基于脂多糖诱导斑马鱼炎症模型研究何首乌多糖抗炎活性

摘要：目的 探究何首乌中水溶性多糖（water-soluble polysaccharides?from Polygonum multiflorum, WPMP）对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）所致斑马鱼系统性炎症的保护作用。方法 何首乌多糖经分离纯化后得到两种组分（WPMP-1和WPMP-2），收集斑马鱼胚胎于28.5℃中培养箱中孵育，设置空白组、LPS诱导模型组，通过孵化率、心跳率、卵黄囊面积、ROS生成率、NO生成率等指标确定LPS最佳诱导炎症浓度，确定炎症模型后，加入不同组分的何首乌多糖，并以上述相同指标评价何首乌多糖的抗炎效果。结果 不同浓度何首乌多糖（10、50、100 μg·mL-1）对LPS引起的斑马鱼炎症具有保护作用，呈现浓度依赖性，能够恢复卵黄囊正常大小，显著降低心率、ROS生成率以及NO生成率，且在相同多糖浓度下，WPMP-2的抗炎活性高于WPMP-1。结论 何首乌多糖具有较好的抗炎作用，为何首乌多糖作为一种天然的抗炎成分提供了科学依据。     

制何首乌多糖的纯度鉴定和理化性质研究

目的对制何首乌多糖进行纯度鉴定和理化性质研究。方法采用水提醇沉法提取制何首乌多糖,经过纤维素和凝胶柱层析纯化后,纯化后的多糖PRPM-1、PRPM-2和PRPM-3分别用Sepha-dexG-100柱层析和紫外吸收光谱检测其纯度;通过物理和化学方法分析多糖理化性质。结果制何首乌多糖为均一多糖。结论该测定方法准确,重复性好。     

制何首乌多糖对痴呆模型小鼠学习记忆能力及脑内酶活性的影响

目的：考察制何首乌多糖对痴呆模型小鼠的作用。方法：应用D-半乳糖制作小鼠痴呆模型，灌胃给予制何首乌多糖提取液，并分别以维生素E、脑复新和雌二醇作为阳性对照药。结果：对于痴呆模型小鼠，制何首乌多糖能够明显提高其学习记忆能力，降低脑内脂褐质含量及单胺氧化酶活性，提高脑内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性及海马部位一氧化氮合酶活性。结论：制何首乌多糖具有抗实验性痴呆作用。     

何首乌多糖提取方法的比较研究

目的:比较不同提取方法对生何首乌多糖的影响,同时初步探索了热水提取生何首乌和制何首乌多糖的差异。方法:以何首乌为原料,分别通过热水提取法、超声提取法、微波提取法制得多糖,并对不同提取工艺下多糖的得率、总糖含量、蛋白含量、重均分子量(M_w)、单糖组成和2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)自由基清除能力进行比较和研究。结果:不同提取方法所得何首乌多糖得率依次为：微波提取法[微波提取何首乌粗多糖(M-PMP)]>热水提取法[热水浸提何首乌粗多糖(H-PMP)]>超声提取法[超声提取何首乌粗多糖(U-PMP)]; U-PMP的蛋白含量最高,M_w与其他多糖也有明显差别;单糖组成结果显示,不同提取方法的何首乌多糖中单糖组成相同,主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,但单糖组成的摩尔比有所不同。结论:3种提取方法所得的多糖成分存在一定差异,且不同提取方法得率差异明显,其中M-PMP得率最高;同时发现生何首乌和制何首乌中多糖成分可能存在一定差异,有待进一步验证。     

与功效、毒性相关的何首乌化学成分研究进展

目的总结与功效、毒性相关的何首乌化学成分研究现状,明确何首乌功效成分与毒性成分,为进行何首乌化学成分与功效、毒性相关性研究提供文献依据和研究思路。方法对近十几年来国内外发表的相关文献进行整理、分析、归纳。结果二苯乙烯苷是何首乌的主要化学成分和活性成分,是何首乌发挥功效的主要物质基础;蒽醌类是其可能的毒性成分和毒性表达的主要物质基础。临床报道何首乌可产生多种不良反应,而关于何首乌化学成分毒性的研究报道较少,对于何首乌毒性物质基础、毒性体内过程、毒性作用特点、毒性作用机制研究尚不够深入;目前关于何首乌化学成分、功效和毒性的研究都是孤立的,彼此之间缺少关联性。结论何首乌应在功效和毒性表达导向下进行定向的物质基础分离、合理毒性控制研究,以达到减少不良反应,保证临床安全用药的目的。     

何首乌多糖对氧自由基及抗氧化酶活性的作用研究

目的:研究何首乌多糖对氧自由基及抗氧化酶活性的作用及其机制.方法:用D-半乳糖注射小鼠致亚急性衰老模型,同时何首乌多糖50或150 mg·kg·d-1)连续灌胃8周,观察其对模型小鼠体内脂质过氧化产物及抗氧化酶活性的影响.结果:50或150 mg·kg-1·d-1)何首乌多糖能使模型小鼠血清和肝、肾组织中SOD,肝、肾组织中GSH-PX酶活力明显上升;血清、肝、肾组织中MDA及脑组织中LF明显下降.结论:何首乌多糖可显著提高模型小鼠体内抗氧化酶活性,清除氧自由基及抑制脂质过氧化.     

何首乌化学成分和药理作用

目的:总结何首乌的主要化学成分和药理作用.方法:翻阅文献和资料,分析何首乌化学成分和药理作用.结果:何首乌化学成分主要有二苯乙烯苷类化合物、醌类化合物、磷脂类化合物等,具有抗衰老、保肝、降血脂、抗癌、抗炎、神经保护、增强免疫力药理作用.结论:随着人们对何首乌研究的逐渐深入,何首乌将在临床得到更广泛的应用.     

何首乌不同炮制品对肝细胞脂代谢的干预作用研究

目的 利用脂肪变性肝L-02细胞模型,比较何首乌的生品及不同炮制品(传统方法炮制品、发酵炮制品)对脂代谢的干预作用.方法 将肝细胞传板至6孔板,分为正常组、模型组、给药组细胞.模型组与给药组采用含医用脂肪乳的培养液诱导48 h,建立肝细胞脂肪变性模型,给药组给予何首乌生品及不同炮制品的各浓度水提取物、50％乙醇提取物刺激液进行培养,采用洛伐他汀、非诺贝特为阳性对照.24 h后测定肝细胞内三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)的量.结果 与模型组相比,何首乌米根霉发酵品水提取物及50％乙醇提取物、生何首乌水提取物、黑豆制何首乌50％乙醇提取物和清蒸何首乌50％乙醇提取物在该模型上具有较好的降脂作用.其中何首乌发酵炮制品的降脂活性尤其明显,何首乌米根霉发酵品能极显著地降低TG的量(P＜0.01)至模型组含量的25％;何首乌米根霉发酵品水提取物和黑曲霉发酵品的50％乙醇提取物均可降低TC的量(P＜0.01)至模型组含量的35％.结论 生何首乌及何首乌传统炮制品、发酵炮制品均有显著地降脂作用,其中由米根霉发酵得到的发酵品表现出的较好的降脂活性,表明发酵法可能成为何首乌炮制法研究的新方向.     

何首乌多糖对衰老模型大鼠肝mtDNA损伤及复合体ⅣCOⅠ、ATPase 6 mRNA表达的影响

何首乌为蓼科植物何首乌的干燥块根,具有抗衰老、保肝、促进血细胞的新生和发育、抗动脉粥样硬化等方面的作用。另有报道,何首乌多糖可提高衰老小鼠的免疫功能,也可促进衰老小鼠神经细胞的发育。但关于何首乌对衰老模型大鼠肝脏线粒体呼吸链酶复合体mRNA表达的研究,国内外尚未见报道。     

何首乌炮制前后水溶性糖含量的比较

目的:探讨炮制对何首乌药材中水溶性糖含量的影响。方法:采用蒽酮-硫酸法测定何首乌及其炮制品中水溶性总糖、单糖-低聚糖、多糖的含量。结果:炮制使何首乌中水溶性总糖含量升高,其中以多糖含量增加为主。结论:测定方法简便、准确、重现性好。     

不同炮制辅料对何首乌药效成分含量的影响

目的研究不同炮制辅料对何首乌药效成分含量的影响,为选择何首乌炮制辅料提供依据。方法分别采用5种不同炮制辅料制备制何首乌,高效液相色谱法按照2015年版中国药典中制何首乌成分含量测定方法分别测定制何首乌中二苯乙烯苷、游离蒽醌的含量,比较不同炮制辅料对何首乌中药效成分含量的影响。结果炮制辅料基本都会降低制何首乌中二苯乙烯苷和游离蒽醌的含量。不同炮制辅料制备的制何首乌中二苯乙烯苷含量从高到低依次为空白对照何首乌>米泔水制何首乌>生姜汁制何首乌>甘草汁制何首乌>熟地汁制何首乌>黑豆汁制何首乌,游离蒽醌含量从高到低依次为甘草汁制何首乌>空白对照何首乌>米泔水制何首乌>熟地汁制何首乌>黑豆汁制何首乌>生姜汁制何首乌。不同炮制辅料制备的何首乌中二苯乙烯苷含量均高于2015年版中国药典中的要求,而游离蒽醌含量均未达到2015年版中国药典中的要求。结论不同炮制辅料对制何首乌中药效成分含量的影响不同。     

何首乌不同组分对小鼠急性毒性试验比较研究

目的比较何首乌全组分、水提组分、醇提组分对小鼠急性毒性的影响,进行何首乌药材的急性毒性观察与评价。方法分别制备何首乌全组分、水提组分、醇提组分,按照经典小鼠急性毒性试验方法测定何首乌不同组分小鼠口服半数致死量（LD50）、最大耐受量（MTD）、最大给药量（MLD）,连续观察14天,观察其急性毒性症状谱,记录累积死亡数及小鼠体重变化。结果何首乌不同组分对小鼠急性毒性强度为：全组分〉醇提组分〉水提组分。何首乌全组分、水提组分、醇提组分无法作出LD50,MTD试验结果按含生药量计算分别为20.0 g.kg-1.d-1、98.4 g.kg-1.d-1和78.0g.kg-1.d-1,分别相当于临床70 kg人每公斤体重日用量的116.7倍、574.0倍和455.0倍。主要毒性症状是腹泻、怠动、毛色不华。结论何首乌药材具有一定的毒性,与文献记载相符。其不同组分中化学成分是决定其毒性强度不同的物质基础,通过何首乌不同组分小鼠急性毒性试验比较研究,有利于进行何首乌药材系统的毒性研究与评价,为进一步锁定其毒性物质基础提供试验依据,其毒性成分和致毒机理有待于进一步研究。     

何首乌炮制后化学成分及药理作用分析

何首乌是祖国医学中常用的滋补药,也是普通民众常用的养生食材,其在补肝方面药效显著,在我国有较为广泛的应用,近年来服用何首乌及其炮制品导致肝损伤的报道时有发生,依据中药相关的炮制理论,大部分的中药材料经过相应的炮制方法处理后,可充分其药物的相应的药理作用,提高临床的疗效,可以充分降低药物本身具有的毒副作用,本文总结了近年来何首乌及其炮制品的相关报道,深入研究炮制对于何首乌化学成分及药理作用的影响,发现,何首乌炮制后的药理作用及化学成分较炮制前有明显的差异,希望对何首乌及其炮制品的正确应用提供参考依据。     

何首乌防治骨质疏松症的研究进展

目的:探讨何首乌防治骨质疏松的研究进展.方法:参阅中外相关文献进行总结归纳,对何首乌的药理研究、历史回顾、临床应用、物质基础、防治骨质疏松机制、应用展望六个方面进行综合性论述,方便各学者及时获得有关何首乌的研究进展信息.结果:大量理论依据证实何首乌有抗骨质疏松作用,此方面的基础药理研究证据也较充足,但是临床研究证据、作用机理研究以及针对此症状的复方制剂都比较缺乏,而且大多数何首乌制剂的炮制提取,生产工艺、剂型都比较落后,导致药妓低、使用不方便等缺点.结论:何首乌有良好的抗骨质疏松症作用,但是须在制剂工艺、剂型和机制研究中进一步深入研究.     

何首乌抗动物急性炎症的初步研究

目的 :研究何首乌乙醇提取物的抗炎作用。方法 :连续3d灌胃给药后 ,观察致炎动物局部肿胀程度和血管通透性的变化 ,以及对醋酸致痛作用的反应。结果 :何首乌乙醇提取物可明显抑制致炎动物的局部肿胀程度 ,降低血管通透性 ;作用时间可维持4h。大剂量组显示明显的镇痛效果。结论 :何首乌乙醇提取物具有一定的抗炎作用 ,其机制可能与免疫抑制作用有关     

广东德庆何首乌中卵磷脂含量测定

目的考察不同栽培条件下的何首乌及制何首乌中卵磷脂含量的差异。方法采用磷钼蓝分光光度法对不同栽培土壤的德庆何首乌及制何首乌中的卵磷脂含量进行测定,并将其与广西宜州产何首乌及制何首乌中卵磷脂含量进行比较。结果发现德庆产何首乌及制何首乌中的卵磷脂含量均高于广西宜州产何首乌。同时,将德庆产何首乌中卵磷脂含量与相应的栽培土壤中磷含量进行比较,发现两者成正相关。结论德庆本地黑土栽培的何首乌中卵磷脂含量较高。     

何首乌炮制与肝毒性研究进展

何首乌及其炮制品为临床常用中药,对人体有多种有益效果。临床服用何首乌引起肝中毒问题时有报道,但由于何首乌导致肝毒性的机制尚未完全明确,炮制后的何首乌仅被认为是相对安全,目前仍缺乏有效控制何首乌炮制品的科学方法。本文从何首乌的炮制工艺、化学成分、肝毒性、药代动力学等角度汇总分析何首乌研究进展,以探索何首乌质量控制方法和下一步研究思路。     

何首乌中结合型大黄素的提取工艺

目的研究不同提取工艺对何首乌中结合型大黄素提取效果的影响,并优化其提取工艺。方法以生何首乌为原料,结合型大黄素的提取率为指标,采用正交设计对提取工艺进行研究。结果最佳提取工艺为80%乙醇提取2次,第1次用8倍量溶剂,提取1 h,第2次用6倍量溶剂,提取0.5 h。结论优化后的工艺适用于何首乌中结合型大黄素的提取。     

何首乌致肝损害案例追溯分析与临床监控

目的：通过对何首乌致肝损害的案例回顾分析,制定临床监控路径。方法：案例分类统计和原因分析。结果：何首乌致肝损害可能与其有毒成分、患者肝酶缺陷或遗传基因有关,对何首乌的不良反应缺乏认识也是其一。结论：加强何首乌用药前后肝功能检测,可将损伤降至最低。     

浙产何首乌根与叶中大黄素含量比较

目的 建立测定浙产何首乌根与叶中大黄素含量的高效液相色谱法,并比较根与叶中大黄素的含量.方法 采用超声提取法制备供试品溶液,应用高效液相色谱法测定何首乌根与叶中大黄素的含量.色谱柱为Zorbax Ecilpse XDB-C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸(70:30),检测波长为254 nm,流速为1.5 mL/min,柱温为40℃,进样量为20μL.结果 大黄素质量浓度在1-500 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=O.9995),平均加样回收率为99.71%,RSD为2.52%(n=6).浙产何首乌根与叶中大黄素含量分别为2.094 7mg/g和0.030 3mg/g.结论 该法适用于何首乌中大黄素含量的检测.浙产何首乌根与叶中大黄素含量差异显著.