细胞外基质相关分子在眼底新生血管形成中的作用

眼底新生血管形成是导致增生型糖尿病视网膜病变(PDR)、早产儿视网膜病变(ROP)及年龄相关性黄斑变性( AMD)患者视力丧失的主要原因之一.细胞外基质(ECM)固有成分中的胶原蛋白、弹性蛋白等经酶解后在体外研究及动物实验中已证实可促进脉络膜新生血管(CNV)、视网膜新生血管形成的发生.ECM黏附分子中的整合素α5β1与纤连蛋白在体外可促进内皮细胞黏附、增生,其抑制剂于体内则可抑制CNV、视网膜新生血管的发生,整合素αV β3及αV β5的抑制剂在体内也可发挥类似作用.黏附分子中的选择素及细胞间黏附分子则主要通过介导白细胞与内皮细胞间的相互作用促进新生血管形成.ECM降解相关的丝氨酸蛋白酶,尤其是尿激酶型纤溶酶原激活剂( uPA)(通过促进纤溶酶的生成)、基质金属蛋白酶(MMPs)(主要是MMP-2及MMP-9),在体外及体内实验中已证明可促进CNV、视网膜新生血管的发生,而I型纤溶酶原激活剂抑制剂(PAI-1)及组织金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)则可抑制新生血管形成.对ECM相关分子在CNV、视网膜新生血管形成中作用的深入研究将为预防和治疗眼底新生血管形成提供新的思路和方法.     

CD105与脉络膜新生血管

CD105(endoglin)为一种同型二聚体的膜结合性糖蛋白,是转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)受体超家族的成员之一。它参与TGF-β受体的信号转导,调节细胞对TGF-β的反应,在新生血管组织及肿瘤组织边缘部分血管起源的内皮细胞中高度表达,是新生血管的标志物之一。脉络膜新生血管(choroidal neovasculariza-tion,CNV)的生成是年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)、眼拟组织胞浆菌病综合征(presumed ocular histoplasmosis syndrome,POHS)和病理性近视黄斑变性等CNV相关疾病的的主要病理特征。近年研究表明,CD105与CNV密切相关,可能成为治疗CNV重要的靶分子之一。     

转化生长因子β1在小鼠脉络膜新生血管中的表达

目的 通过激光诱导小鼠脉络膜新生血管(CNV)模型，探讨TGF-β1在CNV形成中的作用。方法 应用810nm半导体激光光凝C57BL／6J小鼠眼底后极部，诱发CNV生成。术后1、4周，用原位杂交方法检测TGF-β1 mRNA在小鼠CNV中的表达。结果 在正常组织中，TGF-β1 mRNA表达于神经节细胞层，而视网膜色素上皮、脉络膜血管内皮细胞无TGF-β1的mRNA表达。激光光凝1周后CNV膜形成，TGF-β1 mRNA主要表达于CNV及其附近。激光后4周TGF-β1信号仍明显表达。结论 研究结果提示在CNV发生过程中，TGF-β1可能起重要作用。     

细胞外基质与脉络膜新生血管

脉络膜新生血管(CNV)是引起视力障碍的重要原因之一。在CNV形成过程中，多种细胞外基质(ECM)分子通过与整合素(integrin)结合，调节细胞内信号通路，影响血管内皮细胞在ECM中移行和侵入。这一过程可被尿激酶样纤维蛋白水解酶激活物(uPA)和基质金属蛋白酶(MMPs)的蛋白水解作用加强，也受金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)的调控。研究CNV发生过程中ECM的作用，将为预防CNV的生成提供新的思路。(中华眼底病杂志,2005,21:60-63)     

转化生长因子β在脉络膜新生血管形成中的作用

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是具有生物活性的多肽,其与脉络膜新生血管形成(choroidal neovascularization,CNV)密切相关.Smad通路为TGF-β行使生物功能的经典通路.TGF-β信号通路在血管系统发育中起着重要作用.TGF-β通过与血管内皮细胞表面的ALK5和ALK1受体结合对其不同活化阶段进行调控,并通过Smad3和p38/MAPK两条信号通路来调控血管平滑肌的分化.CNV形成过程中TGF-β分泌升高,后者在CNV的形成和增生过程中起重要作用.干预TGF-β信号通路有可能成为CNV治疗的新靶点.     

骨髓来源细胞在脉络膜新生血管形成中的作用研究进展

脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)和多种眼病有关,如年龄相关性黄斑变性、中心性渗出性脉络膜视网膜病变、病理性近视黄斑变性、特发性脉络膜新生血管等。CNV是上述疾病造成视力损害的主要因素之一。近年来许多研究发现骨髓来源细胞在CNV的发生和发展中起着重要的作用,本文就此方面的研究进行综述。     

整合素αvβ3在SDF-1/CXCR4介导的脉络膜新生血管中的作用

目的　探讨内皮细胞表达的整合素αvβ3在基质细胞衍生因子-1（stromal derived factor-1,SDF-1）/趋势化因子受体4（chemokine receptor 4,CXCR4）调控脉络膜新生血管（choroidal neovascularization,CNV）生成过程中的作用。方法　（1）体内动物实验:采用激光诱导C57BL/6J小鼠CNV模型,实验分为4组:单纯CNV组（对照组）、CNV后立即玻璃体内注射SDF-1组（SDF-1组）、CNV后立即玻璃体内注射SDF-1+CXCR4抑制剂AMD3100组（SDF-1+AMD3100组）和CNV后立即玻璃体内注射SDF-1+αvβ3抑制剂SB273005组（SDF-1+SB273005组）。实时定量PCR观察小鼠激光诱发CNV后1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d CXCR4和αvβ3的表达;免疫荧光染色观察4组处理后CNV局部及内皮细胞上αvβ3的表达;OCT观察4组处理后CNV中视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial,RPE）层隆起高度。（2）体外细胞实验:Western blot检测正常对照组、Si-CXCR4敲减组和Si-NC模拟敲减组RF/6A细胞中CXCR4蛋白的表达,同时检测对照组、SDF-1组、SDF-1+AMD3100组、SDF-1+Si-NC组和SDF-1+Si-CXCR4组中整合素αvβ3蛋白的表达。Transwell检测正常对照组、SDF-1组、SDF-1+AMD3100组和SDF-1+SB273005组的细胞迁移能力。结果　（1）体内动物实验:实时定量PCR显示随着CNV诱导后时间的增加,CXCR4 mRNA和整合素亚基β3 mRNA表达开始增加,CXCR4 mRNA在CNV后3 d表达量最高（4.263±0.464）,β3 mRNA在CNV后7 d表达量最高（3.678±0.364）,随后开始下降。免疫荧光结果显示:SDF-1组β3荧光强度显著增加,β3/CD31比率也明显增加,显著高于CNV对照组（P<0.01）;而SDF-1+AMD3100组和SDF-1+SB273005组β3荧光强度和β3/CD31比率显著减弱（P<0.05）。OCT显示SDF-1组RPE层的隆起明显升高（135.503±10.301）μm,显著高于CNV对照组（94.443±12.156）μm（P<0.05）;而SDF-1+AMD3100组和SDF-1+SB273005组RPE隆起的高度显著降低（95.283±20.062）μm和（99.807±10.403）μm（P<0.05）。（2）体外细胞实验:SDF-1组和SDF-1+Si-NC组整合素亚基β3蛋白的表达均升高（1.301±0.043）、（1.273±0.077）,显著高于对照组（0.244±0.069）（P<0.01）;SDF-1+Si-CXCR4组和SDF-1+AMD3100组整合素亚基β3蛋白的水平显著下降（0.322±0.042）、（0.336±0.077）（P<0.01）。Transwell检测显示SDF-1组细胞迁移量增多显著高于对照组,而SDF-1+AMD3100组和SDF-1+SB273005组迁移细胞的数量明显减少。结论　整合素αvβ3在内皮细胞中通过介导SDF-1/CXCR4信号转导,促进CNV的发生发展。     

内皮抑素抑制脉络膜新生血管的实验研究

目的　探讨内皮抑素蛋白抑制激光诱导的大鼠脉络膜新生血管 (CNV)的效果。方法采用基因重组方法获得内皮抑素蛋白 ,取BrownNorway大鼠 30只 (6 0只眼 ) ,用激光光凝方式建立CNV模型 ,随机分为内皮抑素组、生理盐水组及对照组 ,每组 10只 ,分别给予内皮抑素 2 0 μl(5g/L) ,生理盐水 2 0 μl视网膜下注射 ,对照组光凝后不做处理 ,观察期为 14d。应用激光共焦显微镜下脉络膜血管平铺法测量各组CNV面积 ,以荧光素眼底血管造影后荧光素渗漏程度、光镜下观察结果、CD10 5及因子Ⅷ免疫组化染色结果作为观察指标。结果　内皮抑素组CNV面积小于生理盐水组及对照组 (F=30 7 35 1,P <0 0 0 1) ;内皮抑素组各光凝斑荧光渗漏程度评分与生理盐水组及对照组间比较 ,差异有显著意义 (χ2 =13 711,P <0 0 0 1) ;光凝后 14d ,生理盐水组和对照组光凝区脉络膜层增厚 ,脉络膜毛细血管层内皮细胞增殖 ,新生血管增生 ,内皮抑素组内皮细胞增生数量及新生血管明显少于前两组 ;CD10 5、因子Ⅷ的阳性表达量明显降低 ;各组视网膜内核层及神经纤维层内皮细胞均无CD10 5阳性表达。结论　内皮抑素可以有效抑制CNV的形成 ,脉络膜血管平铺及CD10 5检测对于CNV的定性、定量评估具有一定意义。     

实验性脉络膜新生血管的定量评价

目的 评价氪激光诱导下大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)面积计算的可行性.方法 采用氪激光击破大鼠右眼 Bruch 膜的方法诱导24只大鼠产生实验性 CNV,另一眼作正常对照眼.眼底彩照及眼底血管荧光造影检查(fundus fluorescein angiography,FFA)分别于光凝后1周、2周、3周、4周时观察大鼠眼底CNV渗漏情况,脉络膜铺片技术测量CNV面积.结果 氪激光大鼠CNV模型成模率3周、4周时稳定(75.00%、78.75%).从FFA、脉络膜血管铺片技术可见大鼠CNV面积随造模后时间延长呈明显递增生长(P＜0.05),3周、4周时差异不明显,病理切片亦可见CNV中新生血管数量的增多.结论 FFA检查、脉络膜血管铺片技术、病理切片均可作为评价CNV生长的指标,其中脉络膜血管铺片技术是CNV定量评价的可靠方法.     

环氧化酶-2与脉络膜新生血管

脉络膜新生血管（CNV）是引起视力严重损害的常见原因之一,其发生发展是一个多因子调控、多细胞参与的复杂过程。环氧化酶-2（COX-2）是诱导型环氧化酶,是前列腺素生物合成途径的关键酶。COX-2通过调节血管内皮生长因子（VEGF）的合成及生理功能的发挥、内皮细胞的移行和凋亡,在新生血管的形成过程中起重要作用。近期研究证实,COX-2参与了CNV的形成过程,其抑制剂能够抑制CNV的发生发展,为预防和治疗CNV性疾病提供了新的方向。     

脉络膜新生血管相关信号通路的研究进展

脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)与许多眼底病变有关,是引起视力障碍的重要原因之一.细胞内信号转导通路的调节异常参与了CNV的发生和发展.新近的研究发现,PI3K/Akt、Wnt、STAT3、Notch等信号通路在CNV的形成中发挥了重要的作用.这些信号通路的研究对于更加深入地揭示CNV的发生发展机制及寻找新的治疗靶点具有重要意义.     

激光诱导小鼠脉络膜新生血管模型中CD105的表达

目的通过激光诱导C57BL／6J小鼠CNV动物模型，观察CD105在新生血管组织中的表达。方法二极管激光诱导生成小鼠脉络膜新生血管，激光后1周和4周以免疫组化观察CD105的表达。结果激光后1周，视网膜下新生血管形成，CD105表达于CNV组织。激光后4周，当血管形成趋于静止时，CD105表达明显减弱。结论研究提示CD105在脉络膜新生血管形成过程中可能起重要作用。     

骨髓来源细胞在脉络膜新生血管生成中的作用

目的 探讨骨髓来源细胞(BMCs)在脉络膜新生血管(CNV)生成中的作用。 方法 将绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠骨髓细胞移植给野生型C57BL/6J小鼠建立嵌合体,应用532 nm倍频激光诱发嵌合体小鼠(处理组)和野生型小鼠(对照组)CNV。利用脉络膜铺片观察由GFP阳性细胞形成的新生血管;免疫荧光染色观察CNV中GFP 阳性细胞是否表达血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。结果 激光光凝后第29天,脉络膜铺片显示CNV中有大量绿色的骨髓来源细胞,由其组成的血管面积约占CNV表面积的16.22%;免疫荧光染色结果显示,CNV区域的一些BMCs表达VEGF和bFGF。结论 BMCs通过参与新生血管组成及分泌促血管生成因子的方式,可能在CNV发生过程中发挥着重要作用。     

出血性老年性黄斑变性的病理组织观察

目的 观察出血性老年性黄斑变性(AMD)的病理组织特点.方法 手术中获取的36例出血性AMD患者的石蜡标本纳入研究.患者中,隐匿性脉络膜新生血管(CNV) 26例;息肉样脉络膜血管病变(PCV) 10例.病理标本常规处理后行苏木精-伊红、糖原法、Masson染色.光学显微镜观察.在最大垂直和水平的病理标本切片上,记录细胞及细胞外基质中细胞的组成种类,以及病理组织与视网膜和脉络膜的位置关系.依据病变组织组成不同分为新生血管为主型、胶原纤维为主型、出血后的红细胞聚集为主型、变性增厚的Bruch膜为主型.结果 36例患者中,新生血管为主型19例,其中隐匿性CNV 18例,PCV1例;胶原纤维为主型6例,均为隐匿性CNV;出血后红细胞聚集为主型8例,其中隐匿性CNV 1例,PCV7例;变性增厚的Bruch膜为主型3例,其中隐匿性CNV 1例,PCV 2例.以新生血管为主型的隐匿性CNV,病变组织血管管径细小,血管内径为单层内皮细胞附着,并伴有血管内、外红细胞聚集;以新生血管为主型的PCV病变组织位于Bruch膜下,血管管径粗大,血管壁厚,可见脉络膜黑色素细胞.视网膜色素上皮细胞散在分布于所有标本中,且以偏向视网膜方向为主.5份标本新生血管附近可见大量炎性细胞存在.结论 出血性AMD组织结构呈多样性.     

以靶Verteporfin传递的对引导性缩氨酸经新生血管生长因子受体2形成的实验性脉络膜新生血管的选择性光动力疗法

目的：为在脉络膜新生血管（CNV）的激光损伤鼠模型中利用有目的verteporfin递送至脉络膜新生血管评估光动力学疗法的可行性、功效及选择性。     

维替泊芬治疗脉络膜骨瘤伴发的中心凹下脉络膜新生血管

目的：报道维替泊芬治疗脉络膜骨瘤伴发的中心凹下脉络膜新生血管（CNV）1例。方法：介入式个案报道结果：1例患者,32岁,确诊为右眼脉络膜骨瘤伴发性中心凹下脉络膜新生血管。治疗前视力20／80,N24。该患者右眼接受2次光动力治疗（PDT）,治疗后12mo视力为20／200,CNV完全消退。结论：对于脉络膜骨瘤伴发的中心凹下脉络膜新生血管,PDT不失为一种治疗选择。     

特发性脉络膜新生血管自发消退五例临床观察

脉络膜新生血管(CNV)疾病通常会逐渐加重并以瘢痕形成而导致黄斑功能的持续损害.但我们在近年的临床工作中观察到5例特发性脉络膜新生血管(ICNV)患者在未接受任何治疗的情况下CNV自行消退的现象,现报道如下. 1 对象和方法 2009年至2011年临床诊断为ICNV未接受任何治疗,CNV病灶自行萎缩消退的患者5例5只眼.患者均为女性,年龄23～45岁,平均年龄32岁.     

IGF-1与脉络膜新生血管性疾病

在脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)的发生发展过程中,许多生长因子发挥了一定的作用.近来发现胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)不仅参与胚胎发育、创伤修复和肿瘤生长等过程的调节,而且还是一种眼内促生长的促血管生成因子,参与了CNV的形成.现对IGF-1与CNV形成关系的研究进展作一综述.     

光动力疗法治疗高度近视眼的脉络膜新生血管

目的 :探讨光动力疗法 (Photodynamictherapy ,PDT)治疗高度近视眼脉络膜新生血管 (Choroidalneo vascularization ,CNV)的初步疗效及安全性。方法 :2例 3眼高度近视脉络膜新生血管患者 ,注射光敏剂Visu dyneTM(Verteporfin ,BPD)后予 5 0J/cm2 的红光 (6 90nm)照射CNV病变区 83秒 ,观察其不良反应及短期疗效。结果 :初步检查显示治疗后视力稳定或提高 ,未发现任何不良反应。结论 :PDT治疗高度近视所致的CNV是有效的、安全的     

TGF-β在氩激光诱导大鼠脉络膜新生血管中的表达

目的:评价血管内皮转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)在氩激光诱导RWH大鼠脉络膜新生血管(CNV)形成过程中的表达及其意义。方法:RWH大鼠21只,随机分成3组,每组7只。单眼视网膜氩激光光凝诱导CNV形成后,分别在光凝后1,2,3wk摘除双眼球,应用免疫组织化学技术对光凝区进行因子Ⅷ相关抗原(FⅧR∶Ag)的检测以观察CNV形成,并检测CNV形成过程中TGF-β的表达,分析其变化趋势。结果:FⅧR∶Ag免疫组织化学检查结果显示,光凝后1wk开始形成CNV,3wk达到高峰。正常RWH大鼠视网膜中,TGF-β在视网膜神经节细胞层、内核层、色素上皮层、视网膜和脉络膜血管内皮细胞表达。视网膜光凝后,除上述部位外,TGF-β在外核层和脉络膜的光凝损伤区阳性表达。光凝后1～3wk,光斑区内FⅧR∶Ag和TGF-β阳性染色密度逐渐增加(P<0.05),FⅧR∶Ag与TGF-β阳性染色密度呈正相关(r=0.83,P<0.05)。结论:CNV形成与TGF-β表达正相关,TGF-β表达增多可能是CNV形成和增殖的主要原因之一。