浙江汉族人群血小板抗原1-16多态性调查

目的了解浙江汉族人群血小板抗原1-16多态性分布。方法采用PCR-SSP方法对120份浙江无血缘关系汉族样本作HPA-1—16等位基因分型。结果HPA-1b、-2b、-3b、-6bw、-15b的基因频率分别为0.0125、0.0542、0.3833、0.0125、0.4833,未检出HPA-4b、-5b、-7bw、-8bw、-9bw、-10bw、-11bw、-12bw、-13bw、-14bw、-16bw等位基因。浙江汉族人群HPA-3、15抗原系统血小板随机输注错配概率分别为0.36、0.37。结论浙江汉族人群HPA多态性分布与中国其他地区汉族人群比较没有差异,HPA-3和15系统多态性较丰富,因此在随机血小板输注或胎母之间比较容易发生同种免疫反应。     

南宁地区人群血小板抗原HPA1—16bw基因分布频率的研究

目的研究南宁地区人类血小板抗原基因分布频率,为临床同种免疫血小板减少症患者提供诊断依据和HPA相容的成分血。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对南宁地区1 500名无血缘关系的成年人做HPA1—16bw基因分型研究。在包含引物混合液的96孔反应板中,按照相同的循环条件扩增PCR产物。结果每份血液标本均可在4 h内获得分型结果。在16个HPA系统中,HPA-15基因型杂合频率最高,HPA15a/15a,HPA15a/15b和HPA15b/15b的频率分别为0.252 7,0.500 7和0.246 7。HPA-3的杂合程度仅次之,HPA3a/3a,HPA3a/3b和HPA3b/3b的频率分别为0.284 0,0.508 0和0.208 0。其余14个HPA系统均以a/a纯合子为主,其a基因频率范围为0.916 7—0.999 3。除了HPA-3b/3b和HPA-15b/15b的纯合子以外,还检测出了HPA-2b/2b5例和HPA-1b/1b1例。HPA-7bw至-14bw,-16bw的a/a等位基因纯合率为1.000 0。结论在临床工作中我们仍须警惕可能由HPA-1,-2,-3,-5,-6和-15同种抗体引起的疾病,HPA基因分型将有助于更好地诊断同种免疫血小板减少症和建立相容的HPA血小板供者库,提供更有效的血小板输注方法。     

潍坊地区汉族献血者血小板特异性抗原HPA-1-16系统基因多态性研究

目的研究汉族人群血小板特异性抗原HPA-1-16系统基因多态性区域分布特点,建立HPA基因型资料库。方法采用PCR-SSP技术对102名潍坊地区汉族无血缘关系的志愿捐献血小板者作HPA-1-16系统基因分型,计算基因型频率、基因频率。结果从HPA-1、5、6系统分别检出1例a/b基因型,HPA-4系统检出2例a/b基因型,检出HPA-2a/2b 11例(基因频率占0.1078);HPA-3、15系统表现出较高的杂合度,其中3a/3a、3a/3b、3b/3b基因型频率分别为0.3039、0.5392、0.1569,15a/15a、15a/15b、15b/15b基因型频率分别为0.3529、0.4608、0.1863;HPA- 7-14、16系统只检出a基因,呈单特异性。结论潍坊地区汉族人HPA-2、3、15系统具有多态性,是HPA配合性输注关注重点。在随机输血中供受者HPA-2系统不配合的机会为9.68%、HPA-3系统不配合的机会为36.95%、HPA-15系统不配合的机会为36.8%。     

南京地区血小板捐献者HPA-1-29bw基因分型检测

目的了解南京地区汉族血小板捐献人群血小板抗原1～29(HPA-1-29bw)等位基因频率,为患者相容性血小板输注提供依据。方法采用一代测序法(Sanger测序法)对2019年2月～2019年9月在本中心捐献血小板的900名南京汉族固定捐献者做HPA基因分型,并采用直接计数法计算等位基因频率和基因型频率等。结果本组900名汉族单采血小板捐献者HPA等位基因频率分别为:HPA-1a 0.995 0、1b 0.005 0,2a 0.9467、2b 0.053 3,3a 0.585 0、3b 0.415 0,4a 0.998 9、4b 0.001 1,5a 0.982 2、5b 0.017 8,6a 0.982 8、6b 0.017 2,11a 0.999 4、11b 0.000 6,15a 0.531 7、15b 0.468 3,21a 0.992 8、21b 0.007 2;HPA-7-10w、-12-14w、-16-20w和-22-29bw均只检出单一a等位基因;本组中HPA-15不配合率最高[37.40%(337/900)],其次为HPA-3[36.77%(331/900)],另外在HPA-11w中检出1例杂合子。结论南京地区汉族血小板捐献人群HPA等位基因频率特点是HPA-15和HPA-3为最常见的杂合子,在本地临床输注中须引起重视。     

青岛地区汉族人群HPA-1—5,15多态性分布研究

目的研究青岛地区汉族人群人类血小板抗原(HPA)1-5,15抗原分布多态性。方法采用PCR-SSP方法对青岛地区918名无血缘关系固定血小板无偿捐献者进行HPA1-5及HPA-15系统的基因分型.结果各被检系统等位基因频率分别是1a=0.9940,1b=0.0060,2a=0.9319,2b=0.0681,3a=0.5822,3b=0.4178,4a=0.9897,4b=0.0104,5a=0.9804,5b=0.0196,15a=0.4913,15b=0.5087;HPA基因频率分布与国内资料比较,HPA-1与北方人群(河南),HPA-2与南方人群(四川)差异有统计学意义;与台湾人群HPA-2,-4,与日本人群HPA-2,-3,-5,与美国黑人HPA-1,-2,-5,与白人HPA-1,-4,-5,-15分别有统计学显著性差异。结论青岛地区汉族人群HPA分布具有本地人群特点。本组HPA数据分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,可以作为北方汉族人群HPA基因分布频率数据库和青岛本地化血小板供者HPA资料库。     

上海地区汉族人群人类血小板抗原基因的多态性研究

目的研究上海地区汉族人群人类血小板抗原HPA-1～16系统基因多态性分布，为快速寻找更合适的血小板输注提供实验依据。方法采用PCR-SSP方法对137名上海地区汉族健康成年人进行HPA-1～16系统基因分型。结果HPA-1～6和HPA-15的基因频率分别为HPA-1a 0．9854，HPA-1b 0．0146，HPA-2a 0.9453，HPA-2b 0．0547，HPA-3a 0．5511．HPA-3b 0．4489，HPA-4a 0．9964，HPA-4b 0．0036，HPA-5a 0．9891，HPA-5 b0．0109，HPA-6a 0．9781，HPA-6b 0．0219，HPA-15a 0．5292，HPA-15b 0．4708；其余HPA系统只检测到a等位基因，其基因频率均为1．0000。经χ^2检验，符合Hardy-Weinberg遗传定律。结论HPA基因多态性分布存在明显的种族和地域性差异。HPA-1～6和HPA-15系统基因频率分布具有多态性，其中HPA-3和HPA-15系统杂合度最高，抗原分布不配合比例相对高，在临床配合性血小板输注中必须加以重视。HPA-3基因多态性分布更具有上海地区特点。     

吉林地区汉族人群血小板抗原系统基因分型研究

目的研究吉林省汉族人群人血小板同种抗原系统(HPA)基因及其多态性分布特征,建立已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。方法用DNA试剂盒提取外周血标本中DNA,通过特异性引物(PCR-SSP)扩增HPA等位基因。检测200名HPA1-6,15抗原系统共14个抗原的基因分型。结果 200名健康、无血缘关系的吉林省汉族人群HPA基因频率为:HPA-1a0.9900、-1b0.0100;-2a0.9300、-2b0.0700;-3a0.5575、-3b0.4425;-4a1.0000、-4b0;-5a0.9900、-5b0.0100;-6a0.9875、-6b0.0125;-15a0.5125、-15b0.4875。HPA-3与我国其它地区同类资料比较χ2=3.18,P>0.05;与亚洲印尼、泰国、英国及刚果相比χ2=5.98,P>0.05;HPA-5与HPA-15和刚果、喀麦隆比较χ2=55.06、χ2=15.63,P<0.01结论吉林地区血小板志愿捐献者HPA-1～6和HPA-15抗原系统的基因频率符合Hardy-Wein-berg遗传定律,与其它地区和国家的同类资料相比显示出种族和地域性差异,由此建立起了吉林地区已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。     

新疆汉族人群血小板抗原1—5、15系统基因多态性分析

目的调查研究与血小板输注无效关系密切的人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA)1—5及15系统基因在新疆汉族人群中的遗传多态性。方法采用聚合酶链-序列特异性引物(PCR-SSP)法对101例无血缘关系的新疆汉族血样进行HPA基因分型。结果新疆汉族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、15a基因频率分别是0.9851、0.9208、0.5446、1、0.9505、0.4653,HPA-1b、2b、3b、4b、5b、15b基因频率分别是0.0149、0.0792、0.4554、0、0.0495、0.5347,新疆汉族HPA基因频率与维吾尔族人群相比,HPA-1a、1b基因频率差异具有统计学意义(P<0.05)。结论HPA-1、2、3、5、15系统均具有多态性,HPA-3、15系统具有高度多态性。     

中国南京地区汉族人群血小板HPA-1-18遗传多态性研究

本研究旨在调查南京地区无关健康人群人类血小板抗原1-18(HPA-1-18)等位基因频率,为输血患者寻找相容性血小板提供可靠依据。使用PCR-SSP方法对300例南京地区非血缘健康志愿者血液样品进行人血小板抗原1-18(HPA-1-18)等位基因分型。结果表明,南京地区300例非血缘人群HPA等位基因频率分别为:HPA-2a 0.9183和-2b 0.0817;HPA-3a 0.6100和-3b 0.3900;HPA-5a 0.9733和-5b 0.0267;HPA-6a 0.9883和-6b 0.0117;HPA-15a 0.5250和-15b 0.4750。HPA-1a,-4a,-7a-14a和HPA-16a-18a均是纯合子。结论:HPA抗原等位基因频率存在种族和地域差异。南京地区HPA抗原等位基因频率显示具有自身特点。HPA-3和HPA-15是最常见的杂合子,因此必须关注HPA在血小板临床输血中的作用。     

辽宁地区血小板志愿捐献者HPA基因资料库的建立

目的对辽宁地区血小板志愿捐献者进行HPA基因分型,建立已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。方法采用PCR-SSP方法对随机抽取的130名血小板捐献者进行HPA-1-6和HPA-15抗原系统共14个抗原的基因分型。结果辽宁地区血小板志愿捐献者HPA的基因频率分别是:HPA-1a0.9925、1b0.0075、2a0.9305、2b0.0695、3a0.5810、3b0.4190、4a1.0000、4b0.000、5a0.9810、5b0.0190、6a0.9885、6b0.0115、15a0.4615、15b0.5385。结论辽宁地区血小板志愿捐献者HPA-1—6和HPA-15抗原系统的基因频率符合Hardy-Wein-berg遗传定律,与其它地区和国家的同类资料相比显示出种族和地域性差异,由此建立起了辽宁地区已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。     

应用PCR—SSP法分析中国人血小板抗原基因型频率

本研究建立了在同一PCR反应条件下同时检测人血小板抗原（human platelet antigen,HPA）系统HPA-1到HPA-5的PCR-SSP检测法。应用该方法分析了110例健康献血员的HPA-1到HPA-5的基因型,并以此为依据推算了中国人HPA-1到HPA-5各亚型的基因频率。结果表明HPA-1a和HPA-1b的基因频率分别为0.91和0.09,HPA-2a和HPA-2的基因频率分别为0.86和0.14,HPA-3a和HPA-3b的基因频率分别为0.60和0.40,HPA-4a和HPA-4b的基因频率分别为0.92和0.08,HPA-5a和HPA-5b的基因频率分别为0.85和0.15。结论：基因组DNA的血小板抗原PCR-SSP分型法切实可行,可广泛应用于临床血小板抗原的分型。     

献血者血小板1-16抗原基因遗传多态性分析及已知HPA型供者数据库的建立

本研究的目的是分析人类血小板抗原（human platelet antigen,HPA）基因多态性,根据分布频率来判断HPA抗原不配合比率以及抗体产生的机会,确定有临床意义的血小板抗原系统,并建立邯郸地区血小板基因频率数据库和供者库.采用SSP-PCR方法对邯郸地区148名随机献血者进行HPA1-16抗原32个等位基因的检测分析,并与不同人群的分布频率进行比较.结果表明：每个样本均检测到HPA-1a、2a、4a-14a、16a基因;HPA-4a、7a-14a、16a呈现单态性,未检测出相应的等位基因HPA-b;对于HPA-1、-2、-5、-6主要以a/a纯合子为多,a/a基因型频率分别是0.9595、0.8108、0.9865、0.9797,没有b/b纯合子出现.在HPA1-16中,具有最高杂合度的是HPA-15,基因型HPA15a/15a、HPA15a/15b、HPA15b/15b频率分别是0.2230、0.5270、0.2500;HPA-3在其次,基因型HPA3a/3a、HPA3a/3b、HPA3b/3b频率分别是0.3851、0.5135、0.1014.经x2检验,结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律.邯郸地区随机献血者HPA1-5系统基因频率与石家庄地区相似（P＞0.05）;与我国台湾人群进行HPA1-13、HPA-15的比较,HPA-1、-2、-6具有明显的不同（P＜0.05）,其它相似（P＞0.05）;与韩国人群进行HPA1-8的比较,除HPA-3具有明显不同外（P＜0.05）,其余均相似（P＞0.05）;与美国黑人进行HPA1-5的比较,HPA-1、-2、-5具有明显的差异（P＜0.05）;与英国人进行HPA1-11的比较,HPA-1、-5具有明显的不同（P＜0.05）.结论：北方地区中国人群HPA-2、-3、5、-15系统具有多态性,且HPA抗原分布不配合比率较高,这必然造成免疫暴露的机会增加,提示在临床上可能具有重要的免疫学意义.同时,在此次研究数据的基础上建立了邯郸地区血小板基因频率数据库和血小板已知型供者库.     

Genotyping of Eight Human Platelet Antigen Systems in Serbian Blood Donors: Foundation for Platelet Apheresis Registry

IntroductionThe aim of this study was to investigate the allele and genotype frequencies of 8 human platelet antigen (HPA) systems among blood donors from the Blood Transfusion Institute of Serbia and to compare them with published studies. These data would be useful to establish the basis for a platelet apheresis donor registry.Material and MethodsSeventy-two unrelated male platelet apheresis/blood donors from Serbia were typed for 8 HPA systems (HPA-1 to HPA-6, HPA-9, and HPA-15) via the FluoGene method, based on polymerase chain reaction-sequence-specific amplification (PCR-SSP; PCR using sequence-specific primers) with fluorometric signal detection. Allele and genotype frequencies were estimated by direct counting and compared to the expected genotype frequencies according to the Hardy-Weinberg principle. The transfusion mismatch probability was calculated for every HPA specificity.ResultsThe allele frequencies were: HPA-1a, 0.868; HPA-1b, 0.132; HPA-2a, 0.917; HPA-2b, 0.083; HPA-3a, 0.611; HPA-3b, 0.389; HPA-5a, 0.903; HPA-5b, 0.097; HPA-9a, 0.993; HPA-9b, 0.007; HPA-15a, 0.472; and HPA-15b, 0.528. For HPA-4 and HPA-6 only allele a was detected.DiscussionThe HPA allele frequencies of European populations showed no significant differences in comparison with our results. Statistically significant differences were revealed in comparison with some populations of non-European origin. In the tested donors no HPA-2 bb genotype was detected, but we found 1 donor with the rare HPA-9b allele. The biggest transfusion mismatch probability in the Serbian population is for systems HPA-15 (37.4%) and HPA-3 (36.2%), which means that more than a third of random transfusions could cause mismatch in these systems. This study was enabled by the introduction of molecular HPA typing, and it provides initial results of the HPA allele and genotype frequencies in the population of blood donors in Serbia. They will be used to provide a compatible blood supply on demand for treating patients with alloimmune thrombocytopenic disorders. The successful implementation of PCR-SSP with fluorometric signal detection could be further complemented in the future by the introduction of high-throughput methods, which will largely depend on the available financial resources.     

云南汉族血小板献血者HLA-A、B和HPA基因多态性的分析

目的研究云南地区汉族血小板献血者HLA-A、B基因和HPA1-17基因多态性,建立已知型血小板献血者基因数据库。方法分别采用PCR-SSOP和PCR-SSP方法对1 000名云南地区无血缘关系的汉族血小板献血者做HLA-A、B和HPA1-17系统基因分型,计算基因型频率、基因频率,并与其他人群进行比较。结果在云南地区人群中共检出HLA-A位点14个,HLA-B位点35个。A*02(35.81%)、A*11(35.42%)和A*24(17.72%)3个等位基因为云南汉族人群HLA-A座位的主要等位基因;B*46(12.87%)、B*40(60)(10.83%)和B*15(62)(9.78%)3个等位基因为云南汉族人群HLA-B座位的主要等位基因。每个样本均检测到HPA-1a、2a、4a-14a、16a、17a基因;HPA-4a、7a-14a、16a、17a呈现单态性,未检测出相应的等位基因HPA-b;对于HPA-1、2、5、6主要以a/a纯合子居多,a/a基因型频率分别是0.989、0.960、0.990、0.980,没有b/b纯合子出现。在HPA1-17中,具有最高杂合度的是HPA-15,基因型HPA15a/15a、HPA15a/15b、HPA15b/15b频率分别是0.392、0.360、0.248;HPA-3在其次,基因型HPA3a/3a、HPA3a/3b、HPA3b/3b频率分别是0.339、0.467、0.194。经χ2检验,结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。结论云南地区汉族血小板献血者HLA-A、B和HPA1-17基因频率与南方汉族接近,也呈现其自身特点。应建立本地区的血小板供者分型数据库。     

使用Taqman PCR技术建立人类血小板抗原-1～5、15分型体系

目的了解上海地区单采血小板献血人群HPA-1～5、15多态性分布,分析评估新的分型技术。方法利用TaqMan PCR技术对500份上海地区单采血小板供者标本进行HPA-1～5、15抗原系统等位基因分型,并随机抽取100份标本使用PCR-SSP技术进行比对。结果 HPA各等位基因频率分别为HPA-1a:0.999,HPA-1b:0.001,HPA-2a:0.953,HPA-2b:0.047,HPA-3a:0.582,HPA-3b:0.418,HPA-4a:0.999,HPA-4b:0.001,HPA-5a:0.988,HPA-5b:0.012,HPA-15a:0.524,HPA-15b:0.476;有1份标本HPA-5等位基因与SSP检测结果产生差异。结论上海地区HPA各等位基因频率与国内各地区人群分布无明显差异,与中国汉族人群HPA分布情况基本吻合,实验数据经验证符合Hardy-Weinberg平衡定律,实验结果准确可靠;HPA-5差异经测序验证判断可能由PCR-SSP非特异扩增所致;TaqMan技术在HPA抗原系统分型应用中特异性高,反应时间短,具有良好的应用前景,是现有技术方法的一种重要补充。     

Platelet-specific alloantigens and antibodies in Tunisian women after three or more pregnancies

Pregnancy may allow alloimmunization against human platelet antigens (HPA), which can lead to neonatal alloimmune thrombocytopenia (NAIT). The specificities of alloantibodies are closely related to the distribution of the HPA systems. A total of 281 Tunisian multiparous women (mean number of pregnancies: 4.5) were phenotyped for the HPA-1, -3 and -5 systems, by monoclonal antibody immobilization of platelet antigens (MAIPA). We searched for antibodies against HPA-1a, HPA-3a, HPA-5b and HPA-5a in HPA-1b1b, HPA-3b3b, HPA-5a5a and HPA-5b5b individuals, respectively. The gene frequencies were: 0·83 for HPA-1a, 0·17 for HPA-1b, 0·78 for HPA-3a, 0·22 for HPA-3b, 0·82 for HPA-5a and 0·18 for HPA-5b. Anti-HPA-5b antibodies were present in eight sera and anti-HPA-3a antibodies were present in one serum. The anti-HPA-5b system is the most frequently involved in platelet alloimmunization in Tunisian multiparous women. However, prospective trials are required to confirm this result and to determine the exact frequencies and clinical relevance of platelet alloantibodies in pregnant Tunisian women.     

2458名中国汉族人类HPA-1～6、15基因多态性的研究

目的分析中国汉族人群HPA-1～6、15系统的基因多态性,研究中国南、北方汉族人群HPA-1～6、15的基因分布。方法采用Luminex结合序列特异性寡核苷酸探针(flow-sequence specific oligonucleotide probes,FLOW-SSO)方法对2 458名深圳巿机采血小板无偿捐献者(其中南方人群1 554人,北方人群904人)进行HPA-1～6,15系统基因分型。采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-sequence specific primer,PCR-SSP)方法对有疑问的标本及罕见抗原(如HPA-1b/1b、2b/2b、5b/5b等)做进一步确认。结果中国汉族人群中HPA-1～6、15基因频率分别为,HPA-1a 0.991 7,HPA-1b 0.008 3,HPA-2a 0.955 2,HPA-2b 0.044 8,HPA-3a 0.558 6,HPA-3b 0.441 4,HPA-4a0.998 0,HPA-4b 0.002 0,HPA-5a 0.986 2,HPA-5b 0.013 8,HPA-6a 0.985 6,HPA-6b 0.014 4,HPA-15a 0.545 2,HPA-15b 0.454 8。南、北方汉族人群HPA-1～6、15比较,在HPA-1和HPA-3系统(χ2=15.032 0、5.418 8,P0.05);基因频率分布差异有统计学意义。经χ2检验,符合Hardy-Weinbery遗传定律。结论中国汉族人群中HPA-3和HPA-15杂合程度最高,在中国南北方汉族人群中HPA-1和HPA-3系统基因多态性分布存在明显的地域差异。为了给免疫性血小板减少症患者提供相合血小板输注,在中国建立血小板供者资料库是必要的。     

Gene frequencies of human platelet antigens 1-5 in indigenous Australians in Western Australia

The frequencies of human platelet antigen (HPA) systems vary between different racial groups; however, HPA frequency data for some racial groups are still incomplete. We report the distribution of HPA 1-5 systems in Australian Aborigines from a remote community in the north-west of Australia and compare our findings with HPA observed in a Western Australian blood donor population. Using a polymerase chain reaction (PCR) with sequence-specific primers, 185 indigenous Australians and 1000 Western Australian blood donors were genotyped for each of the HPA 1-5 systems. Comparison of gene frequencies of alleles from HPA-1, -2, -3 and -5 systems showed significant differences between Aboriginal people and Western Australian blood donors (P < 0.001). In particular, the frequency of HPA-3b (0.068) in the Australian Aboriginals, from this study, was one of the lowest reported, whilst the frequency of HPA-5b (0.246) was one of the highest for this allele. Gene frequencies were similar to those reported for central Australian Aborigines but with no other ethnic group. In conclusion, this study confirms significant differences in HPA distributions between indigenous Australians, Australian blood donors and other racial groups. These results indicate a higher potential risk of alloimmunization to HPA-1, -2 and -3 in Australian Aborigines receiving transfusion therapy from a Caucasian blood donor population, thereby having practical implications for transfusion and pregnancy risks in people of Aboriginal origin.