亲环素A生物学功能的研究进展

亲环素A是一种在生物界广泛存在、高度保守的蛋白质，具有肽基脯氨酰顺，反异构酶活性，参与蛋白质折叠、装配与运输；它在细胞内能与环孢酶素A结合，参与免疫抑制；还可介导胆固醇转运，能发挥前炎性因子的功能，并且在信号转导中具有重要作用。     

亲环素A蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

亲环素A(Cyclophilin A,CypA)是免疫抑制剂环孢素A(Cyclosporin A,CsA)在细胞内的作用靶点,具有肽基脯氨酸顺/反异构酶(Peptidyl-prolyl cis-transisomerase, PPIase)活性.最近研究示Cyp A蛋白在非小细胞肺癌[1]、前列腺癌细胞 [2]、直肠癌[3]、喉癌[4]、食管癌[5]等肿瘤组织中高表达.另有研究报道CypA表达与子宫内膜癌预后密切相关[6].胰腺癌起病隐匿,其术后5年生存率低于5%[7].     

超声心动图检查联合血清亲环素A与亲环素B检测在高血压性心脏病诊断中的应用

目的分析超声心动图联合血清亲环素A与亲环素B在高血压性心脏病诊断中的应用。方法选择2016年1月至2018年1月就诊的高血压性心脏病患者100例为观察组,同期高血压但无心脏结构性损害者100例作为对照组,对受试者行超声心动图检查,并检测血清中亲环素A与亲环素B水平,采用Logistic回归分析超声心动图、亲环素A与亲环素B联合诊断的价值。结果观察组舒张早期与晚期血流速度峰值比值(E/A)及二尖瓣血流舒张早期左心室充盈峰速(VE)水平分别为0.96±0.24和(0.53±0.12)m/s,低于对照组1.43±0.21和(0.68±0.13)m/s,左心室舒张晚峰值流速(VA)和亲环素A及亲环素B水平分别为(0.66±0.11)m/s、(11.98±2.13)和(198.61±28.19)ng/L,高于对照组(0.49±0.09)m/s、(7.49±1.04)和(139.03±31.25)ng/L(均P0.05)。超声心动图、亲环素A与亲环素B联合诊断高血压性心脏病的敏感度、特异度及受试者工作特征曲线下面积(AUC)分别为94.0%、90.0%和0.987,均显著高于各指标单独诊断的结果。结论采用超声心动图联合血清亲环素A与亲环素B检测对高血压性心脏病进行诊断可有效提高诊断的敏感度和特异度。     

亲环素A在消化道肿瘤中的研究进展

亲环素A(CypA)是一种广泛存在于生物界多种组织和细胞中、具有肽基脯氨酰顺反异构酶(PPIase)、高度保守的蛋白质,参与蛋白折叠、免疫抑制、病毒感染、细胞内信号转导等一系列生物学功能。目前研究发现CypA可参与消化道肿瘤的发生发展,特别是胰腺癌和肝细胞癌等。深入研究CypA在消化道肿瘤生物学中的分子机制,将会是消化道肿瘤研究中新的关注点之一。此文主要讨论CypA的生物学特性及其在消化道肿瘤方面的研究进展。     

亲环素A启动单核细胞炎症性募集的机制

目的　探讨亲环素A在单核细胞参与氧化应激炎症反应中的作用。方法　人类单核细胞系THP-1细胞常规体外培养，以亲环素A作为氧化应激炎症反应的主要活性氧诱导刺激因子，Transwell法检测亲环素A对单核细胞迁移趋化的影响；ELISA检测单核细胞培养液中主要炎症反应因子白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量变化；明胶酶谱法测定基质金属蛋白酶9（MMP-9）的活性变化；Western　blot检测核因子кB（NF-кB）炎症信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）炎症信号通路的激活。结果　亲环素A可以诱导单核细胞迁移趋化，促进单核细胞分泌炎症反应因子IL-6；亲环素A通过MAPK-NF-кB炎症信号通路增强MMP-9活性。结论     

亲环素A在呼吸系统疾病中的研究进展

亲环素A最初作为是免疫抑制剂环孢素A的细胞内蛋白受体发现,属于亲环素家族中的一员。以后的研究发现它是一种高度保守的蛋白质,在生物界中广泛表达,具有分子伴侣、蛋白质运输、免疫调剂和细胞信号转导等多种生物学功能,与许多疾病的发病机制有着密切的关系。本文主要就亲环素A的结构与功能进行介绍,并对其与COPD的关系作一简单综述。     

氨氯地平对平滑肌细胞泡沫化过程中亲环素A表达和胆固醇蓄积的影响

目的 观察氨氯地平预处理对氧化型低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞泡沫化过程中亲环素A表达的影响及其对胆固醇蓄积的作用,从新的角度探讨氨氯地平的抗动脉粥样硬化作用.方法 实验分为6组:对照组、氧化型低密度脂蛋白组、氨氯地平(0.1、1.0和10.0 μmol/L)处理细胞1 h后加入80 mg/L氧化型低密度脂蛋白共同孵育72 h组及10.0 μmol/L氨氯地平单独处理组,Western-blot和RT-PCR分别检测亲环素A mRNA和蛋白质的表达改变;油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况,高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量变化.结果 氧化型低密度脂蛋白处理组的细胞内亲环素A的表达明显减少;经氨氯地平处理后,随着氨氯地平浓度的增加,细胞内亲环素A的表达逐渐增加,10.0μmoL/L氨氯地平预处理细胞组效果最明显,较氧化型低密度脂蛋白组差异有显著性(P<0.05).油红O染色显示,氧化型低密度脂蛋白组细胞内大量脂滴形成,细胞内胆固醇酯/总胆固醇的比值为57.9%,符合泡沫细胞特征;预先予氨氯地平处理后,随着药物浓度的增加,细胞内脂滴逐渐减少,细胞内胆固醇酯/总胆固醇的比值逐渐降低,10.0μmol/L氨氯地平预处理细胞组效果最明显,为37.8%;结论 氨氯地平预处理,可上调氧化型低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞泡沫化过程中亲环素A的表达,减轻细胞内的胆固醇蓄积.     

支气管哮喘患者血清亲环素A检测及其临床意义

目的检测支气管哮喘患者血清亲环素A（CyPA）水平,探讨其临床意义。方法应用酶联免疫吸附试验检测30例支气管哮喘患者发作期、缓解期血清CyPA水平,以28例健康正常人为对照。结果支气管哮喘发作期患者血清CyPA水平显著高于缓解期患者及健康正常人（P〈0.05）,发作期患者血清CyPA水平与C反应蛋白水平呈显著正相关（r=0.697,P〈0.05）。结论 CyPA可能参与支气管哮喘的急性发作,也可能成为支气管哮喘治疗的潜在靶点。     

颅脑损伤患者血清亲环素A水平的变化及临床意义

目的揭示颅脑损伤患者血清亲环素A水平检测的临床价值。方法选取100例重型颅脑损伤患者和100例健康体检者(对照组),采用ELISA法测定血清亲环素A、中枢神经特异性蛋白(S100B)、C-反应蛋白、肿瘤坏死因子-α和白介素-6水平,采用格拉斯哥昏迷(GCS)评分评估患者伤情严重度,统计分析血清亲环素A水平与伤情严重度、上述指标血清水平、30天死亡、急性肺损伤、急性创伤性凝血病和急性进展性出血性脑损伤的关系。结果颅脑损伤患者血清亲环素A、S100B、C-反应蛋白、肿瘤坏死因子-α和白介素-6水平较对照组显著升高(均P0.01)。血清亲环素A水平与入院时GCS评分和上述指标血清水平显著相关性(均P0.01)。血清亲环素A是颅脑损伤患者30天死亡、急性肺损伤、急性创伤性凝血病和急性进展性出血性脑损伤的独立预测因素(均P0.05)。血清亲环素A水平的预测价值超过血清C-反应蛋白、肿瘤坏死因子-α和白介素-6水平(均P0.05),而与入院时GCS评分和血清S100B水平相似(均P0.05)。结论亲环素A参与颅脑损伤后继发性脑炎性损伤过程,其升高的水平与脑损伤严重度及预后密切相关。     

亲环素A在心血管疾病中作用的研究进展

亲环素A（cyclophilin A,CyPA）是一种在生物界广泛存在、高度保守的蛋白质,其具有肽酰脯氨酰顺反异构酶活性,在细胞内充当分子伴侣作用,参与蛋白折叠、组装,以及胞内运输、信号传导等。而细胞外亲环素A作为一种氧化应激诱导分泌因子,在心血管疾病的病理生理过程中有重要作用,为其临床研究、治疗提供新的方向和靶点。     

系统性红斑狼疮患者亲环素A表达异常及其意义的初步探讨

亲环素A（cyclophilin A，CyPA）即环孢素A（CsA）结合蛋白．是环孢素A的细胞内受体。目前发现青环素（CyP）有60多种异构体，分布广泛，从细菌到哺乳动物的多种细胞都有表达结构保守的蛋白质家族。CyP在蛋白质的折叠、装配与运输中发挥作用，也在免疫调节中发挥重要作用。已经发现一些自身免疫病如系统性红斑狼疮（SLE）、银屑病患者体内有抗CyPA抗体，或有CyPA mRNA表达异常，     

高血压致慢性心力衰竭患者T细胞及中性粒细胞中亲环素A和B的表达意义

目的探讨高血压致慢性心力衰竭患者T细胞及中性粒细胞亲环素A和亲环素B的表达特点。方法选择原发性高血压2~3级患者150例,根据合并疾病情况分为原发性高血压无心脏疾病患者50例(A组)、原发性高血压并高血压性心脏病,心功能(NYHA)Ⅰ~Ⅱ级患者50例(B组),原发性高血压并高血压性心脏病心功能Ⅲ~Ⅳ级患者50例(C组),另选择健康体检者50例(对照组),比较各组心脏彩色超声,炎性因子及抗氧化能力,同时采用RT-PCR和Western blot方法检测血清T细胞及中性粒细胞中亲环素A和亲环素B mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,A组、B组、C组血管紧张素Ⅱ、内皮素1、肿瘤坏死因子α以及白细胞介素1β明显升高,总抗氧化能力明显降低(P<0.05);与A组比较,B组和C组血管紧张素Ⅱ、内皮素1、肿瘤坏死因子α以及白细胞介素1β明显升高,总抗氧化能力明显降低(P<0.05)。与对照组比较,A组、B组及C组血清T细胞以及中性粒细胞亲环素A和亲环素B mRNA明显升高(1.12±0.34、1.28±0.38、1.43±0.36 vs 0.78±0.12,0.80±0.21、0.87±0.18、0.86±0.17 vs 0.47±0.16;1.42±0.36、1.56±0.34、1.77±0.35 vs 0.84±0.31,1.08±0.25、1.17±0.28、1.50±0.37 vs 0.72±0.19),同时蛋白表达也明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高血压患者应尽早调节血清亲环素A和亲环素B水平,可能对降低高血压引起的心功能损伤有一定的意义。     

OX40-OX40L相互作用对小鼠平滑肌细胞亲环素A表达的影响

目的　观察OX40-OX40配体（OX40L）相互作用对小鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）亲环素A（CyPA）表达的影响。方法　小鼠VSMC采用组织块贴壁法原代培养；应用实时荧光定量PCR和流式细胞术检测OX40L　mRNA和蛋白表达水平；细胞内、外CyPA水平分别采用实时荧光定量PCR及Western　blot方法检测。结果肿瘤坏死因子α＋脂多糖联合处理小鼠VSMC，细胞OX40L　mRNA和蛋白表达呈时间依赖性，mRNA表达在24　h（5.967±0.252比1.000±0.000，P<0.05）达到高峰，蛋白表达在36　h（61.900±2.551比20.967±0.451，P<0.05）增加最显著；可溶性OX40处理VSMC后，CyPA　mRNA表达呈时间依赖性并在90　min达到高峰（1.799±0.098比1.000±0.000，P<0.05），2　h后细胞培养上清中可检测到高水平的CyPA（1.119±0.059比0.281±0.038，P<0.05），而细胞内CyPA表达较对照组无明显差异；抗OX40L预处理细胞可显著抑制可溶性OX40诱导的CyPA　mRNA（1.105±0.091比1.799±0.098，P<0.05）及蛋白（0.635±0.040比1.119±0.059，P<0.05）表达。结论　OX40-OX40L相互作用可影响VSMC　CyPA的分泌。     

亲环素A对氧化型低密度脂蛋白诱导的RAW264.7细胞中NF-κB蛋白表达的影响

目的 观察亲环素A对氧化型低密度脂蛋白诱导的RAW264.7细胞中核因子κB (NF-κB)表达的影响.方法 Western blot检测氧化型低密度脂蛋白处理RAW264.7细胞不同时间亲环素A和NF-κB蛋白的表达,siRNA沉降亲环素A后再用Western blot检测氧化型低密度脂蛋白对RAW264.7细胞中NF-κB蛋白表达的影响.结果 氧化型低密度脂蛋白能够上调RAW264.7细胞中亲环素A和NF-κB蛋白的表达,siRNA沉降亲环素A能降低细胞中NF-κB蛋白的表达.结论 亲环素A表达的改变能影响氧化型低密度脂蛋白诱导的RAW264.7细胞中NF-κB的蛋白表达.     

亲环素A在巨噬细胞荷脂过程中的影响

目的观察胆固醇转运复合物中关键蛋白亲环素A在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达变化及其与细胞内胆固醇蓄积的关系,进而分析亲环素A在巨噬源性泡沫细胞形成过程中的作用。方法采用75 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞共同孵育,建立巨噬细胞荷脂化模型;Western-blot、免疫荧光法检测亲环素A蛋白的表达水平;高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量的变化。结果75 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞共同孵育48 h后,亲环素A的蛋白表达逐渐减弱,48 h、72 h分别较未处理组下降了54.5%±6.3%、59.8%±5.9%(P<0.05)。间接免疫荧光定位检测发现氧化型低密度脂蛋白显著抑制RAW264.7细胞中亲环素A在胞膜、胞浆中的表达,且随着处理时间的延长作用更明显。细胞内胆固醇酯/总胆固醇的比值由未处理组的28.3%±1.2%上升至48 h的42.3%±5.9%(P均<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白诱导的RAW264.7巨噬细胞泡沫化过程中,亲环素A的表达下调与细胞胆固醇蓄积密切相关。     

氨氯地平对氧化型低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞亲环素A表达的影响

目的观察氨氯地平对氧化型低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞亲环素A表达的影响,以进一步探讨氨氯地平对动脉粥样硬化的作用机制。方法用不同浓度氨氯地平(0、0.1、1.0和10.0μmol/L)预孵育平滑肌细胞1h后,与氧化型低密度脂蛋白共同孵育,逆转录聚合酶链反应和Western blotting法检测细胞亲环素AmRNA及蛋白的表达。结果氧化型低密度脂蛋白抑制平滑肌细胞亲环素AmRNA及蛋白的表达,而氨氯地平预处理可上调亲环素A的表达。结论氨氯地平可逆转氧化型低密度脂蛋白抑制平滑肌细胞亲环素A表达的作用。     

亲环素A在巨噬细胞荷脂过程中的表达及普罗布考干预的影响

目的观察亲环素A在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达变化及其与细胞内胆固醇蓄积的关系,进而探讨亲环素A在动脉粥样硬化形成中的作用机制。方法采用75 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7巨噬细胞共同孵育,建立巨噬细胞荷脂化模型,油红O染色观察细胞内脂滴的形成,高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量,Western-blot检测亲环素A的蛋白表达;用75 mg/L普罗布考干预对上述检测的影响。结果氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞共同孵育48 h后,油红O染色显示细胞内有大量脂滴形成,细胞内总胆固醇和游离胆固醇含量均明显增加,胆固醇酯/总胆固醇的比值为42.3%±5.9%,符合荷脂细胞特征;亲环素A的蛋白表达明显减弱。予普罗布考处理,细胞内脂滴明显减少,胆固醇酯/总胆固醇的比值降至32.9%±2.5%,亲环素A的蛋白表达增加81.3%±3.6%,较对照组差异有显著性(P均<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白诱导的RAW264.7巨噬细胞荷脂过程中,亲环素A表达下调,促进细胞胆固醇蓄积;普罗布考干预可上调亲环素A蛋白表达,减轻细胞内的胆固醇蓄积。     

细胞亲环素A通过CD147分子促进类风湿关节炎单核/巨噬细胞MMP-9的表达

目的观察类风湿关节炎（RA）滑液中存在的大量细胞亲环素A（CypA）是否可以上调RA滑液中细胞膜表面高表达CD147分子的单核／巨噬细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9的表达及活性，并确定这一调节是否需要CDl47分子信号通路的参与。方法重组人CyPA（200ng／mL）刺激人单核细胞系THP-l细胞24h。进行实时定量RT-PCR及明胶酶谱分析MMP-2和MMP-9mRNA表达及酶活性的改变：加入抗CDl47拮抗肽AP-9阻断细胞膜分子CDl47的作用。临床收集10例确诊的活动期RA患者外周血及关节腔滑液，分离获得单核／巨噬细胞，观察CypA对其MMP-2和MMP-9表达的影响。结果CyPA增加分化前及分化后THP-1细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达和活性，而对MMP-2则无作用；环孢素A（CsA）及抗CDl47拮抗肽AP-9显著抑制THP-1细胞MMP-2和MMP-9 mRNA表达及其分泌和活性及阻断CypA的上调作用。CyPA对RA关节腔滑液内单核／巨噬细胞MMP-9的表达和活性具有促进作用。结论CypA通过CD147受体的参与，上调RA关节腔滑液内单核／巨噬细胞MMP-9的表达及其活性，这一作用机制为RA发病机制及其治疗提供了新的理论基础。     

亲环素A保护PC12细胞对抗β-淀粉样蛋白诱导的氧化应激损伤和凋亡

目的 探讨亲环素A(CyPA)对Aβ25 ～35诱导PC12细胞氧化应激损伤和凋亡的影响.方法 用不同浓度的CyPA预处理PC12细胞,再加入Aβ25 ～35继续培养,采用MTT法分析细胞存活率.用10 nmoL/LCyPA预处理PC12细胞,再加入Aβ25 ～35继续培养,碘化丙啶(PI)单染后流式细胞仪进行凋亡的定量检测;罗丹明123(Rd 123)染色流式细胞仪检测线粒体跨膜电位;二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色,倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量.结果 CyPA可提高细胞的存活率,减少Aβ25 ～35引起的细胞凋亡,CyPA还可以改善由Aβ25 ～35引起的线粒体跨膜电位的下降,降低Aβ25 ～ 35诱导产生的大量ROS.结论CyPA可对抗Aβ25 ～ 35对PC12细胞的毒性作用,并通过增加线粒体跨膜电位和降低ROS产生从而减少细胞凋亡.     

非心瓣膜病心房颤动患者血清亲环素A和基质金属蛋白酶的表达水平及临床意义

目的检测非心瓣膜病心房颤动患者血清中亲环素A(CyPA)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达,探讨它们在心房颤动中的临床意义。方法观察组为非心瓣膜病心房颤动患者140例(房颤组,其中阵发性房颤45例、持续性房颤48例、永久性房颤47例),选取我科同期住院条件相同的窦性心律非心瓣膜病患者135例为对照组(非房颤组)。采用ELISA法检测各组患者血清中CyPA、MMP-2、MMP-9水平,同时测量左心房前后径(LAD),探讨CyPA和MMP-2、MMP-9在不同临床特征患者中表达的意义及相关性。结果观察组血清中CyPA和MMP-2、MMP-9表达水平显著高于对照组(P0.01),观察组中CyPA和MMP-2、MMP-9的表达与心房颤动持续时间密切相关。观察组左心房前后径大于对照组(P0.01),且与房颤动持续时间密切相关。经线性相关分析显示观察组患者血清中CyPA与MMP-2、MMP-9水平呈正相关(阵发性房颤组r1=0.77、r2=0.80,P0.01;持续性房颤组r1=0.71、r2=0.76,P0.01;永久性房颤组r1=0.67、r2=0.74,P0.05);CyPA浓度与LAD呈正相关(阵发性房颤组r=0.72,P0.01;持续性房颤组r=0.74,P0.01;永久性房颤组r=0.65,P0.05);MMP-2、MMP-9水平与LAD呈正相关(阵发性房颤组r1=0.74、r2=0.76,P0.01;持续性房颤组r1=0.66、r2=0.68,P0.01;永久性房颤组r1=0.63、r2=0.72,P0.05)。结论 CyPA和基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)在心房颤动患者血清中高表达,二者的协同作用在房颤的维持和发展中具有重要促进作用,CyPA和MMP-2、MMP-9的联合检测对评估心房颤动患者的病变程度及临床治疗具有一定的指导作用。