尿液中二甲啡烷的浓度

目的 建立高效液相色谱串联质谱法 (HPLC-MS/MS) 测定人血浆及尿液中二甲啡烷的浓度。 方法 以重蒸乙醚为萃取剂,采用Ultimate C₁₈ (50 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水-甲酸=75∶25∶0.05,流速为0.2 mL/min。采用正离子模式,ESI 离子源,MRM 模式检测,以利多卡因为内标定量,二甲啡烷和内标的检测离子对质荷比分别为 (m/z) 256.4→155.3和 (m/z) 235.4→86.1。 结果 二甲啡烷血药浓度在0.025~5.0 ng/mL范围内线性关系良好（ r=0.995 7),最低定量限为0.025 ng/mL;尿药浓度在0.1~20.0 ng/mL范围内线性关系良好（ r=0.998 3）,最低定量限为0.1 ng/mL。血浆方法回收率为103.38%～106.88%;尿液方法回收率为90.05%～101.40%。血药浓度日内、日间精密度相对标准偏差 (RSD)分别小于5.92%及5.70%,尿药浓度日内、日间精密度RSD分别小于10.35%及8.80%。 结论 本研究建立的方法准确、灵敏、可靠,可用于二甲啡烷的血药浓度和尿药浓度的测定及其药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定二甲双胍血药浓度

目的建立二甲双胍的高效液相色谱法及其片剂的血药浓度测定方法。方法采用高效液相色谱法测定二甲双胍血药浓度。色谱柱为Hypersil ODS(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水∶乙腈(70∶30,内含0.014moL/L磷酸氢二胺,0.003 moL/L十二烷基硫酸钠,加冰醋酸调pH值为6.8),流速为1.2 mL/min,检测波长232nm。结果二甲双胍血药浓度为50~2 000μg/L,浓度与峰面积比线性良好,相关系数r=0.999 0,最低检测浓度为50μg/L。高中低浓度样品的日内、日间测定RSD均<10%,绝对回收率均>70%。结论本方法简便、灵敏、准确、可靠,可作为二甲双胍血药浓度的测定方法。     

高效液相色谱法测定人血浆中二甲双胍的浓度

目的建立HPLC法测定人血浆中二甲双胍的浓度。方法用乙腈作为蛋白沉淀剂,色谱柱为150 mm×4．6 mm,5μm,流动相为V(乙腈)：V(甲醇)：V(水)：V(1．5%SDS)=35：15：42．5：7．5,流速1．0 mL/min,DAD检测波长234 nm。结果二甲双胍的线性范围为0．154～2．316μg/mL,最低检测限为0．111μg/mL(s/n＞3),样品平均回收率为97．8%,批内、批间精密度的RSD均小于8．0%。结论该法准确、快速、简便,可用作人血浆中二甲双胍浓度测定方法。     

反相高效液相色谱法分析注射用盐酸洛美沙星

为了建立反相高效液相色谱法测定注射用盐酸洛美沙星中盐酸洛美沙星含量的方法,采用phenomenexC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为0.025mol/L磷酸溶液(三乙胺调pH至3.5)-乙腈-(82:18),柱温30℃,检测波长287nm,流速为1.0mL/min。盐酸洛美沙星及其有关物质可完全分离;进样20μL时,线性浓度范围为5~215μg/mL;最低检测限(LOD)为12ng/mL(S/N=3),最低定量限(LOQ)为60ng/mL(S/N=10);日内精密度(RSD)为0.85%(n=5),日间精密度(RSD)为1.35%(n=5)。该方法简便、快速,专属性强,可用于对注射用盐酸洛美沙星的含量测定。     

高效液相色谱-质谱法测定人血浆中甘草次酸浓度及人体药代动力学研究

目的建立人血浆中甘草次酸的高效液相色谱-质谱(LC-MS)测定法,并用于健康志愿者的药代动力学研究。方法20例健康志愿者一次口服甘草酸二铵胶囊150mg,采集肘静脉血并分离血浆,血样经乙酸乙酯提取后,以熊果酸为内标,进行LC-MS分析。色谱柱：Venusil XBP-C18柱(5μm, ID4.6×150mm),流动相：甲醇(5mmol/L乙酸铵)-水(85∶15,V/V),梯度洗脱;流速：0.8mL/min,柱温25℃,进样10μL。甘草次酸和内标熊果酸的检测离子和裂解电压分别为m/z 469.5、m/z 455.6和200V、100V。根据不同时间甘草次酸血浓度计算其药代动力学参数。结果在0.5～200ng/mL范围内,甘草次酸与内标的峰面积比值与浓度线性关系良好,相关系数为0.9974,定量限为0.5ng/mL,提取回收率为76.0%～80.0%,日内、日间RSD均小于12%。甘草次酸口服给药Cmax为(95.57±43.06)ng/mL,Tmax为(10.95±1.32)h。结论高效液相色谱-质谱测定法灵敏、准确、简便,适用于血浆甘草次酸的浓度测定及其人体药代动力学研究。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定复方黄芪益气口服液中黄芪甲苷的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定复方黄芪益气口服液中黄芪甲苷含量的测定方法。方法:采用Hypersil ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(32∶68),流速为1.0 mL/min,柱温30℃;ELSD参数:气化温度70℃,雾化温度50℃,流速1.2 mL/min。结果:黄芪甲苷在2.002μg～10.01μg范围内线性关系良好,r=0.9994;平均回收率99.2%,RSD为0.35%。结论:该方法简便、准确,重复性好,适用于复方黄芪益气口服液的质量控制。     

HPLC法测定盐酸多巴胺注射液的有关物质

目的筛选合适的高效液相色谱条件,测定盐酸多巴胺注射液的有关物质。方法采用不加校正因子的主成分自身对照法,采用RP-HPLC;色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为[0.005 mol/mL十二烷基硫酸钠-冰醋酸-0.1mol/mL乙二胺四醋酸二钠(700∶10∶2)]-乙腈(6∶4);柱温:40℃;流速:1.20 mL/min;检测波长280 nm。结果在1~12μg/mL范围内线性良好,测定标准曲线为Y=36493X-629.88(r=0.9996,n=11);最低检测限为0.9997 ng。结论该法专属性强,准确,灵敏,可用于盐酸多巴胺注射液有关物质的检查。     

RP-HPLC法测定兔血浆中羟基喜树碱的浓度

目的 :建立测定羟基喜树碱在兔血浆中浓度的反相高效液相色谱 -紫外检测法。方法 :血浆样品酸化后 ,用甲醇沉淀蛋白 ,高速离心后取上清液进行色谱分析。色谱柱 :LichrospherC1 8柱 ( 2 5 0mm× 4.6mm ,5 μm ) ,C1 8预柱 ( 10mm× 4.6mm ,5 μm) ;流动相 :ψ(甲醇 ∶ 0 .0 1mol/L磷酸盐缓冲液 ,pH4.0 ) =60∶40 ;流速 :1.0mL/min ;检测波长 3 84nm。以 5mg/kg剂量给大耳白兔静脉推注羟基喜树碱注射液 ,于不同时间点采血测定药物浓度。结果 :羟基喜树碱保留时间为 5 .0min ,定量线性范围为 5 0～ 5 0 0 0ng/mL ,最低检测限为 2 5ng/mL。血浆中羟基喜树碱的回收率为 99.88%～ 10 3 .13 %,日内精密度≤ 3 .2 7%,日间精密度≤ 7.2 5 %。羟基喜树碱静脉注射后符合二室模型。结论 :本法简便实用 ,定量准确 ,可满足羟基喜树碱药动学研究的需要     

RPLC-ESI/MS法测定人血浆中阿普唑仑及其代谢产物的浓度

目的 建立RPLC-ESI/MS法测定人血浆中阿普唑仑及其代谢产物浓度的方法.方法 以地西泮为内标物;色谱柱:Agilent Zorbax SB C18柱(2.1 mm×30 mm,3.5 μm),流动相为10 mol/L乙酰胺-乙腈(2∶8),流速为0.2 ml/min,柱温30℃,进样量10μl;质谱条件为电喷雾电离源(ESI),检测方式为正离子电离、多离子反应监测(MRM).结果 阿普唑仑、α-羟基阿普唑仑和4-羟基阿普唑仑在0.5～50 ng/ml血浆浓度范围内线性关系良好(r=0.9996,r=0.9997,r=0.9994;n=7);批内和批间精密度均低于5%;最低检测限为0.5 ng/ml.结论 该方法灵敏、准确可用于临床上阿普唑仑及α-羟基阿普唑仑和4-羟基阿普唑仑的药代动力学研究.     

二甲双胍对冠心病PCI术后的保护作用

目的 探讨二甲双胍对冠心病患者PCI术后的保护作用.方法 选取120例冠心病行PCI术后患者,随机分为两组,每组60例,常规药物治疗组(A组)、常规药物+二甲双胍治疗组(B组),两组一般情况比较差异无统计学意义.常规药物治疗:根据病情选用抗血小板+β受体阻滞剂+ACEI或ARB+他汀类药物;B组在常规药物治疗基础上,加用二甲双胍50 mg口服bid,治疗1年.分别于治疗前后空腹卧位采血查网膜素-1及内脂素.结果 两组患者血浆OE-1及内脂素水平比较:治疗前差异无统计学意义,治疗后B组OE-1水平明显升高,为(380.22±78.24)ng/mL vs(247.46±56.52)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05);内脂素水平明显降低(,5.78±0.52)μg/L vs(3.24±0.61)μg/L,差异有统计学意义(P<0.05).结论 二甲双胍可延缓冠心病患者的病情进展,可临床推广使用.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定6-巯基嘌呤血浆药物浓度方法的建立与评价

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测人血浆中6-巯基嘌呤(6-MP)的浓度,为临床制定个体化给药方案提供基础.方法 使用 Waters公司超高效液相色谱(I-Class)-质谱(TQ-S)联用仪,以Waters ACQUITY BEH HILIC (2.1 mm×50 mm,1.7 μm)为色谱柱,pH 3.0,0.02 mol/L 醋酸铵缓冲液(含0.3%HCOOH)-乙腈(20:80)为流动相,流速0.4 mL/min,以6-硫鸟嘌呤(6-TG)为内标,乙腈沉淀蛋白,取4 μL上清液进样分析.采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为 m/z 153.03→119.1(6-MP)和m/z 168.06→134.13(6-TG).结果 6-MP 血浆浓度在0.5~2000 ng/mL 内线性关系良好(r=0.9989),定量下限为0.125 ng/mL.日内、日间 RSD<6%,方法回收率89%~104%(RSD<6%),提取回收率>95 %(RSD<8%).血浆中6-MP 在室温避光保存6 h,冻融3次和-20 ℃保存15 d 的 RSD 分别为<4.66%、4.74%和5.11%.结论 该方法操作简单、快速、灵敏度高、稳定性强,适用于血浆中6-MP 药物浓度监测.     

高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定益气强身颗粒中黄芪甲苷的含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定益气强身颗粒中黄芪甲苷的含量。方法色谱条件为ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);检测器(漂移管温度,106℃;载气,空气;流速,2.7 L/min);流动相,乙腈-水梯度洗脱;流速,1 mL/min。结果黄芪甲苷在0.0388~0.2328 mg/mL范围内呈线性关系,r=0.9999;加样回收率为97.2%,相对标准偏差为2.6%。结论该方法灵敏,准确,可用于益气强身颗粒的质量控制。     

保心微丸中肉桂酸大鼠体内的药代动力学研究

目的研究保心微丸中肉桂酸在大鼠体内的药代动力学.方法采用高效液相色谱法测定肉桂酸血药浓度,色谱柱HypersilODSC18,150mm×4.6mm,5μm,柱温30C.流动相甲醇-1%醋酸(4555)流速0.5mL/min;检测波长273nm;进样量10μL.结果与结论建立了用高效液相色谱法测定肉桂酸血药浓度的方法,肉桂酸的峰面积(y)与浓度(X)之间的回归方程为y=4973.5348+42867.96678X,相关系数r=0.9998.肉桂酸在血浆中的回收率为97.5%,RSD为1.33%.检测限为0.15ng,大鼠血浆中最低检测浓度为75ng/mL.肉桂酸口服吸收在大鼠体内的药时过程为线性动力学过程,符合一级吸收一级消除的开放式室模型,t1/2(K.)为7.12min,tmax为53.29min,Cmax为0.20μg/mL,t1/2,2(Ke)为340.74min.该药代动力学参数可能是保心微丸中肉桂酸及有关成分等多种成分在大鼠体内的综合体现.     

RP-HPLC测定红花W/O型乳膏剂中羟基红花黄色素A的含量

建立红花W/O型乳膏剂中羟基红花黄色素A含量测定的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。色谱柱为Zorbax Eclipse C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇-乙腈-0.02%磷酸水溶液(26∶2∶72),流速:1.0 mL/min,柱温:55℃,检测波长:403 nm。乳膏剂依次经甲醇高温破乳、纯水高温萃取后,采用RP-HPLC检测。结果显示,乳膏剂中辅料对羟基红花黄色素A色谱峰不产生干扰。羟基红花黄色素A在1.236~12.36μg/mL范围内呈良好的线性关系(y=156.17x+1.1983,r=0.9995),检测限为23.6 ng/mL,定量限为118 ng/mL,回收率在99.7%~103.3%范围内,精密度RSD为0.12%(n=6),室温放置24 h稳定性良好。本方法简便快捷,结果准确、重复性好,可用于红花W/O型乳膏剂中羟基红花黄色素A的含量测定。