整合素拮抗剂IS201对GL15胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的观察整合素拮抗剂IS201对体外培养的GL15脑胶质瘤细胞生长的影响,并探讨其作用机制。方法将体外培养的GL15脑胶质瘤细胞接种于多孔培养板中,分别加入不同浓度的整合素αvβ3拮抗剂IS201进行干预,采用MTT法、免疫细胞化学法评价IS201对体外培养的GL15脑胶质瘤细胞生长的抑制作用,采用流式细胞术观察IS201对胶质瘤细胞凋亡的促进作用。结果 IS201对GL15胶质瘤细胞生长有明显的抑制作用,并能促进凋亡,且有量效关系。结论整合素拮抗剂IS201对胶质瘤细胞有明显抑制作用,应用整合素拮抗剂治疗脑胶质瘤前景广阔。     

整合素αvβ33抗体对胶质瘤细胞增殖和侵袭力的影响

目的观察整合索αvβ33抗体对胶质瘤GLl5细胞增殖和侵袭力的影响。方法将GL15分为两组,实验组加入不同浓度的整合素αvβ33抗体,对照组不加整合素αvβ33抗体。采用MTT比色法测算GL15增殖抑制率,免疫组化法检测GL15的Ki-67,Transwell小室观察GLl5透膜细胞数。结果与对照组比较,实验组随整合素αvβ33抗体浓度增加GL15增殖抑制率增加,Ki-67阳性细胞数占总细胞数的百分比降低,GL15透膜细胞数减少,P均〈0．01;实验组各浓度间比较,P均〈0．01。结论整合素αvβ33抗体对胶质瘤细胞增殖和侵袭性生长具有抑制作用。     

C6/IL-24对鼠脑胶质瘤治疗作用的研究

目的 观察C6/IL-24对大鼠脑胶质瘤的治疗作用.方法 建立SD大鼠脑胶质瘤模型,实验组皮下注射C6/IL-24细胞,对照组皮下注射同等体积的生理盐水,观察大鼠的生存期及颅内肿瘤的生长变化.结果 实验组肿瘤生长速度明显减慢,实验组大鼠各时段肿瘤体积明显小于对照组,实验组大鼠存活时间明显长于对照组.结论 通过逆转录病毒将IL-24导入C6细胞而形成的C6/IL-24细胞对鼠脑胶质瘤具有较好的治疗效果,建立稳定可靠的脑胶质瘤动物模型是进行各种脑胶质瘤在体实验研究的基础,治疗时间窗的选择应在肿瘤指数生长期以前.     

眼睑基底细胞癌患者术后组织SOX18、整合素αvβ3表达与血管生成的关系

目的分析眼睑基底细胞癌患者术后组织SOX18、整合素αvβ3和CD34的表达及对血管生成的作用。方法 105例眼睑基底细胞癌术后组织为研究组,55例基底细胞乳头状瘤术后组织为对照组。应用免疫组化SABC法检测两组SOX18、整合素αvβ3和CD34表达。结果研究组SOX18、整合素αvβ3蛋白表达阳性率和CD34标记的微血管密度(MVD)均明显高于对照组(P<0.000 1),研究组SOX18、整合素αvβ3和MVD表达均与肿瘤最大径、脉管累犯、TNM分期和增殖细胞核抗原(PCNA)指数密切相关。SOX18和整合素αvβ3均与MVD具有正相关性。结论眼睑基底细胞癌患者术后肿瘤组织SOX18和整合素αvβ3高表达,间质中MVD增高,三者具有一定的协同作用,对促进肿瘤的发生和进展有重要作用。     

冷冻联合rhTNF-α对C6大鼠脑胶质瘤细胞凋亡的影响及其调控机制

目的 探讨冷冻联合肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对C6大鼠脑胶质瘸细胞凋亡的影响及其调控机制。方法 建立C6大鼠脑胶质瘤动物模型，将80只大鼠均分为四组（对照组、冷冻组、rhTNF-α组、冷冻联合rhTNF-α组），治疗后第15天留取标本，以末端标记法、流式细胞仪（FCM）检测肿瘤细胞凋亡，以免疫组化技术检测p21基因表达。结果 与其他三组比较，冷冻联合TNF-α组诱导C6大鼠脑胶质瘤细胞凋亡及上调p21表达明显（P〈0．01），二者呈显著正相关（P〈0．01）。FCM分析显示。G1峰前出现典型的亚二倍体峰。结论 诱导细胞凋亡可能是冷冻联合TNF-α杀伤脑胶质瘤细胞的重要机制之一；p21基因可能参与这种细胞凋亡的调控。     

AAV—AS联合环磷酰胺治疗大鼠皮下胶质瘤效果观察

目的观察腺相关病毒为载体血管抑素重组质粒（AAV-AS）联合环磷酰胺（CTX）治疗大鼠皮下胶质瘤的效果。方法大鼠皮下抑制胶质瘤C6细胞,建立荷C6胶质瘤大鼠模型,当肿瘤体积达250～280mm3时,随机分为对照组、CTX组、AAV-AS组及联合组,分别腹腔内注射生理盐水、CTX、AAV-AS、CTX＋从V—AS。每隔3d测量肿瘤的长、短径计算体积;于22d后处死大鼠,采用免疫组化染色法标记抗CD31抗体计算瘤组织中的微血管密度（MVD）,TUNEL法测算肿瘤细胞凋亡指数（AI）。结果对照组肿瘤体积为（2060．339±82．028）mm3,MVD为（20±3）条／HP,AI为1．442±0．329;CTX组分别为（1763．867±124．237）mm3、（18±5）条／HP、1．719±0．464,AAV—AS组分别为（1229．910±141．646）mm3、（13±2）条／HP、3．653±0．238,联合组分别为（1098．320±70．880）mm3、（8±3）条／HP、3．886±0．361。联合组肿瘤体积和MVD与其他组比较,P均〈0．05;联合组AI与对照组及CTX组比较,P均〈0．05,但与AAV—AS组比较,P〉0．05。结论AAV-AS联合CTX治疗大鼠皮下胶质瘤,可减小肿瘤体积,降低血管密度,间接促进肿瘤细胞凋亡。     

近红外光谱技术对胶质瘤大鼠优化散射系数的研究

目的探讨应用近红外光谱技术测量C6荷瘤大鼠脑胶质瘤优化散射系数的特点。方法选取40只SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组20只。将培养的C6细胞立体定向接种于SD大鼠的尾状核,MR I检查肿瘤生长至直径0.5～1.0 cm时作为实验组,正常大鼠作为对照组。利用稳态光纤光谱仪的微创光学探头测量各组的优化散射系数。结果胶质瘤组的优化散射系数低于对照组（P〈0.05）。结论近红外光谱技术可以应用于胶质瘤的检测,其中优化散射系数是检测脑胶质瘤的良好指标。     

结肠癌细胞中整合素αvβ6-ERK直接连接通路的研究

目的证实结肠癌细胞中整合素αvβ6与细胞外信号调节激酶（ERK）之间存在直接连接。方法应用联合免疫沉淀的方法,观察整合素αvβ6免疫耗竭对细胞中ERK的影响,以及ERK免疫耗竭对整合素αvβ6的影响。结果整合素αvβ6和ERK之间存在相互依存的关系,即免疫耗竭整合素αvβ6后,细胞溶液中的ERK明显减少;而免疫耗竭ERK后,细胞溶液中整合素αvβ6也显著降低。结论整合素αvβ6和ERK之间存在着直接的连接,这一直接连接为肿瘤的生长提供了一个重要的信号调节通路。     

抑胶素对大鼠脑胶质瘤增殖细胞核抗原表达的影响

目的 研究抑胶素对大鼠脑胶质瘤增殖细胞核抗原的影响.方法 采用鼠脑立体定向的方法建立大鼠脑胶质瘤动物模型并进行分组:抑胶素不同浓度实验组(Ⅰ:8 μg/kg;Ⅱ:16 μg/kg;Ⅲ:32 μg/kg;Ⅳ:64 μg/kg)、对照组,于治疗14 d后计算瘤体变化,应用免疫组化方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,观察瘤细胞增殖变化情况.结果 抑胶素Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组对C6脑胶质瘤细胞有显著抑制作用,其瘤体积及抑瘤率与对照组比较有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01);抑胶素能够使胶质瘤PCNA指数下降,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组PCNA指数(%)与对照组相比较有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01).结论 抑胶素能够抑制大鼠脑胶质瘤体内生长.其机制之一可能与胶质瘤内PCNA表达,使肿瘤细胞增殖水平下降有关.     

沙利度胺联合替莫唑胺对胶质瘤细胞黏附、侵袭力及整合素表达的影响

目的探讨沙利度胺（THD）联合替莫唑胺（TMZ）对人胶质母细胞瘤细胞株LN229黏附、侵袭能力的影响及其机制。方法LN229分别用加入DMSO（对照组）、THD（THD组）、TMZ（TMZ组）及THD＋TMZ（联合组）的培养液培养,观察细胞的贴壁过程及形态变化。用流式细胞仪检测各组LN229中整合素αvβ3的表达。用黏附抑制实验与细胞侵袭实验测定细胞黏附及侵袭性。结果对照组和TMZ组LN229迅速形成伪足并与其他细胞接触形成单细胞层,整合素αvβ3均有较高表达。THD组和联合组LN229的伪足变短,形态有变圆倾向,整合素αvβ3表达减弱,其中贴壁细胞整合素αvβ3的阳性表达率分别为对照组的81.8%与77.9%,平均荧光强度（MFI）分别为对照组的66.8%、53.7%;悬浮细胞整合素αvβ3阳性表达率分别为对照组的63.7%、55.0%,MFI分别为对照组的49.8%、54.1%。THD组、TMZ组及联合组平均LN229黏附抑制率分别为25.23%、0.88%、26.83%。THD组及联合组平均每视野侵袭细胞数目较对照组和TMZ组减少（P均〈0.05）。结论THD对LN229具有黏附抑制作用,对其黏附、迁移过程的抑制与细胞整合素αvβ3的表达有关。THD与TMZ间无协同作用。     

鼠脑胶质瘤组织中调节性T细胞的表达变化及其作用

目的观察鼠脑胶质瘤组织中调节性T细胞（Treg）的表达变化,并探讨其对脑胶质瘤的作用。方法①建立9L／Fisher344大鼠脑胶质瘤模型,分别于造模后7、14、21d和临终状态时处死大鼠,获取胶质瘤组织及对侧正常脑组织标本,行流式细胞学检测,观察Treg细胞比例变化。②将Fisher344大鼠随机分为实验组和对照组各15只,实验组在造模前3d腹腔内注射抗CD25单克隆抗体（PC61）,对照组注射相同剂量的IgG-1。两组在造模后14d分别处死5只大鼠,比较两组胶质瘤中Treg细胞的浸润情况,剩余大鼠观察生存时间。结果鼠脑胶质瘤组织中浸润的Treg细胞比例明显高于正常脑组织（P〈0．01）,并随时间延长而增高,到临终时达到高峰。应用PC61后,实验组脑胶质瘤中Treg细胞比例明显低于对照组（P〈0．05）,且大鼠的生存时间明显长于对照组（P〈0．05）。结论Treg细胞在鼠脑胶质瘤组织中的表达明显升高,清除Treg细胞能明显抑制鼠脑胶质瘤的生长;Treg细胞在胶质瘤生长过程中发挥重要作用。     

苦参素对HSC-T6整合素αv表达的影响

为探讨持参素对活化的肝星状细胞整合素αv表达和失巢凋亡的影响，把培养激活的HSC—T6分为对照组及实验组，实验组以不同浓度的昔参素干预（分刖为30、60、120、240、480、960mg／L），Westernblot检测整合素αv的表达，结果发现药物千预后整合素αv的表达逐渐降低（分别降低18．4％、30.5％、39．8％、52％、62．3％、76．5％，P〈0．05），且呈浓度依赖性（r=-0．76），表明苦参素能通过抑制整合素αv的表达来影响肝纤维化的发展。     

Tn-C、整合素α5β3、CD44v6在甲状腺滤泡状癌组织中的表达及意义

目的寻找有利于甲状腺滤泡状癌术前鉴别诊断的生物标志物。方法采用免疫组化（SP）法检测60例甲状腺滤泡状癌（A组）、60例甲状腺滤泡状腺瘤（B组）及60例正常甲状腺（C组）组织标本中韧性素-C（Tn-C）、整合素击83、CD44 v6表达。结果Tn-C、整合素α5β3、CD44v6阳性率A组分别为60．00％、56．67％、58．33％，B组分别为6．67％、11．67％、10．00％，C组均为0。A组三种指标阳性率均显著高于B、C组（P〈0．05）。结论联合检测Tn-C、整合素α5β3、CD44v6有助于临床上甲状腺滤泡状良、恶性肿瘤的鉴别诊断。     

整合素α5β1和FAK在上皮卵巢肿瘤组织中的表达及意义

目的研究整合素α5β1和黏着斑激酶（FAK）在卵巢上皮肿瘤组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组化方法检测49例卵巢上皮癌组织（观察组）和15例卵巢上皮良性肿瘤组织（对照组）中整合素α5β1和FAK的表达情况。结果观察组整合素α5β1和FAK的表达明显高于对照组（P〈0．05）;整合素α5β1阳性表达率与卵巢上皮癌组织的分化程度以及临床分期有关（P均〈0．05）,与患者年龄、肿瘤大小及组织学分型无关（P〉0．05）;FAK阳性表达率与卵巢上皮癌组织的临床分期有关（P〈0．05）,与患者年龄、分化程度、肿瘤大小及组织学分型无关（P〉0．05）;整合素α5β1、FAK在卵巢上皮癌组织中的表达呈正相关（r=0．490,P〈0．01）。结论整合素α5β1、FAK在卵巢上皮癌组织中的表达具有相关性,与卵巢上皮癌的发生、侵袭和转移密切相关。     

小柴胡汤对C6胶质瘤大鼠微血管密度和肿瘤细胞增殖活性的影响

目的探讨小柴胡汤对C6胶质瘤大鼠微血管密度和肿瘤细胞增殖活性的影响。方法 18月龄清洁级Wistar老年雄性大鼠60只,右前肢腋窝皮下接种2×106/20μl的细胞悬液;随机分为6组,连续服药5 d,休息4 d,共给药3次,于最后1次给药后2 d处死动物,眼球取血及肿瘤组织。采用ELISA法检测大鼠血清及肿瘤组织中CD34和增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白含量;采用免疫组织化学方法检测大鼠肿瘤组织中CD34的蛋白水平,计数其微血管密度(MVD);同时通过检测PCNA的表达反映肿瘤细胞的增殖活性,并计算其增殖指数。结果与肿瘤对照组比较,小柴胡汤和阳性药各剂量组大鼠血清、肿瘤组织中CD34和PCNA的水平均明显降低(均P<0.01),且二者之间呈正相关(r=0.735,P<0.01);各组MVD和增殖指数均下降(均P<0.01),且二者之间呈正相关(r=0.726,P<0.01),尤以小柴胡汤高、中剂量组作用显著。结论 C6胶质瘤大鼠的微血管生成和肿瘤细胞增殖密切相关,小柴胡汤各剂量组均能通过降低CD34和PCNA的水平从而降低MVD和增殖指数,达到治疗C6胶质瘤的作用,高、中剂量组作用最为显著。     

非小细胞肺癌中整合素与ECM蛋白表达与转移及预后的相关性研究

背景与目的肿瘤的浸润和转移严重威胁着人类生命,正确认识和评估肿瘤的生物学行为有重要的临床意义。整合素和细胞外基质（ECM）的异常表达在肿瘤浸润转移过程中发挥着重要作用。本研究的目的是探讨整合素α5、β1（integrinα5、β1）与细胞外基质（ECM）在人非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与淋巴结转移及患者预后之间的关系,评估它们在肿瘤转移过程中的作用。方法采用免疫组化方法测定119例NSCLC组织中整合素α5、β1及Ⅳ型胶原、纤连蛋白（fibronectin,FN）、细胞黏合素的表达,探讨其与临床病理特征特别是与淋巴结转移的关系,并分析其与患者预后的相关性。结果Ⅳ型胶原表达与淋巴结转移呈负相关（P〈O．01）,与患者预后呈正相关俨〈0．01）,而整合素α5和β1表达与淋巴结转移呈正相关（P〈0．01）,且整合素o5表达与患者预后呈负相关（P〈0．01）。整合素α55表达与整合素β1表达呈正相关而与Ⅳ型胶原表达呈负相关。Ⅳ型胶原在分期较早和分化较好时表达率较高,整合素α5和β1则相反。结论整合素α5和β1的高表达与ECM蛋白的低表达明显与NSCLC的淋巴结转移及患者不良预后相关,整合素α5与Ⅳ型胶原可能可以作为评估患者预后的重要指标。     

整合素αvβ3小干扰RNA载体构建及其对人视网膜血管内皮细胞的干扰效应检测

目的设计和构建整合素αvβ3（integrin αvβ3）特异性的小干扰RNA表达载体，并初步验证其对靶基因的抑制作用j方法设计靶点特异性的寡核苷酸，连接到经BamH 1-Hind Ⅲ酶切线性化的pGCsilencer2．0-U6质粒上，转染重组质粒到人视网膜血管内皮细胞，通过免疫印迹（Western印迹）及逆转录（RT-PCR）实验检测靶基因的抑制情况。结果成功构建pGCU6-ITGαv和pGCU6-ITGβ3 siRNAs重组质粒，转染人视网膜血管内皮细胞，Western印迹，RT-PCR结果证实重组质粒在蛋白及mRNA水平均能抑制整合素αvβ3的表达。结论成功构建了针对整合素αvβ3的siRNA质粒，该质粒可抑制整合素αvβ3在人视网膜血管内皮细胞中的表达。     

整合素β1、FN与CD34在脑胶质瘤中的表达及与预后的关系

目的 检测整合素β1、纤维连接蛋白(FN)、血管生成因子CD34在脑胶质瘤中的表达,并探讨它们与胶质瘤患者术后生存率的关系.方法 采用免疫组织化学SP法检测各组病例脑组织中整合素β1、FN和CD34的表达.结果 整合素β1、FN在胶质瘤中表达的总阳性率分别为61.4%、54.3%,二者在不同级别胶质瘤中的表达差异有统计学意义(P均<0.05),并与胶质瘤病理分级呈正相关(P均<0.01);胶质瘤患者CD34标记的肿瘤内平均微血管密度(MVD)为34.7±6.3,其在不同级别胶质瘤中的表达有统计学差异(P<0.01),与胶质瘤病理分级呈正相关(P<0.01);胶质瘤中整合素β1蛋白、FN蛋白以及MVD值3者间两两呈正相关(P均<0.05);随着胶质瘤病理分级的升高及整合素β1、FN、MVD表达的增强,术后生存率下降(P均<0.05).结论 整合素β1、FN和MVD的高表达与胶质瘤的发生及恶性程度有关,联合检测有助于评估预后.     

前列腺腺癌中整合素αvβ3、基质金属蛋白酶-2和-9表达及关系

目的检测前列腺腺癌中整合素αvβ3、基质金属蛋白酶(MMP)-2和-9表达,分析其相关性及在不同临床病理特征中的意义。方法观察组为58例前列腺腺癌患者,对照组为31例前列腺增生患者,均留取术后新鲜组织,两组中整合素αvβ3、MMP-2和MMP-9表达应用流式细胞术检测。结果整合素αvβ3、MMP-2和MMP-9在观察组中表达量明显高于对照组。观察组中整合素αvβ3、MMP-2和MMP-9表达量均与增殖指数、Gleason评分和转移相关。观察组中整合素αvβ3和MMP-2、整合素αvβ3和MMP-9的表达呈正相关。结论前列腺腺癌中存在着明显的整合素αvβ3、MMP-2和MMP-9的高表达,三种蛋白在肿瘤发生中可能有一定促进作用。整合素αvβ3可能通过对细胞外基质进行降解促进肿瘤进展。     

TNP-470对Wistar大鼠C6胶质瘤细胞抑制作用的体内实验研究

目的探讨TNP-470对Wistar大鼠C6胶质瘤细胞的抑制作用。方法培养C6细胞，建立动物荷瘤模型。荷瘤后将Wistar大鼠随机分为肿瘤对照组（0．9％氯化钠注射液30mg,／kg隔日1次，共6次皮下注射）、TNP-470组（TNP-47030mg,／kg隔日1次，共6次皮下注射）、顺铂组（顺铂5mg／kg每周2次，共4次腹腔内注射）、联合给药组（TNP-47015mg,／kg隔日皮下注射，共6次；同时顺铂2．5mg／kg腹腔内注射，每周2次，共4次），每组15只。观察不同的药物对肿瘤生长的影响。结果与对照组相比，TNP-470治疗组肿瘤重量及最大横径显著降低（P〈0．001）；TNP-470治疗组及联合给药组G0／G1期细胞数显著高于对照组（P〈0．01），而TNP-470治疗组G0／G1期细胞数明显高于联合治疗组（P〈0．01）；TNP-470治疗组、联合给药组及顺铂治疗组G2／M期、S期细胞数显著低于对照组（P〈0．01）。与肿瘤对照组相比，联合给药组和顺铂治疗组及TNP-70组胶质瘤细胞凋亡百分率显著升高（P〈0．01）TNP-470治疗组胶质瘤细胞凋亡百分率显著高于联合治疗组（P〈0．01）。结论TNP-470是一种对胶质瘤有明显疗效的化疗药物，可明显抑制肿瘤生长，使肿瘤重量减轻，同时对大鼠本身体重影响小，行为学症状改变出现较少，疗效明显优于顺铂。