高效液相色谱法测定复方醋酸氯己定涂膜剂中甲硝唑的含量

目的:建立测定复方醋酸氯己定涂膜剂中甲硝唑含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,固定相为Diamon-sil-C18色谱柱(200×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(30∶70),流速为1.0ml/min;检测波长为318nm。结果:甲硝唑浓度在1~10mg/L范围内线性良好(r=0.999 9),方法回收率为99.6%,RSD为1.7%。结论:本法测定复方醋酸氯己定涂膜剂中甲硝唑含量简便快速,准确可靠。     

HPLC-荧光法测定大鼠血浆中巴罗沙星的含量及其药代动力学研究

目的:建立了大鼠血浆中巴罗沙星浓度的HPLC-荧光测定方法,研究巴罗沙星在大鼠体内药代动力学行为.方法:色谱柱为C18Hypersil(大连依立特),5μm,100mm×4.6mm,I.D,流动相为0.05mol/L的KH2PO4(磷酸调pH=3)-乙腈(80:20,v/v),荧光检测激发波长295nm、发射波长500nm,测定了大鼠静脉注射巴罗沙星20,10,5 mg/kg后血药浓度-时间过程和蛋白结合率.结果:最低检测浓度0.078μg/ml,回收率大于80%,日间和日内的变异系数小于5%,线性范围为0.078～20.00μg/ml,符合生物样品分析的要求.大鼠静脉注射巴罗沙星20,10和5mg/kg后,T1/2β分别为8.95、7.78和5.10h.AUCo→1分别为26.02、17.23和6.79μg·h/ml.峰浓度分别为9.59、6.19和2.44μg/ml.巴罗沙星与大鼠蛋白结合率为(35.60±7.90)%.结论:建立的HPLC-荧光法适合于巴罗沙星动物体内药代动力学研究.     

反相高效液相色谱法测定犬血浆中甲硝唑浓度

目的 建立犬血浆中甲硝唑浓度反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定方法 . 方法 采用反相高效液相色谱法C18柱,以0.05 mol/L的KH2PO4(用1 mol/L的磷酸调节pH3.5):乙腈:甲醇(130:35:35,V/V/V)作为流动相,流速0.6 ml/min,检测波长317 nm,柱温25℃,内标为替硝唑. 结果 RP-HPLC测定甲硝唑血药浓度的线性范围是0.2-20.0 μg/ml(r2=0.998 6),定量下限为0.2 μg/ml,准确度在85%-115%范围内,其日内、日间精密度≤15%. 结论 本法可用于甲硝唑犬体内药动学研究的需要,并成功地用于口服甲硝唑片剂后犬体内的药动学研究.     

高效液相测定加替沙星在大鼠体内的组织分布

目的建立HPLC测定大鼠肝、肾、肺、脾、心等组织内加替沙星的药物浓度.方法待测组织匀浆中加入加替沙星与内标环丙沙星后,用二氯甲烷提取,进行高效液相紫外检测,色谱柱为Sphweisorb ODS柱(5 μm粒径),200 mm×4.6 mm;流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液-甲醇-三乙胺(55:44.5:0.5), pH为3.10;流速1.0 ml/min,检测波长为293 nm.结果本测定方法肝、肾、肺、脾、心组织浓度的线性范围均为0.05～4.0 mg/L;相关系数分别为0.999 9,0.996 0,0.999 9,0.999 9,0.999 9;肝、肾、肺、脾、心的相对回收率分别为:91.4 %～99.2%,98.6%～104.4%,99.0%～110.2%,90.2%～98.7%,99.0%～100.0%;绝对回收率分别为:78.5%～92.4%,87.7%～94.8%,98.3%～111.6 %,83.5%～85.7%,81.4%～91.7%;日内、日间变异均小于10%,各组织中加替沙星的最低检测限均为0.04 mg/L.结论加替沙星在各组织中均有分布,其中肝、肾分布最多,该法测定大鼠各组织中药物浓度精确、灵敏、可靠,为加替沙星药代动力学研究提供依据.     

反相高效液相色谱法测定血浆中卡马西平浓度

目的建立血浆中卡马西平浓度的测定方法.方法采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以艾司唑仑为内标,测定血浆中卡马西平浓度.色谱柱:Shimadzu Shimpack VP-ODS 4.6mm×150mm,加保护柱,流动相为A:B=55:45(V/V,其中A相为甲醇:乙腈=1:1;B相为蒸馏水:四甲基二乙胺:冰醋酸=500:10:8),检测波长243mm;AUFS0.04;流速0.8ml/min;温度为室温.结果卡马西平在3.46-24.22mg.L-1浓度范围内线性良好, r=0.99938(n=7).卡马西平高、中、低3种浓度的平均回收率分别为100.3%,97.3%,89.5%;RSD分别为4.0%,7.2%,7.5%(n=3).结论该方法准确、快速、简便,可作为卡马西平血药浓度常规监测方法.     

HPLC法测定复方甲硝唑擦剂中甲硝唑和氯霉素的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定复方甲硝唑擦剂中甲硝唑和氯霉素含量的方法。方法:色谱柱为C18,流动相为甲醇-水(50:50),流速为1mL·min-1,检测波长为277nm,柱温为25℃。结果:甲硝唑和氯霉素分别在50.06μg·mL-1～400.48μg·mL-1(r=0.9998)和7.55μg·mL-1～60.40μg·mL-1(r=0.9998)的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为102.33%(RSD=0.67%)和100.22%(RSD=0.80%)。结论:本方法方便,准确,重现性好,可作为该制剂的质控标准。     

HPLC法测定痤疮清软膏经皮给药后大鼠体内甲硝唑的浓度及药时曲线研究

目的:建立HPLC法测定痤疮清软膏经皮给药后大鼠体内中甲硝唑含量。方法:采用反相高效液相色谱法,Phenomsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-水(10:90);检测波长:277nm;柱温:30℃;进样量为20μL;流速:1.0mL.min-1。结果:方法检出限为0.212μg/mL;甲硝唑在0.212~6.784μg/mL范围内线性良好,r=0.9991;样品加标回收率为96.2%,RSD=3.5。结论:该方法准确、稳定,有良好的重现性和较高的灵敏度。     

液相色谱-质谱技术测定大鼠血浆中L-NNA浓度

目的建立检测大鼠血浆中L-NNA浓度的液相色谱-质谱联用方法。方法采用Phenomenex Kromosil C18分析柱(4.6mm×250mm,5.0μm),以甲醇∶水溶液(10∶90)为流动相,电喷雾电离源,选择性离子监测质荷比(m/z)分别为:149.3(L-NNA)、218.2(D-苯甘氨酰胺),以D-苯甘氨酰胺为内标物,测定大鼠血浆中L-NNA的浓度。结果 L-NNA浓度在0.10～6.44mg/L范围内线性关系良好;最低检测限为24μg/L,最低定量限为80μg/L;血浆中L-NNA的回收率在85%以上,日内和日间的相对偏差(RSD)均10%。结论本方法快速、准确、灵敏,可用于大鼠血浆中L-NNA浓度的测定。     

甲巯咪唑大鼠经皮给药的药代动力学

目的:研究甲巯咪唑在大鼠体内经皮吸收的药代动力学,并与口服吸收动力学进行比较.方法:采用HPLC法测定大鼠口服(2 mg/kg)或经皮(1,2,4 mg/kg)给药后血清和甲状腺组织中的甲巯咪唑浓度.色谱柱为Lichrospher C18柱,流动相为甲醇-水(10:90),流速1.0 min,柱温30℃,检测波长UV 254 nm.结果:口服或经皮(2 mg/kg)给药后,甲巯咪唑的tmax分别为1.5 h和2.5 h,cmax分别为1 716.6和817.2ng/mL,AUC分别为4 606.2和3 739.6 ng·h/mL,t1/2分别为2.64 h和2.70 h,甲状腺组织中的药物浓度分别于给药后2 h和1 h达到峰值,其峰浓度分别为307.7和320.9 ng/50 mg.经皮给予高、中和低3个剂量甲巯咪唑后,其AUC与剂量呈现线性相关性.结论:甲巯咪唑口服给药的血药浓度明显高于经皮给药的血药浓度,但甲状腺组织中的药物浓度无显著性差异,提示经皮给药的全身不良反应小于口服给药.     

薯蓣皂苷对大鼠缺血再灌注心肌能量代谢的影响

目的:建立测定心肌组织样品中腺苷酸含量的RP-HPLC法,并观察薯蓣皂苷(D)对缺血再灌注大鼠心肌能量代谢的改善作用.方法:建立大鼠心肌缺血再灌注模型,以薯蓣皂苷进行干预,大鼠随机分为4组:空白对照组(C组),心肌缺血再灌组(IR组),薯蓣皂苷高剂量组(DH组),薯蓣皂苷低剂量组(DL组).采用反相高效液相色谱法,C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为100 mmol·L-1磷酸二氢钾-磷酸氢二钾(10:1)缓冲液(pH=6.0),流速为1.0 ml·min-1,柱温为35℃,检测波长254 nm,测定心肌组织ATP、ADP、AMP含量、腺苷酸池(TAN)水平.结果:ATP、ADP、AMP在浓度2.5～320 μg·ml-1(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)分别为ATP 97.5%、ADP 105%、AMP 99.5%;批内RSD分别为0.9%、1.0%、0.8%,批间RSD分别为3.1%、3.3%、3.2%.结论:该方法可简便、快速、准确地测定大鼠心肌腺苷酸含量;薯蓣皂苷对大鼠缺血再灌注心肌能量代谢有明显改善作用.     

高效液相色谱法测定A549细胞内新藤黄酸含量方法的建立

目的:建立高效液相色谱法测定肿瘤细胞内新藤黄酸含量的方法.方法:应用高效液相色谱法测定细胞内新藤黄酸的含量.色谱柱为COSMOSIL C18柱,流动相为甲醇-0.1％磷酸水溶液(90:10 V:V),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为360 nm,进样量为20μL.结果:在0.05～30μg/mL内新藤黄酸样品溶液质量浓度与峰面积比线性关系良好(P<0.01).精密度、稳定性的RSD<10％,准确度均在实测值的10％以内,特异性良好,同一浓度的新藤黄酸孵育相同时间样品测定结果重复性好.结论:该方法简单方便,准确度高,适用于定量测定肿瘤细胞内新藤黄酸的含量.     

替硝唑与甲硝唑对厌氧菌的作用及其药动学比较

目的:研究替硝唑注射液在小鼠体内抗厌氧菌作用,并考察其药动学过程. 方法:用琼脂稀释法测定替硝唑在体外对三株厌氧菌的最低抑菌浓度,在厌氧消化链球菌感染小鼠模型上试验替硝唑的保护作用;采用高效液相色谱法测定替硝唑在小鼠体内浓度,3P87软件计算药动学参数. 结果:替硝唑在体外对三株厌氧菌最低抑菌浓度为0.125～1 mg/L,替硝唑和甲硝唑对厌氧消化链球菌腹腔感染小鼠ED50分别为9.6和13.2 mg/kg,替硝唑和甲硝唑的消除半衰期分别为1.86和1.26 h. 结论:替硝唑比甲硝唑在体内消除更慢,维持有效血药浓度时间更长,替硝唑体内抗厌氧菌作用更强.     

HPCE法测定甲倍霜中甲硝唑的含量

目的:考察高效毛细管电泳法(HPCE)在甲硝唑定量分析中的应用。方法:通过优化电泳条件,采用HPCE区带电泳法(CZE)对甲倍霜中甲硝唑进行含量测定。以40 mmol/L Tris-H3PO4为缓冲液,电动进样10 kV×20 S,分离电压为+24 kV,紫外300 nm检测,分离柱温25℃。结果:以HPCE法测定甲硝唑对照品的保留时间为:8.17 min;标准曲线为:y=0.0394x+0.0078(r=0.9995);线形范围为:1.25~75.00μg/mL;批内RSD为:1.35%~2.01%,批间RSD为:3.11%~4.62%;甲硝唑平均含量为标示量的97.30%。结论:HPCE法取样量小,快速方便,结果可靠,可用于甲倍霜的含量测定。     

HPLC法测定益心巴迪然吉布亚颗粒中木犀草素的含量

目的:建立测定益心巴迪然吉布亚颗粒中木犀草素的高效液相色谱方法.方法:色谱柱:Shim-pack ODS(5μm,250 ×4.6mm);检测波长:350nm;流动相:甲醇-0.4％磷酸(48∶52);流速:1.00mL·min-1;柱温:35℃.结果:木犀草素在20μg·mL-1～120μg·mL-1间呈良好的线性关系,r =0.9998(n =5),日内精密度RSD为1.81％(n=5),日间精密度RSD为1.85％,稳定性RSD为1.55％(n=5),重复性RSD为0.36％(n=5),平均回收率为99.92％ (n =9),RSD为0.07％(n=9).结论:建立的定量方法操作简单、精密度高、重现性好,可以作为控制益心巴迪然吉布亚颗粒质量的有效方法.     

HPLC法测定清开灵颗粒中黄芩苷的含量

目的建立以内标法测定清开灵颗粒中黄芩苷含量的高效液相色谱法。方法采用Liehrospher C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）;流动相为甲醇：0．2％磷酸（55：45）,流速1．0ml·min^-1;柱温：室温;检测波长：278nm。结果黄芩苷在0．024～0．384μg范围内线性良好,r=0．9975;重复性试验RSD为0．62％,稳定性试验RSD为0．96％,高、中、低浓度加样回收率分别为97．75％、99．06％、101．08％。结论本方法简便快速,重现性好,结果准确,可用于清开灵颗粒的质量控制。     

HPLC法测定清热通淋片中苦参碱和氧化苦参碱含量方法的建立及评价

目的：建立高效液相色谱(HPLC)法测定清热通淋片中苦参碱和氧化苦参碱含量的新方法,优化清热通淋片质量的检测和控制。方法：采用HPLC法。以苦参碱、氧化苦参碱标准品为对照品,清热通淋片为样品。使用Agilent 1200高效液相色谱仪,色谱柱Genimi-C18 (5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为磷酸盐缓冲液（pH=3.0）-甲醇(93∶7),流速为0.8mL/min,柱温为35℃,检测波长为220 nm,进样量为10 μL。通过对HPLC法进行线性关系、专属性、稳定性、精密度、重复性和准确度试验以进行方法学考察。结果：苦参碱回归方程为Y=1 102.1X+15.423,其进样量在0.311 8～4.677 0 μg范围内呈良好线性关系（r=0.999　9）,平均加样回收率为97.1%,RSD=0.24%(n=6);氧化苦参碱回归方程为Y=1 106.6X+5.040 2,其进样量在0.029 8～0.446 4 μg范围内呈线性关系(r=0.999　6),平均加
样回收率为98.4%,RSD=1.52% (n=6)。在稳定性、精密度和重复性实验中,苦参碱和氧化苦参碱的RSD值分别为1.21%、 1.47% ;0.13%、2.76%;0.48%（苦参碱和氧化苦参碱之和的RSD）。结论：HPLC方法分离效果好、专属性强、简便、灵敏和准确,可作为清热通淋片中苦参碱和氧化苦参碱含量的测定方法。     

替硝唑和甲硝唑治疗牙周脓肿和冠周炎的疗效比较

目的：评价替硝唑对口腔炎症的疗效及其安全性方法：用替硝唑治疗牙周肿和冠周炎,以甲硝为对照药物通过治疗前后的临床和实验室检查,以评价其疗效和安全性。对厌氧菌培养阳性的标本进行替硝唑和甲硝唑的最小抑菌浓度测定。结果：替硝唑对牙周脓肿和为的疗效明显优于甲硝唑,其不良反应轻微。结论：替硝唑是一种抗厌氧菌高效,安全的经,可替代甲硝唑。     

顶空毛细管气相法测定三七提取物中有机溶剂残留量

目的:建立三七提取物中7种有机溶剂残留量的测定方法。方法:采用顶空毛细管气相色谱法,以标准溶液加入法测定三七提取物中有机溶剂残留量。结果:在考察的浓度范围内7种有机溶剂呈现良好的线性关系(乙醇r=0.9994、正己烷r=0.9982、苯r=0.9999、甲苯r=0.9991、二甲苯r=0.9994、苯乙烯r=0.9997、二乙烯苯r=0.9932),回收率81.74%~111.2%,理论板数均大于15000,相邻峰的分离度均大于2,日内、日间精密度RSD均小于10%。结论:该方法简单、准确、灵敏度高、重现性好,排除了基质的干扰,适用于三七提取物中有机溶剂残留量的测定。     

高效液相色谱法同时测定槐角中槐角苷和芦丁的含量

目的建立同时测定槐角中槐角苷和芦丁含量的高效液相色谱法(HPLC)。方法采用HPLC法对采集到的10批槐角药材中的槐角苷与芦丁的含量进行测定,Agilent ZORBAX-C18柱(4.6mm×250.0mm,5μm),流动相为:甲醇-乙腈-0.007mol·L-1磷酸溶液(体积比122068),流速为1.0mL·min-1,柱温:30℃,检测波长为257nm。结槐角苷在2.40～48.00mg·L-1、芦丁在1.15～23.00mg·L-1范围内线性关系良好;精密度试验槐角苷和芦丁的相对标准偏差(RSD)分别为1.05%和0.87%;供试品在室温放置24h后槐角苷和芦丁含量的RSD分别为1.78%和1.34%;槐角苷和芦丁供试品溶液的平均含量分别为6.71%和3.52%,RSD分别为1.45%和1.37%;槐角苷和芦丁供试品溶液回收率分别为100.2%和100.4%,RSD分别为1.63%和1.45%。结论本高效液相色谱法简便、准确,可同时测定槐角中槐角苷和芦丁的含量。