Tau 蛋白过度磷酸化和β淀粉样蛋白对阿尔茨海默病发生的影响

近年来有关阿尔茨海默病发病机制研究主要有两大学说,tau 蛋白学说和β淀粉样蛋白学说,本文总结了有关 tau 蛋白和β淀粉样蛋白的作用机理,并讨论二者相互作用对阿尔茨海默病发病的影响。     

睡眠节律紊乱诱导阿尔茨海默病大鼠模型的建立与评价

目的研究睡眠节律紊乱对大鼠记忆能力、海马超微结构、海马β-淀粉样蛋白(Aβ)含量和tau蛋白磷酸化的影响及机制,评价非创伤性阿尔茨海默病大鼠模型的构建方法。方法雄性Wistar大鼠36只,随机均分为正常对照组、弱光组和强光组,每组12只。正常对照组大鼠给予自然光照。弱光组和强光组大鼠均给予12 h自然光照、12 h人工光照的24 h持续光照,其中自然光照时间为7∶00至19∶00,人工光照时间为19∶00至次日7∶00,分别用25 W和40 W白炽灯泡悬于鼠笼中央正上方,弱光组大鼠人工光照强度为400 lx,强光组大鼠人工光照强度为800 lx,弱光组和强光组大鼠分别光照30 d。Morris水迷宫检测大鼠空间记忆能力,透射电镜观察海马超微结构的改变,放射免疫法检测海马Aβ含量,Western blotting检测海马tau蛋白磷酸化水平。结果与正常对照组大鼠比较,弱光组和强光组大鼠寻台潜伏期均显著延长(P<0.05),大鼠海马组织Aβ含量显著增高(P<0.05),海马组织PHF-1抗体和tau-1抗体与正常对照组大鼠比较显著增强(P<0.05),而弱光组与强光组大鼠比较差异均无统计学意义(P>0.05)。正常对照组大鼠海马组织超微结构正常;弱光组大鼠海马线粒体结构破坏,线粒体肿胀,线粒体脊断裂,结构紊乱,神经突触密度降低,突触膜增厚,突触间隙不清,突触小泡数量减少;强光组大鼠海马神经元中核变性,线粒体结构模糊,数量减少,突触未见减少,但囊泡显著减少。结论睡眠节律紊乱诱导的阿尔茨海默病大鼠模型是进行阿尔茨海默病发病机制及其治疗药物研究的理想动物模型。     

阿尔茨海默病模型小鼠自主活动能力的分析

目的研究阿尔茨海默病APP/PS双转基因小鼠自主行为的改变和作为阿尔茨海默病行为特征的可行性。方法对APPswe/PSΔE9双转基因小鼠和野生鼠分别在4月龄、6月龄、8月龄进行旷场自主行为实验,并与Morris水迷宫分析进行比较,利用SPSS16.0软件统计分析。结果在4月龄、6月龄转基因小鼠的学习记忆能力、以及自主性探究性行为与野生鼠比较有明显的差异。表现为:模型鼠学习记忆能力减弱,兴奋性增高,自主活动增加。这些表现与临床患者的症状有许多相似性,8月龄时,差异减小。结论APPswe/PSΔE9双转基因小鼠的自主行为学表现为烦躁不安,自主活动增加,与阿尔茨海默病患者的临床表现有许多相似之处,可作为小鼠模型判别的行为标志之一,在阿尔茨海默病的病因病机研究和药物研发等方面具有一定的应用价值。     

脑脊液tau蛋白和磷酸化tau蛋白测定在阿尔茨海默病诊断中的应用价值

目的探讨脑脊液tau蛋白和磷酸化tau（p-tau）蛋白检测在阿尔茨海默病（AD）诊断中的应用价值。方法选取2012年4月~2014年4月在中国人民解放军第309医院和佳木斯大学附属医院接受治疗的AD患者（AD组）、血管性痴呆患者（VD组）及非神经系统疾病患者各50例为研究对象,检测并分析患者脑脊液tau蛋白和p-tau蛋白的含量。结果 AD组患者脑脊液p-tau蛋白含量为（190.3±83.1）pg/mL,显著高于VD组患者的（73.4±36.2）pg/mL和非神经系统疾病组的（55.4±35.2）pg/mL（P〈0.05）;VD组患者脑脊液中p-tau蛋白含量与非神经系统疾病组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。以tau蛋白含量≥370pg/mL为AD诊断标准时,灵敏度、特异度、检验可靠性和与VD患者鉴别率分别为89.6%、78.8%、82.4%和66.8%;以p-tau蛋白含量≥120pg/mL为AD诊断标准时,灵敏度、特异度、检验可靠性和与VD患者鉴别率分别为93.5%、89.9%、91.7%和82.6%。结论脑脊液p-tau蛋白可作为临床鉴别诊断AD患者的辅助指标。     

缓激肽对β-淀粉样蛋白所致阿尔茨海默病动物模型脑中Tau蛋白磷酸化的影响

目的 观察缓激肽(BK)对β-淀粉样蛋白(Aβ)所致阿尔茨海默病(AD)动物模型脑中Tau蛋白磷酸化的影响.方法 随机选取20只健康Wister大鼠,进行水迷宫训练后分为4组,在大鼠双侧海马背侧细胞带分别注入蒸馏水5 μl(DW组),BK2.5 μl、DW2.5 μl(BK组),Aβ2.5 μl、DW2.5 μl(Aβ组),Aβ2.5 μl、BK2.5 μl(Aβ+BK组).2周后观察各组大鼠海马、皮层区的磷酸化Tau阳性细胞数.结果 Aβ+BK组海马CA1、CA4区及皮层区磷酸化Tau蛋白免疫阳性细胞积分光密度值明显高于其他各组.结论 Aβ与BK同时注入大鼠海马可产生协同作用,引起Tau蛋白更明显的磷酸化,提示可以用此方法 建立AD动物模型.     

Tau蛋白高度磷酸化致阿尔茨海默病动物模型研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是老年人中最常见的神经退行性疾病,以过度磷酸化tau蛋白为核心形成的神经原纤维缠结为AD的主要病理特征之一。近年来对tau蛋白磷酸化的研究备受关注。在AD的实验研究中,探索理想的AD动物模型对于明确AD的病因、发病机制及药物的研发等方面起关键作用。本文对Tau蛋白磷酸化致AD主要动物模型的研究进展进行了综述,包括Tau转基因动物模型、激酶和磷酸化酶系统失衡致Tau 蛋白过度磷酸化损伤模型、降低Tau蛋白糖基化致Tau过度磷酸化模型等。     

Tau蛋白过度磷酸化与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病(AD)是最常见的痴呆类型,Tau蛋白异常过度磷酸化是其主要的发病机制之一。Tau蛋白是脑内一种微管相关蛋白,受蛋白激酶(磷酸化)和蛋白磷酸酯酶(脱磷酸化)的调节。Tau蛋白功能异常改变可能是神经元功能障碍和死亡的必要环节。该文对Tau蛋白的结构与功能,Tau蛋白过度磷酸化,Tau蛋白磷酸化调节及Tau蛋白、β淀粉样蛋白与AD的关系进行阐述。     

蛋白异常所致的阿尔茨海默病及相关药物的研究

阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种进行性发展的致死性神经退行性疾病[1],发病率较高,已成为现代社会严重威胁老年人生命的疾病之一,其死亡率仅次于心血管疾病、癌症及中风[2],全世界有3500万AD患者[3]。据欧美等11个国家联合研究报道[4],60岁老年人AD患病率为0.3%~0.8%,65岁以上的老年人年龄每增加5岁,其患AD的概率将上     

肌苷对阿尔茨海默病模型大鼠认知功能改善作用及机制研究

目的 研究肌苷对β-淀粉样蛋白1-40(beta-amyloid protein,Aβ_(1-40))所致的模拟阿尔茨海默病大鼠神经元凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响.方法 成年健康雄性Wistar大鼠30只,用随机数字表法随机分为对照组、模型组和治疗组各10只,经左侧侧脑室微量注射Aβ_(1-40)建立阿尔茨海默病模型,腹腔注射肌苷(100mg·kg~(-1))干预治疗,采用Y型电迷宫检测大鼠学习和记忆功能,HE染色观察神经细胞的结构变化,原位TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组织化学检法测Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 模型组大鼠认知能力[(79.84±6.46)次,(4.83±3.14)次]较对照组[(59.13±7.52)次,(7.94±2.21)次]明显下降(t=5.67,2.25,P＜0.05),神经细胞结构异常,TUNEL阳性细胞数明显增多、Bcl-2和Bax蛋白表达增加(P＜0.05).肌苷组大鼠认知能力[(68.54±8.86)次,(7.11±1.13)次]和细胞结构较模型组[(81.22±3.92)次,(4.61±1.61)次]显著改善(t=3.46,4.64,P＜0.05),相对于模型组(20.24±1.32,41.82±3.71,35.51±2.30),肌苷组Bcl-2蛋白表达(33.52±5.68)明显增强、Bax蛋白表达(25.11±2.45)明显减弱、细胞凋亡数量(23.40±7.07)明显减少(t=6.04,9.94,4.30,P＜0.05).结论 肌苷能促进Bcl-2表达、抑制Bax表达,降低凋亡率,从而改善阿尔茨海默病大鼠大学习和记忆能力.     

微管蛋白及磷酸化tau蛋白在认知功能障碍疾病中的作用

认知功能障碍是指脑的器质性病变所造成的患者在知觉、注意、言语、记忆以及思维等高级皮层机能方面出现的机能障碍。很多疾病可造成认知功能损害，如缺氧性脑病、阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD）、脑血管病等。这些疾病引发认知功能障碍的具体机制尚不明确。研究显示，出现认知功能障碍疾病患者的神经中枢都存在不同程度的细胞凋亡、细胞退变，在这些无功能细胞中可见微管蛋白、磷酸化tau蛋白异常改变。本文主要对认知功能障碍疾病中微管蛋白、磷酸化tau蛋白改变的研究现状作一综述。     

川芎嗪对痴呆小鼠模型学习记忆能力的影响

目的研究川芎嗪对痴呆小鼠学习记忆的影响。方法对APPswe/PSΔE9双转基因小鼠在3月龄开始食物中连续给川芎嗪(100 mg/kg.d)进行治疗,停药后立即进行水迷宫实验,并与未给药APPswe/PSΔE9双转基因小鼠和及野生鼠进行比较。结果治疗组与APPswe/PSΔE9双转基因组比较,平台寻找潜伏期缩短,穿过原平台区的频次增加。结论川芎嗪能改善APPswe/PSΔE9痴呆模型小鼠的学习记忆能力。     

安神定志方对阿尔茨海默病大鼠Tau蛋白磷酸化及BDNF/TrkB信号通路的影响

目的:观察安神定志方对阿尔茨海默病大鼠模型海马区tau蛋白磷酸化水平的影响及其相关机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、安神定志方(低、中、高剂量组)和多哌齐特组,除正常组外其余组通过链脲佐菌素侧脑室注射复制阿尔茨海默病大鼠模型后给予相应药物灌胃治疗2周。通过Morris水迷宫试验检测大鼠学习记忆能力,HE染色检测海马区组织学形态,Western-blot检测脑组织海马组织tau蛋白磷酸化水平及BDNF和TrkB蛋白的表达丰度。结果:与空白组相比,模型组大鼠逃避潜伏期显著增加,跨越平台次数及有效停留时间明显减少,tau蛋白的磷酸化水平均明显升高,BDNF蛋白及TrkB蛋白磷酸化的表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,安神定志方各剂量组均能明显降低AD大鼠逃避潜伏期,增加跨越平台次数及有效停留时间,抑制tau蛋白的磷酸化水平均,上调BDNF蛋白及TrkB蛋白磷酸化的表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:安神定志方能够通过激活BDNF/TrkB信号通路抑制tau蛋白的磷酸化,促进AD大鼠学习、记忆能力。     

天麻素对阿尔茨海默病小鼠的脑内氧化应激及tau蛋白磷酸化的影响

目的研究天麻素对AD模型小鼠脑内氧化应激及tau蛋白磷酸化水平的影响。方法实验分为正常对照组、AD模型组(tau转基因小鼠)和天麻素治疗组,治疗组小鼠选取tau转基因小鼠,隔日给予天麻素[5 mg/(kg·d)]灌胃处理3个月,对照组和模型组小鼠(tau转基因小鼠)则均给予生理盐水灌胃处理。通过分子生物学及形态学相关技术检测各组小鼠脑内p-tau202磷酸化水平及CHAT的表达;并考察氧化应激相关指标的变化。结果 Western blot及免疫荧光结果显示,模型组小鼠脑内p-tau202的表达高于对照组小鼠,而天麻素治疗组小鼠脑内p-tau202的表达水平较模型组小鼠降低;氧化应激结果显示,天麻素干预处理后,小鼠脑内的MDA含量降低,SOD活性明显升高;Western blot结果显示,与模型组小鼠相比较,天麻素治疗组小鼠脑内CHAT表达水平降低。结论天麻素能够通过减少氧化应激进而降低AD模型小鼠脑内tau蛋白的磷酸化水平,最终起到对神经元的保护作用。     

调心方对杏仁核注射Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病模型大鼠的影响

目的 研究调心方(HBR)对杏仁核注射β淀粉样蛋白(Aβ25-35)致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠相关病理变化的作用。方法 单侧杏仁核注射Aβ25-35造成AD大鼠模型，采用Morris水迷宫法、放射免疫法、免疫组化法、RT—PCR法，以Aricept为对照，观察HBR对AD模型大鼠的空间学习记忆能力、胆碱能系统、Aβ1-40沉积、tau蛋白异常磷酸化及脑额叶皮层内APPmRNA表达的影响。结果 HBR可显著改善Aβ25-35诱导的AD大鼠空间学习记忆障碍，提高模型大鼠的胆碱乙酰化转移酶(ChAT)活性及M受体结合容量(Rt)值，减少APPmRNA的表达和Aβ1-40的沉积，抑制tau蛋白的异常磷酸化。结论 HBR对Aβ25-35诱导的AD大鼠空间学习记忆障碍及胆碱能系统损害具有显著改善作用，可以明显减轻Aβ1-40的沉积和tau蛋白的异常磷酸化。     

β淀粉样蛋白和Tau蛋白在血管性痴呆发病机制中的作用

目的:观察β淀粉样蛋白和Tau蛋白在血管性痴呆(VD)大鼠发生、发展中的作用.方法:采用永久性结扎双侧颈总动脉方法建立VD模型.40只SD大鼠随机分为假手术组(10只)、模型组(30只).模型组按手术时间又分为4,6,8周组,每组n=10只.应用Morris水迷宫检测大鼠的学习、记忆能力;免疫组化染色方法检测大鼠海马C...     

胃旁路手术对阿尔茨海默病模型小鼠认知功能的影响

目的观察胃旁路手术对APP/PS1/Tau三转基因阿尔茨海默病模型小鼠(AD模型小鼠)认知功能的影响。方法 2018年2月—2019年3月在武汉大学人民医院中心实验室及动物实验中心进行实验,选取来自亲代APP/PS1/Tau三转基因型的子代小鼠(6月龄)随机分为AD胃旁路手术组(n=6)、AD模型组(n=6),另取相同月龄同窝生的C57小鼠随机分为WT正常对照组(n=6)、WT正常胃旁路手术组(n=6)。胃旁路手术2个月后进行APP/PS1/Tau三转基因小鼠的基因鉴定,鉴定后4组行Morris水迷宫实验检测认知功能,最后取4组小鼠海马部位组织用Western-blot方法检测P-Tau(Ser396)和P-Tau(Thr231)蛋白的表达,了解各组小鼠Tau蛋白磷酸化水平情况。结果AD模型组和AD胃旁路手术组的小鼠均携带APP、PS1及Tau 3种基因,即为APP/PS1/Tau三转基因小鼠,造模成功。在水迷宫定位航行实验中,AD胃旁路手术组小鼠较AD模型组平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),而与WT正常对照组比较,AD胃旁路手术组逃避潜伏期延长(P<0.05);空间探索实验中,AD胃旁路手术组较AD模型组跨越平台次数明显增加(t=3.376,P=0.007)。AD胃旁路手术组小鼠较AD模型组Tau蛋白磷酸化水平明显降低(P<0.01)。结论胃旁路手术能明显改善阿尔茨海默病模型小鼠的认知功能。     

石菖蒲远志散对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆的影响

[目的]观察朝药石菖蒲远志散对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆的影响.[方法]将小鼠随机分成正常对照组、模型对照组、脑复康组及石菖蒲远志散大、中、小剂量组.腹腔注射给予小鼠D-半乳糖和亚硝酸钠建立AD模型,同时灌胃给予不同剂量的石菖蒲远志散4周,利用Morris水迷宫法评价学习记忆功能;采集血清测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.[结果]与模型对照组比较,石菖蒲远志散大剂量组小鼠搜索站台的潜伏期均明显缩短(P<0.05),大、中剂量组在原站台所在象限停留时间明显延长(P<0.05);石菖蒲远志散大剂量组小鼠血清中SOD活性明显增加(P<0.01),大、中剂量组小鼠血清中MDA含量明显降低(P<0.01).[结论]朝药石菖蒲远志散可预防D-半乳糖和亚硝酸钠所致AD模型小鼠学习记忆功能减退,其机制可能与抗氧化作用有关.