大鼠急性胰腺炎时胰腺腺泡细胞凋亡及Bax,Caspase-8的表达

目的:研究大鼠急性胰腺炎腺泡细胞凋亡情况,凋亡调控基因Bax与凋亡蛋白酶Caspase-8的表达及其同疾病严重程度的关系.方法:胆胰管逆行注入不同浓度去氧胆酸钠方法制备大鼠急性胰腺炎模型,设假手术(SO)组、急性水肿性胰腺炎(AEP)组和急性坏死性胰腺炎(ANP)组.采用TUNEL技术检测胰腺腺泡细胞的凋亡,RT-PCR与免疫组化方法分别分析胰腺组织Bax,Caspase-8 mRNA及蛋白的表达,对胰腺组织进行病理学评分并测定血清淀粉酶及IL-6,TNF-α含量.结果:与SO组比较,AEP与ANP组胰腺组织显示不同程度的病理损害,血清淀粉酶(63 413±6118,1 532 134±17 654 nkat/L vs 15 736±483 nkat/L,P＜0.01)及TNF-α(1.86±0.13,2.97±0.14μg/L vs 0.95±0.08 μg/L,P＜0.01),IL-6 (47.10±7.05,170.10±7.59 ng/L vs 29.20±4.47 ng/L,P＜0.01)浓度显著升高,且ANP组显著高于AEP组(P＜0.05);AEP与ANP组腺泡细胞凋亡指数显著升高(22.09±3.71,6.50±1.58 vs 0.13±0.05,P＜0.01),但ANP组显著低于AEP组(P＜0.05).同时发现,AEP与ANP组胰腺组织Bax (mRNA:1.530±0.501,1.046±0.337;蛋白:453.7±30.5,339.4±26.7)和Caspase-8(mRNA:0.595±0.17,0.505±0.173;蛋白:3606±337,3134±231) mRNA及蛋白表达水平均显著高于SO组(Bax mRNA:0.613±0.244,Bax蛋白:245.2±30.0;Caspase-8mRNA:0.357±0.130,Caspase-8蛋白:2396±266)(P＜0.01),ANP组Bax mRNA及蛋白表达水平显著低于AEP组(1.046±0.337,339.4±26.7 vs 1.530±0.501,453.7±30.5,P＜0.05),ANP组Caspase-8 mRNA及蛋白表达水平低于AEP组,但差异不具有显著性意义.结论:急性胰腺炎时胰腺腺泡细胞发生凋亡伴随凋亡调控基因Bax与凋亡蛋白酶Caspase-8表达增加,并同病情严重程度呈负相关关系.     

信号转导和转录激活子1的活化抑制蛋白对急性胰腺炎的预后判断

目的 检测信号转导和转录激活子1的活化抑制蛋白( PIASl)在急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺中的表达,探讨其对AP病情的评估价值.方法 SD大鼠按随机分配表法分为对照组、急性水肿性胰腺炎(AEP)组、急性坏死性胰腺炎(ANP)组,各15只.术后0.5、6、16、24、48、72 h分批处死大鼠,取血清检测C反应蛋白(CRP)、淀粉酶水平,测胰腺组织含水量,行胰腺常规病理检查并评分,采用蛋白质印迹法和免疫组化法检测胰腺组织PIASI表达.记录大鼠72 h生存情况,行Cox多因素风险评估.结果 ANP组16 h时的胰腺病理评分、胰腺含水量、血清CRP和淀粉酶水平分别为(7.70±2.55)分、(2.9l±0.57)％、(0.36 ±0.05) mg/L、(3141±625) U/L,均显著高于AEP组的(2.60±1.04)分、(2.04±0.47)％、(0.24±0.05) mg/L、(1984±637) U/L,亦显著高于对照组的(0.80±0.42)分、(1.21±0.27)％、(0.14±0.03) mg/L、(978±353) U/L(P值＜0.05或＜0.01).ANP组大鼠平均生存时间为(26.4±3.4)h,较AEP组的(57.3±4.2)h和对照组的(71.3±0.5)h显著缩短(P值均＜0.01).ANP组16 h时的胰腺组织PIAS1蛋白表达较AEP组及对照组显著下调(0.10±0.01比0.80±0.07和0.87±0.05,P＜0.01).Cox分析显示PIAS1为影响AP大鼠生存时间的独立因素之一.结论 PIAS1在ANP中低表达,与AP病情严重度呈负相关,可以成为预测病情严重程度及预后的指标.     

RANTES在急性胰腺炎血-脑脊液屏障通透性变化中的作用

目的 观察急性胰腺炎(AP)大鼠脑组织正常T细胞表达与分泌的活化调节因子(regulated on activation,normal T-cell expressed and secreted,RANTES)和occludin在大脑中的表达,探讨RANTES表达与血-脑脊液屏障通透性变化之间的关系.方法 将49只SD大鼠按数字表法随机分为假手术(SO)组,急性水肿性胰腺炎(AEP)3、6 h组和急性坏死性胰腺炎(ANP)3、6、12、24 h组.以0.5%和5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备AEP和ANP模型.采用RT-PCR、Western blotting和免疫组化法检测脑组织RANTES和occludin的mRNA及蛋白的表达.结果 SO组,AEP 3、6组,ANP 3、6、12、24 h组RANTES mRNA表达量分别为0、0、0、0.36±0.05、0.47 4-0.04、0.65 4-0.05、0.83±0.07,蛋白表达量为0、0、0、0.42±0.03、0.57±0.04、0.78±0.08、1.05±0.08,ANP组较SO组和AEP组显著增加(P<0.01);occludin mRNA表达量为1.21±0.07、1.17±0.07、1.15±0.08、0.84±0.07、0.77±0.05、0.64±0.09、0.56±0.09,蛋白表达量为1.18±0.08、1.16±0.10、1.11±0.10、0.90±0.03、0.65±0.05、0.57±0.05、0.48±0.05,ANP组较s0组和AEP组显著下降(P<0.01).RANTES表达与胰腺组织病理损伤呈正相关(r=0.936,P<0.001);occludin表达与胰腺组织病理损伤呈负相关(r=-0.900,P<0.001);RANTES和occludin呈负相关(r=-0.943,P<0.001).结论 ANP时大鼠脑组织RNANTES 表达呈进行性增高,occludin表达呈进行性下降,RANTES通过下调occludin蛋白表达而改变血-脑脊液屏障通透性.     

Toll受体4在急性胰腺炎引起的血-脑脊液屏障通透性增高中的作用

目的 研究Toll受体4(toll receptor-4,TLR-4)在急性胰腺炎(AP)合并中枢神经系统(CNS)损伤中的作用.方法 将64只SD大鼠分为8组:对照组;急性水肿性胰腺炎(AEP)2、6 h组;急性坏死性胰腺炎(ANP)2、6、12、24、48 h组,每组8只.测定血-脑脊液屏障(BBB)通透性、胰腺病理损伤程度、组织TLR-4的表达,并分析其相互关系.结果 对照组,AEP2、6 h组,ANP 2、6、12、24、48 h组的BBB通透性分别为1.55±0.29、1.64±0.17、1.69±0.24、1.89±0.12、2.66±0.32、2.91.4±0.29、2.89±0.69和1.84±0.07;胰腺病理分值分别为0、2.38±0.92、3.13±0.64、8.50±1.07、9.75±0.71、10.25±1.28、1 1.13±1.25和10.13±1.13.AEP组与对照组无显著筹异,ANP各组较AEP组显著升高(P＜0.05或P＜0.01).BBB通透性与胰腺损伤呈正相关(r=0.626,P＜0.01).对照组和AEP组无TLR-4mRNA和蛋白表达,而ANP各组明显表达,其表达水平与BBB通透性水平呈正相关(r=0.208,P=0.027).结论 ANP时存在BBB通透性的升高,CNS内TLR-4信号途径的激活可能参与了ANP所引起的血-脑脊液屏障通透性的升高.     

重症急性胰腺炎外周血中性粒细胞凋亡及其调控机制的研究

目的 初步探讨重症急性胰腺炎(SAP)外周血中性粒细胞的凋亡及凋亡抑制蛋白survivin在SAP中性粒细胞凋亡延迟调控中的作用.方法　48只SD大鼠随机分为急性坏死性胰腺炎(ANP)组和假手术(SO)组.采用胰胆管逆行注射4%牛磺胆酸钠(1 ml/kg体重)制模,制模后24、48、72 h分别处死动物.取胰腺组织评估病理变化;TUNEL荧光标记法检测外周血中性粒细胞的凋亡;RT-PCR检测外周血中性粒细胞survivin mRNA的表达.结果　ANP组胰腺病理评分较(SO)组明显升高(P ＜ 0.05).ANP组中性粒细胞凋亡率较SO组明显降低,随时间延长更明显(P ＜ 0.05).ANP组中性粒细胞survivin mRNA水平均较SO组明显升高,且随时间延长更明显(P ＜ 0.05).ANP组中性粒细胞凋亡率分别与胰腺病理评分和survivin mRNA水平呈负相关(r = 0.97,r = 0.99, P ＜ 0.05).结论 ANP时外周血中性粒细胞凋亡明显延迟,survivin mRNA高表达,表明survivin在调控SAP外周血中性粒细胞凋亡延迟机制中可能具有重要作用.     

Livin、Smac/DIABLO和PTEN在胃癌组织中的表达及其与胃癌的相关性

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin及线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO和PTEN在胃癌发生发展分子机制中的调控作用及意义.方法:实时荧光定量PCR检测75例手术切除胃癌患者组织, 20例癌旁组织及20例正常胃组织中Livin mRNA和Smac/DIABLO mRNA的表达, Western blot结合免疫组织化学法检测两者与PTEN蛋白的表达及组织学定位.结果:正常胃组织及癌旁组织中均无Livin mRNA表达, 胃癌组织中Livin mRNA相对表达量显著上调(6.374±4.759), 其表达在低分化胃癌组及淋巴结转移组具有显著差异(χ2 = 9.60, 5.51, P<0.01或0.05), 与肿瘤大小, 浸润程度及TNM分期等病理表现无关;Smac/DIABLO mRNA胃癌组织中的表达水平低于正常胃组织及癌旁组织, 但差异无显著性(0.731±0.420 vs 1.104±0.276, 1.061±0.737, 均P>0.05), Smac/DIABLO mRNA的表达水平与胃癌各临床病理因素无关; 其蛋白表达量与Smac/DIABLO mRNA的表达水平存在差异. Smac/DIABLO在肠型胃癌与弥漫型胃癌中的表达有显著差异(χ2 = 5.06,P<0.05). 正常胃黏膜及胃癌组织中未检出PTEN蛋白表达.结论:Li v i n、Sma c/DIABLO及PTEN的表达水平在不同阶段及病理类型的胃癌中存在差异. 实时荧光定量PCR检测Li v i n及Smac/DIABLO的表达量, 有可能为判断胃癌的发生, 分化程度及预测化疗敏感性提供新的指标.     

抵抗素在大鼠急性胰腺炎中的表达

目的 检测抵抗素在大鼠急性胰腺炎(AP)中的表达,探讨其与胰腺病理改变的关系.方法 40只SD大鼠按数字表法随机分为正常组、假手术组、急性水肿性胰腺炎(AEP)组和急性坏死性胰腺炎(ANP)组.AEP组腹腔注射雨蛙素,ANP组腹腔注射精氨酸,正常组未做任何处理,假手术组腹腔注射等容量生理盐水.测定大鼠血清淀粉酶、抵抗素、TNF-α、IL-1β、C反应蛋白(CRP)水平,记录胰腺/体重比值,观察胰腺组织病理变化,免疫组化法检测胰腺组织抵抗素蛋白表达,实时定量PCR法检测胰腺组织抵抗素mRNA表达.结果 抵抗素主要定位于胰腺腺泡细胞的胞质内.AEP组血清淀粉酶水平、胰腺/体重(g/kg)比值、胰腺组织病理评分、抵抗素mRNA表达量及血清抵抗素、IL.1β、TNF-α 和CRP水平分别为(4377 ±343)U/L、(8.67 ±1.43)、(5.39 ±0.26)、(2.04 ±0.19)、(10.21 ±1.34)ng/ml、(184.18 ±45.24)pg/ml、(194.24 ±44.81)pg/ml、(3586 ±63)ng/ml;ANP组分别为(6750 ±322)U/L、(9.33 ±1.76)、(7.81 ±0.28)、(3.29 ±0.30)、(15.14 ±0.84)ng/ml、(349.31 ±94.54)pg/ml、(315.59 ±37.04)pg/ml、(4345 ±244)ng/ml.两组均显著高于假手术组的(1442 ±183)U/L、(4.34±0.42)、(1.10 ±0.21)、(0.88 ±0.08)、(5.13 ±0.74)ng/ml、(108.74 ±31.03)pg/ml、(106.44 ±21.31)pg/ml和(2895 ±165)ng/ml(P<0.01),且该两组间差异也有统计学意义(P<0.01或P<0.05).血清抵抗素水平与CRP、TNF-±、IL-1β水平及胰腺组织病理评分均呈正相关,相关系数r分别为0.711、0.871、0.794和0.812(P<0.01).结论 抵抗素与AP的发生、发展有关,其检测结果可能是评估AP严重程度的有价值的指标之一.     

急性肝衰竭大鼠肝组织中Smac/DIABLO和caspase-3的表达变化

研究显示急性肝衰竭(AHF)与肝细胞凋亡密切相关,而Smac/DIABLO是线粒体凋亡途径的重要促进因子。目的:动态观察AHF模型大鼠肝组织中Smac/DIABLO、caspase-3的表达变化,探讨两者的变化在AHF中的意义。方法:以D-半乳糖胺腹腔注射诱导大鼠AHF模型,于造模后12h、24h、48h、72h、120h、168h和240h分批处死大鼠,以RT-PCR和免疫组化方法检测肝组织Smac/DIABLO、caspase-3 mRNA和蛋白表达,同时检测血清肝功能指标。结果:AHF模型建立后,大鼠血清ALT、AST、总胆红素水平迅速升高,白蛋白水平则明显下降,于48h或72h后逐渐好转。模型大鼠肝组织中Smac/DIABLO、caspase-3 mRNA和蛋白表达随病情加重而逐渐增强,于72h时达高峰,其后随病情好转而逐渐下降,其蛋白表达在中央静脉周围、门管区和坏死区周围最为明显。结论:AHF模型大鼠肝组织中Smac/DIABLO、caspase-3的表达随疾病进程而波动,观察其表达变化有利于AHF预后的判断。抑制Smac/DIABLO在线粒体凋亡途径中的作用,为AHF的治疗提供了新的思路。     

趋化因子在实验性急性胰腺炎早期发病机制中的作用

目的　探讨中性粒细胞趋化因子(CINC)和单核细胞趋化蛋白(MCP-1/JE)在急性胰腺炎(AP)早期发病机制中的作用。方法　分别以浓度为0.5%和5%的牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制备大鼠急性水肿型胰腺炎(AEP)和急性坏死型胰腺炎(ANP)模型,同时设假手术对照组,检测血清淀粉酶、生化指标、观察胰腺组织湿干重比、髓过氧化物酶(MPO)活性和病理学改变,检测胰腺组织中 CINC及MCP-1/JE基因和蛋白表达。结果　与假手术对照组阴性表达相比,造模各组胰腺腺泡细胞内均有强弱不等的CINC和MCP-1/JE蛋白表达,胰腺组织MPO活性和CINC mRNA、MCP-1/JE mRNA表达均随AP逐渐加重及时间进展呈不断上调趋势(P< 0. 05 或 P< 0. 01),且 CINC mRNA、MCP-1/JEmRNA的表达都与胰腺组织病理学改变呈正相关。结论　AP 发生早期,胰腺腺泡细胞为 CINC 和MCP-1/JE的来源之一,在AP早期发病机制中发挥重要作用。     

吡格列酮对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的作用

目的 探讨吡格列酮在重症急性胰腺炎发病机制中与凋亡激活的关系.方法 将80只SD大鼠按随机表法分为急性坏死性胰腺炎组（ANP组）、假手术组、二甲基亚砜溶剂对照组（DMSO组）、吡格列酮干预组（吡格列酮组）,每组20只.采用胰胆管逆行注射5％牛磺胆酸钠1 ml/kg体质量的方法制作ANP模型,吡格列酮组在造模前30 min腹腔注射吡格列酮40 mg/kg体质量.术后1、3、6、12 h分批处死大鼠,收集胰腺组织.采用常规HE染色进行胰腺组织病理评分,采用TUNEL染色方法检测大鼠胰腺细胞凋亡,免疫组化法和蛋白质印迹法检测胰腺组织PPARγ的表达变化,同时检测胰腺组织caspase3的表达变化.结果 吡格列酮干预后大鼠胰腺组织病理损伤较ANP组大鼠有所减轻,差异有统计学意义（P＜0.05）.吡格列酮组胰腺组织PPARγ表达水平为2.69 ±0.46,显著高于ANP组的0.75 ±0.05,差异有统计学意义（P＜0.05）.吡格列酮3h组大鼠胰腺细胞凋亡指数为8.35 ±0.95,显著高于同时点ANP组的4.37±1.22;caspase 3的活性为9.24±1.78,显著高于ANP组的5.04±0.86,差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.结论 吡格列酮干预后大鼠胰腺炎症减轻,PPARγ和caspase 3表达升高,胰腺细胞凋亡率升高.     

紧密连接蛋白occludin在急性坏死性胰腺炎大鼠脑微血管内皮细胞的表达

目的 研究ANP大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白occludin表达的变化及与胰腺病变程度的关系.方法 80只大鼠按完全随机法分为假手术(SO)组和ANP 3、6、12、24 h组.以5%胆酸钠逆行性胰胆管注射诱导ANP大鼠动物模型,行胰腺组织病理学评价,应用免疫组织化学法、RT-PCR法及Western blotting法检测大鼠脑微血管内皮细胞间紧密连接蛋白occludin及其mRNA表达.结果 occludin蛋白沿脑血管线性表达.ANP 3 h组蛋白表达量从S0组的0.49±0.08下降到0.35±0.09;occludin mRNA表达从1.50±0.30减少到1.01±0.18(P<0.05).ANP 6 h组达最低值,分别为0.26±0.07和0.93±0.19.ANP 12、24 h组occludin蛋白和mRNA表达量又较ANP 6 h组增加(P<0.05),但仍低于SO组(P<0.05).occludin蛋白及mRNA表达与胰腺组织损害程度呈明显负相关(Pearson相关系数分别为-0.48和-0.536,P<0.05).结论 在ANP进程中,脑微血管内皮细胞间紧密连接蛋白occludin及其mRNA均呈下调趋势,且与胰腺病变程度呈负相关.     

急性胰腺炎大鼠血和组织中降钙素原水平的变化

目的 观察急性胰腺炎(AP)大鼠血和组织中降钙素原(procalcitonin,PCT)水平的变化,并探讨其意义.方法 将102只雄性Wistar大鼠按数字表法随机分为正常对照组(6只)、脂多塘(LPS)组(24只)、急性水肿性胰腺炎(AEP)组(24只)、急性坏死性胰腺炎(ANP)组(24只)和ANP+LPS组(24只).皮下注射雨蛙素制备AEP模型,逆行胆胰管注射牛磺胆酸钠制备ANP模型.术后3、6、18、24 h分批处死动物,胰腺组织常规病理检查并评分;取血检测PCT水平;取肝、肺、脾、胰腺、小肠及大肠组织检测PCT含量.结果 AEP和ANP模型制备成功.术后6 h时,对照组、LPS组、AEP组、ANP组和ANP+LPS组血PCT水平分别为(0.0144±0.0082)ng/ml、(0.1722±0.0449)ng/ml、(0.4751±0.0572)ng/ml、(0.7070±0.1040)ng/ml和(1.1960±0.8644)ng/ml,各组间相差显著(P＜0.05).正常大鼠肝、肺、脾、胰腺、小肠及大肠组织均检测到PCT.与之相比,ANP组肝和胰腺PCT含量无明显变化;肺、脾及大肠PCT含量显著降低[分别为(5.63±0.62)ng/ml对(6.85±0.46)ng/ml,(4.73±1.27)ng/ml对(6.88±0.31)ng/ml,(1.08±0.52)ng/ml对(4.12±1.02)ng/ml,P值均＜0.01],而小肠组织明显升高[(2.51±0.90)ng/m1对(0.98±0.20)ng/ml,P＜0.01].结论 血清PCT水平与AP的严重程度及感染相关,AP时各组织PCT含量的不同变化可能与器官功能的改变有一定的关系.     

PPAR-γ激动剂对急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤的作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)激动剂罗格列酮对ANP大鼠肺损伤的作用及其机制.方法 雄性Wistar大鼠54只,按完全随机法分为假手术组(SO组)、ANP组、罗格列酮组.胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备ANP模型.SO组、ANP组在造模前30 min股静脉注射10%DMSO(0.2 ml/100 g体重);罗格列酮组则注射等量10%DMSO溶解的罗格列酮(6 mg/kg体重).术后3 h、6 h、12 h分批剖杀,每个时间点6只.检测血清淀粉酶、肺组织髓过氧化物酶(MPO)、肺湿干重比、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量.取胰头部胰腺组织和肺组织行病理学检查.RT-PCR检测肺组织TNF-α mRNA和ICAM-1 mRNA的表达.结果 ANP组血淀粉酶、肺MPO、湿干重比、BALF蛋白含量、胰腺及肺病理分值、肺脏TNF-α mRNA和ICAM-1 mRNA的表达水平均随时间延长而逐渐升高,12 h时分另0为(5353.0±728.2)U/L、(1.12±0.14)U/g、3.00±0.14、(0.438±0.056)g/L、11.17±0.93、8.17±0.75、0.57±0.03和1.53±0.08,均明显高于SO组(P<0.05或P<0.01).罗格列酮12 h组上述指标分别为(2847.4±841.0)U/L、(0.84±0.06)U/g、2.13±0.36、(0.283±0.078)g/L、7.75±0.27和4.33±0.82、0.26±0.04和0.84±0.02,均明显低于ANP 12 h组(P<0.05或P<0.01),但仍高于SO组(P<0.05或P<0.01).结论 罗格列酮对ANP大鼠胰腺及肺损伤具有一定程度保护作用,其机制可能与抑制肺组织TNF-α、ICAM-1 mRNA的表达有关.     

抵抗素在大鼠急性胰腺炎中的表达

目的检测抵抗素在大鼠急性胰腺炎（AP）中的表达,探讨其与胰腺病理改变的关系。方法40只SD大鼠按数字表法随机分为正常组、假手术组、急性水肿性胰腺炎（AEP）组和急性坏死性胰腺炎（ANP）组。AEP组腹腔注射雨蛙素,ANP组腹腔注射精氨酸,正常组未做任何处理,假手术组腹腔注射等容量生理盐水。测定大鼠血清淀粉酶、抵抗素、TNF-α、IL-1β、C反应蛋白（CRP）水平,记录胰腺／体重比值,观察胰腺组织病理变化,免疫组化法检测胰腺组织抵抗素蛋白表达,实时定量PCR法检测胰腺组织抵抗素mRNA表达。结果抵抗素主要定位于胰腺腺泡细胞的胞质内。AEP组血清淀粉酶水平、胰腺／体重（g／kg）比值、胰腺组织病理评分、抵抗素mRNA表达量及血清抵抗素、IL-1β、TNF-α和CRP水平分别为（4377±343）U／L、（8．67±1．43）、（5．39±0．26）、（2．04±0．19）、（10．21±1．34）ng/ml、（184．18±45．24）pg／ml、（194．24±44．81）pg／ml、（3586±63）ng／ml;ANP组分别为（6750±322）U／L、（9．33±1．76）、（7．81±0．28）、（3．29±0．30）、（15．14±0．84）ng／ml、（349．31±94．54）pg／ml、（315．59±37．04）pg／ml、（4345±244）ng／ml。两组均显著高于假手术组的（1442±183）U／L、（4．34±0．42）、（1．10±0．21）、（0．88±O．08）、（5．13±0．74）ng/ml、（108．74±31．03）pg／ml、（106．44±21．31）pg／ml和（2895±165）ng／ml（P〈0．01）,且该两组间差异也有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。血清抵抗素水平与CRP、TNF-α、IL-1β水平及胰腺组织病理评分均呈正相关,相关系数r分别为0．711、0．871、0．794和0．812（P〈0．01）。结论抵抗素与AP的发生、发展有关,其检测结果可能是评估AP严重程度的有价值的指标之一.     

急性坏死性胰腺炎胰腺组织中褪黑激素受体表达及褪黑激素干预作用

目的 探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)胰腺组织中褪黑激素受体MT1表达及褪黑激素(MT)干预作用.方法 54只SD大鼠随机分为假手术组(SO组)、急性坏死性胰腺炎组(ANP组)、MT干预组(MT组),每组18只.应用胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠的方法诱导ANP模型,MT组于诱导模型前30 min腹腔注射MT.术后4 h、8 h和12 h分批处死大鼠(每个时间点6只),以免疫组化和实时定量PCR分别检测胰腺组织中MT1蛋白及MT1 mRNA的表达;检测血清淀粉酶、胰腺组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及TNFα的含量,并行胰腺病理检查.结果 (1)ANP组胰腺病理损伤呈进行性加重,MT组胰腺病理损伤较ANP组明显减轻(P＜0.05).(2)淀粉酶、MDA、TNFα水平在ANP组较S0组明显增高(P＜0.05或P＜0.01),而MT组较相应时间点ANP组显著降低[12 h,(2348.00±278.90)U/L比(3194.83±538.10)U/L,(2.255±0.472)μmol/L比(2.960±0.722)μmol/L,(102.929±29.399)ng/L比(378.544±183.454)ng/L,P＜0.05].SOD水平在ANP组各时点较SO组显著降低(P＜0.01),而MT组较ANP组显著升高[12 h,(11.448±1.594)U/L比(8.427±1.950)U/L,P＜0.05].(3)与SO组相比,MT1蛋白及MT1 mRNA表达在ANP组胰腺组织中明显下降(P＜0.05),且随ANP病变加重表达减弱,而MT组表达较ANP组明显增多.结论 MT干预可提高SOD活力,降低MDA、TNFα水平,故能显著减轻ANP时胰腺病理损伤,MT1在ANP发病机制中可能具有重要作用,MT对ANP中的干预作用可能与上调胰腺组织中MT1的表达有关.     

早期阻断MCP-1对实验性急性坏死性胰腺炎的作用

目的 探讨趋化因子MCP-1对实验性急性坏死性胰腺炎(ANP)及其并发症的影响.方法 60只SD大鼠按数字表法分为假手术组、ANP组和MCP-1多抗干预组(干预组),各20只.采用3.5%牛黄胆酸钠制备ANP模型,干预组于制模后0、6 h皮下注射抗MCP-1多抗.观察血清淀粉酶、MCP-1、D-乳酸含量变化;观察胰腺、肺、小肠组织病理改变及MCP-1 mRNA的表达;检测胰腺MCP-1蛋白表达;检测肺、小肠髓过氧化酶(MPO)含量.结果 干预组12 h的血淀粉酶、MCP-1、D-乳酸含量分别为(4666±412)U/L、(39.53±8.25)pg/ml和(6.3±2.2)mg/L,均显著低于ANP组的(9611±363)U/L、(63.42±9.32)pg/ml和(9.3±2.1)mg/L(P值均<0.05);胰腺、肺、小肠组织MCP-1 mRNA表达量分别为0.431±0.009、0.211±0.018和0.442±0.017,均显著低于ANP组的0.624±0.010、0.523±0.019和0.569±0.024(P值均<0.05);胰腺MCP-1蛋白表达评分为2.0±0.1,显著低于ANP组的4.0±0.2(P<0.05);肺、小肠组织MPO含量分别为(11.1±3.0)U/g组织和(19.2±2.0)U/g组织,均与ANP组的(39.2±3.1)U/g组织和(13.1±2.1)U/g组织有显著差异(P值均<0.05).结论 早期阻断MCP-1不但可以减轻急性胰腺炎病理损伤,而且能减轻急性肺损伤和肠屏障的损伤程度.     

NF-κB对急性坏死性胰腺炎大鼠甲状旁腺激素受体表达和低钙血症的影响

目的 探讨NF-κB对ANP大鼠甲状旁腺激素受体(PTH1R)表达及低钙血症的影响.方法 将雄性SD大鼠24只按完全随机法分为对照组、ANP组和四氢化吡咯二硫代氨基甲酸脂预处理组(PDTC组),各8只.以5%牛磺脱氧胆酸钠逆行胰胆管注射建立ANP模型.观察6 h后各组血清钙浓度以及胰腺组织病理改变,蛋白免疫印渍法检测肾脏和骨组织NF-κB、PTH1R蛋白表达,RT-PCR检测肾脏和骨组织FTH1R mRNA表达.结果 对照组、ANP组和PDTC组血钙浓度分别为(2.31±0.03)mmol/L、(2.01±0.03)mmol/L和(2.12±0.05)mmol/L,3组间差异显著(P<0.05).ANP组肾脏和骨组织的NF-κB蛋白表达量分别为1.53±0.08和0.47±0.19;PDTC组分别为0.61±0.13和0.36±0.06,两组差异显著(P<0.05).ANP组肾脏和骨组织PTH1R mRNA的表达量分别为0.27±0.08和0.29±0.06,PTH1R蛋白表达分别为0.87±0.07和0.31±0.09;PDTC组分别为0.57±0.27和0.37±0.11,1.13±0.17和0.68±0.15,两组差异显著(P<0.05).ANP组NF-κB活性较对照组明显升高,PTH1R表达明显下降;与ANP组比较,PDTC组NF-κB活性降低,血清钙水平明显升高,PTH1R的表达上调(P<0.05).结论 NF-κB可能通过间接下调组织PTH1R的表达,致血清钙显著下降.PDTC对改善ANP低钙血症有一定意义.