61例患者HBV五项指标和PCR—HBV DNA同期检测结果的临床意义

６１例患者ＨＢＶ五项指标和ＰＣＲ—ＨＢＶＤＮＡ同期检测结果的临床意义甘肃省平凉地区医院内三科张天成ＰＣＲ－ＨＢＶＤＮＡ新技术的建立和应用，为临床上检测并进一步认识ＨＢＶ感染开辟了新的途径，本文就６１例患者的检测结果分析了其临床意义。１临床资料收集门诊...     

应用PCR法检测血清HBV DNA及其意义

应用PCR法检测不同HBV标志物阳性血清112例HBV DNA,部分与斑点杂交法比较,以阐明NBV标志物与HBVDNA关系及其意义。材料与方法112例血清来源于本院1990年7月至1991年12月传染病科住院及门诊病人。共分5组,A:22例HBsAg、HBeAg均阳性(为慢性肝炎);B组:14例HBsAg( )、HBeAg(一)(亦为慢性肝炎);C组:41例HBsAg(一)、HBeAg(一)     

蚊虫携带HBV模型的PCR研究

利用ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性血清喂饲中华按蚊，淡色库蚊及白纹伊蚊，分别在吸血后０、２、４、６、１２、２４和４８ｈ将蚊制成匀浆，用经典和粗提法提取ＨＢＶ－ＤＮＡ模板。经聚合酶链反应后，电分析扩增产物：结果；３种蚊虫各时点匀浆的扩增说物中的ＨＢＶ－ＤＮＡ均为阴性。     

PCR法区别HBV RC—和CCC—DNA

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和基因组为一松驰环状、部分双链ＤＮＡ（ＲＣ－ＤＮＡ）。在其负链的５与３端之间存在一缺口。当ＨＢＶ进入宿主细胞后，基因组转变为共价闭合环状ＤＮＡ（ＣＣＣ－ＤＮＡ）。我们根据ＨＢＶ－ＲＣ－和ＣＣＣ－ＤＮＡ的结构特点，设计了ＰＣＲ区别ＲＣ－和ＣＣＣ－ＤＮＡ。实验表明，该方法可有效地区别两种形式的ＨＢＶＤＮＡ》     

应用聚合酶链反应检测HBV—DNA的临床价值

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法对５３０例乙肝患者（含１１８例病毒携带者）血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和乙肝病毒标志物进行检测，ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率分别为１）ＨＢｓＡｇ“＋”、ＨＢｅＡｇ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为９６．８５％；２）ＨＢｓＡｇ“＋”、抗－ＨＢｅ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为４４．１２％；３）ＨＢｓＡｇ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为３５．８９％；４）ＨＢＶ标志物均阴性为１３．１１％；５）     

双带PCR提高检测血清HBV—DNA质量的意义

应用双带ＰＣＲ方法（ＤＢ－ＰＣＲ）检测了２４０份血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ。该方法能直接观察和判断假阴性和假阳性结果，提高了检测的准确性，与国内其它ＰＣＲ试剂比较，符合率分别为９４．０５％（ＤＢ－ＰＣＲ／华美产品）和９５．２８％（ＤＢ－ＰＣＲ／长城产品），ＨＢｅＡｇ阳性的血清，经ＤＢ－ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者达９３．５５％（２９／３１）ＰＣＲ产物Ｓｏｕｔｈｅｍｂｌｏｔ后能与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针杂交。     

HBV DNA定量PCR方法的建立

ＨＢＶＤＮＡ定量ＰＣＲ方法的建立阎小君肖乐义韩锋产郭进军苏成芝侯瑜（第四军医大学全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词聚合酶链反应定量分析乙型肝炎病毒中图号Ｑ５２３ＨＢＶＤＮＡ是乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染最直接和可靠的病原学标志．用定量Ｐ...     

聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA与ELISA检测e系统间的关系

作应用聚合酶链反应检测了８９例慢性乙型肝炎ｅ系统阳性患血清乙型肝炎病毒ＤＮＡ，其中４４例ＥＬＩＳＡ法ＨＢｅＡｇ阳性，ＰＣＲ法ＨＢＶＤＮＡ检出率为８８．１０％；４７例抗－ＨＢｅ阳性，ＰＣＲ法ＨＢＶＤＮＡ检出率为６５．９６％，应用高特异，高录敏的ＰＣＲ法检测ｅ系统阳性患血清ＨＢＶＤＮＡ提示既往认为ＨＢｅＡｇ阳性转为抗－ＨＢｅ阳性做为病毒复制减弱或消失，病情缓解的指标是不确切的，而情缓解的指标     

荧光定量聚合酶链反应检测乙肝病毒及其临床意义

目的 :研究HBVDNA含量与乙型肝炎血清学免疫标志物表达关系及HBVDNA含量与肝细胞损害关系。方法 :以完全闭管式的PCR和荧光探针技术相结合的实时检测定量PCR方法 ,对 110例病毒性肝炎患者血清HBVDNA进行检测。结果 :HBeAg阳性 /抗HBe阴性患者HBVDNA拷贝数与HBeAg阴性 /抗HBe阳性患者或HBeAg阴性 /抗HBe阴性患者的拷贝数比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而后二者比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;HBVDNA拷贝数与肝实质损害指标血清谷丙转氨酶 /谷草转氨酶 (ALT/AST)、总胆红素 (TBIL)、白蛋白 (ALB)、凝血酶原活动度 (PTA)不具相关性。结论 :抗e抗原抗体非病毒复制终止的标志、病毒性肝炎的肝实质损害程度与血清HBVDNA的含量无相关性。     

HBV感染者血清标志物模式与HBVDNA的水平

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染者血清标志物模式与HBVDNA水平的关系。方法：采用时间分辨荧光免疫定量分析法（TRFIA）和荧光定量PCR技术（FQ—PCR）分别检测542例乙型肝炎感染者血清HBVM和HBVDNA。结果：542例乙型肝炎感染者血清标本HBVM模式有10种,HBVDNA检出总阳性率83．39％（452／542）,各种模式HBVDNA的阳性率存在显著差异性,高拷贝数的HBVDNA主要存在于HBeAg阳性的各种模式中,与其它模式比较有显著差异（P〈0．05）。结论：动态监测HBVM和HBVDNA含量有利于对乙肝患者的诊断及疗效提供客观依据。     

一种新的乙型肝炎病毒全基因组克隆技术的建立

目的建立一种乙型肝炎病毒(HBV)全基因组扩增及克隆的新方法。方法设计含SalⅠ、NotⅠ酶切位点的引物,用一片段PCR法扩增HBV全基因组,经双酶切后将PCR产物克隆入pBlueScript-(SK-)载体,进行HBV全基因组序列测定。结果用此方法成功获得35例HBV全基因组DNA序列。同时以重组质粒为模板进行敏感性和保真性测定,其敏感性为102个初始模板,核苷酸的人为突变率为1.6bp/kb。结论此方法可用于大规模HBV全基因组扩增和序列分析,为HBV的基础和临床研究提供了一种新方法。     

Ad-1.2乙型肝炎病毒感染HepG2细胞后HBV cccDNA的动态分析

目的 研究Ad-1.2 HBV感染HepG2细胞后HBV的复制情况.方法 携带1.2拷贝FIBV DNA的腺病毒体外感染人肝癌细胞株HepG2,ELISA法检测培养上清中HBsAg、HBeAg的动态表达;利用质粒抽提试剂盒提取细胞内cccDNA,经绿豆核酸酶处理后,用特异引物进行实时定量PCR检测.结果 Ad-1.2HBV感染HepG2细胞后,可有效表达HBsAg及HBeAg;感染后第1天即可在细胞内检出cccDNA,第4天达到高峰.结论 Ad-1.2HBV感染细胞,可作为抗病毒药物筛选和评价的模型.     

巢式聚合酶链反应检测血清HBV DNA对乙肝治疗的临床意义

【摘要】 目的 研究使用巢式聚合酶链反应检测血清中HBV DNA对治疗乙肝的临床意义。方法 筛选146例乙型肝炎病毒（HBV）感染者,先采用ELISA检测HBVM作为参照,再分别采用FQ PCR和nPCR检测参与研究的HBV病人HBV DNA,并判断HBV的复制和活动情况。另外选择49名健康者作为对照组。结果 PCR模板1和PCR模板4中的HBV DNA阳性率都很高,PCR模板1中ELISA检测的阳性率与套式聚合酶链反应（nPCR）和实时荧光定量PCR（FQ PCR）检测HBV DNA的阳性率差异显著（P＜005）。PCR模板2中ELISA检测阳性率与nPCR和FQ PCR检测HBV基因的阳性率,无明显差异（P＞005）。nPCR法和FQ PCR法的结果对比可见,nPCR的阳性率显著高于FQ PCR,具有明显差异（P＜005）。nPCR的阳性率要比ELISA的阳性率高很多,具有明显差异（P＜005）。ELISA阳性率比对照组高很多,具有明显差异（P＜005）。结论 采用nPCR检测技术诊断HBV疾病的检出率高、特异性强,对HBV疾病的诊断具有很高的实用价值,可在临床推广应用。     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA定量检测与抗原抗体模式的关系

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量与抗原抗体模式的关系,为慢性乙型肝炎的诊治及预防提供科学依据。方法采用荧光标记定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附实验法检测180例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量和抗原抗体,统计分析不同抗原抗体模式HBV DNA含量。结果在HBsAg和HBeAg同时阳性模式中,HBV DNA含量>103copy.ml-1者114例(91.20)%,其中>107copy.ml-1者44例(35.20%);在HBsAg和抗-HBe同时阳性模式中,HBV DNA含量>103copy.ml-1者18例(56.25%),其中>107copy.ml-1者4例(12.50%)。HBeAg阳性模式HBV DNA含量显著高于HBeAg阴性模式(Ρ<0.01)。结论HBeAg阳性模式HBV DNA含量高于HBeAg阴性模式,HBeAg阳性模式中少数人HBV DNA含量很低,HBeAg阴性模式中少数人HBV DNA含量很高。仅根据抗原抗体模式,难以准确地判断病毒复制程度及传染性的强弱。     

应用聚合酶链反应制备HBV DNA生物素探针

通过聚合酶链反应将Bio-11-duTP掺入扩增的HBV DNA中,制备了长度为120bp的生物素探针,可检测到0.1pg的HBV DNA。PCR际记法简便迅速,特异性强,所用DNA量少且无需分离纯化,其标记探针得率高,活性强。     

乙型肝炎患者血清中分泌型IgA水平与HBV DNA含量的关系

湖北省鹤峰县人民医院检验科,鹤峰 445800目的 研究乙型肝炎患者血清中分泌型IgA(SIgA)水平与乙型肝炎病毒(HBV)DNA含量的关系,为临床提供一个新的评价HBV复制状态及肝细胞损伤的指标。方法 100份经ELISA检测并确诊为乙型肝炎的患者血清用荧光定量PCR检测HBV DNA的拷贝数,用ELISA并经酶标仪定量其SIgA的量。结果 SIgA的含量与HBVDNA的拷贝数的对数呈正相关(r=0.69,P<0.01),在HBsAg( )/HBeAg( )/HBcAb( )组和HBsAg( )/HBeAb( )/HBcAb( )组中SIgA含量差异无显著性意义(P>0.05),而HBV DNA拷贝数前者明显高于后者(P<0.01)。结论 乙型肝炎患者血清SIgA的含量在评价HBV的传染性及肝细胞损伤程度方面比乙型肝炎血清学标志物(HBV-M)更灵敏、准确。     

荧光定量-聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA及其临床价值

目的:应用荧光定量聚合酶链反应(FQ PCR)技术检测血清乙型肝炎病毒(HBV)DNA,评价其临床应用价值。方法:用FQ PCR和酶联免疫吸法(ELISA)检测298份血清HBVDNA拷贝数和免疫学血清标志。结果:27份HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性的标本中,HBVDNA阳性率96.3%,平均拷贝数5.0×107mL;69份中检出率44.9%,平均拷贝数2.1×105mL;43份中检出率34.9%,平均拷贝数8.6×103mL。结论:FQ PCR可以准确、灵敏地判断HBV感染的实际情况及复制水平,可为选择治疗方案和评估药物疗效提供较可靠的理论依据。