氧自由基对血管内皮细胞内源性一氧化氮合酶抑制物的影响及卡托普利的作用

目的：观察氧自由基(OFR)对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内源性一氧化氮合酶抑制物——不对称二甲精氨酸(ADMA)浓度的影响及卡托普利的保护作用。方法： 采用改良的Jaffe法培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，取生长良好的3-6代HVUECs用于实验，分为①空白对照组：加DMEM培养液；②OFR组：分别加入OFR(0.01 mmol/L，0.1 mmol/l)；③OFR+卡托普利组：同时加入0.1 mmol/L OFR及卡托普利(50 mg/L、100 mg/L)。共孵24 h后，分别测定上清液中ADMA、左旋精氨酸(L-arg)、一氧化氮(NO)和内皮素(ET)的浓度，并测定血管紧张素转换酶(ACE)的活性。结果：OFR组ADMA、ET的量及ACE活性增加，而NO的量减少。卡托普利干预后，上清液中ADMA、ET的浓度减少，ACE活性降低，NO的量增加，而L-arg水平无明显变化。结论： OFR通过增加ADMA导致内皮功能紊乱，卡托普利则能通过减少ADMA减轻OFR诱导的内皮细胞代谢功能障碍。     

尿酸对ECV304细胞的NO-NOS通路及ADMA-DDAH系统的影响

目的：观察尿酸（uric acid，UA）对ECV304细胞的NO-NOS通路及ADMA-DDAH系统的影响。 方法： ①浓度依赖性分组：对照组、UA 200 μmol/L（UA2）组、UA 400 μmol/L（UA4）组、UA 600 μmol/L（UA6）组与ECV304细胞共同孵育24 h。②时间依赖性：UA6组分别观察1、3、5、7 d。检测培养液NO2-/NO3-浓度、NOS活性、非对称二甲基精氨酸（ADMA）浓度、二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）活性以及SOD活性和Ang Ⅱ浓度，细胞裂解液DDAH表达。 结果： ① 3种浓度UA组NO2-/NO3-明显高于对照组，NOS、DDAH、SOD活性则在UA4、UA6两组明显高于对照组，而ADMA浓度在UA4、UA6两组降低，Ang Ⅱ浓度和DDAH表达则无显著差异。② UA6组各时段NO2-/NO3-浓度和NOS、DDAH、SOD活性均高于相应对照组，而ADMA浓度低于对照组；Ang Ⅱ浓度、DDAH表达则无明显差异。除NOS活性在第7 d明显下降外，其余指标在不同时段组没有明显的差异。 结论： ① 短期UA刺激使ECV304细胞分泌NO2-/NO3-增多，且呈浓度依赖，无时间依赖。② UA通过增加DDAH活性、加速ADMA的降解,使NOS活性增加而致NO2-/NO3-生成增多。③尿酸使SOD活性增加而不增加AngⅡ浓度。     

NADPH氧化酶介导溶血性磷脂酰胆碱诱发的非对称二甲基精氨酸升高

目的:研究溶血性磷脂酰胆碱(LPC)诱导内源性一氧化氮合酶抑制物非对称二甲基精氨酸(ADMA)升高的机制。方法:LPC处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),检测活性氧、NO和ADMA水平,以及ADMA代谢酶甲基化蛋白转移酶(PRMT)的表达和二甲基精氨酸-二甲胺水解酶(DDAH)的活性。结果:LPC能显著升高活性氧和降低细胞活性;降低NO和升高ADMA水平;上调PRMT蛋白的表达和降低DDAH活性。NADPH氧化酶抑制剂di-phenyliodonium能抑制LPC的作用。结论:LPC诱发ADMA水平增高与其升高NADPH氧化酶活性,进而上调PRMT表达及降低DDAH活性有关。     

内源性一氧化氮合酶抑制物上调4周运动大鼠骨骼肌收缩功能和线粒体生物合成

目的:观察内源性一氧化氮合酶(NOS)抑制物非对称性二甲基精氨酸(ADMA)及其信号通路在4周运动大鼠NO水平及骨骼肌收缩功能与线粒体生物合成中的调节作用。方法:建立4周运动大鼠模型,检测离体比目鱼肌对电刺激的单次、强直和疲劳收缩的最大张力;并检测骨骼肌中ATP和线粒体DNA含量以及过氧化物酶增殖体受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)、核呼吸因子(NRF)mRNA的表达以反映线粒体生物合成及功能;用高效液相色谱测定血清ADMA浓度;用Western blot法检测骨骼肌中内源性ADMA生成酶PRMT1和ADMA代谢酶DDAH2种亚型以及NOS 3种亚型蛋白的表达;用比色法测定NOS活性及一氧化氮(NO)含量等。结果:与正常对照组相比,运动组大鼠比目鱼肌对电刺激诱导的各种收缩张力均明显增强,比目鱼肌ATP含量、线粒体DNA含量和PGC-1α、NRF mRNA增加显著(P0.01)。运动组大鼠比目鱼肌中构成型NOS(cNOS)的蛋白表达及其NOS活性明显上调(P0.01),而NO含量仅小幅增加(P0.05);同时,4周运动增加大鼠血清ADMA浓度,并伴有骨骼肌DDAH2表达下调。结论:短期耐力运动增强比目鱼肌单次收缩、强直收缩和抗疲劳收缩肌功能,其机制可能与过度增加的cNOS促使ADMA水平反馈性升高,从而维持骨骼肌NO低幅度增加,促进线粒体生物合成有关。     

ADMA/NOS/NO/cGMP通路系统在子痫前期患者母胎界面的表达及意义

目的：探讨ADMA/NOS/NO/cGMP通路系统在子痫前期患者母胎界面的表达及意义。方法：分别选取重度子痫前期、轻度子痫前期、妊娠期高血压患者各20例,另选同期行剖宫产的单胎初产健康妊娠妇女20例作为对照。检测并比较各组胎盘组织NO和cGMP水平、总NOS活性,免疫组化SP法检测胎盘组织eNOS和iNOS表达。高效液相色谱法检测各组脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）内ADMA水平。结果：重度、轻度子痫前期组胎盘组织NO水平分别为（7.6±3.6） μmol/g、（11.4±4.3） μmol/g,均显著低于对照组（均P＜0.05）;重度、轻度子痫前期组胎盘组织cGMP水平分别为（3.26±0.31）pmol/g、（4.53±0.42）pmol/g,均显著低于对照组（均P＜0.05）,且4组胎盘组织cGMP水平与NO水平呈正相关关系（r=0.672）;重度、轻度子痫前期组胎盘组织总NOS活性分别为（10.4±3.0）、（14.8±1.6 ）U/mg蛋白质,显著低于对照组（均P＜0.05）,4组胎盘组织总NOS活性与NO水平呈正相关关系（r=0.785）;重度、轻度子痫前期组胎盘组织eNOS表达显著低于对照组（均P＜0.05）,重度子痫前期组iNOS表达显著高于对照组（P＜0.05）;重度子痫前期、轻度子痫前期及妊娠期高血压3组HUVECs内ADMA水平均显著高于对照组（均P＜0.05）,且4组患者HUVECs内ADMA水平与胎盘组织NO水平呈负相关关系（r=-0.582）。结论：ADMA/NOS/NO/cGMP通路系统可能在子痫前期的发病中起重要作用。     

一氧化氮合酶抑制物在胃黏膜损伤中的作用与机制

目的:研究一氧化氮合酶抑制物非对称性二甲基精氨酸(ADMA)在不同因素诱发的胃黏膜损伤中的作用,并初步探讨其机制。方法:用乙醇、吲哚美辛、应激诱发大鼠胃黏膜损伤模型,检测胃黏膜溃疡指数(UI),一氧化氮(NO)和ADMA水平,以及二甲基精氨酸-二甲胺水解酶(DDAH)的活性;检测幽门螺旋杆菌(Hp)处理胃黏膜上皮细胞(GES-1)细胞培养液中NO,ADMA和TNF-α水平,以及细胞中DDAH活性。结果:乙醇、吲哚美辛、应激诱发大鼠胃黏膜损伤的同时ADMA水平显著升高以及DDAH活性下降;Hp处理GES-1细胞24 h后,ADMA和TNF-α水平显著升高,DDAH活性下降;外源性ADMA也能显著升高GES-1细胞TNF-α水平。结论:ADMA是促进胃黏膜损伤的重要因子,除抑制NO生成外,还具有直接致炎作用。     

低糖诱导人脐静脉内皮细胞一氧化氮与活性氧变化的研究

目的观察低浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞一氧化氮（NO）与活性氧（ROS）变化的影响。方法以体外培养人脐静脉内皮细胞株HUVEC-12为研究对象,将实验分为正常对照组（5.5mmol/L葡萄糖）、低糖组（2.8mmol/L葡萄糖）、无糖组（0mmol/L葡萄糖）。分别用2.8、0mmol/L葡萄糖干预HUVEC-12细胞,经过1、2、4、12h后,硝酸还原酶法测定NO产量,化学比色法测定一氧化氮合成酶（NOS）活性,Dihydroethidium荧光探针法测定细胞内ROS水平。结果与正常对照组相比,低糖组与无糖组NO水平降低（P〈0.01）,NOS活性下降（P〈0.01）,细胞内ROS水平升高（P〈0.01）,均呈剂量依赖关系。同一浓度组内随着时间的延长,内皮细胞NO水平、NOS活性进一步降低（P〈0.01）,ROS水平进一步升高（P〈0.05）,各指标都具有浓度和时间依赖性。结论低糖可导致内皮细胞功能障碍,NO水平降低,NOS活性下降,其机制可能与低糖导致内皮细胞氧化应激损伤有关。     

高静水压对血管内皮细胞ADMA水平的影响及RAS的作用

目的：观察体外压力培养对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）非对称性NG-二甲基精氨酸（asymmetric NG, NG-dimethyl-L-arginine, ADMA ）代谢的影响。 方法:分大气压（APC，0 mmHg），中压（MPC，120 mmH g）和高压（HPC，180 mmHg）三组，各组分别用卡托普利（Cap, 10 μmol/L或100 μmol/L）和厄贝沙坦（Irb, 10 μmol/L或100 μmol/L）进行干预。测定β-N-乙酰氨基己糖苷酶活性以反映12 h细胞增殖。上清液用以测定ADMA的浓度（高效液相色谱法，HPLC）。 结果:①中、高压组ADMA浓度显著高于大气压组（0.75±0.05 vs 4.69 ±0.37和4.48±0.39，P<0.01），两压力组间无明显差异。②大气压时Cap与Irb对ADMA浓度无明显影响，而中、高压组药物使ADMA增加幅度减轻，且呈浓度依赖性趋势。 结论:压力刺激可使条件培养液中 ADMA的水平增加。抑制肾素-血管紧张素系统(re nin-angiotensin system, RAS)可以减轻ADMA增加，表明RAS激活参与压力诱导的ADMA代谢 异常。     

内源性一氧化氮合酶抑制物在糖尿病大鼠勃起功能障碍中的作用

目的:探讨内源性一氧化氮合酶(NOS)抑制物非对称性二甲基精氨酸(ADMA)在糖尿病大鼠勃起功能障碍中的作用及其机制。方法:采用高脂饲养加小剂量链脲佐菌素腹腔注射诱导8周病程的2型糖尿病大鼠模型;麻醉下分离大鼠阴茎海绵体,用器官浴槽方法检测海绵体对乙酰胆碱的内皮依赖性舒张反应以反映其勃起功能;检测血清ADMA含量;检测海绵体组织NOS活性及一氧化氮(NO)和环磷酸鸟苷(c GMP)含量;用Western blot检测海绵体ADMA信号通路蛋白和磷酸二酯酶5(PDE5)的表达;检测超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化产物丙二醛含量以评价氧化应激。结果:糖尿病大鼠血糖升高,胰岛素敏感性降低,表明糖尿病大鼠模型建立成功;与正常对照组比较,糖尿病大鼠海绵体舒张功能明显降低,血清ADMA浓度升高,海绵体组织NOS活性及NO和c GMP含量降低,ADMA生成酶蛋白精氨酸甲基转移酶1表达上调,ADMA代谢酶二甲基精氨酸二甲胺水解酶1、2及ADMA靶酶内皮型NOS和神经元型NOS表达下调,PDE5蛋白表达上调,氧化应激增加;体外用ADMA孵育正常大鼠离体海绵体,亦可产生与糖尿病大鼠海绵体相似的舒张功能障碍及NO和c GMP含量减少。结论:内源性NOS抑制物ADMA蓄积是导致糖尿病大鼠勃起功能障碍的重要原因,其机制可能与减少NO生成、增加氧化应激有关。     

妊高征脐动脉内皮细胞损伤与内皮素和NO合酶的变化及意义

目的 :探讨妊高征脐血管内皮细胞损伤与内皮素 (ET)、一氧化氮 (NO)释放和一氧化氮合酶 (NOS)活性的关系。方法 :用内皮细胞铺片法结合免疫组化技术观察内皮细胞损伤程度和内皮细胞中ET阳性率 ;用Criess法检测血浆中NO代谢产物亚硝酸基和硝酸基 (NO-2 /NO-3 )浓度 ,同时测定脐血管组织NOS活性。结果 :妊高征组脐血管内皮细胞损伤程度、ET阳性率明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;血浆NO/NO浓度和脐血管NOS活性显著低于正常对照组 (P <0 .0 1)。结论 :妊高征患者脐血管内皮细胞损伤加重 ,ET、NO和NOS代谢异常 ,导致血管舒缩功能障碍 ,可能是妊高征重要的发病机理。     

Increased (E)-4-hydroxy-2-nonenal and asymmetric dimethylarginine concentrations and decreased nitric oxide concentrations in the plasma of patients with major depression

Background: (E)-4-Hydroxy-2-nonenal (HNE) is a highly electrophilic end-product of lipid peroxidation. Asymmetric dimethylarginine (ADMA) is an endogenous inhibitor of endothelial nitric oxide synthase (NOS). ADMA is metabolised by dimethylarginine dimethylaminohydrolase (DDAH). DDAH contains a nucleophilic cysteine residue in its active site. There is an increase in lipid peroxidation in major depression. Major depression is associated with the development of coronary heart disease (CHD) and greatly increases morbidity and mortality. There is an increase in circulating ADMA in CHD and vascular risk factors. Objectives: To determine plasma HNE, ADME and nitric oxide (NO) concentrations in patients with major depression compared to normal volunteers and to examine the effect of HNE on ADMA formation and DDAH activity in cultured endothelial cells. Methods: The study was conducted in 25 patients with major depression (DSM-IV criteria) and 25 healthy control subjects. Plasma concentrations of HNE were determined as the O-pentafluorylbenzyl oxime using capillary column GC–MS and deuterated HNE as the internal standard; ADME by LC–MS–MS using ¹³C⁶- -arginine as the internal standard; and NO by GC–MS following reduction to nitrate and nitrite and derivatisation to the pentafluorobenzyl derivative using [¹⁵N]nitrate and [¹⁵N]nitrite as the internal standards. Human umbilical vein endothelial cells were incubated in serum-free medium in the presence of HNE. The concentration of ADMA in the medium was determined by LC–MS–MS. DDAH activity was determined by measuring -citrulline in endothelial cell lysates using LC–MS. Results: There was a significant increase in the plasma concentration of HNE (P<0.0001) and ADMA (P<0.0002) in patients with major depression. There was a significant decrease in the plasma concentration of NO (P<0.0001). A significant positive correlation was found between the plasma concentrations of HNE and ADMA (r=0.63, P<0.0001). A significant negative correlation was detected between the plasma concentrations of ADMA and NO (r=−0.595, P<0.0001). HNE significantly increased ADMA formation (P<0.0001) and significantly decreased DDAH activity (P<0.0001) in cultured endothelial cells. The effects of HNE on DDAH activity were significantly attenuated by the addition of glutathione (P<0.0001). Limitations: No allowance was made for the phase of the menstrual cycle which could influence plasma nitric oxide concentrations. Conclusions: There is an increase in circulating HNE in major depression. HNE inactivates the cysteine residue in the active site of endothelial DDAH leading to the accumulation of ADMA in the circulation. The ADMA then decreases the production of eNOS. This could reduce the amount of NO diffusing from cerebral blood vessels to nearby neurons and influence the release of neurotransmitters. ADMA also constricts cerebral blood vessels and may contribute to the decreased regional perfusion in major depression. The accumulation of ADMA could explain the increased risk of CHD in major depression. The preservation of DDAH activity and the reduction of ADMA accumulation may represent a novel therapeutic approach to the treatment of major depression.     

非对称性二甲基精氨酸保护PC12细胞拮抗谷氨酸兴奋性毒性的损伤作用

 目的： 探讨一氧化氮合酶（NOS）抑制剂-非对称性二甲基精氨酸（ADMA）对谷氨酸（Glu）兴奋性毒性损伤PC12细胞的影响及其机制。方法: 用不同浓度的谷氨酸处理PC12 细胞,建立谷氨酸兴奋性神经毒性损伤细胞的实验模型;应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶（LDH）释放试验评价细胞的损伤程度;双氢罗丹明123（DHR）染色后流式细胞仪（FCM）检测细胞内活性氧（ROS）水平;应用试剂盒及分光光度计测定NOS活性和NO水平。结果: 谷氨酸（1-6 mmol/L）处理PC12细胞24 h,可呈剂量依赖性地降低PC12细胞的存活率;在谷氨酸作用PC12 细胞前30min 给予ADMA,可明显地抑制谷氨酸引起的细胞存活率降低及LDH释放增加,减少谷氨酸引起的细胞内ROS堆积,抑制谷氨酸过度激活 NOS和增加NO的生成。结论: ADMA能显著地减弱谷氨酸对PC12细胞的兴奋性毒性损伤作用;其作用机制可能与抑制NOS活性,减少NO生成,进而减轻细胞内ROS的堆积有关。     

同型半胱氨酸硫内酯损伤血管内皮细胞的机制研究

目的: 在体外培养的内皮细胞中探讨同型半胱氨酸硫内酯(HTL)致血管内皮细胞损伤作用及其机制。方法: 体外培养的人脐静脉内皮细胞,与不同浓度的HTL孵育,用ELISA检测内皮细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和可溶性细胞间黏附分子(sICAM)-1的浓度,荧光显微镜检测活性氧簇(ROS)的含量、核转录因子κB(NF-κB)的激活及IκBα蛋白表达,同时检测内皮细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量与一氧化氮(NO)水平。结果: HTL(1 mmol/L)孵育内皮细胞3 h后显著增加细胞 ROS含量,刺激NF-κB转入胞核而活化,孵育细胞24 h后明显升高细胞上清液中sICAM-1和TNF-α浓度;降低细胞活力和NO的水平,增加LDH的漏出量。抗氧化剂NAC、NADPH氧化酶抑制剂Apocynin和NF-κB抑制剂PDTC可显著抑制HTL所致ROS含量的增加以及NF-κB激活,降低HTL刺激的培养液中sICAM-1和TNF-α的浓度,增加培养液中NO水平。结论: HTL诱导的血管内皮细胞功能损伤的机制可能与诱导氧化应激以及NF-κB活化有关。     

复方丹参滴丸对过氧化氢损伤的人脐静脉血管内皮细胞的保护作用

目的： 观察复方丹参滴丸对过氧化氢（H2O2）损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用，探讨其在心脑血管疾病治疗中的机制。 方法： 用0.1 mmol/L H2O2制造HUVEC损伤模型;按分组把不同浓度的丹参滴丸（0.5 g/L、0.25 g/L、0.1 g/L）分别于损伤前、损伤后加入，分别测定细胞活力（MTT法）观察滴丸对H2O2损伤内皮细胞活性的影响；硫代巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量；硝酸酶还原法测定细胞培养液中一氧化氮含量;免疫细胞化学法观察滴丸对H2O2损伤的内皮细胞NOS2、NOS3（一氧化氮合酶2、3）、NF-κB（核因子кB）表达的影响;同时进行形态学观察。 结果: 0.1 mmol/L H2O2对HUVEC有损伤作用。H2O2损伤后,滴丸能显著增加细胞活性; 显著抑制H2O2诱导HUVEC MDA的产生;双向调节NO产生;影响H2O2损伤后细胞NOS3、NF-κB的表达。 结论： 损伤前给滴丸浓度0.5 g/L、0.25 g/L、0.1 g/L对H2O2所致内皮细胞损伤有明显拮抗作用。损伤后给药滴丸浓度0.5 g/L、0.25 g/L、0.1 g/L对H2O2所致人血管内皮细胞损伤有明显拮抗作用，其作用机制与抗氧化作用及调节NOS2、NOS3、NF-κB的表达有关。     

Dimethylarginine dimethylaminohydrolase (DDAH) regulates trophoblast invasion and motility through effects on nitric oxide

BACKGROUND: Invasion of trophoblast into the uterine environment is crucial for establishing a successful pregnancy. Physiological production of nitric oxide (NO) by extravillous trophoblasts results in significant pro-invasive effects. NO synthesis is competitively inhibited by methylated arginine analogues such as asymmetric dimethylarginine (ADMA) but not the enantiomer symmetric dimethylarginine (SDMA). Within cells, the concentration of ADMA is regulated by the activity of the enzyme dimethylarginine dimethylaminohydrolase (DDAH). The aim of this study was to examine DDAH expression and function in trophoblasts. METHODS AND RESULTS: DDAH-1 and DDAH-2 messenger RNA and protein were demonstrated in first trimester placental tissue, primary extravillous trophoblasts and extravillous trophoblast-derived cell lines. DDAH activity was demonstrated in both cells and tissue. Overexpression of DDAH-1 in trophoblasts led to a number of significant changes, including an 8-fold increase in enzymatic activity, a 59% decrease in production of ADMA (but not SDMA), a 1.9-fold increase in NO and a 1.6-fold increase in cyclic guanosine monophosphate (cGMP) production. Functional assays showed that increased DDAH activity led to significantly increased cell motility and invasion in response to hepatocyte growth factor (HGF). CONCLUSIONS: DDAH may play an important role in the regulation of extravillous trophoblast function via its effects on ADMA and NO production.     

抗衰老Klotho蛋白对高糖作用下血管内皮细胞的保护作用

目的:研究抗衰老Klotho蛋白对高糖作用下血管内皮细胞的保护作用及其作用机制。方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),设置PBS对照组、5.5 mmol/L葡萄糖组、33.3 mmol/L葡萄糖组、0.1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组、1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组和10μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组。使用MTT法检测各组细胞活力;同时检测各组细胞培养上清中丙二醛(MDA)的含量以及乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的活性;流式细胞术检测各组细胞中活性氧(ROS)含量变化;ELISA检测各组细胞培养液中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的浓度变化;Western blot法检测各组细胞中核因子κB(NF-κB)蛋白的表达。结果:与PBS对照组相比,33.3 mmol/L葡萄糖能够显著降低HUVECs的细胞活力,增加细胞中ROS的含量,增加细胞培养上清中LDH活性和MDA含量,降低SOD和GSH的活性,同时降低NO分泌,诱导ET-1、ICAM-1分泌及细胞中NF-κB蛋白的表达(P0.05)。不同浓度Klotho蛋白和33.3 mmol/L高糖同时作用HUVECs时,细胞活力逐渐上升,ROS和MDA含量以及LDH活性逐渐下降,SOD和GSH活性则逐渐上升,同时NO分泌增加,ET-1、ICAM-1分泌及NF-κB蛋白表达显著下降(P0.05)。结论:抗衰老Klotho蛋白能够提升高糖作用下HUVECs的细胞活力,减少高糖诱导的ROS生成及氧化损伤,恢复HUVECs的正常分泌功能,并通过减少NF-κB蛋白表达发挥抗损伤作用。     

二苯乙烯苷对LPC损伤血管内皮细胞的保护作用及其机制

目的: 观察在溶血性磷脂酰胆碱(LPC)诱导下,二苯乙烯苷(TSG)对血管内皮细胞的保护作用及非对称性二甲基精氨酸(ADMA)、NO和细胞凋亡的影响。方法: 体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),细胞经培养、传代,将第3、4代用于实验。随机将细胞分为对照组、LPC组和TSG+LPC组。10 mg/L LPC作用于HUVECs,孵育24 h诱导内皮细胞损伤,建立细胞损伤的模型;10.0、1.0、0.1 μmol/L TSG预先作用于HUVECs 1 h后,再给予10 mg/L LPC作用于HUVECs共同孵育24 h,建立TSG+LPC组。然后,分别检测细胞的存活率、ADMA、NO和凋亡率的变化。结果: LPC组与对照组比较,细胞培养上清液中ADMA含量显著增加,而NO含量明显降低,细胞的凋亡有所增加,细胞的存活率降低。与LPC损伤组比较,10.0、1.0、0.1 μmol/L TSG作用HUVECs 1 h后,再予10 mg/L LPC作用HUVECs 24 h后,细胞培养上清液中ADMA显著降低, NO含量显著升高,细胞凋亡率降低和细胞存活率显著升高。结论: 二苯乙烯苷能够通过抑制ADMA的表达,增加NO 的生成,并抑制细胞的凋亡,增加细胞的存活,从而对LPC损伤的血管内皮细胞发挥保护作用。