骨质疏松模型骨组织中IL-6,IL-1β,TNF-α的表达特征

目的:通过测定切除卵巢骨质疏松模型小鼠骨组织中白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)相关细胞因子的表达特征,探讨其在骨质疏松发病过程中的生物学意义.方法:选用4月龄雌性BALB/C小鼠随机分假手术对照组和去卵巢骨质疏松模型组,术后第12周用ABC免疫组织化学方法测定骨组织中IL-6,IL-1β,TNF-α的蛋白含量并进行细胞定位.结果:免疫组织化学染色结果显示,3种蛋白在模型组和对照组均有阳性表达,主要位于骨小梁周边成骨细胞、破骨细胞及骨髓细胞胞浆中,模型组蛋白含量明显高于对照组且与骨密度呈负相关(P＜0.01或P＜0.05).结论:小鼠骨质疏松模型骨组织相关破骨细胞分化因子IL-6,IL-1β,TNF-α表达增高,导致破骨活动增强,骨吸收大于骨形成,最终导致骨质疏松.     

雌激素对去势大鼠牙槽骨改建过程中IL-6表达的影响

目的 研究去势大鼠颌骨骨质疏松的病变特征及雌激素应用对绝经后骨质疏松牙槽骨中自细胞介素(IL)-6的分布及表达的影响,探讨雌激素对绝经后骨质疏松拔牙创牙槽骨改建影响的机制.方法 65只3月龄雌性SD大鼠随机分为2组:骨质疏松模型组(n=40)及假手术组(n=25).骨质疏松模型由切除卵巢法建立.2组中随机选取5只大鼠于术后8周处死.模型建立后,拔除所有实验大鼠的左上颌磨牙.骨质疏松模型组大鼠再进一步随机分为雌激素治疗组(皮下注射苯甲酸雌二醇)及未用雌激素治疗组,每组各15只,并随机选取假手术组大鼠15只作为对照.观察并分析上述3组大鼠颌骨骨质疏松的变化及IL-6的表达情况.骨质疏松情况用病理彩色图像仪分析组织形态学参数,IL-6表达采用免疫组化法.结果 卵巢切除后,模型组大鼠的骨小梁薄而少,骨小梁间距变宽,颌骨骨强度下降;应用雌激素治疗后,雌激素治疗组IL-6的阳性表达较未用雌激素治疗组减少.结论 3月龄SD雌性大鼠去卵巢8周后可发生骨质疏松;雌激素治疗对骨质疏松大鼠拔牙创骨愈合、牙槽骨中IL-6的表达有明显的抑制作用,从而有利于骨质疏松牙槽骨的改建.     

去卵巢大鼠血清骨钙素与细胞因子的测定

目的:通过测定去势大鼠血清中的白细胞介素1β(interleubin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNFα),探讨细胞因子在绝经后骨质疏松发病中的意义.方法:3月龄雌性SD大鼠随机分为3组,假手术组、手术未用药组和手术用药组,后2组摘除双侧卵巢,用药组每周3次腹腔注射阿仑膦酸钠(alendronate,ALN).12周后处死,单光子骨矿测定仪测下颌骨和股骨骨密度,以放射免疫测血清中IL-1β和TNFα的浓度.结果:手术未用药组下颌骨骨密度明显低于假手术组(P<0.01),手术用药组下颌骨密度明显低于假手术组(P<0.05).手术未用药组股骨密度明显低于假手术组(P<0.05),应用ALN后股骨密度明显高于未用药组(P<0.01).手术未用药组血清骨钙素水平明显高于假手术组(P<0.01),也明显高于手术用药组(P<0.05);用药组骨钙素水平高于假手术组,但差异无显著性.血清中IL-1β和TNFα的浓度3组之间差异均无显著性,但手术未用药组两种因子血清含量均高于假手术组和用药组;用药组血清中IL-1β和TNFα水平与假手术组接近.结论:雌激素缺乏,IL-1β和TNFα水平升高,骨吸收活性增加,骨转换率加速,导致骨质疏松.     

甲状旁腺激素对大鼠血清中转化生长因子-β1的影响

目的研究去势及甲状旁腺激素间歇注射对大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法3月龄雌性SD大鼠行卵巢切除术(OVX)或假手术(Sham),手术组于2周后分别皮下注射甲状腺激素1-34片段(PTH134)或溶剂,10天后处死;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中TGF-β1含量.结果雌性大鼠卵巢切除2周后血清中TGF-β1含量明显升高(P＜0.05),甲状旁腺激素注射组与去势对照组无明显差异.结论甲状旁腺激素短期注射并不影响血清中TGF-β1含量.     

凉血活血方对大鼠肺组织TNF-α及TGF-β表达的影响

目的通过观察不同剂量凉血活血方对大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响,评价其对放射性肺损伤的防治效果。方法 72只Wistar种雌性大鼠随机分为模型组(A组)、凉血活血方小剂量组(B组照,射9(g3/0k gG.yd)/1、0凉次血/5活周血),方分中别剂于量第组5(、1C2组、2,61周8 g末/k分g.批d)处和死凉大血鼠活,血取方受大照剂射量肺组组(织D行组免,3疫6 g组/k化g.染d)色,对,观大察鼠大右鼠肺肺进组行织剂不量同分时割相TNF-α和TGF-β的表达。结果模型组大鼠肺组织TNF-α在第5周时达到高峰,而TGF-β在第12周和第26周时表达最强;中药各剂量组在第5周时明显抑制了TNF-α表达高峰,大、中剂量组效果更为明显;中药组TGF-β在各时相的表达明显低于模型组(P<0.01);中药大、中剂量组之间对TNF-α、TGF-β表达的影响无差别(P>0.05)。结论不同剂量凉血活血方在早期可明显抑制致炎因子TNF-α的表达,而在后期对致纤维化因子TGF-β表达的抑制更明显,中药大、中剂量组的抑制效果明显好于小剂量组和模型组。     

转化生长因子β1与雌激素在骨质疏松大鼠中的表达

目的:建立并完善骨质疏松症 (OP)动物模型,观察SD大鼠OP模型血清学中雌激素(E2)和关节骨组织中转化生长因子β1 (TGF-β1)的表达,并观察它们之间的关系.方法:20只4个月龄雌性SD大鼠,随机分为空白组、OP模型组(采用摘除双侧卵巢法),每组10只.2个月后处死各组大鼠,取右股骨近端利用双能X线骨扫描仪进行骨密度检测,取左股骨髁关节骨组织行光镜组织形态学观察,酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠血清中E2的含量,免疫组化即用二步法观察各组大鼠左股骨髁关节骨组织中TGF-β1的分布,采用图像分析仪比较TGF-β1在骨微量环境中积分光密度值(IOD值),将结果进行统计学分析.结果: OP模型组SD大鼠膝关节软骨退变程度较对照组明显加重,骨小梁局部区域变细,排列较紊乱,出现较多的断裂点.股骨近端骨密度较对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).OP模型组血清中E2的含量较对照组明显降低,骨组织中TGF-β1的表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05～0.01).结论:TGF-β1和E2在绝经后骨质疏松症中起重要调节作用.     

藏药护骨丸抗骨质疏松的效果

目的:探讨藏药护骨丸抗老年雌性大鼠骨质疏松的效果.方法:50只雌性22月龄老年大鼠,分为药物大、中、小剂量组、雌激素组及老年模型组,连续给药50天;另6月龄大鼠12只作为青年对照组.观察实验大鼠骨钙含量、骨密度、骨生物力学改变.结果:22月龄雌性大鼠可作为骨质疏松的实验模型;与老年对照组比,大剂量组可显著提高骨钙含量39.5%,(113.28±22.74)mg/mL比(81.16±16.88)mg/mL,P<0.05;显著提高股骨骨密度7.8%,(0.06900±0.007)比(0.06430±0.007),P<0.05;显著改善股骨骨变形能力9.6%,(147.34±37.02)比(134.41±23.09),P<0.05;中、小剂量组股骨骨密度虽有不同程度的增加,但均无统计学意义(P>0.05).结论:大剂量藏药护骨丸对老龄雌性大鼠骨质疏松有显著改善的作用,提示可对绝经后期女性骨质疏松症具有预防和治疗作用.     

雌激素对大鼠牙槽骨骨代谢的影响

目的 探讨雌激素防治大鼠牙槽骨骨质疏松的机制,为开发药物提供依据.方法 24只SD大鼠随机分为3组:对照组、去卵巢组和雌激素治疗组,每组8只.除对照组外,其余行双侧卵巢切除术.雌激素组给予炔雌醇100μg/(kg·d)灌胃,对照组和去卵巢组给予生理盐水对照灌胃,实验90 d后取大鼠牙槽骨,检测牙槽骨骨量、牙槽骨组织中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和胰岛素样生长因子-I(IGF-I)活性.结果 与对照组相比,去卵巢组牙槽骨骨量明显减少;牙槽骨组织中TRAP阳性的破骨细胞数增加57.14%(p＜0.05);IGF-I表达变少、变弱(P＜0.05).与去卵巢组相比,雌激素组牙槽骨骨量明显增多;牙槽骨组织中TRAP阳性的破骨细胞数减少31.82%(P＞0.05);牙槽骨IGF-I表达变多、变强(P＜0.05).结论 雌激素能促进牙槽骨骨形成和抑制骨吸收,防治牙槽骨骨质疏松.     

17β-雌二醇对去卵巢SD大鼠作用的研究

目的:探讨17β-雌二醇对去卵巢雌性SD大鼠骨量和骨组织形态计量学的作用。方法:30只10月龄SD雌性大鼠随机分为假手术(Sham)组、卵巢切除(OVX)组和17β-雌二醇(EST)组,实验12周后处死大鼠,测定全身骨密度(BMD)和股骨重量,截取第4腰椎进行骨形态计量学的静态参数和动态参数的测量。结果:与Sham组相比,OVX组BMD和股骨重量减少(P<0.05),EST组BMD和股骨重量无明显差异(P>0.05)。与OVX组相比,EST组BMD和股骨重量明显增加(P<0.05)。与OVX组相比,EST组骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数量明显上升,骨小梁分离度明显降低,骨表面积骨形成率、骨体积骨形成率、骨组织体积骨形成率和骨矿化沉积率明显下降(均P<0.05),与Sham组接近。结论:17β-雌二醇通过抑制骨转换,阻止骨丢失,增加骨密度。     

透明质酸联合羟乙基淀粉预防术后腹腔粘连的作用机制初探

目的:探讨透明质酸(HA)与羟乙基淀粉(HES)联合作用下,大鼠腹腔粘连组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况。方法:建立大鼠术后肠粘连模型,20只SD大鼠随机分成4组:假性粘连组、生理盐水对照组、透明质酸与羧甲基纤维素(HA-CMC)对照组和HA-HES实验组。用HE染色方法观察腹膜粘连程度以及用免疫组化的方法检测组织中TGF-β1和TNF-α的表达情况。结果:HA-HES实验组粘连分级及粘连发生率比生理盐水组和HA-CMC对照组明显减轻,差异显著(P<0.05)。结论:HA-HES防粘连剂能够明显减轻术后腹腔粘连程度,抑制术后腹膜损伤部位TGF-β1及TNF-α的表达。     

燃煤氟对雌性大鼠下丘脑、垂体、卵巢脏器系数及组织TGF-β1表达的影响

目的 观察燃煤氟中毒模型雌鼠下丘脑、垂体、卵巢脏器系数变化及组织转化生长因子β1(TGF-β1)表达情况,探讨氟对雌性大鼠性腺轴功能影响的可能机制。方法 120只雌性SD大鼠随机均分为对照组(正常饲料)、低氟组(25 mg/kg)、中氟组(50 mg/kg)及高氟组(100 mg/kg),连续喂养5个月,各组分别于第3、4及5个月处死10只大鼠,分离大鼠下丘脑、垂体和卵巢组织称重,采用氟离子选择电极法测定雌鼠尿氟和骨氟含量,观察氟斑牙的情况,计算各组织的脏器系数;采用免疫组化法测定雌鼠性腺轴组织中TGF-β1表达水平。结果 各染氟组的尿氟、骨氟含量高于对照组(P<0.05),并随染氟剂量的增加和时间延长呈上升趋势(P<0.05);除对照组外,各染氟组均有不同程度的氟斑牙,且检出率随染氟剂量的增加而增加(P<0.05);各染氟组雌性大鼠下丘脑、垂体组织脏器系数于各染氟时间段差异无统计学意义(P>0.05),长期氟暴露条件下高剂量组雌性大鼠卵巢脏器系数高于对照组(P<0.05);长期染毒情况下雌鼠下丘脑组织中TGF-β1表达随剂量增加呈先降后升趋势(P<...     

葛根素对多囊卵巢综合征大鼠卵巢转化生长因子-β1表达的影响

目的:探讨葛根素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:40只SD雌性大鼠采用硫酸普拉睾酮钠皮下注射建立PCOS模型成功后随机分为模型对照组,葛根素高、低剂量组[120 mg/(kg.d)、80 mg/(kg.d)],另取20只健康雌性大鼠作为空白对照组。放射免疫法测定血清雄激素(Testosterone)水平变化观察卵巢组织形态学改变及排卵情况,免疫组化法测定卵巢TGF-β1表达水平。结果:与模型对照组相比,葛根素高、低剂量组血清雄激素水平和卵巢TGF-β1表达较低,但组间比较无显著差异(P均<0.05);2组卵泡膜及间质细胞增生明显改善,卵泡颗粒细胞层数明显增多,且囊性扩张卵泡及闭锁卵泡减少,有优势卵泡和黄体形成。结论:葛根素可能通过下调卵巢局部TGF-β1表达水平从而降低PCOS大鼠雄激素水平,减轻卵巢多囊样改变。     

脉冲电磁场对废用性骨质疏松大鼠骨密度和血清转化生长因子β_1的影响

目的 观察脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields,PEMF)对废用性骨质疏松(disuse osteoporosis,DOP)大鼠骨密度(bone mineral density,BMD)和血清转化生长因子β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)的影响,探讨可能的发生机制.方法 健康4月龄雌性SD大鼠80只,按体质量随机区组法分成4组:正常对照组(INT组)、单纯模型组(DOP组)、降钙素组(CT组)、脉冲电磁场组(PEMF组).INT组大鼠喂养DOP大鼠饲料消耗量的平均水平,后3组均通过改良的局部制动法建立DOP大鼠模型;CT组和PEMF组术后即分别给予降钙素(2 IU/kg,腹腔注射,1次/d)及PEMF 预防性治疗,各组分别于建模后1、2、4、8周时处死5只大鼠,进行骨密度、骨组织学和血清TGF-β1浓度等指标检测.结果 建模后2周时,DOP组大鼠制动侧股骨近端骨密度较INT组明显降低(P<0.01),从建模后4周起,CT组和PEMF组骨密度均明显高于DOP组(P<0.05),8周时PEMF组骨密度较CT组明显增高(P<0.05);DOP组大鼠血清TGF-β1浓度在建模后1周时明显高于INT组(P<0.01),而后逐渐下降至正常水平以下;8周时PEMF组TGF-β1浓度明显高于CT组、DOP组(P<0.01).结论 PEMF及降钙素埘废用性骨质疏松均有治疗作用,且PEMF在后期较降钙素效果更明显:TGF-β1浓度在废用性骨质疏松骨重建过程中呈双相变化,PEMF可能通过促进TGF-β1分泌而影响骨重建过程.     

尾静脉高压注射hIL-10质粒对去卵巢大鼠实验性牙周炎发生的影响

目的探讨hIL-10基因治疗对去卵巢大鼠骨代谢、牙槽骨的影响。方法将96只SD大鼠随机分成4组(SHAM+hIL-10组,SHAM+VECTOR,OVX+hIL-10组,OVX+VECTOR组),每组24只。术后即刻将各组大鼠随机分成3小组,分别于术后12、14、18周建立实验性牙周炎模型。术后12周起,每周给予尾静脉加压注射hIL-10质粒(1、3两组)或空载体质粒(2、4两组)1次。丝线结扎后2周,处死大鼠。结果 hIL-10基因可在血清中表达,抑制血清TNF-α和TRAP 5b的升高(P<0.05)。大鼠牙周膜的IL-1β和TNF-α阳性细胞数目不同程度地减少(P<0.05)。结论 hIL-10基因治疗不能抑制去卵巢大鼠实验性牙周炎的牙槽骨吸收,但对牙周膜IL-1β和TNF-α有抑制作用。     

运动对去势雌性大鼠松质骨组织中IL-6及TNF-α表达的影响

目的:探讨运动对去势雌性大鼠骨组织中IL-6、TNF-α表达的影响并讨论其在骨代谢变化中的作用。方法:24只4月龄雌性大鼠随机分为3组:正常组、去势组、运动组。去势组和运动组均行双侧卵巢切除,运动组大鼠卵巢切除后在跑台上进行中等强度运动(18m/min,1h/d,5d/周)10周。10周后处死动物对股骨近端松质骨中IL-6、TNF-α进行免疫组织化学染色,并结合计算机图象分析系统对表达强度进行评定。同时对血钙、血碱性磷酸酶(ALP)、血骨钙素(BGP)、尿钙、尿肌苷、尿羟脯氨酸(Hop)进行检测以评定骨转换状态。结果:去势组大鼠骨吸收增强,骨转换加快;运动可以抑制去势后大鼠骨吸收增强和高转换状态。去势组大鼠TNF-α、IL-6阳性表达强度显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),运动组则与对照组相比差异无显著性。结论:卵巢切除导致骨髓微环境中TNF-α和IL-6增加,运动可能通过抑制骨髓微环境中TNF-α和IL-6增加而抑制去卵巢大鼠的骨吸收和高转换状态。     

健骨颗粒对大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响

目的探讨健骨颗粒对骨组织成骨细胞雌激素受体表达的影响。方法通过切除6月龄SD雌性大鼠卵巢,建立绝经后骨质疏松症动物模型,分假手术组、模型组、治疗组,运用RT-PCR实时荧光定量SYBR GREEN法检测雌激素受体ERα、ERβmRNA的表达。结果治疗组与模型组比较,ERα、ERβmRNA的相对表达量增加,差异有显著性(P0.01)。结论健骨颗粒能提高去卵巢骨质疏松模型大鼠的成骨细胞ERα、ERβ的表达,促进成骨细胞增殖。     

蛤蚧乙醇提取液影响去势大鼠胫骨TGF-β1表达的研究

目的：研究在灌服蛤蚧乙醇提取液去势大鼠胫骨中TGF-β1的表达,探讨蛤蚧乙醇提取液防治绝经后骨质疏松症的机理。方法：采用12月龄SD雌性大鼠60只,随机分为对照组、去势组和实验组。去势组和实验组均切除双侧卵巢,实验组给予蛤蚧乙醇提取液灌胃处理;对照组给予假手术处理。3组大鼠分别于术后4、12周,随机各取10只,测定骨密度（BMD）后处死,取右侧胫骨,脱钙后包埋切片,HE染色,计数破骨样细胞;常规SABC法进行免疫组化染色,图像分析灰度值。结果：实验组的全身BMD明显高于去势组,但仍然低于对照组;实验组的破骨样细胞计数与对照组相似,与去势组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。TGF-β1在实验组及对照组的成骨细胞中呈阳性染色,部分骨基质中也有阳性表达,去势组呈阴性表达。结论：蛤蚧乙醇提取液可能诱导骨微环境中TGF-β1表达增加,进而抑制破骨样细胞的生成,有效地预防绝经后骨质疏松的发生。     

雷诺昔酚对去势后大鼠松质骨中TNF-α表达及骨密度的影响

目的:选择性雌激素受体调节剂(SERM)-雷诺昔酚(RAL)对去卵巢大鼠骨密度及松质骨中TNF-α表达的影响.方法:将8月龄未经产雌性二级SD大鼠30只,随机分为假手术(SHAM)组、去势 (OVX)组、去势 雷诺昔酚(OVX RAL)组.OVX RAL组大鼠术后第2日开始给予雷诺昔酚灌胃.术后20 wk处死各组大鼠,对各组大鼠不同部位骨密度(BMD)进行检测.利用免疫组织化学染色及用图像分析方法对各组大鼠松质骨切片TNF-α表达图像进行分析,观察RAL对OVX大鼠腰椎松质骨中TNF-α表达的影响.结果:① DVX组与SHAM组相比较,TNF-α表达的灰度值降低(P＜0.01);RAL组较OVX组灰度值升高(P＜0.01),表明OVX大鼠松质骨中骨小梁周围及髓腔内TNF-α表达阳性细胞数多于SHAM组;而经RAL治疗后的去卵巢大鼠骨小梁周围及髓腔内TNF-α阳性表达减弱.②与SHAM组相比,OVX组股骨近端、股骨干、腰椎BMD降低(P＜0.01);RAL治疗组各部位BMD高于OVX组(P＜0.05),接近SHAM组水平(P＞0.05).结论:RAL可通过抑制破骨性因子TNF-α表达来抑制因雌激素缺乏引起的骨密度降低及骨形态结构退变.     

骨碎补总黄酮对绝经后骨质疏松大鼠疼痛介质和疼痛反应影响

目的:利用去卵巢大鼠骨质疏松模型,观察骨碎补总黄酮对血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1(IL-1)、前列腺素E2(PE2)和5羟色胺(5-HT)的表达和对大鼠痛阈的影响。方法:36只雌性大鼠随机分为3组(假手术组、去卵巢组和药物处理组),造模成功后,药物处理组持续给予骨碎补总黄酮,采用ELISA检测大鼠血清中TNF-α、IL-1、PE2和5-HT的表达变化,采用X线骨密度检测仪测定大鼠骨密度;采用von-Frey纤毛检测法观察其不同时间点的镇痛作用。结果:骨碎补总黄酮对去卵巢骨质疏松症导致的骨密度下降有明显抑制作用,且明显抑制大鼠血清中TNF-α、IL-1、PE2和5-HT的表达,显著提高去卵巢骨质疏松大鼠的痛阈。结论:骨碎补总黄酮能明显提高去卵巢大鼠的骨密度,并可抑制血清中疼痛介质的表达,具有镇痛作用。     

雌激素对大鼠牙槽骨骨量的影响

目的探讨雌激素对大鼠牙槽骨骨量的影响.方法24只SD大鼠随机分为3组:假手术组、去卵巢组和雌激素治疗组.治疗组大鼠给与雌激素100μg/(kg·d)灌胃治疗90 d,实验90 d后取大鼠的牙槽骨,脱钙,切片,染色,用骨形态计量学方法测量牙槽骨松质骨的骨量,计算牙槽骨的骨静态参数.结果与假手术组相比,去卵巢组牙槽骨骨小梁面积百分数减小(P＜0.01)和骨小梁分离度增大(P＜0.05)均有统计学意义.与去卵巢组相比,雌激素治疗90 d后牙槽骨骨小梁面积百分数、骨小梁厚度均增大(P＜0.01).结论去卵巢可造成大鼠牙槽骨骨量减少导致骨质疏松,应用雌激素可预防去卵巢大鼠牙槽骨骨质疏松.