中药"参阳"方调节舌鳞癌SD大鼠血清Th1/Th2型细胞因子的实验研究

目的观察"参阳"方对舌鳞癌SD大鼠血清Th1/Th2型细胞因子表达水平的影响,并探讨其可能的作用机制.方法80只SD大鼠采用0.002％4-硝基喹啉-1-氧化物自然饮水喂养36周,诱发建立舌鳞癌动物模型61只,随机分为4组"参阳"方A组、B组、阳性对照(刺五加)组和阴性对照组.药物干预15d,于服药前后制备外周静脉血血清,酶联免疫吸附法测定Th1型细胞因子IFN-恪L-2、TNF-岷蚑h2型细胞因子IL-4、IL-10的含量,自身前后对照,配对t检验进行统计学分析.结果"参阳"方可显著增加血清中Th1型细胞因子TNF-岷虸L-2的含量(P＜0.05),对血清中IFN-愕暮恳灿幸欢ǖ脑黾幼饔?同时能显著降低Th2型细胞因子IL-4和IL-10的表达(P＜0.05).结论逆转Th1向Th2漂移,从而增强机体的细胞免疫功能,可能是"参阳"方发挥抗癌作用的主要效应机制之一.     

口腔扁平苔藓患者Th1／Th2失衡表达的研究

目的：观察口腔扁平苔藓（oral liclaen planus,OLP）患者外周血中Th1、Th2型细胞转录因子T-het和GATA-3以及Thl、Th2型细胞因子的表达,进一步探索OLP的发病机制。方法：通过密度梯度离心法分离20例充血糜烂型,16例光滑型OLP病例和19例正常对照组人群的外周血单个核细胞,逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测各组外周血单个核细胞中T—betmRNA和GATA-3 mRNA的表达;ELISA法检测各组血清中干扰素-γ（interferon gamma,IFN-1）和白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）的表达。结果：充血糜烂型和光滑型OLP患者中T—betmRNA、IFN-γ的表达均低于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;而充血糜烂型和光滑型OEP患者中GATA-3 mRNA、IL-4的表达均高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。T—bet mRNA和GATA-3 mRNA的表达在充血糜烂型及光滑型OLP患者组间的差异有统计学意义（P〈0．01）;而IFN-γ和IL-4的表达在充血糜烂型及光滑型OLP患者组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：Th1／Th2失衡表达与OLP发病机制密切相关,为临床治疗OLP提供参考。     

Th2极化对牙周炎保护作用的实验研究

目的:探讨稳定机体免疫反应对牙周组织病变的免疫调节作用,为牙周炎的免疫防治提供实验依据.方法:选用36 只SPF级12周龄雄性KM小鼠,随机分成3 组:正常对照组;牙周炎组,采用丝线结扎牙颈部并接种牙周炎患者病变区域龈缘下细菌诱导实验性牙周炎模型;Th2极化组,同上法复制实验性牙周炎模型,于术后第0 d感染低剂量旋毛虫.正常对照组及各实验组分别于术后第1、4、8、12 周分批处死动物,进行组织学观察和血清细胞因子IFN-γ、IL-4检测.结果:牙周炎组的牙周组织表现为中等程度的炎症破坏,而Th2极化组的牙周破坏程度较牙周炎组轻.牙周炎组血清IFN-γ含量较Th2极化组明显升高(P<0.01); Th2极化组IL-4含量较牙周炎组明显升高(P<0.01).结论:牙周炎的发病过程与Th1/Th2免疫应答平衡的失调有密切关系,表现为Th1细胞功能相对亢进,Th2细胞功能不足;Th2型细胞因子可有效减轻病变程度,对牙周组织具有保护作用.     

口腔鳞癌患者Th1/Th2细胞亚群漂移的检测

目的:检测口腔鳞癌患者外周血中Th1与Th2细胞亚群的相对比例,并探讨其与肿瘤进展的关系。方法:采集128例口腔鳞癌患者和120例正常人的外周血,荧光抗体标记CD3、CD8、IFN-γ和IL-4。流式细胞仪三色荧光分析检测各细胞亚群的比例,采用方差分析进行统计学处理。结果:正常人外周血Th1细胞亚群(CD3 CD8-IFN-γ )比例为21.09%±7.62%,Th2细胞亚群(CD3 CD8-IL-4 )比例为4.40%±2.88%。口腔鳞癌患者Th1细胞亚群(CD3 CD8-IFN-γ )比例为10.80%±5.98%,Th2细胞亚群(CD3 CD8-IL-4 )比例为8.44%±5.67%。随着肿瘤的进展,口腔鳞癌患者Th1细胞亚群百分比逐渐下降,而Th2型细胞亚群百分比呈上升趋势。结论:口腔鳞癌患者外周血Th1细胞亚群向Th2细胞亚群漂移,且其程度与肿瘤进展密切相关。     

大鼠舌鳞状细胞癌外周血淋巴细胞亚群的变化及其与肿瘤的关系

本研究通过建立舌鳞癌SD大鼠动物模型,采用双色荧光抗体标记流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群,探讨舌鳞癌SD大鼠的免疫功能状况及其与病变进展的关系,以期为临床上舌鳞癌患者的免疫治疗提供理论依据。一、材料与方法1.舌鳞癌动物模型的建立与分组:150天龄雌性SD大鼠100只随机分为4NQO诱导实验组80只(0.002%4NQO溶液避光饮水喂养)和无肿瘤对照组20只(普通自来水喂养)。36周末,对存活的81只大鼠在麻醉状态下检查口腔并自股静脉采集外周静脉血1.0ml,根据舌根病灶的大小分为4组:舌根黏膜正常组20只,舌根黏膜粗糙组24只,舌根肿块直径<5mm组…     

口腔扁平苔藓患者Th1/Th2的表达及临床意义的研究

目的 观察Th1型和Th2型细胞因子在口腔扁平苔藓(OLP)外周血中的表达。方法 密度梯度离心法分离20例充血糜烂型,16例光滑型OLP病例和19例正常对照组人群的外周血单个核细胞,逆转录-聚合酶链反应法检测各组外周血单个核细胞中IFN-gamma mRNA和IL-4 mRNA的表达;ELISA法检测各组血清中IFN-gamma和IL-4的表达。结果 充血糜烂型和光滑型OLP患者中IL-4 mRNA和蛋白的表达均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);而充血糜烂型和光滑型OLP患者中IFN-gamma mRNA和蛋白的表达均低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。但表达结果在充血糜烂型及光滑型OLP患者组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Th1/Th2失衡表达与OLP发病机制密切相关,为临床治疗OLP提供新的思路。     

不同牙周状态下正畸力诱导Th1和Th2细胞的表达及其比率变化的初步研究

目的 研究不同牙周状态下正畸力诱导外周血Th1细胞和Th2细胞的表达及Th1/Th2细胞比率的变化,初步探讨牙周炎正畸治疗机制.方法 14只8周龄SD大鼠随机分为牙周炎静止期移动组(RM组)、正常牙周移动组(CM组)、牙周炎活动期对照组(A组)、牙周炎静止期对照组(R组)及空白对照组(NC组).采用丝线结扎并局部注射脂多糖法建立牙周炎活动期模型,建模成功后去除上述刺激因素并行牙周治疗,建立牙周炎静止期模型.各移动组大鼠用镍钛拉簧以50g力近中移动上颌第一磨牙,于移动后第7天处死.流式细胞技术检测大鼠外周血Th1细胞及Th2细胞的表达及Th1/Th2比率变化.结果 RM组和CM组、A组、R组外周血Th1细胞、Th2细胞比例及Th1/Th2比率均较NC组升高(P<0.05).与CM组相比,RM组外周血Th1细胞、Th2细胞比例升高(P<0.05),Th1/Th2细胞比率降低(P<0.05);与A组(P<0.05)相比,RM组外周血Th1细胞比例降低(P<0.05),Th2细胞比例升高(P<0.05),Th1/Th2细胞比率降低(P<0.05).结论 Th1、Th2细胞参与调节正常牙周及牙周炎静止期正畸牙齿移动.相对于正常牙周,牙周炎静止期正畸力诱导Th1、Th2细胞在牙周组织的表达增强,以Th2细胞为显著,Th1/Th2比率减小.     

口腔扁平苔藓患者血清IFN-γ、IL-10和IL-17表达分析

目的观察口腔扁平苔藓(OLP)患者血清中Th型细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-17表达,初步探讨其在OLP发生发展中的作用。方法选择2011—2014年在上海市口腔病防治院口腔内科就诊的OLP患者15例,健康志愿者15例,采集静脉血,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IFN-γ、IL-10和IL-17含量。结果实验组、对照组OLP患者血清中Th1型细胞因子IFN-γ的含量无显著差异(P>0.05),Th2型细胞因子IL-10含量为(43.3±4.6)、(29.0±5.1)pg/m L,实验组高于对照组(P<0.05)。IFN-γ与IL-10的比值(即Th1/Th2)为0.418、0.712,实验组较对照组的比值减小。两组Th17型细胞因子IL-17含量为(23.6±2.7)、(16.8±3.3)pg/m L,实验组高于正常对照组(P<0.05)。结论 Th型相关细胞因子失衡与OLP的发生发展密切相关。     

Th1极化反应与牙周炎病理改变的实验研究

目的:观察增强机体Th1型细胞功能对牙周炎的影响,探讨机体免疫平衡失调在牙周炎发病中的作用.方法:SPF级KM 12 周龄雄性小鼠36 只,随机分成3 组:正常对照组;牙周炎组,采用丝线结扎牙颈部并接种牙周炎患者病变区龈缘下细菌诱导实验性牙周炎模型;Th1极化组,同法复制牙周炎模型,并于术后第0天感染紫外线减毒弓形虫.正常对照组及各实验组分别于术后第1、4、8、12 周分批处死动物,进行组织学观察和血清细胞因子TNF-α、IL-10检测.结果:Th1极化组牙周破坏程度较牙周炎组为重, 血清TNF-α含量较牙周炎组明显升高(P<0.01), IL-10含量较牙周炎组明显降低(P<0.01).结论:牙周炎的发病过程与Th1/Th2免疫应答平衡的失调有密切关系,表现为Th1细胞功能相对亢进,Th2细胞功能不足;Th1型细胞因子可加重牙周组织疾病和增加牙槽骨的吸收量.     

慢性牙周炎病人基础治疗前后Th17型细胞因子及RORC的表达变化

目的:研究慢性牙周炎(CP)病人牙周基础治疗前后龈沟液(GCF)中的Th17型细胞因子及其外周血特异性转录因子RORC的表达变化规律。方法:选择CP病人30例,使用ELISA检测牙周基础治疗前后GCF中Th17型细胞因子(IL-17、IL-21)的水平变化,并利用荧光定量PCR检测牙周基础治疗前后外周血CD4+T细胞中特异性转录因子RORC的表达水平。结果:牙周基础治疗后龈沟液中的Th17型细胞因子IL-17、IL-21水平以及外周血CD4+T细胞中特异性转录因子RORC表达水平均较治疗前显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Th17型细胞因子在慢性牙周炎发生发展中发挥重要的致炎作用。     

Th1/Th2细胞在口腔扁平苔藓发病中的研究

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Th1／Th17细胞相关因子在根管治疗后疾病患牙根尖组织中的表达

目的研究Th1／Th17细胞相关因子在根管治疗后疾病（post—treatment endodontic disease,PED）患牙根尖组织中的表达。方法收集12例根管治疗失败患牙的根尖组织样本,制作组织学切片后,以免疫组化方法检测根尖组织样本中Th1／Th17细胞相关因子白细胞介素-17、干扰素-γ蛋白的表达,用ImageProPlus图像分析软件测量各样本中阳性染色区域的平均光密度值,并进行统计学分析。结果12例样本病理检查确诊2例根尖肉芽肿,10例根尖囊肿,通过免疫组化检验证实12例病变组织均检测出白细胞介素-17、干扰素-γ蛋白的表达,且自细胞介素-17表达高于干扰素-γ（t=6．720,P〈0．05）。结论Th1／Th17细胞相关因子均参与了根管治疗失败患牙根尖炎症过程,而Th17型炎症反应可能在PED发生中发挥主要作用。     

牙周炎不同阶段Th17/Treg细胞平衡变化初探

目的 建立实验性大鼠牙周炎模型,观察外周血及牙周组织Th17/Treg细胞平衡在牙周炎不同阶段的变化以及牙槽骨高度变化,为探寻用于研究牙周炎正畸牙齿移动的动物模型提供参考。方法 32只SD雄性大鼠随机分为3个实验组(牙周炎A组、牙周炎B组和牙周炎C组,每组8只)和1个对照组(8只)。实验组采用牙颈部丝线结扎并局部注射LPS的方法建立实验性牙周炎模型后,牙周炎A组处死,采用流式细胞仪检测外周血Th17细胞、Treg细胞比例变化。免疫组化检测牙周组织ROR-γt、Foxp3表达。实时定量PCR检测牙龈组织ROR-γt mRNA、Foxp3 mRNA的表达。牙周炎B组和C组去除局部刺激并行牙周洁治,分别于术后第7、14天进行牙周检查,并行上述流式细胞等检测。结果 牙周炎A、B及C组外周血Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg细胞比例及牙龈组织ROR-γt mRNA、Foxp3 mRNA的表达均较对照组明显升高( P <0.05)。牙周炎B组和C组Th17细胞、Th17/Treg细胞比例及牙龈组织ROR-γt mRNA的表达较牙周炎A组明显降低( P <0.05),但Treg细胞及Foxp3 mRNA表达较牙周炎A组明显升高( P <0.05)。牙周炎B组和C组相比,Th17细胞、Treg细胞及Th17/Treg细胞比例差异无统计学意义( P >0.05)。牙周炎A组、B组、C组牙槽嵴顶距釉牙骨质界距离均较对照组明显增加( P <0.05),但三组间差异无统计学意义( P >0.05)。结论 Th17、Treg细胞及Th17/Treg细胞平衡参与不同阶段牙周炎的免疫调控。局部炎症因素去除后,大鼠牙周炎病变稳定,可以尝试作为研究牙周炎正畸牙齿移动的动物模型。     

Overexpression and varied clinical significance of Th9 versus Th17 cells in distinct subtypes of oral lichen planus

ObjectiveOral lichen planus (OLP) presents with large numbers of T lymphocytes accumulating beneath the epithelium of the oral mucosa; however, its aetiology remains obscure. A potential role for an emerging novel T cell subset, Th9, in OLP has recently been suggested but remains to be clarified. The current aim was to investigate the expression and potential clinical significance of Th9 cells in distinct subtypes of OLP.Materials and methodsPeripheral blood samples were collected from 41 OLP patients and 18 healthy controls (HCs). Flow cytometric analysis was used to detect the CD4+ T helper subset Th9 (IL-9⁺IL-17⁻CD4⁺ Th cells) and Th17 (IL-9⁻IL-17⁺CD4⁺ Th cells) expression levels.ResultsFlow cytometry results showed significantly elevated levels of Th9 cells in reticular and erosive OLP compared to HCs. Th9 expression in erosive OLP was less than in reticular OLP, indicating that Th9 but not Th17 cells may play a predominant role in reticular disease. However, in erosive OLP patients, we found much higher levels of Th17 cells compared to reticular OLP patients and HCs, indicating that Th17 dominates in erosive OLP. Statistical analysis showed positive correlations of Th9 cells and Th17 cells in patients with reticular or erosive OLP but none in HCs.ConclusionsTh9 and Th17 cells may take the predominant roles in reticular and erosive OLP respectively, and their numbers were positively correlated in reticular and erosive OLP patients. Elevated circulating Th9 cells may help maintain immune balance in OLP immunopathogenesis, which requires further investigation.     

Th1/Th2 cytokine profiles in saliva of HIV-positive smokers with oropharyngeal candidiasis

Oropharyngeal candidiasis (OPC) is a common opportunistic infection among HIV-positive individuals and often correlates with a CD4 cell number < 200 cells/microl. This study further examined the association of smoking and OPC in HIV-positive persons. A strong association between smoking and OPC was seen in HIV-positive individuals with > or =200 CD4 cells/microl. In HIV-positive persons with > or =200 CD4 cells/microl, OPC+ smokers had lower gamma-interferon (IFN-gamma) concentrations and a trend toward higher interleukin (IL)-4 concentrations in whole saliva compared to OPC- persons with > or =200 CD4 cells/microl, a cytokine profile consistent with that observed in HIV+OPC+ persons with < 200 CD4 cells/microl. These results suggest that premature OPC in HIV-positive smokers is associated with altered oral host defence mechanisms that cannot be overcome by levels of systemic CD4 cells that are otherwise sufficient to protect against OPC.