慢性肾功能衰竭患者外周血单核细胞向树突状细胞分化能力的研究

目的了解慢性肾功能衰竭患者外周血单核细胞向树突状细胞(DC)分化的能力.方法采用流式细胞仪检测细胞表面标记表达,混合淋巴细胞反应评价细胞的抗原递呈能力.结果慢性肾功能衰竭患者外周血单核细胞能向DC分化,分化而成的DC表达CD11c,CD40,CD80,CD83的阳性率显著低于正常人(P＜0.05),刺激淋巴细胞增殖的能力显著弱于正常人(P＜0.01).结论慢性肾功能衰竭患者外周血单核细胞向DC分化的能力减弱,分化而成的DC具有较弱的抗原递呈能力.     

骨髓间充质干细胞抑制外周血单核细胞向树突状细胞分化

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对单核细胞分化为树突状细胞(DC)的影响。方法:将分离培养的MSC与单核细胞共培养,加入DC分化诱导因子GM-CSF和IL-4(MSC+-DC),并以培养分化体系中无MSC存在的作为阳性对照(MSC--DC)。6d后收集悬浮细胞并用TNF-α诱导成熟48h。分别用流式细胞术、混合淋巴细胞反应及扫描电子显微镜检测细胞的表型、免疫功能及细胞形态。结果:同阳性对照DC相比,与MSC共培养得到的细胞上DC相关分子的表达明显较低,包括CD80,CD86,CD1a,CD83;而CD14分子则持续性高表达;与MSC共培养的细胞刺激异基因T淋巴细胞增殖的能力亦显著降低。形态学上,细胞胞体小,胞质突起不明显甚至缺如。结论:MSC抑制单核细胞向DC分化和成熟。     

终末期肾病维持性血透患者树突状细胞分化成熟能力的研究

目的 研究终末期肾病(ESRD)患者外周血中树突状细胞(DC)分化成熟能力的变化,探讨ESRD患者免疫功能低下的可能机制.方法 采集接受维持性血液透析治疗的ESRD患者(ESRD组,n=20)外周血,利用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素4(IL-4)和脂多糖(LPS)联合培养体系体外诱导培养DC,经流式细胞仪检测DC表面分子CD40、CD80、CD86 、CD83、CCR7和HLA-DR的表达,采用酶联免疫吸附法(ELASA)测定DC细胞培养上清液中细胞因子IL-12的含量.设立正常对照组(n=20).结果 与正常对照组比较,ESRD组DC表面分子CD40 、CD80 、CD86、CD83、CCR7和HLA-DR的表达率显著降低,组间比较差异均有统计学意义(P ＜0.05和P＜0.01);同时,ESRD组DC培养上清液中IL-12的含量显著高于正常对照组(P＜0.01).结论 ESRD患者外周血单核细胞源性的DC发育不成熟,其趋化迁移功能以及外源性抗原递呈能力下降,免疫激活能力降低,可能导致T细胞功能缺陷,从而最终诱导机体特异性的免疫耐受.     

外周循环血中单核细胞与糖尿病肾病的关系分析

目的：研究糖尿病（DM）患者外周循环血中单核细胞（MONO）与糖尿病肾病（DN）的关系。方法：根据尿白蛋白排泄率（UAER）将120例DM患者分为两组：DM组（UAER＜30mg/d)和DN组（UAER＞30mg/d)，分别测定两组患者外周血白细胞（WBC）总数，中性粒细胞（NEU）、淋巴细胞（LYM）和单核细胞（MONO）的绝对数及百分比，其中UAER用放射免疫法测定，外周血细胞用全自动血细胞分析仪测定。结果：DN组患者外周血MONO的绝对数及百分比均显著高于DM组患者（P＜0．001）；而BC总数，NEU和LYM的绝对数及百分比两组间无显著性差异（P＞0．05）。结论：DM患者外周循环血中MONO的绝对数及百分比的增高与DN的发生发展有关。     

单核细胞趋化蛋白-1与糖尿病肾病

糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是指糖尿病微血管病变所引起的肾脏结构和功能的改变,是糖尿病常见和严重的远期并发症之一。在我国,导致终末期肾功能衰竭（end-stage renal diseases,ESRD）的病因中DN占15％,是糖尿病患者的主要死亡原因之一。     

单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值在Ⅱ型糖尿病患者并发肾病中的临床意义

目的分析单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值在糖尿病肾病患者中的临床意义。方法收集2015年1月‐2016年11月该院诊治的Ⅱ型糖尿病患者87例为研究对象,依据24-hour尿白蛋白排泄量(UAE)将其分为正常组(22例,30 mg)、微量组(27例,30~300 mg)和大量组(38例,300 mg)。统计学分析3组患者临床病理学参数的差异及单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值与临床病理参数之间的相关性。结果 3组患者血清肌酐水平、24 h尿白蛋白排泄量和单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值比较差异均有统计学意义(P0.01);87例Ⅱ型糖尿病患者单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值与24 h尿白蛋白排泄量呈正相关(r=0.397,P0.0001);87例Ⅱ型糖尿病患者单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值与肾小球滤过率呈负相关(r=-0.250,P=0.0196)。结论单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值可用于评估糖尿病早期肾损伤,对于Ⅱ型糖尿病合并肾病患者具有预后价值。     

糖尿病肾病患者血清单核细胞趋化蛋白-1水平变化

目的检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在不同尿微白蛋白水平(UMA)的2型糖尿病(DM)患者空腹血清水平.方法 76名2型糖尿病患者分别按UMA水平分为3组正常蛋白尿(N)组(UMA≤30mg/24h)、微白蛋白尿(Mi)组(UMA在30～300mg/24h)、显性蛋白尿(Ma)组(UMA≥300mg/24h).年龄匹配的16名健康人群为对照组.用ELISA分别检测血清MCP-1和UMA.结果糖尿病组血清MCP-1平均水平为(631.1±248.2)pg/ml,明显高于对照组(359.3±134.3)pg/ml,P=0.0012.Mi组血清MCP-1平均水平为(767.2±301.2)pg/ml,明显高于N组(565.3±145.4)pg/ml,P＜0.05.Ma组与Mi组血清MCP-1平均水平无统计学差异(P＞0.05).结论 2型DM尤其是早期DN患者空腹血清MCP-1水平明显升高可能预示DN的发生,但是与DN的严重性无关.     

脐血与成人外周血单核细胞来源树突状细胞分化和成熟标志物的比较

目的比较脐血单核细胞(CBMC)来源树突状细胞(DC)和成人外周血单核细胞(PBMC)来源DC在分化和成熟过程中表型的变化,以探讨新生儿免疫功能低下的原因。方法将重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)和脂多糖(LPS)的不同组合对单核细胞来源DC进行刺激培养,利用流式细胞仪技术检测DC表面CD11c、CD1a、CD80、CD86、CD40、MHCⅠ类和MHCⅡ类分子的表达。结果CD11c阳性细胞和MHCⅠ类分子在CBMC来源DC和PBMC来源DC的表达率非常接近(P>0.05)。CBMC来源的DC上CD40的表达率低于PBMC来源DC[(34.80±7.77)%vs(54.37±9.57)%](P<0.01)。经LPS诱导后,CBMC来源DC上CD80、CD86的表达率都明显低于PBMC来源DC[(3.72±1.63)%vs(7.82±0.81)%、(28.53±4.67)%vs(45.62±5.16)%](均P<0.01)。CBMC来源DC上MHCⅡ类分子的相对荧光强度(RFI)均低于PBMC来源DC(P<0.01)。结论CBMC来源DC上MHCⅡ类分子及协同刺激分子的表达均明显低于PBMC来源DC,可能是造成新生儿免疫功能低下及脐带血移植时移植物抗宿主病发生率较低的原因之一。     

脐血与成人外周血单核细胞来源树突状细胞分化和成熟标志物的比较

目的 比较脐血单核细胞(CBMC)来源树突状细胞(DC)和成人外周血单核细胞(PBMC)来源DC在分化和成熟过程中表型的变化,以探讨新生儿免疫功能低下的原因.方法 将重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)和脂多糖(LPS)的不同组合对单核细胞来源DC进行刺激培养,利用流式细胞仪技术检测DC表面CD11c、CD1a、CD80、CD86、CD40、MHC Ⅰ类和MHC Ⅱ类分子的表达.结果 CD11c阳性细胞和MHC Ⅰ类分子在CBMC来源DC和PBMC来源DC的表达率非常接近(P>0.05).CBMC来源的DC上CD40的表达率低于PBMC来源Dc[(34.80±7.77)%vs(54.37±9.57)%](P<0.01).经LPS诱导后,CBMC来源DC上CD80、CD86的表达率都明显低于PBMC来源DC[(3.72±1.63)%vs(7.82±0.81)%、(28.53±4.67)%vs(45.62±5.16)%](均P<0.01).CBMC来源DC上MHC Ⅱ类分子的相对荧光强度(RFI)均低于PBMC来源DC(P<0.01).结论 CBMC来源DC上MHC Ⅱ类分子及协同刺激分子的表达均明显低于PBMC来源DC,可能是造成新生儿免疫功能低下及脐带血移植时移植物抗宿主病发生率较低的原因之一.     

外源性IL-10对单核细胞定向分化为树突状细胞的影响

目的:研究外源性IL-10对单核来源的树突状细胞(dendritic cells,DCs)的影响,为进一步认识IL-10在系统性红斑狼疮(system lupus erythemacosus,SLE)发病机制中的作用提供线索。方法:应用GM-CSF IL-4 TNF-α体系诱导培养单核细胞来源的DCs,同时在该体系中加入与SLE患者血清浓度相当的外源性IL-10(30 pg/ml)。用流式细胞术检测DCs的表型(CD14、CD11c、CD1a、HLA-DR、CD80、CD86和CD83),CCK-8法检测Dcs刺激同种异体淋巴细胞增殖能力,ELISA法检测DCs分泌IL-12p40、IL-10和INF-γ水平。结果:30 pg/ml的外源性IL-10可使单核细胞来源的DCs(monocyte derived-DCs,MDDCs)HLA-DR、CD80、CD86和CD83的表达以及IL-12p40和IFN-γ的分泌水平受到抑制,并使其刺激同种异体T细胞增殖能力下降。结论:外源性IL-10对单核细胞定向分化为DCs产生了抑制作用。进一步证实IL-10在SLE发病机制中发挥了重要作用。     

糖尿病患者造影剂肾病的研究进展

糖尿病患者造影剂肾病的发生率较正常人群高,可高达50％以上,临床表现以非少尿型急性肾功能衰竭者多见,往往需要透析治疗。造影剂肾病无特殊治疗方法,识别高风险患者是减少造影剂肾病的关键。     

羧甲基茯苓多糖抑制人外周血源性树突状细胞凋亡的体外研究

目的 :探讨羧甲基茯苓多糖(carboxymethytl pachymaram,CMP)对人外周血源性树突状细胞(dendritic cells,DC)凋亡的影响。方法:人外周血单核细胞经rh GM-CSF和IL-4诱导分化为不成熟DC。LPS诱导成熟的基础上分别加入不同浓度的CMP(终浓度为10、50、100 mg/L),以不加CMP为对照组,应用流式细胞术检测细胞凋亡率和趋化因子受体CCR7表达情况,Q-PCR检测CCR7基因表达情况,Western blot检测磷酸化Akt、Akt蛋白表达情况。结果:经CMP处理后DC凋亡率低于对照组,而CCR7的表达高于对照组,磷酸化Akt蛋白表达亦增高,且呈剂量依赖趋势。100 mg/L CMP处理组细胞凋亡率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。50 mg/L和100 mg/L CMP处理组CCR7的表达和磷酸化Akt蛋白均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CMP能抑制成熟DC的凋亡,其机制可能是通过上调CCR7的表达,经PI3K/Akt信号通路发挥作用。     

非胰岛素依赖型糖尿病及糖尿病肾病患者红细胞免疫功能的变化

本文检测３４例非胰岛素依赖型糖尿病（２例ＤＭ）患者及３１例糖尿病肾病（ＤＮ）患者的红细胞免疫功能,并与４０例健康人进行对照,结果发现２型ＤＭ及ＤＮ患者红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＢＣ·Ｃ３ｂＲＲ）红细胞免疫促进因子（ＲＦＥＲ）显著下降,红细胞免疫复合物花环率（ＲＢＣ·ＩＣＲＲ）红细胞免疫抑制因子（ＲＦＩＲ）显著升高,ＲＢＣ·Ｃ３ｂＲＲ与肌酐呈负相关,ＲＢＣ·ＩＣＲＲ,ＲＦＩＥＲ与肌酐呈正相关,提示２     

尿微量蛋白联合检测对糖尿病早期肾损伤的诊断价值

目的观察糖尿病患者尿液微量蛋白联合检测对糖尿病早期肾损伤的诊断价值及其监控作用。方法用干化学法和速率散射比浊法分别检测105例不同病程糖尿病患者及100名健康对照者的尿蛋白定性和尿微量蛋白[微量白蛋白(MA)、α1-微球蛋白(α1-M)、β2-微球蛋白(β2-M)],对检测结果进行统计分析。结果糖尿病组尿蛋白定性及尿微量蛋白测定的结果均明显高于健康对照组,比较有显著性差异;糖尿病组中,尿蛋白定性阳性率只有23.8%,尿MA、α1-M、β2-M阳性率分别为56.2%、64.8%、27.3%;尿MA和α1-M联合检测总阳性率为77.1%,与单测尿MA或α1-M阳性率比较有显著性差异(P<0.05);尿蛋白定性和尿MA,尿α1-M联合检测时,105例糖尿病者尿蛋白定性阴性中有53.3%MA或尿α1-M阳性;糖尿病者随病程增加尿蛋白定性、尿MA和α1-M的阳性检出率不断增高,尿MA和α1-M水平不断升高。结论尿蛋白定性阴性不能排除糖尿病早期肾损伤;尿微量蛋白联合检测对发现糖尿病早期肾损伤有重要意义。     

树突状细胞分布与糖尿病大鼠主动脉内膜增生的关系

目的 探讨糖尿病大鼠树突状细胞在外周血、动脉壁以及脾脏分布情况及与主动脉内膜增生的关系.方法 链脲菌素腹腔注射及经高脂饮食喂养8周形成糖尿病大鼠内膜增生模型,分别取外周血、动脉壁以及脾脏组织.并制备组织单细胞悬液.应用流式细胞仪检测树突状细胞及T淋巴细胞比例情况.结果 糖尿病大鼠及高脂饮食喂养合并糖尿病大鼠内膜较正常对照大鼠内膜增生明显(P＜0.05),其外周血树突状细胞分布明显减少且主动脉内树突状细胞比例明显升高(P＜0.05).T淋巴细胞比例检测同样发现,糖尿病大鼠及高脂饮食喂养合并糖尿病大鼠较正常大鼠,外周血及主动脉内T淋巴细胞比例升高(P＜0.05).结论 糖尿病大鼠及高脂饮食喂养的糖尿病大鼠主动脉内膜增生与树突状细胞及T淋巴细胞比例变化呈一定相关关系,树突状细胞等免疫细胞在糖尿病大鼠主动脉内膜增生形成中可能起重要作用.     

2型糖尿病患者血清chemerin水平与糖尿病肾病相关性研究

目的：检测2型糖尿病（T2DM）患者血清脂肪细胞因子chemerin表达水平,探讨其与糖尿病肾病（DN）的相关性。方法 T2DM患者78例,根据尿白蛋白／肌酐比率（UACR）分为单纯糖尿病组（UACR＜30 g／mg,36例）和DN组（ UACR≥30 g／mg,42例）。同期健康体检者30例作为对照组。采用酶联免疫法检测血清chemerin表达水平。对3组生化指标、chemerin水平等进行比较,并分析它们之间的相关性。结果 DN组血清chemerin水平（149．90±25．71）μg／L 显著高于单纯糖尿病组（123．11±22．04）μg／L（P ＜0．01）;单纯糖尿病组与对照组（121．03±21．89）μg／L比较血清chemerin无明显差异（ P＞0．05）;T2DM患者血清chemerin水平与收缩压（ SBP）、体重指数（BMI）、胰岛素抵抗指数（HOMA－IR）、血肌酐（Scr）和甘油三酯（TG）呈正相关（均P＜0．05）,与肌酐清除率（Ccr）、高密度脂蛋白（HDL－C）和血脂联素呈负相关（均P＜0．05）;多元回归分析显示Ccr、UACR是影响T2DM患者血清chemerin主要因素。结论血清chemerin水平升高与DN相关,可作为预测DN的参考标记物。     

Changes in dendritic cells and dendritic cell subpopulations in peripheral blood of recipients during acute rejection after kidney transplantation

Background Advances in transplantation immunology show that the balance between dendritic cells （DCs） and their subsets can maintain stable immune status in the induction of tolerance after transplantation. The aim of this study was to investigate if DCs and DC subpopulations in recipient peripheral blood are effective diagnostic indicators of acute rejection following kidney transplantation. Methods Immunofluorescent flow cytometry was used to classify white blood cells （WBCs）, the levels of mononuclear cells and DCs （including the dominant subpopulations, plasmacytoid DC （pDC） and myeloid DC （mDC）） in peripheral blood at 0, 1, 7, and 28 days and 1 year after kidney transplantation in 33 patients. In addition, the blood levels of interleukin-10 （IL-10） and IL-12 were monitored before and after surgery. Fifteen healthy volunteers served as normal controls. Patients were undertaking hemodialysis owing to uremia before surgery. Results The total number of DCs, pDC, and mDC in peripheral blood and the pDC/mDC ratio were significantly lower in patients than controls （P 〈0.05）. Peripheral DCs suddenly decreased at the end of day 1, then gradually increased through day 28 but remained below normal levels. After 1 year, levels were higher than before surgery but lower than normal. The mDC levels were higher in patients with acute rejection before and 1 day after surgery （P 〈0.005）. There was no significant difference in IL-10 and IL-12 levels between patients with and without acute rejection. Conclusion The changes in DCs and DC subpopulations during the acute rejection period may serve as effective markers and referral indices for monitoring the immune state, and predicting rejection and reasonably adjusting immunosuppressants.     

阿托伐他汀对外周血中树突状细胞成熟及免疫功能的影响

目的:探讨阿托伐他汀对外周血中树突状细胞(DC)成熟和免疫功能的影响。方法:梯度离心法分离人外周血单核细胞,经含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白介素4的DC完全培养液中培养,使其分化为成熟DC。DC与氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)及与100μmol/L阿托伐他汀和ox-LDL共同孵育48h后,镜下观察DC吞噬ox-LDL的形态变化,同时采用流式细胞术检测DC表型(CD1a、CD80、CD86、HLA-DR)的表达。结果:经阿托伐他汀处理的DC可下调CD1a、HLA-DR的表达,抑制DC对ox-LDL的吞噬作用。结论:阿托伐他汀可明显抑制树突状细胞的免疫活性,推测是他汀类药物免疫调节的新机制。     

口腔癌患者外周血树突状细胞的生物学特性

目的:研究口腔癌患者外周血树突状细胞(DC)的形态、表型和功能性变化及其临床意义. 方法: 口腔癌患者(实验组)及正常人(对照组)15例外周血单个核细胞经GM-CSF,IL-4及TNF-α诱导培养, 获取成熟DC, 光镜和电镜观察细胞的形态,流式细胞仪检测细胞表型如CD1a,CD83,CD80,CD86和HLA-DR等分子的表达变化,用噻唑蓝(MTT)法检测DC与自体和同种异体的混合淋巴细胞反应(MLR)中对淋巴细胞增殖的刺激能力. 结果: 正常人及口腔癌患者的外周血单个核细胞经体外7 d诱导培养,均诱导出具有典型形态和表型的DC,其中实验组细胞的CD83,CD1a表达率分别为49.3±9.5和48.1±7.3,与对照组两者表达率62.1±7.9和60.2±6.8相比,差异有统计学意义(P＜0.05),CD86,CD80和HLA-DR的表达率分别为85.5±8.7,83.2±8.1和78.3±5.4,与对照组三者表达率89.2±6.7,87.7±7.2和82.3±4.1相比无明显统计学差异(P＞0.05);实验组DC细胞CD83,CD1a,CD86,CD80和HLA-DR表达的平均荧光指数(MFI)分别为4.80±2.13,3.96±1.15,12.33±6.75,19.63±8.12和39.44±7.9, 均低于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05);口腔癌患者来源的DC在体外具有诱导同种异体和自体外周血T细胞增殖的能力. 结论: 口腔癌患者外周血单核细胞来源可诱导成为具有功能性的成熟DC,该细胞可应用于口腔癌的免疫治疗.