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相似文献
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1.
目的:通过构建Id3?Gdf9条件性敲除(CKO)小鼠并研究雌性小鼠的表型,从而确定分化抑制因子3(inhibitor of differentiotion 3,Id3)对雌性小鼠生育能力的影响。方法:通过交配繁殖获得Id3?Gdf9 CKO小鼠,以HE染色、卵泡计数对CKO小鼠卵巢中的卵泡发育情况进行检测,以卵母细胞体外成熟实验和体外超排实验对卵母细胞的体外成熟进行检测,通过交配实验对生育力进行检测。结果:qPCR、Western blot结果显示卵母细胞中Id3被成功敲除;对3、8周小鼠卵巢进行HE染色并对各级卵泡进行计数,结果表明CKO小鼠中各级卵泡发育正常;卵母细胞体外成熟以及体外超排实验显示CKO小鼠中卵母细胞体外成熟正常;交配实验表明CKO小鼠生育能力正常。结论:在正常饲养条件下,条件性敲除Id3不影响正常卵泡的发育以及雌性小鼠的生育能力。  相似文献   

2.
目的:通过构建基因敲除小鼠模型探究锌指蛋白212(Zinc finger protein 212,Zfp212)对于雌性生育力的影响。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Zfp212基因敲除小鼠;利用实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光实验检测Zfp212蛋白表达、定位情况,并对Zfp212基因敲除效率进行验证;通过卵巢切片和HE染色、体外受精及早期胚胎培养和生育力测试实验对Zfp212基因敲除雌性小鼠的生殖表型进行分析。结果:Zfp212基因在卵母细胞和早期胚胎中高表达,且呈母源表达模式;基因敲除效率验证实验结果显示Zfp212敲除小鼠构建成功;Zfp212基因敲除雌性小鼠的卵泡发育、卵母细胞成熟、受精、植入前胚胎发育以及平均每窝产仔数量与对照组小鼠相比,差异均无统计学意义。结论:Zfp212基因对雌性小鼠的生育力建立不是必需的。  相似文献   

3.
目的 探讨他克莫司结合蛋白38(Fkbp38)在卵泡发育中的作用及其缺失导致早发性卵巢功能不全(POI)的机制。方法 采用Cre-loxp系统构建卵母细胞特异性敲除Fkbp38转基因小鼠,并应用PCR鉴定小鼠基因型,然后在蛋白水平上验证Fkbp38在卵母细胞中的敲除效果。通过HE染色在显微镜下计数敲除小鼠与同窝对照小鼠卵巢原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡及窦卵泡数量分析卵母细胞缺失Fkbp38基因对小鼠卵泡发育的影响。通过繁殖实验及ELISA实验检测小鼠繁殖能力及血清性激素水平,明确卵母细胞敲除Fkbp38基因对卵巢功能的影响。TUNEL法检测敲除小鼠与同窝对照小鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况。检测雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路下游靶蛋白磷酸化核糖体S6(PS6)活性验证Fkbp38基因对mTOR信号通路的影响。IF检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及Bcl2-Associated X(BAX)表达明确Fkbp38基因敲除对卵母细胞发育的影响。结果 卵母细胞特异性敲除Fkbp38转基因小鼠模型构建成功。敲除小鼠较对照小鼠表现出生育力下降,性激素水平紊乱,卵巢内原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡数均显著减少(P<0.05),引起POI样改变。卵母细胞特异性敲除Fkbp38基因后,mTOR信号通路激活,颗粒细胞凋亡增加,卵母细胞内BAX蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,BAX/Bcl-2蛋白比值显著升高(P<0.05)。结论 Fkbp38在卵泡发育中发挥重要作用,其缺失致POI发生的机制可能是通过激活mTOR信号通路诱导细胞凋亡而引起的。  相似文献   

4.
目的:研究PUF家族基因[Pumilio1(Pum1)和Pumilio2(Pum2)]在雌性生育能力和生殖细胞减数分裂过程中的作用?方法:在Pum1基因位置携带loxP位点的Pum2基因全敲鼠的基础上,利用生殖细胞特异性表达的Cre-Vasa-Cre介导Pum1基因条件性敲除,以此获得Pum基因双敲小鼠模型Vasa-cre:Pum1F/F Pum2-/-(VDKO)?同时,对Pum基因双敲小鼠进行生殖表型分析?结果:①交配实验结果表明,雌性VDKO小鼠的生育能力显著下降,但仍可以产生后代;②VDKO小鼠卵母细胞体外成熟过程不受影响?结论:Pum蛋白不影响小鼠卵子发生发育过程?  相似文献   

5.
目的 繁育和鉴定调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)中条件性Notch2基因敲除小鼠,为Notch2在Treg中的功能提供研究工具;为Treg与免疫性疾病的发病关系及靶向治疗提供研究手段.方法 将引进的Notch2flox/flox小鼠和Foxp3-Cre+小鼠进行饲养和杂交;将繁育得到的第一代小鼠进行相互交配,再得到第二代小鼠.通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定出具有Notch2flox/flox Foxp3-Cre+基因型的小鼠,再通过该小鼠进行繁育.通过流式细胞术分选出野生型小鼠和Notch2flox/flox Foxp3-Cre+小鼠体内的Treg,Western blot检测小鼠Treg中Foxp3、Notch2、NICD2蛋白的表达,苏木精-伊红(hemotoxylin-eosin,HE)染色观察小鼠肺脏等器官的形态学变化.结果 该方法成功构建了在Treg中敲除Notch2基因的小鼠.Western blot结果显示Notch2flox/flox Foxp3-Cre+小鼠体内的Treg中Notch2、NICD2、Foxp3蛋白表达明显下降(P<0.05),HE染色显示该小鼠肺脏等器官出现明显炎症细胞浸润.结论 本研究成功构建了Treg中条件性敲除Notch2基因的实验小鼠,为Treg与免疫性疾病的发病和靶向干预研究奠定了基础.  相似文献   

6.
不同直径山羊卵泡卵母细胞的发育特征及体外发育能力   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的研究山羊卵巢表面不同直径卵泡卵母细胞的发育特征及体外发育能力,优化山羊早期胚胎体外生产系统。方法收集繁殖期和非繁殖期山羊卵巢,采集表面直径小于1.5 mm、1.5-2.5 mm、2.5-3.5 mm和大于3.5 mm4种卵泡卵母细胞,以Hoechst33342染色检查核发育阶段;同时,利用体外培养方法观察不同直径卵泡卵母细胞的成熟、受精和早期胚胎发育能力。结果直径小于1.5 mm卵泡卵母细胞主要处于GVI期;1.5-2.5 mm卵泡卵母细胞以GVⅠ、GVⅡ和GVⅢ期为主;2.5-3.5 mm卵泡卵母细胞在GVⅡ到GVⅣ期间平均分布;大于3.5mm卵泡卵母细胞主要为GVⅢ到GVBD期。体外培养实验发现,直径小于1.5 mm卵泡卵母细胞仅有个别能完成成熟和卵裂;大于1.5 mm卵泡卵母细胞具有核成熟能力,能完成成熟和受精,但1.5-2.5 mm卵泡卵母细胞的受精卵通常阻滞于4-8细胞期;当卵泡直径大于2.5 mm时,卵母细胞才能较好地支持胚胎继续发育,其桑/囊胚的比例达到30%以上。卵泡卵母细胞的发育特征和体外发育能力与动物所处的繁殖季节无关。结论山羊卵巢上直径大于1.5 mm卵泡卵母细胞具有核成熟能力,大于2.5 mm卵泡卵母细胞能支持早期胚胎继续发育。  相似文献   

7.
目的 构建可在血液系统中条件性敲除DNMT 3B 基因小鼠并进行鉴定,为研究DNMT 3B 基因的生物学功能及其在血液肿瘤疾病的作用机制提供动物模型。方法 将引进的DNMT3Bflox/flox 小鼠与Mx1-Cre+ 小鼠进行杂交繁殖,得到基因型DNMT3Bflox/+Mx1-Cre+ 及DNMT3Bflox/+Mx1-Cre- 两种子代,再用这两种子代杂交产生子代小鼠,通过PCR 法鉴定子代小鼠的基因型;获得基因型为DNMT3Bflox/flox Mx1-Cre+ 的小鼠,通过腹腔注射pI-pC 共5 次诱导DNMT3B 敲除,然后用半定量PCR 方法鉴定DNMT 3B 基因敲除情况。结果 基因型鉴定确认在13 只子鼠中有2 只为DNMT3Bflox/flox Mx1-Cre+,经pI-pC 腹腔注射后,DNMT 3B 基因通过Cre/loxP 系统被成功敲除。结论 该方法成功构建可以在血液系统条件性敲除DNMT 3B 基因的小鼠,并进行敲除后鉴定。  相似文献   

8.
目的:利用医学研究常用ICR品系小鼠,在建立窦状卵泡体外培养体系的基础上,研究黄体生成素(luteinizing hormone,LH)与表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导卵母细胞体外成熟及排卵的作用。方法:体外剥离得到大的窦状卵泡用于培养并建立适宜于研究诱导卵母细胞成熟及排卵的窦状卵泡体外培养模型,通过向培养液中添加LH和EGF诱导卵母细胞体外成熟与排卵。结果:成功构建了ICR小鼠窦状卵泡体外培养模型,发现LH或EGF单独处理均可诱导卵泡卵母细胞成熟和卵丘扩展,而两者共同作用才能够诱导卵泡体外排卵。结论:LH/EGF促进ICR小鼠窦状卵泡卵母细胞体外成熟与排卵。  相似文献   

9.
通过观察雄激素对小鼠卵母细胞生长分化因子 9(growth differentiation factor 9,GDF 9)表达的影响,研究GDF 9参与卵泡生长发育及其表达调控机制,探讨GDF 9与多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)的关系。方法:以性成熟昆明小鼠为研究模型,体内实验分为实验组(注射丙酸睾丸酮)和对照组(注射等体积的生理盐水),每组各20只小鼠,采用原位杂交法检测卵巢组织GDF 9 mRNA的表达水平。体外实验:胶原酶消化加机械法分离性成熟昆明小鼠卵泡进行体外培养,实验组培养液中加睾丸酮,对照组不加睾丸酮,72?h后收集卵泡,免疫组化检测卵母细胞GDF 9的表达水平。结果:体内实验:实验组较对照组卵巢组织GDF 9 mRNA表达水平降低, 差异有统计学意义(P<0.05);体外实验:实验组卵母细胞GDF 9蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:雄激素减弱卵母细胞GDF 9 mRNA和蛋白的表达强度;表达强度降低的GDF 9可能与PCOS卵泡发育停滞有关  相似文献   

10.
小鼠体外发育卵母细胞生长分化因子-9基因表达   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的体外培养小鼠窦前卵泡得到MⅡ期卵母细胞,比较发育过程中体外与体内卵母细胞生长分化因子-9(GDF-9)的基因表达量,初步探讨GDF-9的表达对卵母细胞体外发育成熟的影响。方法出生D10雌性昆明小鼠50只,机械方法分离窦前卵泡,体外培养12d。分别于体外培养D2、D4、D6、D8、D10、D12分离卵母细胞作为体外发育组;同窝雌性小鼠出生后D12、D14、D16、D18、D20、D22卵母细胞作为体内发育组;使用半定量逆转录多聚酶链反应技术分别检测两组单个卵母细胞GDF-9基因表达量。应用计算机全自动图像分析仪测量PCR产物电泳条带的几何平均光密度,基因表达量用相对光密度表示:检测基因光密度/管家基因(β-actin)光密度。结果培养第12天观察306个卵泡,274个卵泡成活(89.5%),143个窦腔形成(51.8%);第13天观察,155个卵母细胞成熟(56.6%)。体外发育D2、D4、D6、D8、D10、D12卵母细胞GDF-9基因表达相对光密度分别是0.83±0.08、0.52±0.09、0.45±0.13、0.49±0.09、0.49±0.09、0.68±0.08;体内发育D12、D14、D16、D18、D20、D22卵母细胞GDF-9基因表达相对光密度分别是0.64±0.35、0.48±0.10、0.52±0.10、0.66±0.08、0.72±0.09、0.91±0.11;体外发育D8 ̄12卵母细胞GDF-9表达量明显低于同期体内发育卵母细胞(P<0.05)。结论小鼠窦前卵泡体外培养后可以生长发育,部分得到成熟的卵母细胞。小鼠卵母细胞GDF-9基因表达量随发育时间的改变发生变化;体外发育D8 ̄12卵母细胞GDF-9基因表达量低于同期体内发育的卵母细胞可能是其发育潜能较低的原因之一。  相似文献   

11.
目的 探讨支气管镜结合全身联合用药治疗儿童难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)的临床疗效。方法 回顾性分析我院2018年3月至2020年3月的RMPP患儿临床资料,共205例,分为两组,其中气管镜组114例与对照组91例(未行支气管镜)。比较两组患儿一般资料、影像学检查、发热天数、住院天数、肺外并发症、实验室检查结果及全身联合用药使用情况。结果 ①气管镜检查治疗后患儿咳嗽发热等临床症状明显改善,住院天数(t= -2.514,P=0.013)及退热天数(t= -4.774,P=0.000)较对照组缩短。② 两组患者均常规使用大环内酯类抗生素,气管镜组较对照组联合糖皮质激素及丙种球蛋白使用率较对照组低[46(40.4)vs58(63.7)](X2=11.072 a ,P=0.001)。与对照组比较,气管镜组联合使用糖皮质激素减少(X2=10.454a,P=0.015)、联合使用免疫球蛋白减少(X2=10.395a,P=0.001)。 ③ 治疗后复查生化指标,气管镜组较对照组CRP、LDH 、IgE检查指标均下降,CRP(t= -1.901,P=0.036)、LDH(t= -0.473,P=0.025)、IgE(t= -1.400,P=0.042)。结论 支气管镜对于治疗难治性支原体肺炎治疗起关键作用,支气管镜联合糖皮质激素及丙种球蛋白治疗比以往单一依靠药物治疗疗效肯定,能够促进疾病康复。  相似文献   

12.
<正>胸腔镜技术由于创伤小、恢复快成为纵膈肿瘤切除术常规术式。单肺通气(one-lung venti-lation,OLV)有效实现肺隔离,已在胸腔镜中广泛使用。OLV时,萎陷侧肺因炎症因子释放、淋巴循环中断及缺血再灌注等造成肺损伤[1];而高氧流量及过度灌注也可能使对侧肺发生肺不张[2-3]。虽然在关闭胸腔前常规进行肺复张,但术后肺不张仍不能完全避免[4]。肺不张形成是术后低氧血症的主要原因,  相似文献   

13.
<正>脑性瘫痪简称脑瘫,全球患病率0.15%~0.4%[1]。痉挛型脑瘫是所有脑瘫分型中占比最高的一型。姿势异常及运动功能障碍是痉挛型脑瘫特征性表现。目标导向性训练为患者设定目标导向式任务,重复训练以达到目标,当目标实现后,设定新的更高的目标,继而进入一个新的目标训练过程,从而使运动动机强度维持在较高的水平上,充分调动积极主动性[2]。  相似文献   

14.
背景 高血压是动脉粥样硬化性心血管疾病最重要的危险因素。合理的药物治疗、健康的生活方式、血压监测和随访管理是改善血压控制效果的有效措施。其中,随访管理对提高药物和非药物治疗依从性具有重要价值。但合适的随访频次以及随访频次是否与血压控制效果直接相关还缺少循证医学证据。目的 了解服药治疗的社区高血压患者门诊随访现状及其与血压控制的相关关系。方法 2019年1月至12月,在太阳宫社区卫生服务中心全科门诊连续纳入服药治疗的高血压患者。通过问卷调查和现场测量方法收集患者的相关信息。结果 共收集符合条件的高血压患者855例,女性534例(60.3%)。平均年龄68.2 ±8.5岁,65岁以上705例(79.7%)。采用两种降压药联合治疗的比例为65.8%(582/855)。门诊随访超过4次的比例为90.1% (767/855)。收缩压和舒张压水平随着门诊随访频次的增加而显著降低,和门诊随访1-3次/年的患者相比,门诊随访超过12次者收缩压降低8.3mmHg,舒张压降低5.3mmHg(P<0.001)。单因素logistic回归分析结果显示,门诊随访频次与血压控制效果相关。与年内门诊随访1-3次者相比,随访7-12次者比值比(OR)为1.68 [95%可信限(CI):1.14-2.45],随访超过12次者OR=2.26(95%CI:1.39-3.68);调整年龄、性别、高血压病程、缺血性心血管疾病以及糖尿病病史、超重和肥胖、现在吸烟、现在饮酒、体力活动的影响后,仍显示随访6次以上门诊随访与血压控制改善相关,且联系强度没有明显变化;进一步调整是否联合应用降压药以及参加健康教育次数后,和参考层相比,门诊随访7-12次与血压控制的改善无相关关系,随访12次以上与血压控制改善相关,OR=1.82(95%CI:1.10-3.03)。结论 90%以上采取降压治疗的社区高血压患者年内门诊随访4次以上;门诊随访6次以上者有益于血压控制,但降压药物联合应用对血压控制的效果更显著。  相似文献   

15.
目的 探讨前列腺组织良恶性病变的T2 mapping与T2* mapping定量值的差异,为前列腺良恶性病变的诊断与鉴别诊断提供依据。方法 收集50例前列腺病变患者的临床资料,其中前列腺癌19例,良性前列腺病变31例,均具有手术病理或超声引导下穿刺活检病理。通过常规MRI检查及T2 mapping与T2* mapping检查,测量良恶性病灶的T2 mapping与T2* mapping定量值,分析两者之间的差异,绘制ROC曲线,确定最佳诊断临界值及其敏感性和特异性,评价诊断效能。结果 前列腺良恶性病变的T2 mapping与T2* mapping定量值差异具有统计学意义(P<0.01),其中良恶性病变的T2 mapping与T2* mapping定量值分别为(93.15±11.17)ms vs(43.21±15.39)ms和(74.50±6.93)ms vs(21.53±6.81)ms;T2mapping和T2* mapping定量值诊断的敏感性和特异性,最佳截断值,AUC,分别为68.4% vs 94.7%,96.8% vs 74.2%,77.49 ms vs 31.66 ms,0.91 vs 0.88。结论 T2 mapping与T2* mapping定量值有助于辨别前列腺良恶性的病变,是前列腺磁共振检查序列的良好补充。  相似文献   

16.
以氟化钇(YF3)为基质材料,采用共沉淀法合成了YF3:Yb3+/Er3+/Tm3+上转换发光材料。采用X射线衍射仪(XRD)、热重差热分析仪(DTA)和荧光光谱分析对材料的物相结构、烧结温度和发光性质进行了研究。结果表明,掺入稀土离子没有改变YF3晶体结构,在980 nm近红外波长激发下,出现了多个波段的发光现象,Yb3+、Er3+、Tm3+不同的掺杂量分别对应于材料不同的发光规律。本文还探讨了上转换发光机制,确定了该体系荧光粉的最佳烧结温度。  相似文献   

17.
MicroRNA(miRNA)是一类长度为20~25个核苷酸的内源性非编码RNA,主要在转录后和翻译水平上调控基因表达。许多研究表明,miRNA在生精过程中发挥重要的调控作用,miRNA的异常影响精子形成的多个阶段和不同的细胞类型,导致生精障碍,引起男性不育。现将近年来miRNA在精子发生和生精障碍领域的研究文献作一综述。并介绍miRNA在精子发生中的作用及其与生精障碍的关系,以及miRNA在生精障碍性疾病领域的诊断和治疗潜力。  相似文献   

18.
天津地区国人CETP第15外显子突变(Asp^442→Gly)频率   总被引:5,自引:2,他引:3  
目的:检测胆固醇酯转移蛋白第15外显子突变(Asp^442→Gly),为探讨CETP在AS发生、发展中的作用提供基础数据和参考资料。方法:利用特异设计的错配碱基引物,在PCR扩增获得的人CETP第15外显子突变片段人工导入了-MspI酶切位点,根据酶切片段的电泳图谱检测人CETPAsp^442→Gly突变。结果:131例正常成年人中发现4例杂合子突变,突变率为3.05%,首次证实Asp^442→G  相似文献   

19.
目的 探讨经皮放射性碘125粒子(125I)植入联合化疗在中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)治疗中的应用及对CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的影响。方法 选取2017年1月-2019年1月咸阳市中心医院收治的120例中晚期NSCLC患者,根据治疗方案分为研究组78例(经皮125I植入联合化疗)和对照组42例(同步放化疗)。统计两组基线资料,并记录粒子植入情况及并发症情况,治疗6个月后评估两组临床疗效。比较两组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+占比及CD4+/CD8+治疗前后的变化。统计治疗期间不良反应发生情况。结果 两组性别、年龄、病灶部位、肿瘤直径、病理类型、临床分期及治疗前卡氏评分比较,差异无统计学意义(P >0.05)。研究组91.03%(71/78)患者植入粒子的分布符合术前模拟剂量分布;术后气胸30.77%(24/78),肺内渗血28.21%(22/78),发热19.23%(15/78),粒子移位2.56%(2/78),围术期均无死亡病例。两组临床疗效比较,差异有统计学意义(P <0.05),研究组有效率高于对照组。两组治疗后外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及治疗前后的差值比较,差异有统计学意义(P <0.05),研究组高于对照组;两组治疗后外周血CD8+及治疗前后的差值比较,差异无统计学意义(P >0.05)。两组不良反应(胃肠道反应、粒细胞减少及放射性食管炎发生率)比较,差异无统计学意义(P >0.05);两组放射性肺炎发生率比较,差异有统计学意义(P <0.05),研究组低于对照组。结论 经皮125I植入联合化疗可有效治疗中晚期NSCLC,可明显改善患者免疫功能,减少不良反应。  相似文献   

20.
目的:比较两种不同的心脏超声造影技术对中心静脉导管尖端位置判断的临床诊断价值。 方法:选取重症医学科收治的107例中心静脉置管患者,分别应用心脏超声微泡造影技术和快速灌注湍流造影技术来判断中心静脉导管尖端的位置,并以床旁胸片为标准来进一步分析此两种超声造影技术对于中心静脉导管尖端位置判断的准确性。 结果:应用心脏超声微泡造影技术和快速灌注湍流造影技术判断中心静脉导管尖端位置仅用时分别为6.2mins(95%CI,5.8-6.7mins)和5.3mins(95%CI,4.9-5.7mins),均明显低于胸片判断中心静脉导管位置的所需耗时76.2mins(95%CI,69.2-83.2mins)。以床旁胸片作为判断导管位置的金标准,应用心脏超声微泡造影和快速灌注湍流造影这两种诊断方法来的判断结果一致,其敏感性均高达100%。(95%CI,95.2%-100%),特异性均为81.2%(95%CI,47.8%-96.8%)。 结论:相比床旁胸片而言,心脏超声微泡造影技术和快速灌注湍流造影技术均可更加快速的判断中心静脉导管的位置,从而有助于危重患者的救治。尤其是心脏超声快速灌注湍流造影技术无需注射造影剂,更值得临床进一步推广。  相似文献   

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