麦麸酶解产品清除自由基的体外实验研究

目的:以体外实验研究麦麸酶解产品(EHWB)清除自由基、保护DNA氧化损伤的效果。方法:采用黑曲霉发酵生产混合酶制剂水解去淀粉麦麸(DSWB)获得EHWB,并设计不同反应体系,探讨在离体条件下其对自由基的清除作用和防止羟自由基对DNA的损伤作用。结果:EHWB对二苯代苦味酰自由基(DPPH)、超氧阴离子自由基(O2)、羟自由基(·OH)等都有很好的清除·?能力。另外它还可有效地保护DNA免受·OH的损伤。结论:麦麸酶解产品有清除自由基的作用。     

麦麸多肽对小鼠抗氧化损伤作用

目的 探讨麦麸多肽对氧化损伤模型小鼠的抗氧化作用。方法 应用D-半乳糖建立亚急性衰老小鼠模型;麦麸多肽每d分别按150,300,600 mg/(kg·bw)的剂量灌胃,42 d后取脾脏及胸腺称重,计算脏器指数,测定血清、肝脏中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果 麦麸多肽300,600 mg/(kg·bw)组小鼠体重增长分别为(5.92±0.73),(6.19±0.30)g;脾脏指数分别为(4.39±0.06),(4.56±0.15);胸腺指数分别为(2.53±0.12),(2.96±0.11),与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);血清和肝脏中MDA含量明显下降(P<0.01),SOD和GSH-Px活力明显提高(P<0.01)。结论 在本实验条件下,麦麸多肽对氧化损伤模型小鼠有较强的抗氧化作用。     

原花青素对氨基脲染毒小鼠睾丸组织损伤的修复作用

目的:探讨原花青素(PC)对氨基脲(SEM)染毒小鼠睾丸组织形态及睾丸酶损伤的修复作用。方法:50只昆明种小鼠按体重随机分为5组:溶剂对照组、SEM染毒组、SEM染毒+低、中、高剂量PC保护组。SEM染毒组小鼠按56.25 mg/(kg.bw)剂量灌胃SEM溶液;低、中、高剂量PC保护组小鼠分别按100、200、400mg/(kg.bw)剂量灌胃PC溶液。除溶剂对照组灌胃等体积的去离子水外,其它每组均上午灌胃SEM、下午灌胃PC,每天1次,实验时间均为6周。实验结束后处死动物,分离双侧睾丸测定相关指标。结果:溶剂组,睾丸组织形态正常;SEM染毒组睾丸曲细精管上皮细胞层次显著减少,管壁脱落缺失,腔内未见精子等;PC保护组睾丸形态较SEM染毒组有所改善,且随PC剂量的增加改善较明显,睾丸间质有所缩小,曲细精管上皮细胞层次趋向正常等。SEM染毒组小鼠睾丸组织LDH-X、γ-GT活性降低,ACP活性升高(P<0.05);中、高剂量PC保护组LDH-X、γ-GT活性升高,ACP活性降低(P<0.05);SEM染毒组睾丸组织GSH-PX活力及GSH含量下降(P<0.05);高剂量PC保护组GSH-PX活力、GSH含量均呈增高趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:56.25 mg/(kg.bw)剂量SEM对小鼠睾丸组织形态及其酶有损伤作用;一定剂量的PC对SEM损伤的睾丸组织形态及其酶有修复作用,其作用机制可能与抗氧化损伤有关。     

羟基酪醇对肥胖大鼠睾丸线粒体氧化损伤的保护作用

目的 研究羟基酪醇(hydroxytyrosol,HT)对高脂膳食诱发的大鼠睾丸线粒体氧化损伤的保护作用.方法 雄性SD大鼠48只,随机分出8只为基础对照组,给予基础饲料喂养.其余40只给予高脂喂养8w成功诱导出16只肥胖模型,将肥胖模型大鼠随机分为高脂对照(high-fat,HF)和HT两组,继续喂高脂饲料5w,同时HT组灌胃给予HT(25 mg/kgb w),实验结束时,称体重,杀动物并提取睾丸组织,检测线粒体氧化损伤指标.结果 与基础组比,HF组大鼠睾丸组织ROS和MDA含量增高,总抗氧化能力和总SOD活性下降,线粒体膜电位下降,与HF组相比,HT组ROS和MDA含量降低,总抗氧化能力和总SOD活性增强,膜电位水平升高.结论 HT对高脂饮食诱导肥胖大鼠睾丸线粒体的氧化损伤具有一定的保护作用.     

猪血酶解产物的小鼠初级精母细胞染色体畸变试验

目的 通过小鼠初级精母细胞染色体畸变试验评价猪血酶解产物的遗传毒性.方法 采用经口灌胃给药,制备小鼠精母细胞染色体标本,观察染色体畸变类型和畸变率.结果 受试物各剂量组总畸变细胞率、常染色体单价体率和性染色体单价体率与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);阴性对照组与阳性对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 猪血酶解产物在本试验剂量范围内未见遗传毒性,小鼠初级精母细胞染色体畸变试验为阴性.     

葛根素对酒精所致大鼠睾丸损伤的保护作用

目的 研究葛根素对酒精所致大鼠睾丸损伤的保护作用. 方法 30只Wistar大鼠,随机分为3组,对照组:蒸馏水5 ml/(kg·d)灌胃;酒精损伤组:50°酒精5 ml/(kg·d)灌胃;葛根素组:50°酒精5 ml/(kg·d)灌胃,腹腔内注射葛根素10 mg/(kg·d),对照组与酒精损伤组行等体积生理盐水每天腹腔内注射.26 d后处死大鼠,检测精子数量、精子畸形率、血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平,光镜观察睾丸组织的病理变化. 结果酒精损伤组与正常组相比,精子数量下降(P＜0.05),精子畸形率升高(P＜0.05),血清T、FSH和LH水平下降(P＜0.05),睾丸生精上皮结构破坏,支持细胞、各级生精细胞和睾丸间质细胞均有退化变性.葛根素组与酒精损伤组相比,精子数量上升(P＜0.05),精子畸形率下降(P＜0.05),血清T、FSH和LH水平上升(P＜0.05),睾丸形态结构基本正常. 结论葛根素对酒精所致大鼠睾丸的损伤具有保护作用.     

山楂黄酮对小鼠睾丸间质细胞热损伤保护作用

目的探讨山楂黄酮对离体小鼠睾丸间质细胞的热应激防护作用。方法选取对数生长期的小鼠睾丸间质细胞株（TM₃）,设对照组、热应激组（43 ℃ 1 h）、山楂黄酮高、中、低剂量组（800、200、50 mg/L）、阳性对照组（绒毛膜促性腺激素500 IU/L）。采用噻唑蓝法观察细胞活性,光学显微镜观察细胞形态学变化,检测丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。结果与对照组比较,热应激组细胞增殖率[（77.74±5.10）%]明显下降,SOD和GSH-Px活性[分别为（19.27±1.02）、（246.03±13.53）U/mL]降低,MDA含量[（2.54±0.09）nmol/mL]明显升高（P<0.01）,细胞数量明显下降,细胞收缩变形;与热应激组比较,山楂黄酮低剂量组细胞增值率[（91.33±5.50）%]、SOD和GSH-Px活性[分别为（28.31±1.30）、（270.91±10.34）U/mL]明显升高,MDA含量[（2.04±0.01）nmol/mL]明显下降（P<0.05）,细胞数量虽明显减少,但细胞形状保持良好。结论山楂黄酮可增强细胞抗氧化能力,对睾丸间质细胞的热应激损伤具有一定保护作用。     

二甲基甲酰胺对小鼠睾丸组织结构和睾丸酶的影响

目的探讨二甲基甲酰胺（DMF）对睾丸组织结构及睾丸酶活力的影响。方法将40只SPF级健康成年雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组（0g／kg）、低（0．5g／kg）、中（1g／kg）、高（2g／蝇）剂量染毒组。每天灌胃染毒DMF一次，空白对照组以蒸馏水灌胃，连续灌胃30d。于染毒前1d称重小鼠，以后每3d称重1次。于第31日摘除眼球取血并颈椎脱臼处死小鼠。每组随机抽取两只小鼠的一侧睾丸，制备病理切片。采用试剂盒测定其余睾丸琥珀酸脱氢酶（SDH）、乳酸脱氢酶（LDH）、酸性磷酸酶（ACP）活力。结果与空白对照组（0g／kg）比较，染毒第9天后各染毒组小鼠体重下降（P〈0．05）。随染毒剂量增高，睾丸组织中ACP活力有增高趋势，各染毒组ACP活力显著高于空白对照组（P〈0．01）。中、高剂量染毒组SDH活力显著低于空白对照组（P〈0．01）。各染毒组LDH活力显著低于空白对照组（P〈0.01）。结论在本实验染毒时间和剂量范围内，DMF能引起小鼠睾丸组织病理学改变并且抑制睾丸酶的活力。     

丙烯腈对大鼠睾丸抗氧化酶活力和脂质过氧化水平的影响

目的　探讨丙烯腈(ACN)的雄性生殖毒性机制。方法　健康雄性SD大鼠分别以0、7.5、15.0、30.0 mg/kg剂量腹腔注射ACN染毒,测定其睾丸谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)、谷胱甘肽S 转移酶(GST)活力。结果　ACN染毒4周后,15.0、30.0 mg/kg组大鼠睾丸GSH含量[(7.44±0.96)、(6.95±0.77)mg/g pro]增加,30.0 mg/k组大鼠GSH Px活力[(70.89±4.01)U/mg pro]升高,与对照组的差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。ACN染毒8周后,30.0 mg/kg组大鼠睾丸GSH含量[(2.50±0.94)mg/g pro]降低,15.0、30.0mg/kg组大鼠SOD活力[(102.08±16.08)、(113.30±17.20)NU/mg pro]升高,与对照组的差异均有统计学意义(P<0.01)。ACN染毒13周后,15.0、30.0 mg/kg组大鼠睾丸GSH含量降低,30.0 mg/kg组GST活力下降,各染毒组GSH Px活力均低于对照组,30.0 mg/kg组MDA含量[(0.68±0.16)nmol/mgpro]高于对照组[(0.38±0.12)nmol/mg pro],差异均有统计学意义(P<0.01)。停止染毒后2周,大鼠睾丸GSH水平恢复;30.0 mg/kg组大鼠睾丸MDA含量下降,但仍高于对照组,GSH Px活力仍低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论　ACN能通过破坏氧化-抗氧化体系的平衡,诱导雄性大鼠睾丸脂质过氧化损伤。     

槲皮素对缺血再灌注损伤肝脏的保护作用

目的 :　探讨槲皮素对大鼠缺血再灌注损伤肝脏的保护作用。方法 :　灌胃给予槲皮素及作为阳性对照的维生素 C,结扎后 3 0 min再开放肝门血管造成肝脏缺血再灌注损伤 ,分别测定血浆谷丙转氨酶 (GPT)、谷草转氨酶 (GOT)活性、丙二醛 (MDA)浓度 ,肝脏槲皮素、MDA、还原型谷胱甘肽 (GSH)含量和黄嘌呤氧化酶 (XO)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)、超氧化物歧化酶 (SOD)活性以及肝脏总抗氧化力、活性氧 (ROS)含量、DNA断裂率。结果 :　肝脏缺血再灌注后GPT、GOT活性、MDA水平升高 ,肝脏 XO活性、MDA和 ROS含量以及 DNA断裂率增加 ,而SOD、GSH- Px活性、GSH含量及总抗氧化力降低。槲皮素灌胃后肝脏中槲皮素浓度升高 ,血浆GPT、GOT活性及 MDA浓度降低 ,肝脏 ROS含量降低 ,GSH含量及总抗氧化力升高 ,SOD、GSH- Px活性有所恢复 ,对肝脏 DNA断裂发生无明显影响。维生素 C灌胃后对缺血再灌注损伤肝脏也具有保护作用。结论 :　槲皮素对大鼠缺血再灌注损伤肝脏具有明显的保护作用 ,其机制与增强肝脏抗氧化体系功能有关。     

葡多酚对大鼠DNA氧化损伤的防护作用研究

目的:研究葡多酚(GPC)对DNA氧化损伤防护作用。方法: 将大鼠分为正常对照组、高脂膳食、高脂+乙醇、高脂+ GPC(50 mg/kg bw)、高脂+乙醇+ GPC(50 和100 mg/kg bw)等共6组,饲养6 w,处死动物,制作脾细胞悬液,分不给和给予Fenton氧化两种处理,测定脾细胞DNA损伤程度及血清MDA水平和SOD活力等指标。结果: 1.不给予Fenton氧化处理的高脂+乙醇组和高脂+乙醇+GPC(100 mg/kg bw)组的 DNA损伤程度分别为76.15%和15.27%,给予氧化处理的为83.02%和19.83%,差异均有显著意义。2.高脂+乙醇组和高脂+乙醇+GPC(100 mg/kg bw)组的MDA分别为8.18±0.98 mmol/L和5.63±1.16 mmol/L,SOD为597.04±88.88 NU/ml和729.71±88.88 NU/ml,差异均有显著意义。结论: GPC对高脂和乙醇引发的DNA氧化损伤有防护作用。     

硒、锌对梭曼诱导大鼠过氧化损伤的保护机制研究

目的 :　研究梭曼 (Soman)对大鼠急性中毒的自由基损伤作用及硒、锌的抗氧化保护作用。方法 :　雄性大鼠 40只 ,按体重随机分为阴性组 (正常对照组 )、阳性组 (损伤对照组 )、硒组 (加硒保护组 )及锌组 (加锌保护组 )。测定指标有血清、大脑、肝脏的维生素 E(VE)、总抗氧化能力 (T- AOC)及一氧化氮合成酶 (NOS)。结果 :　梭曼中毒后 ,T- AOC水平、VE含量明显下降 ,NOS活性显著提高 ;硒、锌组较阳性对照组损伤指标变化幅度较小。结果 :　梭曼中毒有明显的自由基损伤 ,硒、锌对梭曼中毒有显著的抗氧化作用。     

番茄红素预防大鼠高血糖及其作用机制

目的:研究番茄红素(lycopene,LP)对大鼠高血糖的预防作用并探讨相关机制。方法:40只SD大鼠随机分为5组,其中3个剂量组分别以番茄红素5、20和50mg/(kgbwd)灌胃,四氧嘧啶模型组和正常对照组以等量色拉油灌胃,连续15d后,模型组和各剂量组大鼠腹腔注射四氧嘧啶(ALx)150mg/kgbw。注射后D4、D14进行口服葡萄糖耐量试验,称体重。D14同时测定糖化血清蛋白(GSB)、血清胰岛素(FISN)、血清游离脂肪酸(NFFA)、肝组织SOD,GSH-Px及MDA等。结果:LP中剂量组大鼠餐后2h血糖、GSP含量显著低于模型组(P<0.01),体重高于模型组(P<0.01);LP各剂量组大鼠肝组织SOD、GSH-Px含量均明显高于模型组,MDA含量低于模型组(P<0.01)。但LP各剂量组FINS和NEFA浓度与模型组比均无显著性差异。结论:预防性给予LP可缓解ALx所致的高血糖,并缓解高血糖大鼠体重下降程度。其机制可能与番茄红素增强机体的抗氧化能力,抑制脂质过氧化等效应有关。     

番茄红素对高脂血症模型大鼠肝脏保护作用研究

目的研究番茄红素对高脂血症大鼠肝脏的保护作用。方法 64只SD成年雄性大鼠按体重和血清总胆固醇(TC)随机分为对照组、模型组、氟伐他汀钠10mg/(kg bw d)、番茄红素4.4、11、22、44、110 mg/(kg bw d)共8个剂量组;实验(3w)期间,对照组饲基础饲料,其余饲高脂饲料;第2w起,对照组和模型组以溶剂1%CMC-Na灌胃,其余各组按确定剂量(1%CMC-Na为溶剂,1 ml/d)灌胃,历时2w。实验结束,检测肝脏总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)、血管内皮生长因子(VEGF);光镜下观察肝脏病理变化并计算炎症活动度。以番茄红素各剂量组肝脏各项指标与模型组均值差的绝对数进行曲线拟合分析。结果与模型组相比,各干预组肝脏TC、TG、LDL-C、MDA和VEGF水平均有不同程度降低,SOD、LPL、HL活性均有不同程度增强;肝脏脂变和炎症现象均有不同程度减轻。番茄红素44mg/(kgbw d)组大鼠肝脏TC、TG、LDL-C、SOD、LPL、HL、MDA和VEGF水平分别为24.75±3.03、13.67±1.26、22.21±2.83mg/g、156.56±8.61、0.53±0.06、0.50±0.10 U/mg prot、14.87±1.15 nmol/mg prot和199.12±33.92 pg/mg prot。拟合得到9个曲线方程。结论番茄红素可降低高脂血症大鼠肝脏脂质,调节肝脏脂质代谢酶的活性,提高抗氧化能力减缓肝脏的脂质过氧化,影响VEGF的生成,避免炎症反应扩大而保护肝脏实质细胞和肝脏血管;采用拟合曲线方程在4.4～110 mg/(kg bw d)剂量范围,可初步了解不同剂量的番茄红素对高脂血症大鼠肝脏各指标变量的影响。     

米糠甾醇对大鼠免疫功能的影响

目的探讨米糠甾醇(rice bran sterol,RBS)对大鼠免疫功能的调节作用。方法健康SD大鼠160只分为正常对照组(CN,灌胃生理盐水)和RBS低、中、高剂量(RBS-L,RBS-M,RBS-H,分别灌胃RBS乳化液30、75和150 mg/(kg·bw·d)组,15d后,测定免疫器官指数、碳廓清指数、血清溶血素、淋巴细胞增殖能力和腹腔巨噬细胞功能等免疫指标。结果与CN组比较,RBS-L和RBS-H组可提高脾脏指数(P0.05或P0.01),但RBS-M组差异不显著(P0.05);RBS各剂量组对大鼠胸腺指数无明显影响(P0.05);RBS-L和RBS-M组能提高大鼠碳廓清指数(P0.05);RBS-M组能促进血清溶血素的释放(P0.05);RBS各剂量组能显著提高大鼠淋巴细胞的增殖能力(P0.05或P0.01)和巨噬细胞的吞噬百分率(P0.05或P0.01)与吞噬指数(P0.01)。结论 RBS可增强大鼠的免疫功能。     

大豆硒蛋白对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的探讨大豆硒蛋白对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用。方法 Wistar大鼠50只,,随机分为正常对照组(NC)、糖尿病对照组(DM)、低剂量Se治疗组(L-Se)、中剂量Se治疗组(M-Se)、高剂量Se治疗组(H-Se)。后4组腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg制备DM模型。第7w起,NC、DM组予0.5%CMC-Na 10ml/(kg.d),L-Se、M-Se、H-Se组分别予大豆硒蛋白2,4,8g/(kg.d)灌胃。第12w末处死大鼠,检测血糖、血清及心肌组织中SOD、GSH-Px、NOS活性和MDA、NO含量以及心肌组织中Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性。结果与模型组比较,补充外源性大豆硒蛋白后,M-Se、H-Se组可明显降低糖尿病大鼠血糖及MDA含量(均P<0.001),显著增加血清GSH-Px、NOS活性(P<0.001),同时使心肌线粒GSH-Px活性、NO含量明显增加(均P<0.001),并且使心肌组织Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性显著增加(P<0.01,P<0.001)。结论大豆硒蛋白对糖尿病大鼠心肌损伤具有保护作用。     

硒对糖尿病大鼠肝脏磷脂酶D基因表达的影响

目的:研究硒对糖尿病大鼠代谢相关基因表达的调控作用。方法:对前期研究分离到的与补硒50μg/kgbwd有关的糖尿病大鼠差异显示的基因片段进行克隆、测序及同源性分析,选择目的基因进行RT-PCR验证,以观察各组大鼠之间肝脏中基因表达的变化。结果:差异显示基因片段Se-4的碱基序列与磷脂酶D(PLD)基因片段的同源性为100%。RT-PCR验证结果显示:PLDmRNA在糖尿病对照组、糖尿病补硒组大鼠肝脏中的表达水平较正常对照组明显增高,但糖尿病补硒组PLDmRNA的表达较糖尿病对照组有所降低(P<0.05)。结论:硒可抑制糖尿病大鼠肝脏中PLDmRMA的表达,这可能是硒改善糖尿病糖、脂代谢紊乱的分子机制之一。     

饲喂硝酸镧对大鼠生长及肝脏中几种酶活性的影响

[目的]探讨硝酸镧对大鼠生长及其肝脏中谷丙转氨酶(GPT),谷草转氨酶(GOT),碱性磷酸酶(AKP),γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性的影响。[方法]实验分为短期实验和长期实验,每期实验分为对照组和3个不同剂量组(0.1 mg/kg、2 mg/kg、20 mg/kg体重),灌喂硝酸镧,记录其体重和采食量变化。实验结束后,分别测定其肝匀浆中GPT、GOT、AKP、γ-GT活性。[结果]短期实验中,大鼠采食量与对照组相比变化不大,其增重率分别提高了11.33%、5.96%和2.14%,但均未达显著水平(P﹥0.05)。长期实验中,0.1 mg/kg和2 mg/kg组的大鼠,其日采食量与对照组相比变化不大,大鼠增重率分别提高了7.81%和9.94%,而20 mg/kg组大鼠采食量和增重率均降低。GPT酶活性在短期均表现出"低促-高抑"的效应;长期高浓度的镧降低GPT的活性。硝酸镧对GOT活性的影响主要表现在低剂量上,短期降低活性,长期有明显的增强作用。无论短期和长期,硝酸镧能提高AKP活性。γ-G活性则无显著变化。[结论]镧能影响大鼠的生长,影响肝脏GPT、GOT、AKP的活性,其结果与镧的剂量及灌喂长短有关,某些酶表现出低剂量促进,高剂量降低的hormesis效应。