铜绿假单胞菌主动外排系统MexAB-OprM的研究进展

医院感染在感染性疾病中占有相当比例。院内感染的病原菌中,铜绿假单胞菌的感染高居榜首,且耐药状况十分严重。主动外排系统是细菌存在耐药性并发生获得性多重耐药的主要原因。M exAB-OprM型外排系统因具有广谱的外排活性成为铜绿假单胞菌最具临床意义的药物外排系统。本文对细菌主动外排系统的分类,PA M exAB-OprM外排系统的组成、结构、重要作用及表达调控予以综述,并对其治疗研究作出展望。     

铜绿假单胞菌耐药机制的研究进展

铜绿假单胞菌(PA)是医院内感染及获得性感染的最常见革兰阴性条件致病菌之一。广谱抗生素的大量应用致其耐药情况日趋严重,特别是多重耐药及泛耐药株的出现,成为临床上治疗最棘手的问题。PA的耐药机制极为复杂,主要包括外膜蛋白的缺失或突变;主动外排机制;产生β内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶;青霉素结合蛋白和DNA拓扑异构酶的改变;生物被膜的形成等。     

多重耐药铜绿假单胞菌相关耐药基因的研究

目的探讨临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶相关耐药基因及氨基糖苷类修饰酶基因。方法采用MicroScan40微生物全自动鉴定系统微量肉汤稀释法测定菌株的耐药性。采用聚合酶链反应(PCR)方法检测β-内酰胺酶基因型及氨基糖苷类修饰酶基因型。结果 32株铜绿假单胞菌除对哌拉西林/他唑巴坦和替卡西林/克拉维酸耐药率分别为75.9%和93.1%外,对其余抗菌药物耐药率均为100%。氨基糖苷类修饰酶基因检出30株(93.7%),aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6)-Ⅰ、aac(6)-Ⅱ、ant(3)-Ⅰ和ant(2)-Ⅰ基因阳性率分别为9.3%、90.6%、12.5%、90.6%、90.6%和0,检出β-内酰胺酶基因28株(87.5%),TEM、DHA、OXA和IMP基因阳性率分别为62.5%、43.7、21.8%和3.1%,未检出VIM、SHV和CTX-M-9,检出OprD2基因缺失23株(71.8%)。结论广州地区多重耐药铜绿假单胞菌携带多种氨基糖苷类修饰酶基因和β-内酰胺酶基因。     

多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的了解目前多重耐药铜绿假单胞菌（PA）的耐药现状,以指导临床用药。方法对540株临床分离的PA（痰中222株、纤支镜检查得到102株、脓性分泌物中84株、尿中60株、血中72株）进行耐药性测定。结果PA对丁胺卡那霉素、头孢吡肟、妥布霉素、左氧氟沙星、头孢他啶、庆大霉素、头孢哌酮的耐药率已达到64.8%～74.1%;对美罗培南、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星的耐药率为23.7%～52.4%。结论铜绿假单胞菌是目前临床感染的主要病原菌之一,且耐药现象较严重,应尽量根据细菌药敏...     

铜绿假单胞菌gshb基因突变对MexXY-OprM主动外排泵表达的影响

目的:研究铜绿假单胞菌谷胱甘肽合成酶基因(gshb)突变体对MexXY-OprM外排泵表达的影响.方法:运用同源重组技术构建铜绿假单胞菌的谷胱甘肽合成酶基因(gshb)突变体,将连有MexXY-OprM外排泵启动子的pMS402质粒电转化到此突变体中,通过pMS402质粒上的Lux报道子发光值大小检测MeXY-OprM外排泵的表达变化情况.结果:MexXY-OprM外排泵的表达在谷胱什肽合成酶突变体中显著降低.结论:铜绿假单胞菌中的谷胱甘肽对MexXY-OprM的表达具有促进作用,这将为进一步探讨MexXY-oprM的分子机制提供理论依据.     

一株携带多种耐药基因的铜绿假单胞菌研究

目的了解铜绿假单胞菌的多重耐药情况和有关机理。方法聚合酶链反应（PCR）法对多重耐药的铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶（AMEs）基因、耐消毒剂和磺胺基因（qacE△1—sul1）的检测。并对CARB基因进行了测序。结果PCR显示CARB、TEM型β-内酰胺酶基因，aac（6’）-Ⅰ、aac（6’）-Ⅱ、ant（2″）-Ⅰ、ant（3″）-Ⅰ AMEs基因、qacE△1-sul1耐消毒剂基因和耐磺胺基因扩增阳性，oprD2基因扩增检测呈缺失型。CARB基因扩增产物测序，经BLAST程序分析（WWW．ncbi．nlm．nih．gov）为CARB-3型。结论铜绿假单胞菌存在多重耐药基因，管壁涂有季胺类、双胍类消毒剂和磺胺的Ⅱ代导管的抑菌效果需重新评价。     

铜绿假单胞菌的耐药分析

目的 通过对2004～2007年笔者所在医院临床分离的铜绿假单胞菌对抗生素的耐药分析,为临床提供基本的选药依据.方法 对门诊和住院患者分离的110株铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法监测其对11种抗生素的耐药率.结果 11种抗生素的平均耐药率达到61 4%,占前二位的分别是头孢唑啉(95 5%)、氨苄青霉素(92 7%).结论 对铜绿假单胞菌,抗生素的耐药率差异明显,说明实验室对其正确检测,可帮助临床合理选药,减少耐药性的扩散.     

多重耐药铜绿假单胞菌产β内酰胺酶研究

目的 研究临床分离所得多重耐药铜绿假单胞菌产β内酰胺酶情况,以指导临床合理使用抗菌药物. 方法 用改良三相水解实验检测药敏试验筛选出的30株多重耐药铜绿假单胞菌产β内酰胺酶情况,然后对产酶菌株进行等电聚焦电泳,判断产酶情况. 结果 30株细菌均未检测到金属酶;26株细菌产β内酰胺酶,其中25株为持续高产AmpC酶,1株同时持续高产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs).多重耐药铜绿假单胞菌的产酶率为86.7%. 结论 多重耐药铜绿假单胞菌以持续高产AmpC酶为主;改良三相水解实验能消除外膜通透性降低,主动外排泵过度表达和产酶等因素干扰,从而准确、有效地检测出产ESBLs铜绿假单胞菌株.     

多重耐药铜绿假单胞菌产β内酰胺酶研究

目的研究临床分离所得多重耐药铜绿假单胞菌产β内酰胺酶情况,以指导临床合理使用抗菌药物。方法用改良三相水解实验检测药敏试验筛选出的30株多重耐药铜绿假单胞菌产β内酰胺酶情况,然后对产酶菌株进行等电聚焦电泳,判断产酶情况。结果30株细菌均未检测到金属酶;26株细菌产β内酰胺酶,其中25株为持续高产AmpC酶,1株同时持续高产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)。多重耐药铜绿假单胞菌的产酶率为86.7%。结论多重耐药铜绿假单胞菌以持续高产AmpC酶为主;改良三相水解实验能消除外膜通透性降低,主动外排泵过度表达和产酶等因素干扰,从而准确、有效地检测出产ESBLs铜绿假单胞菌株。     

多重耐药铜绿假单胞菌联合药敏分析

目的分析多重耐药铜绿假单胞菌(MDR-PA)在临床上的分布,探讨联合药敏在临床上治疗MDR-PA的作用。方法收集2015年1月至2017年12月南京市浦口医院细菌室分离保存的全部32株MDR-PA,采用微量倍比稀释法测定替卡西林/克拉维酸+氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦+环丙沙星、美罗培南+环丙沙星、依替米星+哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶+阿米卡星、多黏菌素E+环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦+左氧氟沙星、头孢吡肟+环丙沙星共8组联合药物,分别测量每组每种联用与单用药物对MDR-PA的最小抑菌浓度(MIC)值,并计算部分抑菌浓度(FIC)指数。结果 8组联用药物中,替卡西林/克拉维酸+氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦+环丙沙星、美罗培南+环丙沙星、依替米星+哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶+阿米卡星、多黏菌素E+环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦+左氧氟沙星这7组药物的MIC值较单用时下降明显。而头孢吡肟+环丙沙星组,头孢吡肟单用和与环丙沙星联用时,MIC值均为16μg/mL;环丙沙星单独使用时的MIC值为8μg/mL,与头孢吡肟联用时,MIC值仍为8μg/mL。替卡西林/克拉维酸+氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦+环丙沙星、美罗培南+环丙沙星、依替米星+哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶+阿米卡星、多黏菌素E+环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦+左氧氟沙星这7组药物的药物之间药效学表现为协同和相加作用的构成比依次为90. 6%(29/32)、93. 8%(30/32)、90. 6%(29/32)、93. 8%(30/32)、87. 5%(28/32)、93. 8%(30/32)、87. 5%(28/32),而头孢吡肟与环丙沙星联合药物中药效学表现主要是无关作用占71. 9%(23/32)。结论通过联合药敏试验,选择有效的药物联合,可以抑制或杀灭MDR-PA,是临床治疗MDR-PA感染的有效方案。     

铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性分析

目的　对某院分离的铜绿假单胞菌的耐药性及变化趋势进行研究 ,为临床用药提供依据。方法　对 14 6株铜绿假单胞菌选用 12种常用抗生素进行药敏实验 ,实验采用K B法按NCCLS标准进行。结果　亚胺培南、妥布霉素、阿米卡星、哌拉西林 /三唑巴坦、头孢他啶对铜绿假单胞菌抗菌活性较强 ( >70 %) ,铜绿假单胞菌最敏感的抗生素为亚胺培南 ( 86 3 %)。抗菌作用较差的抗生素为头孢噻肟 ( 6 8%)、头孢曲松 ( 11 0 %)。结论　某院铜绿假单胞菌的临床分离株和耐药率逐年上升 ,应根据药敏结果合理选用抗生素     

某院348株铜绿假单胞菌耐药性分析及多重耐药铜绿假单胞菌耐药基因检测

目的研究该院检出的348 株铜绿假单胞菌（PAE）耐药性及多重耐药PAE 耐药基因检测。方法将血液科检出348 例PAE 菌株进行体外耐药监测,并对其中36 株多重耐药PAE 菌株进行耐药相关基因OprD2、VIM、GIM、SPM、IMP-1、TEM、VEB、PER、aac（3）-Ⅲ、aac（6）’-Ib-Cr 、TEM检测。结果多重耐药PAE 对妥布霉素、哌拉西林/ 他唑巴坦、美罗培南比较敏感,对其他临床常用抗生素均有明显的耐药性,PCR 基因分析结果显示, OprD2 和IMP-1 基因阳性率分别为97.22%和94.44%, aac（3）-Ⅲ和aac（6）’-Ib-Cr 阳性率分别为38.89%和27.78%,TEM 阳性率为75.00%, qnrA、qnrS和qnrD阳性率为50.00%、61.11%和47.22%,其他基因低于15.00%。结论PAE 耐药性较强,多重耐药PAE 耐药基因主要为OprD2 和IMP-1 基因。     

391株铜绿假单胞菌感染的耐药性分析

目的分析铜绿假单胞菌院内感染分布的概况、特征及耐药性，指导临床合理使用抗菌药物。方法利用湖南天地人微生物分析系统对海南医学院附属医院2005年1月～2007年12月临床分离的391株铜绿假单胞菌耐药情况进行分析，统计391株铜绿假单胞菌感染其分布情况。结果391株铜绿假单胞菌对各种抗生素的耐药率为：氨苄西林／舒巴坦92．8％、美洛西林81．1％、氯霉素83．0％、复方新诺明76．O％、头孢曲松84．9％、头孢噻肟84．4％、哌拉西林，他唑巴坦54．2％、头孢哌酮66．2％、庆大霉素69．6％、妥布霉素66．8％、阿米卡星64．7％、左氟沙星40．4％、氨曲南59．3％、环丙沙星45．0％、头孢他啶54．0％、头孢吡肟50．4％、美洛培南23．3％。结论铜绿假单胞菌院内感染情况严重，以ICU病区、呼吸内科病区和神经外科病区最为严重，美洛培南可作为治疗的首选，其次为左氟沙星、环丙沙星、头孢吡肟、头孢他啶。因此，应加强对铜绿假单胞菌耐药性的监测，以降低其耐药性控制多重耐药菌株的出现和院内感染扩散。     

398株铜绿假单胞菌的分布及耐药性分析

目的：了解我院398株铜绿假单胞菌（PA）的分布及耐药性变迁,为临床合理用药提供依据。方法：收集2006年1月~2009年12月分离的铜绿假单胞菌的药敏结果,对铜绿假单胞菌排位、分布情况、耐药性的变迁进行分析。结果：2008~2009年的PA检出率（13.21%）明显高于2006~2007年（8.10%）,检出细菌的排位发生了变化;其中痰标本中分离的菌株最多。PA在ICU的分布率呈上升趋势。2008~2009年与2006~2007年相比,PA对头孢他啶、亚胺培南、左氧氟沙星的耐药率显著上升（P〈0.05）。结论：PA对部分β内酰胺类药物耐药率呈明显上升趋势,提示临床上合理应用抗菌药物极为重要,应完善耐药监控体系,延缓耐药性的产生。     

Contributions of efflux pumps to high level resistance of Pseudomonas aeruginosa to ciprofloxacin

Pseudomonas aeruginosa （P. aeruginosa） is one of the leading pathogens involved in nosocomial pneumonia. In addition, P. aeruginosa infection is associated with significant morbidity and mortality. A major problem in P. aeruginosa infection is that this organism exhibits natural and acquired resistance to many structurally and functionally diverse antibiotics.     

253株铜绿假单胞菌的临床分布及耐药情况分析

目的回顾性分析本院在1a内不同标本中，分离到的铜绿假单胞菌对抗生素的耐药情况，以利临床合理使用抗菌药物。方法采用纸片扩散法，对分离到的253株铜绿假单胞菌进行药物敏感试验。结果本院2009年1月1日至2009年12月31日分离到的铜绿假单胞菌构成居第一位，并且对多种抗菌药物严重耐药。结论铜绿假单胞菌的耐药性问题日趋严重，应引起临床医生的高度重视。     

铜绿假单胞菌耐药性的临床调查

目的：了解2002年1月至2004年12月间中国医科大学附属第一医院铜绿假单胞菌耐药性的变化趋势，为临床治疗提供可靠依据。方法：采用生物梅里埃公司的API系统及VITEK2系统进行细菌鉴定，用K—B法及V1TEK2进行药敏试验，用WHONET5．3软件分析细菌的耐药性。结果：3年间铜绿假单胞菌对11种常用抗菌药物的耐药率存在普遍增高的趋势，对其中8种抗菌药物的耐药率变化显著（P〈0．05），且ICU病房的耐药率明显高于其他病区（P〈0．01）。结论：及时准确的细菌鉴定及药敏试验，能尽早发现铜绿假单胞菌的院内感染情况，为临床治疗提供重要的实验室依据。     

铜绿假单胞菌中质粒介导喹诺酮类耐药基因的研究

目的了解广州地区质粒介导喹诺酮类耐药（PMQR）基因在铜绿假单胞菌中的流行状况并分析其与耐药之间的关系。方法收集2005-2007年临床分离到的212株铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,通过PCR检测质粒介导喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、qnrC、qnrD、aac（6’）-Ib-cr和qepA,并对阳性扩增产物进行DNA测序分析。结果 212株铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为10.8%（23/212）和19.3%（41/212）。qnrB、qnrS和aac（6’）-Ib-cr的阳性率分别为0.9%（2/212）、0.5%（1/212）和0.9%（2/212）,qnrA、qnrC、qnrD、qepA未检出。4株PMQR基因阳性菌株中,仅1株对左氧氟沙星表现为耐药,其余对环丙沙星和左氧氟沙星均表现为敏感。结论 2005-2007年间广州地区铜绿假单胞菌耐药现象严重,该地区铜绿假单胞菌中已携带有PMQR基因,且敏感菌株中也有该类基因存在。     

铜绿假单胞菌的分离情况及耐药性分析

目的了解铜绿假单胞菌感染现状、分布特征及其耐药性,指导临床合理用药。方法回顾性分析北京儿童医院2007年1月至2009年12月临床分离出的1 195株铜绿假单胞菌的标本来源、感染科室分布及耐药情况。结果 1 195株铜绿假单胞菌中79.4%来自痰及咽拭子,9.5%来自尿液,3.6%来自血液;病区分布中呼吸内科占46.7%,重症监护病房占20.8%,外科占7.9%。3 a间铜绿假单胞菌对环丙沙星、庆大霉素、哌拉西林和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率变化差别有统计学意义(P<0.05)。铜绿假单胞菌对亚胺培南和头孢他啶的耐药率呈逐年上升趋势,铜绿假单胞菌对美洛培南及替卡西林/克拉维酸的耐药率呈逐年下降趋势,但差别均无统计学意义(P>0.05)。结论临床分离的铜绿假单胞菌多来自于痰及咽拭子标本和呼吸内科。及时准确地细菌鉴定和药物敏感试验能尽早发现铜绿假单胞菌的院内感染情况,为临床治疗提供重要的实验室依据。     

铜绿假单胞菌临床分离株感染分布与耐药性分析

目的探讨铜绿假单胞菌临床分离株的感染分布情况及其耐药性与耐药趋势,方法对2005年7月～2007年7月本院各科室送检合格临床标本进行常规细菌分离培养与鉴定、进行药物敏感性测试,统计分析其院内感染的分布及耐药性。结果共检出204株铜绿假单胞菌。感染部位依次为呼吸道、伤口等在感染患者中,以老年患者为主,主要分布在ICU病房,3年间铜绿假单胞菌对18种常用抗生素耐药率存在普遍增高的趋势。18种抗菌药物中耐药率最高的是头孢呋辛、头孢噻肟钠和四环素,高达90％以上;敏感性最强的是亚胺培南和环丙沙星,敏感率为92．65％和87．25％。结论：本院铜绿假单胞菌分布以呼吸道和伤口感染为主,患者多为老年人。铜绿假单胞菌与院内感染密切相关,且耐药性严重。表现为多重耐药。加强耐药性监测,合理选用抗生素,以减少耐药菌株的出现与传播至关重要。