应用聚合酶链反应检测18种46株酵母样真菌的探讨

目的探讨快速检测酵母样真菌的方法。方法以源于重要医学真菌１８ＳｔＤＮＡ保守区的一对寡核苷酸序列为引物，利用聚合酶链反应对酵母样真菌ＤＮＡ进行扩增。民试１８种４６株酵母样真菌，经扩增一条６８５ｂｐ的ＤＮＡ片段，而对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌不扩增，以溴化乙啶染色，其对白色念 的最低检出限为１ｐｇ的ＤＮＡ。５０份临床标本的酵母样真菌培养阳性率为３２％；而经扩增阳性率为３８％。结论 该法具     

PCR检测病原性真菌及其临床应用

选用多数真菌共有的１８ＳrＤＮＡ基因保守区的一对寡核苷酸序列Ｂ４Ｆ和Ｂ４Ｒ为引物 ，用ＰＣＲ方法对病原性真菌的基因进行扩增。检测常见病原性真菌的５个菌属１５种真菌，其扩增产物经琼脂糖电泳均出现一条６８７bp的持异性条带。其ＤＮＡ检出最低限量为１０pg而毛霉菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌均无此条带，３９份临床标本中，培养法１８例阳性，基因扩增检出阳性２０例，实验结果表明该法应有于临床病原性真     

酵母样真菌酶反应模式的初步建立

利用尿素底物和１８种带有显色基因的合成底物，对４属１４种１５６株酶母样直菌进行酶活性测定，初步建立了酵母样菌酶反就模式。结果表明所试１４菌各有其特异的酶反应模式。酶法鉴定具有快速、准确、简便等优点、，是今后临床实验室常规酵母样真菌鉴定具有潜在发展前景的方法。     

酵母样真菌酶反应模式的初步建立

利用尿素底物和１８种带有显色基团的合成底物，对４属１４种１５６株酵母样真菌进行酶活性测定，初步建立了酵母样真菌酶反应模式。结果表明所试１４种菌各有其特异的酶反应模式。酶法鉴定具有快速、准确、简便等优点，是今后临床实验室常规酵母样真菌鉴定具有潜在发展前景的方法。我们建立的酶反应模式如做进一步充实和完善后，可以作为标准反应模式用于临床菌株的快速鉴定。     

聚合酶链反应检测霍乱弧菌

为快速、准确地检测霍乱弧菌，控制霍乱流行，研究建立了一种聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法。根据霍乱弧菌肠毒素ＣＴ基因序列，自行设计一对特异引物，扩增片断为２９６ｂｐ，同时采用一种高效率、快速、简便的方法提取并纯化ＤＮＡ，该法能成功地检测各种样品中的产ＣＴ肠毒素Ｏ１群霍乱弧菌。应用ＰＣＲ技术和常规分离培养方法对９０９份腹泻患者粪便标本和１８份环境水样标本进行平行检测。结果表明，两种方法的检测结果一致，粪便标本阳性率为４．２％（３８／９０９）；水样标本为２２．２％（４／１８），其中１份粪便标本和１份水样标本，是经过第２次增菌培养后，检出用性，而ＰＣＲ方法未见假阳性及假阴性结果。表明ＰＣＲ方法准确、快速、灵敏，并可在２、３小时内检测出含３个菌细胞的标本。因此，该方法可广泛应用于检测各种临床、环境标本中的产ＣＴ肠毒素Ｏ１群霍乱弧菌。     

两种酵母样真菌培养鉴定方法评价

目的 选择和评价实用性强、快速、准确酵母样真菌培养鉴定方法。为临床诊断和治疗真菌感染性疾病提供可靠的病原学依据。方法 将API酵母样真菌鉴定试条鉴定出的白色念珠菌（48株），热带念珠菌（15株），克柔氏念珠菌（19株）。光滑念珠菌（6株）转种科玛嘉酵母样真菌显色平板，经35℃，24—48小时培养，分析科玛嘉酵母样真菌显色平板鉴定结果正确率。结果 科玛嘉显色平板鉴定出白色念珠菌43株，热带念珠菌13株，克柔氏念珠菌8株，光滑念珠菌5株。科玛嘉显色平板法与酵母样真菌鉴定符合率为80％-90％．结论 科玛嘉显色平板法操作简单、快速。价格低廉，可作为酵母样真菌鉴定的初筛方法。     

一种快速提取新生隐球菌及其他酵母样真菌DNA方法

目的寻找一种快速提取酵母样真菌DNA的方法。方法使用酶溶解法提取新生隐球菌及其他酵母样真菌DNA,并对提取的DNA通过特异性引物进行PCR,所得产物进行酶切验证。结果用此方法提取的新生隐球菌基因组DNA浓度为280～395ng/μL,OD260/OD280比值为1.6～1.8,所提取的DNA可用于PCR的扩增检测特异性酵母样真菌。结论该方法可以用于提取新生隐球菌及其他酵母样真菌。     

聚合酶链反应检测幽门螺杆菌

本文应用与幽门螺杆菌染色体ＤＮＡ高保守区序列互补的引物对，建立聚合链反应检测技术，对２８种非ＨＰ菌及１６株ＨＰ进行检测，特异性１００％，敏感性达到能检出１ｐｇ染色体ＤＮＡ（相当于１００个菌细胞）水平，对３６例接受胃镜检查病人的胃活检组织进行检测，ＨＰ阳性率４７．２％（１７／３６），而对照方法中细菌培养ＨＰ阳性率３３．３％（１２／３６），快速尿素酶试验ＨＰ阳性４１．６％（１５／３６）。结果提示ＰＣＲ     

UF-100全自动尿沉渣分析仪检测酵母样真菌假阴性结果分析

目的 探讨影响UF-100全自动尿沉渣分析仪检测酵母样真菌假阴性的因素。方法 分析6966例经尿液整体化分析的住院患者尿液数据,以UF-100未提示酵母样真菌而镜检检出酵母样真菌孢子或菌丝作为UF-100检测酵母样真菌假阴性结果。进行综合分析,并将误认为红细胞的酵母组与血尿组的红细胞参数进行统计分析。结果 UF-100酵母样真菌检测假阴性率为1．23％,其中仪器软件固定的提示者占32．9％（27／82）,提示精于者占13．4％（11／82）,单纯其他颗粒大于500／μl者占9．8％（8／82）,直方图、散点图异常占28．0％（23／82）,干化学不匹配占14．6％（12／82）,其他占1．2％（1／82）。结论 全面应用UF-100的多参数指标（包括散点图、直方图）,有机结合干化学数据综合分析。可以避免UF-100对酵母样真菌漏检;被误认为红细胞的酵母组与红细胞组的平均前向散射光（MFSC）和荧光分布宽度-SD（FLDW-SD）有显著差别。而平均荧光强度（MFL）无差别。     

PCR技术在儿科结核病诊断中存在的问题

观察多聚酶链反应技术在结核病临床诊断上的应用以及存在的问题，方法：２２例结核病符合临床诊断标准，５０例对照组，应用ＰＣＲ技术，经凝胶电泳法检测结果。结果血样本ＴＢ－ＤＮＡ－ＰＣＲ的阳性率为结核组１８．１８％，对照组３６．００％，敏感度１８．１８％，特异性６４．００％，假阳性３６．００％，假阴性８１．８２％。     

MSCT直接淋巴管造影在弥漫性肺淋巴管瘤病中的诊断价值

目的 探讨MSCT淋巴管造影在弥漫性肺淋巴管瘤病(DPL)中的诊断价值.方法 收集经临床和病理证实的DPL患者18例,由2名医师分别对其淋巴管造影表现及其发生率进行分析.结果 18例DPL患者的胸部表现包括:对比剂反流18例(100％)、淋巴管扩张18例(100％)、纵隔软组织肥厚18例(100％)、中轴支气管血管束增厚18例(100％)、小叶间隔增厚15例(83.33％)、叶间裂增厚15例(83.33％)、双肺磨玻璃影14例(77.78％),以及胸腔积液17例(94.44％)、胸膜增厚9例(50.00％)、胸膜外软组织增厚11例(61.11％)、心包积液和心包增厚16例(88.89％)、纵隔淋巴结肿大8例(44.44％)、胸腔和纵隔心包积气4例(22.22％)、胸廓塌陷3例(16.67％);胸外异常表现包括:腹膜后对比剂反流和淋巴管扩张4例(22.22％)、腹腔积液1例(5.56％)、腹膜后和脾脏囊性淋巴管瘤各1例(5.56％)、颈部淋巴管扩张8例(44.44％)、胸导管出口梗阻8例(44.44％)、颈部多发淋巴结10例(62.50％)、腋窝多发淋巴结16例(88.89％)、下肢淋巴水肿1例(5.56％)、颜面部水肿1例(5.56％)和骨骼异常3例(16.67％).结论 MSCT直接淋巴管造影能通过显示对比剂的异常分布和堆积明确判断有无淋巴液反流和淋巴管扩张及增多,为诊断和治疗DPL提供重要依据.     

Na18F用于肿瘤骨转移病灶显像及其诊断效能

目的介绍骨转移瘤的Na18F PET/CT显像,并比较其与Na18F PET和99Tcm-亚甲基二膦酸盐(MDP)ECT显像对骨转移病灶的诊断效能。方法对临床15例多发性骨转移瘤患者,分别行Na18F PET/CT、Na18F PET和99Tcm-MDP ECT显像,将肉眼可见的骨骼热区记为转移、无法定性和非转移病灶,通过临床随访最终定性诊断为转移病灶、非转移病灶,比较3种检查方法探测骨转移灶的灵敏度、特异度和准确率。结果 Na18F PET/CT和Na18F PET均检出全部168处病灶,99Tcm-MDP ECT探测到全部病灶的64.88%(109/168)。当无法定性的病灶被计入转移病灶时,Na18F PET/CT、Na18F PET和99Tcm-MDP ECT的灵敏度、特异度分别为100%、100%;99.17%、72.92%;66.67%、39.58%。前两者与后者之间差异均有统计学意义(χ2=17.8、χ2=8.2、χ2=18.0、χ2=25.4,P均<0.05)。当无法定性的病灶被计入非转移病灶时,Na18F PET/CT、Na18F PET和99Tcm-MDP ECT的灵敏度、特异度分别为100%、93.75%;93.33%、79.17%;57.50%、81.25%。PET/CT、PET较ECT灵敏度差异均有统计学意义(χ2=26.1、χ2=22.5,P均<0.05),而特异度差异均无统计学意义(χ2=4.8、χ2=0.44,P均>0.05)。结论 Na18F PET/CT用于骨转移瘤显像具有高灵敏度、高特异度兼备的优势。     

侵袭性肺炎克雷伯菌肝脓肿综合征临床及影像学特点

目的 观察侵袭性肺炎克雷伯菌肝脓肿综合征（IKLAS）的临床及影像学特点。方法 回顾性分析18例IKLAS的临床及影像学表现。结果 临床表现为发热（18例）、寒战（11例），部分伴呼吸、消化、神经系统症状及视觉障碍；13例合并糖尿病；实验室感染指标增高，肝功能异常。肝脓肿位于肝右叶15例，肝左叶2例，同时累及肝左右叶1例；脓肿大小2.45~10.27 cm，平均（5.70±2.35）cm；3例为含气脓肿。双肺病灶分布以外周胸膜下为主，CT表现包括无空洞结节（18/18，100%）、空洞性结节（15/18，83.33%）、蜂窝脓肿（13/18，72.22%）、晕征（4/18，22.22%）、反晕征（3/18，16.67%）、实变影（3/18，16.67%）、外周楔形影（2/18，11.11%）、滋养血管征（2/18，11.11%）、磨玻璃影（1/18，5.56%）及双侧胸腔积液（15/18，83.33%）。2例合并颅内及眼部感染。结论 IKLAS影像学表现具有一定特征性，结合临床有助于诊断。     

Fatty acid modulation of HepG2 cell cholesterol biosynthesis and esterification.

We investigated the effects of medium supplementation with increasing amounts of different fatty acids on HepG2 cell cholesterol biosynthesis and esterification. Up to 200 microM 16:0 led to an increase in cholesterol secretion/synthesis of 60%/40%; 18:1, 18:2, or 18:3 decreased secretion/synthesis by 35%/25%, 65%/65%, and 60%/60%; 80 microM 20:5 caused a reduction of 75%/50%. Compared to 200 microM 16:0, 18:2 led to a 50% reduced cellular cholesterol ester biosynthesis; the effect of 30 microM 20:5 was comparable to that of 18:2 while the addition of 200 microM 18:1 raised esterification. Supplementation of 18:2 reduced the cellular cholesterol ester content by 50%; 16:0 led to an increase of 80%. The effects of saturated and unsaturated fatty acids seem to be related to their number of double bonds and could be due to changes in membrane phospholipid fatty acid composition.     

5-FU对人结肠癌HCT116细胞摄取18F-FDG的影响

目的 探讨结肠癌HCT-116细胞对18F-FDG摄取率的影响因素,从而利用18F-FDG细胞摄取率的变化早期评价化疗的疗效.方法 依据实验结果依次改变实验条件中细胞浓度、反应时间、18F-FDG放射性活度、葡萄糖的浓度,测定结肠癌HCT-116细胞的18F-FDG细胞摄取率.在加入不同浓度5-FU前后,分别采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)和细胞18F-FDG 摄取率测定细胞的增殖抑制率.结果 当细胞浓度1×106/瓶、加入18F-FDG放射性活度为3.7KBq,葡萄糖浓度为5.5mmol/ L,反应时间为100min,细胞摄取率为(43.93±3.54)%,加入终浓度10、20、30和50μg/mL 5-FU 100μL作用24h后,细胞摄取率分别为(32.47±5.43)%、(26.44±3.62)%、(22.26±3.63)%、(16.10±6.40)%;细胞摄取抑制率分别为 (25.81±5.64)%、(39.58±3.74)%、(49.31±5.16)%、(62.27±7.50)%,各组之间差异均有统计学意义,且随5-FU 剂量增加而下降,两者呈负相关(r=-0.879,P＜0.01).给药24h后MTT实验细胞生长抑制率与细胞摄取抑制率呈正相关 (r=0.831,P＜0.01).结论 5-FU作用24h后结肠癌HCT-116细胞18F-FDG摄取率下降,18F-FDG摄取抑制率升高,可以通过18F-FDG细胞摄取抑制率早期评价5-FU对结肠癌的杀伤作用.     

Agreement between actual and synthesized right-sided and posterior electrocardiographic leads in identifying ischemia

ObjectiveA 12-lead electrocardiogram (ECG) is the standard of care for chest pain patients. However, 12-lead ECGs have difficulty detecting ischemia of the right ventricle or posterior wall of the heart. New technology exists to mathematically synthesize these leads from a 12-lead ECG; however, this technology has not been evaluated in the emergency department (ED). We assessed the level of agreement between synthesized 18-lead ECGs and actual 18-lead ECGs in identifying ST elevations, ST depressions, and T wave inversions in ED patients.MethodsActual 12- and 18-lead ECGs were acquired and synthesized 18-lead ECGs were produced based on waveforms from 12-lead ECGs. A blinded cardiologist interpreted the actual and synthesized 18-lead ECGs to identify the presence of abnormalities. Using actual 18-lead ECGs as the reference, the sensitivity, specificity, positive predictive value (PPV), negative predictive value (NPV), and kappa of synthesized 18-lead ECGs in identifying abnormalities were determined.ResultsData from 295 patients were analyzed. There was 100% agreement between synthesized 18-lead ECGs and actual 18-lead ECGs in identifying ST elevations and ST depressions (sensitivity, specificity, PPV, and NPV of 100%, and kappa of 1.00). Synthesized 18-lead ECGs had 95% sensitivity, 80% specificity, 97% PPV, and 70% NPV in identifying T wave inversions, when compared with actual 18-lead ECGs (kappa: 0.70).ConclusionSynthesized 18-lead ECGs demonstrated 100% agreement with actual 18-lead ECGs in the identification of ST elevations and ST depressions and good agreement in the identification of T wave inversions in a sample of patients ED patients with complaints suspicious of cardiac origin.     

First trimester umbilical venous Doppler sonography in chromosomally normal and abnormal fetuses.

In 342 singleton pregnancies in which the patients were undergoing chorionic villus sampling at 11 to 14 weeks of gestation, color Doppler sonography was used to obtain waveforms from the umbilical cord. The prevalence of pulsatile flow in the umbilical vein was higher in the 18 fetuses with trisomy 18 or 13 (16 of 18; 88.9%) than in the 18 fetuses with trisomy 21 (6 of 18; 33.3%) or the 302 chromosomally normal fetuses (73 of 302; 24.2%).     

18h判读CHROMagar MRSA显色筛查培养基的研究

目的评估CHRO Magar耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)显色培养基在孵育18h时判读的敏感性和特异性等试验指标。方法选择2007年7月至2009年5月临床分离的176株MRSA阳性菌株和738株MRSA阴性菌株,分别孵育18h和24h判读后进行特异性和敏感性比较。结果 18h和24h判读结果的特异性分别为84.1%、90.0%;敏感性分别为92.1%、87.0%;阳性预测值分别为72.0%、67.0%;阴性预测值分别为96%、97%;阳性似然比分别为10.5、8.2;阴性似然比分别为0.17、0.11。与18h比较,在24h判读结果中有11株阳性菌株在孵育24h时变色(18h判读为阴性),20株阴性菌株在孵育18h时出现红色。假设MRSA的患病率分别为15%、25%、35%时孵育18h的判读阳性预测值分别为65%、78%、85%;孵育24h的判读阳性预测值分别为60%、74%、82%。结论数据证明CHROMagar MRSA用于MRSA的筛查在18h时就具有较高的特异性和敏感性;随着患病率的增高,18h和24h判读阳性预测值差距缩小;在实际工作中,18h判读可缩短样本报告周期,并且使临床医生在选择抗生素时更加快速、准确。     

MSCT后处理技术在诊断胰腺导管内乳头状黏液瘤中的应用

目的 探讨MSCT后处理技术在胰腺导管内乳头状黏液瘤(IPMN)中的诊断价值.方法 对18例经手术病理或超声内镜引导下细针穿刺证实的IPMN患者的临床、病理及MSCT检查资料进行回顾性分析,对MSCT双期增强扫描的原始数据均行MPR、MinIP及CPR,观察病变本身及其与胰管、周围结构的关系.结果 18例IPMN患者中,病变与扩张胰管相通18例(18/18,100%),胰管扩张 >1.0 cm 7例(7/18,38.89%),囊性病变17例(17/18,94.44%),囊实性病变1例(1/18,5.56%).主胰管型6例(6/18,33.33%)、分支胰管型9例(9/18,50.00%)、混合型3例(3/18,16.67%).MPR图像能清晰显示IPMN病变的大小、边界、有无强化的壁结节,也可较好显示病变与扩张胰管间的关系以及病变与周围结构之间的关系;MinIP图像在显示扩张胰管的全貌及病变与扩张胰管间关系等方面优于MPR图像及CPR图像;CPR图像有助于显示主胰管扩张的全貌.结论 利用MSCT多种后处理技术可整体显示病变、扩张胰管以及周围结构,在IPMN诊断方面具有重要价值.     

主动呼吸控制系统结合适形放射治疗非小细胞肺癌近期疗效观察

目的:探讨主动呼吸控制系统(ABC)结合适形放射治疗在非小细胞肺癌中应用的可行性。方法:对19例Ⅱ~Ⅳ期未能手术的非小细胞肺癌患者应用治疗计划系统设计适形放疗计划,并在模拟定位机下进行验证。放射治疗期间均使用ELEK-TA公司的ABC系统进行主动呼吸控制,选择屏气触发方式为吸气后屏气,触发阈值设定为呼吸曲线峰值的80%,每次最长屏气时间为25s。上叶病灶:计划靶区为临床靶区外放0.6cm;中下叶病灶:计划靶区为临床靶区外放1.0cm。采用3~5个野进行共面适形治疗。近期疗效按世界卫生组织(WHO)肿瘤治疗后客观效果评分;正常组织急性反应按美国国家癌症研究所(NCI)CTC3.0标准评价。结果:除1例患者因经济原因中断治疗,其他患者均顺利完成治疗。中位剂量64Gy(60~64Gy),总有效率为61.1%(11/18)。根据NCICTC3.0标准,急性放射性食管炎1级83.3%(15/18),2级16.7%(3/18);急性放射性肺损伤1级94.4%(17/18),2级5.6%(1/18);骨髓抑制1级61.1%(11/18);2级22.2%(4/18);3级16.7%(3/18);急性心脏损伤1级88.9%(16/18),2级11.1%(2/18)。结论:ABC的临床应用可行,可减少肺癌放射治疗过程中不良反应的发生率。