γ干扰素增强阿霉素对HeLa细胞的杀伤作用

肿瘤的化疗是肿瘤治疗中的重要手段之一 ,如何减少化疗药物的用量 ,增加疗效 ,减少副反应是人们所期望的。本研究旨在探讨γ干扰素对化疗药物杀伤肿瘤细胞株时的影响。1　材料和方法1 1　材料　人宫颈癌ＨｅＬａ细胞株购自浙江省医学科学院。引入实验室后以ＲＰＭＩ 16 40 (ＧＩＢＣＯ产品 )培养基 ,37℃、5 %ＣＯ2 湿化孵箱中传代培养。重组γ干扰素 (ＩＦＮ γ) ,上海克隆生物高技术公司产品 ,每支含 10 0万ＩＵ ,批号 :96 0 92 1。阿霉素 (ＡＤＭ ) ,浙江海门制药厂产品 ,批号980 5 17。1 2　实验分组　采用嵌套设计 ,即组内分组设计。将…     

5-氟脲嘧啶及丝裂霉素对人胃癌细胞株SGc-7901 及BGc-823的相互作用

目的 :体外观察 5-氟脲嘧啶 ( 5-ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ,5-Ｆｕ)及丝裂霉素 (ｍｉｔｏｍｙｃｉｎＣ ,ＭＭＣ)合用对人胃癌细胞株 (ＳＧｃ - 790 1及ＢＧｃ - 82 3)的相互作用。方法 :采用ＭＴＴ法利用中效原理判定两药合用的效果。结果 :两种药单独应用时随着药物剂量增加 ,其效应 (抑制率ｆａ)也增加 ;5-Ｆｕ用在细胞株ＳＧｃ - 790 1时其中效浓度Ｄｍ( μｍｏｌ/Ｌ)为 1 96 32 ,而ＭＭｃ的Ｄｍ为 0 776,两药合用时的Ｄｍ为 1 0 3 36;而 5-Ｆｕ用在细胞株ＢＧｃ - 82 3时其中效浓度Ｄｍ为 1 64 48,ＭＭｃ的Ｄｍ为 0 886,两药合用时的…     

乳腺癌多药耐药机制研究进展

乳腺癌癌细胞表现多药耐药性 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ,ＭＤＲ)往往是导致临床化疗失败的主要原因之一。ＭＤＲ有两种不同的表型 ,一种是对第一次化疗就产生耐药 ,称天然性耐药 (ｎａｔｕｒａｌｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ)或称内源性耐药 (ｉｎｔｒｉｎｓｉｃｒｅｓｉｓ ｔａｎｃｅ) ;另一种是在化疗过程中产生耐药 ,故称获得性耐药(ａｑｕｉｒｅｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ)。ＭＤＲ的特点是一旦对某种化疗药物产生耐药 ,对其他结构上无关、作用靶点和机制不同的抗癌药物产生交叉耐药。目前研究认为 ,肿瘤产生ＭＤＲ的分子机制主要…     

1,25-二羟维生素D3及其类似物对MCP-1与树突状细胞间相互作用的影响

1 ,2 5 二羟维生素Ｄ3 (骨化三醇 ) ,具有免疫调节功能并能通过促进细胞分化、抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡 ,从而对血液系统或其他组织来源的多种肿瘤细胞系发挥很强的抑制效应。已发现肿瘤组织内或组织旁浸润的树突状细胞(ＤＣ) ,数量越多预后越好。单核细胞分泌的单核细胞趋化蛋白 1(ＭＣＰ 1)是单核细胞的趋化和激活因子 ,具有抗肿瘤效应。为阐明骨化三醇、ＤＣ和ＭＣＰ 1三者之间相互作用的关系 ,我们研究了单核细胞衍生的树突状细胞 (ｍｏｎｏｃｙｔｅｄｅｒｉｖｅｄｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓ,ＭｏＤＣ)表达和产生ＭＣＰ 1的能力…     

ACM联合化疗治疗恶性滋养细胞瘤好

ＡＣＭ联合化疗治疗恶性滋养细胞瘤好浙江医科大学附属妇产科医院在应用ＡＣＭ──放线菌素Ｄ（ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ—Ｄ）、环磷酰胺（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）及甲氨蝶呤（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）──联合化疗治疗恶性滋养细胞肿瘤的基础上，进行了“...     

病毒导向酶联药物前体5—FC疗法对 前列腺癌的抑制作用研究

前列腺癌是男性常见肿瘤之一 ,在我国的发病率及死亡率也有逐年增加及年轻化的趋势 ,一旦诊断明确已失去手术治疗机会。传统的化疗易使肿瘤细胞产生药物毒性作用及耐受性 ,而ＣＤ(ｃｙｔｏｓｉｎｅｄｅａｍｉ ｎａｓｅ) /5ＦＣ自杀基因疗法恰可弥补上述不足。ＣＤ基因存在于细菌中 ,其编码产物ＣＤ可催化无毒性的5—氟胞嘧啶 ( 5ＦＣ)脱氢变为有毒性的 5—氟尿嘧啶 ,可在实体瘤或全身使用 ,降低化疗的毒性作用 ,提高敏感性。目的和方法 :采用腺病毒作为载体 ,将ＣＤ基因导入后 ,观察其对前列腺癌细胞系的敏感性、感染率、旁观者效应、在体内…     

Bcl-2基因转染人白血病细胞系(K562)的生物学特性的观察

目的 :我们在慢性粒细胞白血病 (ＣＭＬ)急变研究中发现ＣＭＬ急变细胞ｂｃｌ- 2基因表达明显高于慢性期 ,甚至高于其他急性粒细胞白血病 (中华血液学杂志 ,1 999,2 0 :2 7) ;而ＣＭＬ急变时化疗反应甚差 ,是目前白血病治疗难题之一。为了进一步阐明Ｂｃｌ- 2基因在ＣＭＬ急变中的作用 ,我们将ｂｃｌ- 2基因转染人ＣＭＬ细胞系———Ｋ562 ,建立了一株ｂｃｌ- 2基因高表达的细胞株———Ｋ562 /ｂｃｌ- 2 ,并对它的生物学特性 ,特别对抗肿瘤药物的反应进行了研究。方法 :Ｂｃｌ- 2ｃＤＮＡ逆转录病毒载体质粒由中国医学科学院肿瘤研究所吴教…     

NM23基因与乳腺癌转移关系的研究进展

ＮＭ2 3(ｎｏｎ -ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ 2 3ｒｄ)基因是美国国立癌症研究所的Ｓｔｅｅｇ等于 1988年在转移潜力不同的Ｋ- 1735鼠黑色素细胞株中用消减杂交法分离出来的一种与恶性肿瘤转移有关的基因 ,ＮＭ2 3在高转移细胞中低表达 ,而在低转移或不转移的癌细胞中高表达 ,表明ＮＭ2 3可能与肿瘤的转移抑制有关。目前发现ＮＭ2 3基因家族包含 8个成员 :ＮＭ2 3-Ｈ1,ＮＭ2 3-Ｈ2 ,ＤＲ -ＮＭ2 3,ＮＭ2 3-Ｈ4 ,ＮＭ2 3-Ｈ5 ,ＮＭ2 3-Ｈ6,ＮＭ2 3-Ｈ7,ＮＭ2 3-Ｈ8[1] 。这是个保守的基因家族 ,在细菌、酵母、植物、果蝇、鼠及人中 ,有很大的同源…     

黄芪对贫血小鼠骨髓基质细胞分泌TNF-α的影响

骨髓基质细胞可分泌细胞因子包括肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)调控造血。中医补气要药黄芪能够增强和调节免疫系统 ,为探讨黄芪补气补血的生物学机理 ,本文观察了黄芪对贫血小鼠骨髓基质细胞分泌ＴＮＦ的影响。1　材料方法1 1　实验动物 :8～ 12周龄ＢＡＬＢ ｃ雄性小鼠 ,体重 18～ 2 0ｇ,成都中医药大学实验动物中心提供。1 2　药品与材料 :黄芪注射液 (Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓｉｎｊｅｃ ｔｉｏｎ ,ＡＭＩ) :(成都地奥九泓制药厂 ) ,1ｍＬ相当于原生药黄芪2ｇ;ｒｈＴＮＦ :(美国基因公司 ) ;放线菌素Ｄ(ＡＭＤ)、四甲基偶…     

bcl-2在鸡马立克氏病肿瘤中的表达

目的 :从ｍＲＮＡ水平测定ｂｃｌ- 2在鸡马立克氏病ＭＤ肿瘤中的表达 ,阐明ｂｃｌ- 2与ＭＤ淋巴瘤形成的关系。方法 :用来克亨ＳＰＦ鸡复制ＭＤ肿瘤模型 ,取肿瘤和相应正常组织 ,液氮保存 ,用ＡＧＰＣ(ＡｃｉｄＧｕａｎｉｄｉｎｉｕｎＴｈｉｏｃｙａｎａｔｅ -Ｐｈｅｎｏｌ-Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ,一步法 )法提取组织总ＲＮＡ(ＴＲＮＡ) ,紫外测定其浓度 ,甲醛变性胶电泳观测其纯度。一个含鸡ｂｃｌ- 2 1 .2ｋｂ片段的质粒 (ｐＴＴＣＢ1 ) ,经转化扩增 ,提取质粒ＤＮＡ ,并用限制性内切酶 (ＲＥ)消化 ,回收纯化ｂｃｌ- 2片段 ,放射性 [α - …     

多药耐药性研究进展

多药耐药性（ＭＤＲ）是肿瘤细胞抵抗化疗药物导致肿瘤化疗失败的主要原因。本文探讨ＭＤＲ基因与癌基因的关系，某些药物对ＭＤＲ的逆转及转基因小鼠在ＭＤＲ研究中的新进展．     

EB病毒LMP1促鼻咽癌细胞生长与CD23、bcl-2表达和凋亡的关系

目的 :探讨ＥＢ病毒ＬＭＰ1表达的促鼻咽癌细胞生长作用与ＣＤ2 3、ｂｃｌ- 2表达和细胞凋亡的关系。方法 :用免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＬＭＰ1、ＣＤ2 3和ｂｃｌ- 2蛋白的表达 ;用ＭＴＴ法测定鼻咽癌细胞的生长能力 ;用ＤＮＡ电泳法、流式细胞仪测定法和末端脱氧核苷酸转移酶介导核苷酸缺口标志 (ＴＵＮＥＬ)法检测癌细胞凋亡 ;用ＭＴＴ法观察ＣＤ2 3单克隆抗体对鼻咽癌细胞生长能力的影响。结果 :用含ＬＭＰ1基因质粒转染并表达ＬＭＰ1的鼻咽癌细胞 (Ｌ -ＣＮＥ1 )在 1 5%血清和无血清培养液培养下的生长能力均明显增强 ,并表达ＣＤ2 3蛋白 …     

反义寡核苷酸对HL60细胞c-myc基因表达的抑制和 分化诱导作用及凋亡作用的研究

目的和方法 :原癌基因ｃ-ｍｙｃ广泛存在于各型白血病细胞 ,在人早幼粒白血病细胞系ＨＬ60细胞中表达最高。其表达水平随细胞的增殖而增加 ,随细胞的分化成熟而下降。ＨＬ60细胞在不同的诱导剂作用下可向不同的方向分化 ,如 :ＤＭＳＯ、ＲＡ等可诱导其向粒细胞方向分化 ;ＴＰＡ、1 ,2 5- (ＯＨ) 2 ＶｉｔａｍｉｎＤ3、ＤＣＡ等可诱导其向单核 /巨噬细胞方向分化。本工作在本室以前工作的基础上进一步采用针对ｃ -ｍｙｃｅｘｏｎｌ的 1 62～ 1 79核苷酸序列 ,与ｃ -ｍｙｃｍＲＮＡ的 5’端转录调控区互补的 1 8ｂｐ硫修饰反义寡核苷酸 5’ｄ(…     

榄香烯复合瘤苗对小鼠腹腔巨噬细胞功能影响的分析

目的 :本室已证明榄香烯复合瘤苗对多种小鼠肿瘤 (如Ｌ61 5白血病、Ｈ2 2 肝癌等 )有明显的主动免疫保护作用。巨噬细胞在抗肿瘤免疫中不仅作为抗原递呈细胞 ,而且也是参与肿瘤杀伤的效应细胞。本实验检测了榄香烯复合瘤苗对小鼠腹腔巨噬细胞 (ＰＥＭΦ)的吞噬、杀瘤及一氧化氮 (ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ ,ＮＯ)产生等功能的影响 ,以期从这一方面研究瘤苗免疫的机制。方法 :ＭＴＴ法检测不同浓度的榄香烯及榄香烯复合瘤苗体外刺激正常小鼠ＰＥＭΦ的活性变化 ;通过ＰＥＭΦ的吞噬功能 (血红蛋白释放法 )、对肿瘤靶细胞(ＨＣａ-Ｆ、Ｌ92 9)的…     

钙调素拮抗剂对HeLa细胞S期进程的影响

目的　探讨钙调素拮抗剂三氟拉嗪（ＴＦＰ）对ＨｅＬａ细胞Ｓ期进程的影响及其分子机理。　方法　通过ＴｄＲ双阻断法获得同步化的Ｓ期ＨｅＬａ细胞,以３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和Ｗｅｓｔｅｒｎ 技术分别观察了ＴＦＰ对ＨｅＬａ 细胞Ｓ期进程和胸苷激酶（ｔｈｙｍ ｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ,ＴＫ）活性及细胞周期引擎分子ＣｙｃｌｉｎＡ、Ｃｄｋ２ 和细胞周期调节蛋白ｐ８０ｃｄｃ２５Ｂ、ＰＣＮＡ、ｐ２１ 蛋白表达水平的影响。　结果　ＴＦＰ（２０μｍ ｏｌ／Ｌ）能使３ Ｈ－ＴｄＲ的掺入峰值后移,并抑制了Ｃｙ－ｃｌｉｎＡ、ＰＣＮＡ、ｐ８０ｃｄｃ２５Ｂ的表达和提高了ｐ２１ 蛋白的水平,但对Ｃｄｋ２的表达几乎无影响。　结论　ＣａＭ 除了能通过影响ＰＣＮＡ的水平直接作用于ＤＮＡ 合成,同时又可通过作用于ＣｙｃｌｉｎＡ、ｐ８０ｃｄｃ２５Ｂ、ｐ２１ 等周期引擎分子和调控因子水平正调ＨｅＬａ 细胞Ｓ期进程。     

感康源的体外抗病毒实验研究

目的 :感康源冲剂为验方中药制剂 ,主要由柴胡、双花、连翘、桔梗、元参、板兰根、荆芥等组成 ,治疗上呼吸道感染疗效显著。本实验观察了该药对Ⅰ型人类疱疹病毒 (ＨＳＶ - 1 )、腺病毒 (ＡＤ3)和流感病毒ＦＭ1株致Ｈｅｌａ- 2细胞病变的药效研究。方法 :实验前确定感康源实验浓度为 :5、1 0、2 5、50 μｇ/ｍＬ ;各病毒的ＴＣＩＤ50 分别为ＨＳＶ - 1 1 0 - 6/ｍＬ ,ＡＤ31 0 - 6,ＦＭ1 1 0 - 2 /ｍＬ。然后将Ｈｅｌａ - 2细胞以每孔 1× 1 0 5/ｍＬ接种于2 4孔板 ,6孔 /组。实验分组 :( 1 )对照组加入正常的细胞维持液 ;( 2 )纯病毒对照组…     

肺内一氧化氮含量的变化与肺纤维化的关系

目的和方法 :为探讨一氧化氮 (ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ ,ＮＯ)在肺纤维化形成中的作用 ,本实验动态观察了气管内注入平阳霉素 (ｂｌｅｏｍｙｃｉｎＡ5,ＢＬＭＡ5) 5ｍｇ/ｋｇ后 7ｄ至 30ｄ ,大鼠出、入肺血ＮＯ代谢终产物ＮＯ-2 /ＮＯ-3 含量、肺间质诱导型一氧化氮合酶 (ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ,ｉＮＯＳ)蛋白表达的变化及其与肺组织羟脯氨酸含量变化间的关系。ＳＤ大鼠 2 4只 ,分为注ＢＬＭＡ5 后 7ｄ、1 4ｄ、30ｄ组 (简称 :ＢＬＭＡ57ｄ、ＢＬＭＡ51 4ｄ、ＢＬＭＡ530ｄ组 )和假手术组 (ｓｈａｍ) ,…     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离和体外培养

骨髓中的间充质干细胞 (ＭＳＣｓ ,ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ)是一种具有多向分化潜能的细胞 ,它的分化程度低 ,在特定的条件下 ,能诱导分化形成多种非造血组织细胞 (如 :成骨细胞、软骨细胞、肌细胞等 )。本实验对成体大鼠骨髓间充质干细胞进行了分离、培养和初步的组织化学检测 ,并对其生长方式进行了观察。1　材料与方法1.1　材料　实验动物为成年ＳＤ大鼠 ,由广西医科大学实验动物中心提供 ,饲养观察一周后使用。主要试剂为ＤＭＥＭ培养液 ,胎牛血清 ,胰蛋白酶和Ｐｅｒｃｏｌｌ分离液。1.2　方法1.2 .1　骨髓中间充质干…     

转化生长因子-β族信号转导与肿瘤

转化生长因子 β(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ,ＴＧＦ- β)族细胞因子包括ＴＧＦ - β类、骨成形蛋白 (ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ＢＭＰ)类、活素 (ａｃｔｉｖｉｎ)类、抑素(ｉｎｈｉｂｉｎ)类、苗勒氏抑制物 (ｍｕｌｌｅｒｉａｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｓｕｂ ｓｔａｎｃｅ)及结节物 (ｎｏｄａｌ) ,胶质细胞源性促神经因子(ｇｌｉａｌ-ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｉｃｆａｃｔｏｒ) ,Ｄｐｐ(果蝇Ｄｅｃａｐｅｎｔａ ｐｌｅｇｉｃ基因产物 ) ,Ｖｇｌ(蛙卵ｖｇｌＲＮＡ产物 )等 2 5多…     

T细胞活化的CD28依赖性受cb1-b的调节

目的 :探讨ｃｂ1 ｂ对Ｔ 细胞活化的调节作用。方法 :将新霉素耐受基因插入到ｃｂ1 ｂ基因的第三个外显子中 ,构建ｃｂ1 ｂ基因缺陷小鼠 (ｃｂ1 ｂ- - 小鼠 ) ,分别经Ｔ细胞抗原受体 (ＴＣＲ)、ＣＤ4、ＣＤ3ε、ＣＤ2 8单克隆抗体单独或协同刺激后 ,观察突变小鼠中枢及外周淋巴组织中正常Ｔ、Ｂ淋巴细胞 ,自然杀伤 (ＮＫ)细胞及髓系细胞功能性信号转导通路的变化。将突变小鼠分别与雄性基因ＴＣＲ转基因小鼠、鸽细胞色素ＴＣＲ转基因小鼠杂交 ,检验胸腺Ｔ细胞的发加入抗ＣＤ3ε及外源性ＩＬ 2 ,使用氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法检测Ｔ细胞增殖…