阿胶强骨口服液对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度、生物力学、25-(OH)D3和1,25-(OH)2D3的影响

目的：研究阿胶强骨口服液对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度（BMD）、生物力学、25-（OH）D3和1，25-（OH）2D3，的影响，探讨阿胶强骨口服液治疗原发性骨质疏松症的疗效机制。方法：4月龄健康雌性SD大鼠36只，随机分为3组，每组12只，分别为模型组，假手术组，阿胶强骨口服液治疗组。除假手术组外所有大鼠手术摘除双侧卵巢后导致雌激素缺失从而诱导骨质疏松症模型，分别在实验的第4、8、12周采用DEXA法分析股骨头及粗隆部的骨密度，生物力学技术分析股骨头生物力学参数，酶联免疫吸附方法检测25-（OH）D3和1,25-（OH）2D3的含量。结果：阿胶强骨口服液治疗组与模型组比较，股骨头及粗隆部骨密度明显提高（P〈0．05）；最大载荷（ML）及最大压应变（MS）等指标明显增强（P〈0．05）；血液、肝脏和肾脏组织中25-（OH）D3和1，25-（OH）2D3的含量明显提高，且组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。阿胶强骨口服液治疗组与假手术组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：阿胶强骨口服液在雌激素缺失早期即可在蛋白水平上调节25-（OH）D3和1，25-（OH）2D3的表达，激活骨代谢，提高骨密度，增强骨质量，起到预防骨质疏松的作用。     

血清25-(OH)D水平及VDR基因多态性与类风湿性关节炎骨侵蚀的关系探讨

目的探讨血清25-羟维生素D[25-(OH) D]及维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)基因多态性与类风湿性关节炎骨侵蚀的关系。方法将94例类风湿性关节炎患者设为研究组,另将85名健康体检者设为健康组。2组均检测血清25-(OH) D水平,且提取基因组DNA,采用MassARRAY分子量阵列技术平台检测VDR基因多态性,分析其与类风湿性关节炎骨侵蚀度之间的关系。结果研究组血清25-(OH) D水平低于健康组(P0.05),且骨侵蚀患者血清25-(OH) D水平低于无骨侵蚀者(P0.05);研究组Fok I位点基因型FF、Ff及等位基因F和Apa I位点基因型AA、Aa及等位基因A频率均高于健康组(P0.05);研究组ff、aa出现频率均低于健康组(P0.05);血清25-(OH) D30 ng/m L、Fok I位点基因型FF及Ff、Apa I位点基因型AA及Aa均是类风湿性关节炎发病的危险因素(P0.05),血清25-(OH) D20 ng/m L是类风湿性关节炎骨侵蚀的危险因素(P0.05)。结论血清25-(OH) D水平缺乏可增加类风湿性关节炎骨侵蚀发生风险,VDR基因Fok I位点等位基因F及Apa I位点等位基因A可增加类风湿性关节炎发病风险,但与骨侵蚀无关。     

1，25(OH)2D3对模拟失重大鼠股骨远端松质骨的扫描电镜观察

目的 观察1,25-二羟维生素D3对模拟失重状态下大鼠股骨远端松质骨超微结构的影响.方法 SPF级雄性SD大鼠66只,随机分为自由活动组、悬吊对照组和悬吊实验组,同时悬吊实验组给予1,25-二羟维生素D3皮下注射（0.05 μg/kg·d）,实验期为14 d、28 d.取股骨远端沿冠状面切开,蒸馏水冲洗净骨髓腔,乙醇梯度脱水,表面喷金后利用扫描电镜对大鼠股骨远端松质骨的形态结构进行观察.结果 悬吊对照组与自由活动组比较大鼠骨小梁变细,断裂,数目减少,胶原纤维排列杂乱,微损伤增多;悬吊实验组较悬吊对照组大鼠骨小梁数目增多,胶原纤维排列规整,未见明显微骨折发生,且悬吊14 d实验组较悬吊28 d实验组保持了更好的微结构.结论 1,25-二羟维生素D3能够对模拟失重状态下大鼠股骨远端松质骨的超微结构产生有利影响.     

不同骨代谢状态下T2DM患者血清25(OH) D及Omentin-1水平的变化及其意义

目的检测不同骨代谢状态下2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血清中25-羟维生素D、Omentin-1水平的变化,初步探讨它们在T2DM合并骨质疏松(osteoporosis,OP)发生发展过程中的作用。方法收集2016年2月至2017年1月在遵义医学院附属医院内分泌科住院的T2DM患者140例,据骨密度分为3组:T2DM骨量正常组(A组45例)、T2DM骨量减少组(B组45例)、T2DM骨质疏松组(C组50例),收集同期医院体检中心年龄、性别相匹配的健康体检者为正常对照组(NC组120例)。酶联免疫吸附(ELISA)法测定所有受试者血清25(OH)D、Omentin-1水平;多元逐步回归分析骨密度的影响因素。结果 (1)T2DM组空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)、稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平较NC组明显升高,而高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)明显降低(P0.05);(2)C组25(OH)D、Omentin-1水平显著低于NC组、A组及B组;B组低于NC组及A组;A组低于NC组,即C组B组A组NC组[(17.18±2.51)ng/mL vs(20.46±3.46)ng/mL vs(23.58±3.61)ng/mL vs(27.41±4.44)ng/mL;(47.56±6.52)ng/mL vs(59.28±5.16)ng/mL vs(63.58±6.77)ng/mL vs(65.24±8.39)ng/mL](P0.05)。(3)多元逐步回归分析结果显示,T2DM合并OP患者双侧股骨颈的骨密度平均值与Omentin-1、25(OH)D呈正相关;与病程、HbA1c呈负相关(P0.05)。结论 T2DM患者25(OH)D、Omentin-1水平低于健康体检者,并且从骨量正常→骨量减少→骨质疏松患者逐渐减低,说明低水平的25(OH)D、Omentin-1可能参与了T2DM合并OP的发生发展。     

1，25-（OH）2D3增加阿霉素肾病大鼠CD2AP表达

目的观察1，25-（OH）2D3对阿霉素肾病大鼠肾小球CD2AP表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为对照组和阿霉素模型组，后者经尾静脉注射阿霉素（ADR）诱导肾病模型，再随机分肾病组和1，25-（OH）2D3组。实验5周末测定大鼠尿蛋白、相关生化指标及电解质。肾小球CD2AP免疫组化及荧光染色分析肾小球CD2AP蛋白的表达。多元回归分析CD2AP的平均吸光度值（A）与上述检测指标的关系。结果与对照组相比，肾病组大鼠尿红细胞、尿蛋白、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、甲状旁腺素（PTH）明显升高（P〈0．01），血清白蛋白（Alb）、1，25-（OH）2D3、离子钙（Ca^2＋）降低（P〈0．05或P〈0．01），磷（P）无明显差异（P〉0．05），CD2AP蛋白表达明显下调（P〈0．01）。与肾病组相比，1，25-（OH）2D3组尿红细胞、尿蛋白、TC、TG、PTH下降（P〈0．05或P〈0．01），而Alb，1，25-（OH）2D3、Ca^2＋增加（P〈0．01），P无明显差异（P〉0．05），CD2AP蛋白表达明显增加（P〈0．01）。多元回归分析显示，A值与尿蛋白呈负相关（rs=-0．63，P〈0．01），与1，25-（OH）2D3、Alb水平正相关（rs=0．59、0．27，P〈0．05）。结论1，25-（OH）2D3可减轻ADR肾病大鼠血尿、蛋白尿，调节血脂及钙磷代谢障碍，恢复CD2AP蛋白的表达，具有保护肾脏作用。     

1，25-（OH）2D3的免疫抑制作用及其在器官移植中的应用（文献综述）

近年的研究证实1，25-(OH)2D3具有重要的免疫调节作用，可以调节细胞因子的产生，抑制移植物急性排斥反应，延长移植物生存期。本文就1，25-(OH)2D3免疫调节作用的分子生物学机制、对免疫活性细胞的调节作用及其在器官移植后预防急性排斥反应中的作用等方面的研究进展作一综述。     

1，25-二羟基维生素D3对炎性肠病的免疫调节作用

1，25-二羟基维生素D3[1，25-（OH）2D3]是维生素D（Vitamin D，VD）的活性形式，除了具有调节钙和骨新陈代谢的功能外．还对许多类型细胞的生长和分化有重要的影响。1，25-（OH）2D3的生物学效应是VD受体（VD recepton，VDR）介导的。该受体是核受体家族成员之一，1，25-（OH）2D3作为配体与之结合导致VDR构象的改变，     

50 -60岁绝经后骨折女性25(OH)D3和骨密度、骨代谢指标的关系研究

目的探讨50-60岁绝经后骨折女性25羟维生素D_3和骨密度、骨代谢指标的关系。方法选择2014年7月至2015年9月因骨折在我院骨科行手术治疗的50-60岁绝经后女性90例,检测患者腰椎和股骨近端部位骨密度并分为骨质疏松组、骨量减少组及骨量正常组。检测患者身高、体重及25羟维生素D_3、骨碱性磷酸酶、骨钙素、I型胶原羧基末端肽、I型原胶原羧基末端肽及尿Ⅰ型胶原氨基末端肽等骨代谢指标。结果血清25羟维生素D_3水平随着骨密度降低而降低(P0.05);血清骨碱性磷酸酶、骨钙素、I型胶原羧基末端肽、I型原胶原羧基末端肽及尿I型胶原氨基末端肽水平随着血清25羟维生素D_3水平降低而升高(P0.05);血清25羟维生素D_3水平随着年龄增加而降低(P0.05)。结论在50-60岁绝经后女性骨折患者中,血清25羟维生素D_3水平与骨密度存在正性相关关系;血清25羟维生素D_3与血清骨碱性磷酸酶、骨钙素、I型胶原羧基末端肽、I型原胶原羧基末端肽及尿I型胶原氨基末端肽水平存在负性相关关系。50-60岁绝经后女性应及时补充维生素D,并随着绝经年限的增加而适当增加,可以增加骨量,从而可能减少各种并发症的发生。     

1，25-二羟基维生素D3对小鼠骨髓细胞形成破骨细胞样细胞及其骨吸收效应的影响

目的动态观察1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)2D3]对NH小鼠骨髓细胞培养在体外形成破骨细胞及其骨吸收的剂量效应和作用时象.方法收集NH小鼠骨髓细胞于含10%胎牛血清的α-MEM培养基中行体外培养,设置不同的1,25-(OH)2D3浓度组和给药时间组,并于培养第3、6、9、12天观察记录抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)阳性多核巨细胞[或破骨细胞样细胞(osteroblast-like cell,OLC)]以及骨磨片上骨吸收陷窝的数目.结果高于10-9mmol/L的1,25-(OH)2D3单一刺激可于培养第6天诱导TRAP阳性OLC形成,并且可在骨磨片上观察到骨吸收陷窝;随1,25-(OH)2D3浓度的增高,OLC和骨吸收陷窝数目均随之增加;各浓度组OLC数目于培养第9天达最高值,随后则趋于减少,而骨吸收陷窝数于培养第9和第12天均有所增加;采用单一1,25-(OH)2D3浓度(10-8mmol/L),TRAP阳性OLC和骨吸收陷窝见于培养3 d后用药和全程用药组,而仅在培养前3 d用药则不能诱导OLC和骨吸收陷窝的形成.结论 1,25-(OH)2D3可在体外诱导骨髓单核细胞分化形成OLC并使其具有破骨活性,诱导作用的强弱与1,25-(OH)2D3的浓度相关,而且其作用时象可能是在培养3 d以后.     

1,25-(OH)2D3对小鼠皮肤移植后脾T细胞亚群、MLR及NK细胞活性的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]抑制机体免疫功能的机理,为用于临床抗排斥治疗提供实验依据.方法建立不同系小鼠间皮肤移植的动物模型.术日将实验小鼠随机分为四组,均用小鼠灌胃器给药.对照组:每日20ml/kg生理盐水; 维生素D3(VD3)组:单独应用1,25-(OH)2D3 2.5μg*kg-1*d-1; 环孢素A(CsA)组:单独应用CsA 25mg*kg-1*d-1; VD3+CsA组:联合应用VD3+CsA,按VD3组和CsA组用药剂量给药.术后10d,测定小鼠脾的T细胞亚群、单向混合淋巴细胞反应(MLR)、自然杀伤细胞(NK)活性.结果 VD3组的移植皮片存活时间(13.13±1.13)d,明显长于对照组的(9.75±0.89)d;CD3+、CD4+ T细胞百分率40.19%±4.25%、24.65%±3.47%均明显低于对照组48.70%±7.19%、 33.55%±4.34%,P<0.01;对BALB/C鼠的MLR(0.95±0.12)明显低于对照组(1.19±0.22),P<0.05; NK细胞的活性与对照组小鼠比较, 差异无显著性.结论 1,25-(OH)2D3能延长小鼠皮肤移植的存活时间,其抑制机体免疫功能的作用是通过减少CD3+、CD4+ T细胞的数量及抑制T细胞功能而发挥的,对NK细胞活性无明显影响.     

1，25双羟维生素D3和染料木素对人成骨样SaOS-2细胞的作用

目的 研究1,25双羟维生素D3[1.25-(OH)2D3]及染料木素(genistein)对人成骨样SaOS-2细胞的作用.方法 培养人成骨样SaOS-2细胞,经1,25-(OH)2D3、genistein及二者联合应用后,用硝基苯磷酸二钠法(p-nitrophenylphosphate,pNPP)测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ALP及骨保护素(osteoprotegerin,OPG)mRNA水平的变化.免疫印记法测定OPG蛋白表达.结果 1,25-(OH)2D3及genistein可显著提高ALP活性,但对ALP mRNA的表达没有影响.二者联合应用有协同作用,可显著提高ALP活性及mRNA的表达(P＜0.01).1,25-(OH)2在D3组可显著降低OPG mRNA及蛋白的表达,而与genistein共用时,此抑制作用消失(P＜0.01).结论 1,25-(OH)2D3及genistein在促进人成骨样SaOS-2细胞的分化过程存在协同作用,genistein通过调控OPG基因及蛋白的表达抑制1,25-(OH)2D3对破骨细胞的促进作用,从而促进骨的形成.     

A novel synthetic vitamin D analogue, 2β-(3-hydroxypropoxy)1α, 25-dihydroxyvitamin D3 (ED-71), increases bone mass by stimulating the bone formation in normal and ovariectomized rats

We performed dosing experiments to evaluate the bone mass increasing action of a novel, synthetic vitamin D derivative, 2-(3-hydroxypropoxy)-1, 25(OH)₂D₃ (ED-71), in normal and estrogen-deficient rats. The first experiment consisted of 31 Sprague-Dawley rats, 28 weeks of age. The second experiment consisted of 44 animals who were ovariectomized (OVX) or sham operated at the age of 12 weeks. ED-71 was given twice a week for the duration of 12 weeks. At the end of the experiments, serum chemistries were examined and lumbar vertebrae were assessed histomorphometrically. Serum alkaline-phosphatase levels tended to decrease by ED-71 administration in the first experiment and their elevated values after ovariectomy were also depressed by ED-71 in the second experiment. Serum osteocalcin levels, however, increased by the agent. In the first experiment, cancellous bone volume (BV/TV) increased dose dependently. Bone formation rates (BFR/BS) also increased. In the second experiment, BV/TV significantly decreased by ovariectomy and it increased in ED-71-treated groups, but not in 1-(OH)D₃-treated group. BFR/BS increased by ED-71. Activation frequency did not decreased by ED-71 in either experiment. These data clearly demonstrated that ED-71 administration was capable of increasing the bone mass by stimulating bone formation in normal and estrogen-deficient rats.