芪加真武汤联合糖皮质激素体外对SLE患者外周血淋巴细胞凋亡及Fas、FasL表达的影响

目的 探讨中药芪加真武汤联合糖皮质激素对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞(PBL)凋亡及Fas、FasL表达的影响。方法 采用血清药理学方法 ,制取芪加真武汤含药兔血清。运用流式细胞仪检测19例SLE患者外周血淋巴细胞在不同浓度的芪加真武汤的含药血清(20%、10%、5%)、地塞米松(0.001mol/L)及两者联合刺激下细胞凋亡和Fas、FasL表达的变化。结果 ①SLE患者PBL凋亡率明显高于正常组(P<0.001),Fas表达明显多于正常组(P<0.01),FasL表达与正常组差异不明显(P>0.05)。②10%、20%含药血清显著减少SLE患者PBL的凋亡率(P<0.01),显著降低Fas表达(P<0.01),升高FasL的阳性细胞率(P<0.05);③地塞米松可增高SLE患者PBL的凋亡率(P<0.05),但对Fas、FasL的表达无影响(P>0.05);④含药血清联合地塞米松显著减少PBL凋亡率(P<0.01),降低Fas表达(P<0.05),明显升高FasL的阳性细胞率(P<0.01)。结论 SLE患者PBL存在凋亡及凋亡相关蛋白表达的紊乱,中药芪加真武汤在体外可纠正其紊乱,缓解由地塞米松引起的PBL过度凋亡。     

系统性红斑狼疮外周血单一核细胞Fas和FasL mRNA的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞Fas及其相应配体FasL的表达水平及在SLE发病中的作用。方法：应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测34例活动期SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞（PBMC）中Fas和FasL mRNA的表达水平。结果：活动期SLE患者PBMC中FasL的阳性检出率为91.18%,明显高于正常对照组（63.30%),差异非常显著（P＜0.01);Fas的阳性检出率与对照组相比无明显差异（P＞0.05)。活动期SLE患者PBMC中Fas和FasL mRNA的平均表达水平均高于正常对照组,差异显著（P＜0.05)。结论：Fas和FasL的高水平表达可能与SLE患者外周血T淋巴细胞活化、凋亡增加有关,Fas介导的淋巴细胞凋亡可能参与了SLE的发病过程。平表达可能与SLE患者外周血T淋巴细胞活化、凋亡增加有关,Fas介导的淋巴细胞凋亡可能参与了SLE的发病过程。     

白癜风患者外周血淋巴细胞Fas及Fas配体和可溶性Fas的研究

目的探讨Fas抗原与Fas配体(FasL)及可溶性Fas(sFas)在白癜风发病中的作用。方法应用流式细胞计数仪对白癜风患者外周血淋巴细胞(PBLC)上Fas和FasL的表达情况进行了检测,用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测患者血清中sFas的含量。结果寻常型白癜风患者PBLC上Fas的表达(43.45%)较正常人(58.30%)显著降低(P<0.01),寻常型白癜风患者PBLC上FasL的表达(58.40%)亦较正常人(64.65%)显著降低(P<0.05);寻常型白癜风患者血清中sFas水平(3.95±3.23μg/L)较正常人(1.51±0.71μg/L)明显增高(P<0.01),散发型白癜风患者进展期血清sFas水平(5.55±4.82μg/L)明显高于稳定期(2.94±2.29μg/L)(P<0.05),治疗后血清sFas水平较治疗前明显下降(P<0.001)。结论白癜风患者PBLC上Fas/FasL及循环sFas的表达均有异常,淋巴细胞Fas/FasL异常表达及Fas介导的细胞凋亡机制可能与白癜风的免疫异常及发病有关。     

系统性红斑狼疮患者bcl-2及Fas、Fas配体表达与淋巴细胞凋亡的关系

目的：对SLE患者外周血淋巴细胞凋亡率以及凋亡凋控基因表达蛋白bcl-2、Fas抗原和Fas配体进行分析,以进一步探讨其在SLE发病中的作用及相互关系。方法：应用流式细胞仪检测。结果：SLE患者外周血淋巴细胞凋亡率明显视于正常人（P＜0.01）和其他疾病患者（P＜0.05）;bcl-2抗原表达显著低于正常人和其他疾病患者（P＜0.01）,而Fas抗原、Fas配体表达三组间无明显差异。结论：SLE患者体内淋巴细胞凋亡的明显增加可能与其发病有关,而bcl-2对淋巴细胞凋亡抑制作用的减弱可能较Fas／Fas配体诱导促进淋巴细胞的凋亡更为重要。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞Caspase-1和Caspase-3mRNA的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞Caspase-1和Caspase-3的表达水平及其与淋巴细胞凋亡的关系。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测34例活动期SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中Caspase-1和Caspase-3mRNA的表达水平。结果 活动期SLE患者PBMC中Caspase-1mRNA的平均表达水平(1.20±0.33)明显高于正常人对照组(0.79±0.25),差异有非常显着性(P<0.01);Caspase-3mRNA的平均表达水平(0.87±0.16)高于正常人对照组(0.66±0.10),差异有显着性(P<0.05).活动期SLE患者PBMC中Caspase-1和Cas-pase-3的阳性表达率与正常人对照组相比差异无显着性(P>0.05).结论 活动期SLE患者外周血淋巴细胞Caspase-1和Caspase-3mRNA表达水平增高,Caspase级联反应可能参与了SLE患者淋巴细胞的凋亡过程。     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞早期凋亡的初步研究

目的 通过对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞(PBL)早期凋亡率测定,探讨其在SLE发病中的作用及相关性。方法 应用最新的Annexin Ⅴ试剂盒及流式细胞仪对SLE患者及年龄、性别相匹配的正常人PBL进行早期凋亡细胞的检测;并运用免疫印迹法检测SLE患者组自身抗体谱及应用免疫浊度法检测补体C3含量。结果 SLE活动期患者PBL早期凋亡率(13.46±4.13)明显高于稳定期患者(5.29±2.74)及正常人对照(5.14±2.33);稳定期患者与正常人对照差异无显著性(P>0.05);活动期患者中初发病组与已用皮质类固醇或免疫抑制剂治疗组差异无显著性(P>0.05)。SLE患者中,能测定出两种以上自身抗体阳性者凋亡率(13.44±4.40)明显高于至多有一种自身抗体阳性者凋亡率(6.72±3.86);且活动期患者PBL凋亡率与补体C3含量呈高度负相关(r=-0.86,P<0.01)。结论 SLE患者PBL凋亡率明显高于正常人,可能通过释放过量自身抗原的方式诱导一系列自身抗体的产生,从而参与SLE的发生。     

CD70 mRNA及其蛋白在SLE患者T淋巴细胞中的表达

目的通过研究SLE患者T淋巴细胞CD70mRNA及其蛋白的表达,探讨CD70在SLE发病机理中的作用。方法用定量RT-PCR方法测定15例活动期、15例非活动期SLE患者和15例正常人对照组外周血T淋巴细胞CD70mRNA转录水平。用流式细胞仪检测各组的CD70+CD4+T淋巴细胞阳性率。结果活动期、非活动期SLE患者及正常对照组T淋巴细胞CD70mRNA转录水平分别为(0.82±0.12),(0.73±0.11)和(0.45±0.09),活动期、非活动期SLE患者明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01),且活动期显著高于非活动期SLE患者,差异有统计学意义(P<0.01)。活动期、非活动期SLE患者及正常人外周血CD4+CD70+T淋巴细胞阳性率分别为(80.30±11.04)%,(66.80±3.98)%和(12.48±3.45)%,活动期、非活动期SLE患者明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01),且活动期显著高于非活动期SLE患者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CD70的过度表达在SLE的发生发展中起着重要的作用,并且CD70过度表达可以作为SLE疾病活动的一个指标。     

芪加真武汤对免疫抑制小鼠淋巴细胞转化及血清白介素2的影响

目的研究芪加真武汤颗粒对免疫抑制小鼠的作用,旨在探讨其作用机制,为临床使用提供实验依据。方法将实验动物(昆明种小鼠)随机分为4组,每组10只。实验组:环磷酰胺(CTX)+芪加真武汤。阳性对照组:CTX+胸腺肽。病理模型组:CTX+生理盐水(NS)。正常对照组:NS+NS。实验组小鼠用芪加真武汤灌胃4周。第3周末前三组用环磷酰胺150 mg/kg一次性腹腔注射,造成免疫抑制模型。第4周断头取血,应用双抗夹心ELISA法检测四组小鼠血清白细胞介素-2(IL-2)水平。用3H-TdR渗入法检测小鼠脾脏淋巴细胞转化率。结果与正常对照组比较,病理模型组IL-2水平降低(P<0.01),淋巴细胞转化率及血清溶血素均降低(P<0.05)。与病理模型组比较,实验组显著提高IL-2(P<0.01)、淋巴细胞转化率(P<0.01)及血清溶血素水平(P<0.05)。与阳性对照组比较,实验组IL-2、淋巴细胞转化率无统计学意义(P>0.05)。结论 芪加真武汤颗粒能显著提高免疫抑制小鼠淋巴细胞转化率及血清IL-2水平。     

二期梅毒患者外周血淋巴细胞凋亡及其Fas、Bcl-2表达的研究

目的 检测二期梅毒患者外周血淋巴细胞(PBLC)凋亡及其Fas、Bcl-2的表达,探讨二期梅毒患者免疫功能异常与淋巴细胞凋亡的关系。方法 采用流式细胞仪检测33例二期梅毒患者和30例正常人PBLC细胞凋亡及其Fas、Bcl-2的表达。结果 梅毒患者PBLC及CD4⁺细胞Fas表达明显高于对照组(P<0.01),而Bcl-2表达明显低于对照组(P<0.01)。CD8⁺、CD19⁺细胞Fas、Bcl-2表达两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。梅毒患者PBLC及CD4⁺细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01),CD8⁺及CD19⁺细胞凋亡率两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。梅毒患者PBLC及CD4⁺细胞凋亡率分别与其Fas表达呈显著正相关(r=0.68,P<0.01;r=0.71,P<0.01),但与Bcl-2表达呈显著负相关(r=-0.82,P<0.01;r=-0.74,P<0.01)。结论 二期梅毒患者细胞免疫功能异常可能与淋巴细胞凋亡过度有关,而淋巴细胞凋亡过度与Fas、Bcl-2表达异常有关。     

c-FLIP在SLE患者外周血B细胞的表达及与临床特征的相关性研究

目的 探讨SLE患者外周血B细胞凋亡抑制蛋白c-FLIP的表达及其与临床特征的相关性。方法 53例SLE患者和30例正常人对照组,采用流式细胞术检测外周血B细胞c-FLIP表达阳性率,采用ELISA方法检测血清中IL-4和IL-10的水平。结果 活动期SLE患者（18例）外周血B细胞内c-FLIP表达（3.11% ± 0.70%）明显高于非活动期患者（35例）（0.78% ± 0.28%）和正常人对照组（0.68% ± 0.12%）（P均 < 0.05）,而非活动期组和正常人对照组比较,差异无统计学意义（t = 1.56,P > 0.05）。SLE患者外周血B细胞c-FLIP的表达与SLEDAI、ESR、C反应蛋白、ANA 滴度均呈正相关（P均 < 0.05）;伴有WBC减少的36例SLE患者中c-FLIP的表达与WBC的数目呈负相关（P < 0.01）。伴有狼疮肾炎的23例SLE患者的外周血B细胞内c-FLIP的表达（3.04% ± 1.09%）明显高于30例不伴狼疮肾炎者（1.76% ± 1.09%）（t = 4.23,P < 0.05）。SLE患者c-FLIP的表达与血清中IL-4和IL-10的水平均呈正相关（P均 < 0.01）。结论 活动期SLE患者外周血B细胞c-FLIP高表达,且与SLE病情严重程度正相关。同时其表达水平与SLE患者血清中IL-4和IL-10水平呈正相关。     

系统性红斑狼疮外周血单个核细胞Fas FasL及bcl-2抗原的表达

目的探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）免疫功能失调与细胞凋亡的关系。方法应用免疫细胞化学技术对ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）上某些凋亡调节分子的表达进行了检测。结果ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ上Ｆａｓ及ＦａｓＬ抗原均高表达,ｂｃｌ ２蛋白正常表达。结论ＳＬＥ患者体内存在较多活化的淋巴细胞,Ｆａｓ和ＦａｓＬ抗原表达异常促进了ＳＬＥ的ＰＢＭＣ凋亡。     

寻常型进展期白癜风患者外周血T淋巴细胞Fas和FasL的表达

目的：检测寻常型进展期白癜风患者外周血T淋巴细胞Fas和FasL的表达。方法：随机采集30例寻常型进展期白癜风患者（实验组）外周血3mL,分离T淋巴细胞后进行细胞涂片,使用免疫组化和原位杂交方法检测Fas和FasL蛋白和FasLmRNA水平的表达。并以30例静止期患者（对照组A）和20例健康志愿者（对照组B）作对照。结果：3组间Fas的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。与两组对照组相比,实验组FasL的表达明显增加（P〈0．001）。与对照组B相比,对照组A FasL的表达显著增加（P〈0．001）。结论：寻常型进展期白癜风患者外周血T淋巴细胞FasL的表达显著增加。     

Fas and Fas ligand: expression and soluble circulating levels in cutaneous malignant melanoma

BACKGROUND: The Fas/Fas ligand (FasL) system plays a key part in maintaining tissue homeostasis via the induction of apoptosis. Functional impairment of the Fas/FasL system is associated with the development and progression of malignancies. Malignant melanoma cells and tissues have been shown to express Fas and FasL to variable extents. OBJECTIVES: To demonstrate the expression and the presence of soluble circulating levels of Fas and FasL in cutaneous malignant melanoma. METHODS: Biopsy specimens of 42 patients with primary melanoma and nine patients with cutaneous metastatic melanoma were obtained for immunohistochemistry studies. All patients were followed for at least 5 years. In another 46 patients with melanoma (15 stage I and II; 11 stage III; and 20 stage IV) and in 10 healthy volunteer control subjects circulating levels of Fas and FasL were analysed with commercial ELISA tests. RESULTS: FasL was strongly positive in 38 (90%) of 42 primary melanomas; two of nine metastases did not express FasL. In the primary melanomas Fas was strongly or intensely positive in 17 (40%), moderately or weakly positive in 10 (24%) and negative in 15 (36%) of 42 melanomas. Soluble Fas plasma levels in patients with metastatic malignant melanoma were significantly elevated over those in the control group (P = 0.01). CONCLUSIONS: The absence of Fas in most of the thick melanomas that did not metastasize, and in insitu melanomas, might be taken as a theoretical factor for a good prognosis. Soluble Fas is increased in patients with metastatic melanoma and might be associated with poor prognosis.     

性激素对SLE患者外周血单一核细胞凋亡的影响及其意义

研究脱氢表雄酮(DHEA)和(或)雌二醇(E2)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)凋亡的影响。应用吖啶橙(AO)染色法检测SLE患者、健康献血员PBMC与生理、病理浓度的DHEA和(或)E2培养48h的凋亡百分率。SLE患者PBMC凋亡率高于健康献血员(P<0.01)。不论生理或者病理浓度的E2对SLE患者、健康献血员PBMC凋亡无影响(P>0.05)。生理浓度的DHEA及DHEA+E2对健康献血员PBMC凋亡无影响(P>0.05),但可显著抑制SLE患者PBMC凋亡(P<0.05);病理浓度的DHEA及DHEA+E2可显著促进SLE患者、健康献血员PBMC凋亡(P<0.05)。DHEA及DHEA+E2对PBMC凋亡的影响,两者间无显著差异(P>0.05)。结果提示,DHEA对SLE患者PBMC凋亡起重要作用;DHEA浓度降低可能导致凋亡加快。     

CGRP对SLE患者外周血单一核细胞凋亡的影响

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)凋亡的影响。方法应用流式细胞仪膜联蛋白(Annexin)V/碘化丙啶(prop id ine iod ide,PI)染色法检测SLE患者、健康献血员PBMC与不同浓度的CGRP和(或)CGRP的受体拮抗剂CGRP8-37培养48 h的凋亡百分率。结果SLE患者PBMC凋亡率显著高于健康献血员(P<0.001)。不同浓度(0.5×10-8~1.5×10-8mol/L)的CGRP对健康献血员PBMC凋亡无影响(P>0.05);但可以不同程度的抑制SLE患者PBMC的凋亡(P<0.05~0.001);当CGRP浓度超过1.0×10-8mol/L时,其对SLE患者PBMC凋亡的抑制效应进入平台,增加CGRP浓度并不能进一步显著抑制SLE患者PBMC地凋亡。无论何种浓度的CGRP均不能使SLE患者PBMC的凋亡率降低至正常范围内。CGRP8-37本身对PBMC凋亡无影响(P>0.05),但是可以拮抗CGRP对SLE患者PBMC凋亡的影响。结论CGRP通过受体影响PBMC地凋亡;CGRP浓度地降低在某种程度上可导致SLE患者PBMC地凋亡加快。     

卡介菌多糖核酸联合中药对白癜风患者T细胞亚群及Fas/FasL系统表达的调节

【摘要】 目的 探讨卡介菌多糖核酸（BCG-PSN）联合中药白癜风颗粒治疗白癜风临床疗效及对免疫的调节作用。 方法 流式细胞仪和ELISA法检测BCG-PSN联合白癜风颗粒治疗白癜风前后T细胞亚群及外周血淋巴细胞Fas及FasL的表达水平,并与BCG-PSN及白癜风颗粒单一治疗对照组进行比较。结果 BCG-PSN联合白癜风颗粒治疗组总有效率达82.86%,明显高于BCG-PSN对照组的40.63%（P ＜ 0.01）。各组治疗前外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+均低于健康对照组（P ＜ 0.01）, CD4+/CD8+比值升高（P ＜ 0.01）, Fas表达明显降低（P ＜ 0.01）。治疗后CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+较治疗前升高 （P ＜ 0.05）,CD4+/CD8+比值下降（P ＜ 0.05）,Fas明显上升（P ＜ 0.01）。结论 BCG-PSN可通过逆转外周血淋巴细胞的Fas/FasL表达异常,诱导淋巴细胞的正常凋亡,与中药合用起协同作用。