替莫唑胺缓释系统的构建及体外抗胶质瘤细胞的实验研究

目的 制作一种安全有效的替莫唑胺(TM)缓释系统,使药物稳定释放,减少突释现象,减少局部使用时的神经毒性。方法 首先通过电纺丝方法制作TM/聚碳酸亚丙酯(PPC)纺丝膜,探论其制作条件,分析纤维直径、载药量和包封率等参数。然后将部分纺丝膜用海藻酸(ALG)包被,在体外观察两种膜片的药物释放速度及对C6胶质瘤细胞的抑制作用。结果 TM/PPC缓释系统仅在纺丝距离为15～20cm、纺丝电压为10～15kV、聚碳酸亚丙酯质量浓度为8%时可以纺出均匀平滑的纺丝膜。纺丝纤维直径约为3μm,持续释放时间为12d。通过包被ALG,能明显减少突释的发生。两种纺丝膜在体外实验中均显示出较强的持续抑制胶质瘤细胞的能力。结论 通过电纺丝方法制作替莫唑胺缓释系统切实可行。通过包被海藻酸,可以减少突释现象,使药物释放曲线更为平缓。     

可吸收球囊制作的实验研究

目的研究以可降解吸收的高分子材料制成的可吸收球囊的生物学性能及其用于椎体成形术治疗胸腰椎爆裂骨折的可行性。方法采用可吸收高分子材料——DL-乳酸与ε-己内酯（70：30）的共聚物（PDLLA—CL）制造直径1．9cm的可吸收球囊，进行体外降解试验和动物实验，观察胫骨上端回植骨块的愈合情况及球囊的吸收情况。结果可吸收球囊的初始拉伸强度为8．5MPa，2周后为4．2MPa，于体外24周可完全降解。载负磷酸钙骨水泥的可吸收球囊的动物实验显示，于16周时，球囊已部分吸收，胫骨上端开槽处回植骨块愈合良好，无骨膜反应和排斥反应。结论采用PDLIA—CL研制的可吸收球囊，一方面具有良好的生物相容性，对机体正常组织结构无不良影响；另一方面具备良好的机械性能，可以将灌注入内的磷酸钙骨水泥与周围组织形成一个良好的分割屏障，有效防止骨水泥的渗漏。     

PLGA神经诱导管的制作及其神经再生诱导作用

目的观测制备的聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物[Poly(DL-lactide-co-glycolide)PLGA]管的神经再生诱导作用.方法采用大鼠坐骨神经缺损模型观察以两种构成比不同[(85:15)或(50:50)]的聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物制备的PLGA管的神经再生诱导作用.结果(1)体内神经桥接情况下,硅胶管促发有明显的纤维组织增生,并形成包囊包裹于管壁,而两种PLGA管组未见类似现象;(2)与硅胶管组相似,PLGA(85:15)管能够顺利完成坐骨神经缺损桥接作用,再生神经电生理及组织学评价显示两组无明显差异,而PLGA(50:50)管体内神经桥接4周时即出现破裂,不能为坐骨神经桥接提供良好的支持作用.结论与硅胶管及PLGA(50:50)管相比,PLGA(85:15)管能够提供良好的神经再生诱导作用,而且由于其并物反应小、生物相容性佳,生物降解率适当,是一种良好的周围神经组织工程材料.     

静电纺丝聚乳酸/聚己内酯共混纤维支架与兔脂肪源干细胞的体外生物相容性研究

目的利用兔脂肪源干细胞评价静电纺丝聚乳酸/聚己内酯共混纤维支架的生物相容性。方法脂肪源干细胞取自新西兰白兔皮下脂肪组织,经分离、培养后接种到待检支架上,使用倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞在支架上的生长形态;MTT法比较支架上培养和常规培养条件下的脂肪源干细胞生长曲线与倍增时间。结果脂肪源干细胞在纤维支架上生长良好,生长曲线与常规培养时基本一致,两组间细胞倍增时间差异无统计学意义(P>0.05)。结论脂肪源干细胞能够在静电纺丝聚乳酸/聚己内酯共混纤维支架材料上正常生长增殖,该支架材料生物相容性好。     

电纺PCL、PLA和PVA纳米纤维膜的制备、表征及细胞活性的研究

目的:探讨不同浓度和接收速度对聚己内酯(PCL)、聚乳酸(PLA)和聚乙烯醇(PVA)电纺纳米纤维的纤维结构、直径、机械性能以及细胞活力的影响.方法:利用静电纺丝技术对不同浓度的PCL、PLA和PVA溶液进行电纺,同时设定不同的接受速度;通过扫描电镜(SEM)和力学仪器对PCL、PLA和PVA纳米纤维膜的平均直径和机械...     

不同比例聚乳酸-聚己内酯/泊洛沙姆静电纺纳米材料作为皮肤支架的可能性

 目的 探讨不同比例聚乳酸-聚己内酯/泊洛沙姆［poly (ε-caprolactone-co-lactide) /Poloxamer,PLCL/Poloxamer］静电纺材料作为皮肤组织支架的可能性。方法 静电纺丝技术制备纯PLCL及PLCL/Poloxamer比例75/25、85/15、90/10、95/5的纳米纤维材料,测定支架表面形态、机械以及亲水性能。将脂肪干细胞接种至支架表面,第1、3、7、10天行水溶性四唑盐(CCK 8)分析,并于第3天扫描电镜观察细胞形态。结果 90/10、95/5比例支架的断裂强度高于纯PLCL及75/25、85/15比例支架(分别为9.31±0.29,9.27±0.50,7.08±0.21,7.46±0.27和7.47±0.21,MPa),90/10、85/15、75/25比例的水接触角低于纯PLCL及95/5比例(分别为0° ,0°,0°,131.5°±8.9°和7.8°±2.7°)。在第1、3、7、10天时,PLCL/Poloxamer材料脂肪干细胞黏附及增殖能力明显高于纯PLCL。扫描电镜显示90/10比例PLCL/Poloxamer支架上有大量脂肪干细胞生长,细胞形态完整、表面光滑。结论 90/10比例PLCL/Poloxamer支架的机械性能及亲水性能高于其他组,该材料与大鼠脂肪干细胞的相容性良好,是更适合脂肪干细胞黏附及增殖的组织工程材料。     

人脑恶性胶质瘤细胞培养液氨基酸成分的研究

本文报告了人脑恶性胶质瘤SHG-44细胞培养液中氨基酸的变化。其中精氨酸、苏氨酸十丝氨酸等有明显降低,而谷氨酸、丙氨酸、鸟氨酸等有明显增高。精氨酸的添加实验测得本细胞所需精氨酸的合适浓度为200mg/L～100mg/L。通过添加天门冬氨酸改进Eagte基础培养基,可使之更适于胶质细胞生长。从10-羟基癸烯酸对细胞的影响来探讨以培养液氨基酸的变化作为细胞动态观察的一个指标。     

羟基喜树碱抗高转移性人肺癌细胞增殖和侵袭的研究

目的:研究10-羟基喜树碱抗人肺癌细胞增殖和侵袭的作用,并探讨其抗侵袭作用的机理。方法:10-羟基喜树碱作用于克隆化高转移人肺癌细胞(PGCL3),用细胞增殖抑制试验、软琼脂集落形成试验、对重建基底膜的侵袭试验、趋化运动试验、对层粘连蛋白的粘附试验以及组织蛋白酶B活性测定观察细胞增殖和侵袭能力的变化。结果:10-羟基喜树碱可降低PGCL3细胞增殖能力并呈剂量依赖性,IC_(50)为0.17μmol/L;0.25μmol/L和0.5μmol/L10-羟基喜树碱能抑制PGCL3细胞的侵袭能力(P<0.01)且有剂量依赖性。抗侵袭作用机理的分析结果显示上述浓度的药物对细胞的运动、粘附及组织蛋白酶B分泌均有明显的抑制作用(P<0.01);软琼脂集落形成率也显著降低。结论:10-羟基喜树碱有抗PGCL3人肺癌细胞增殖和侵袭作用。其抗侵袭机理是通过对侵袭各个基本环节的抑制实现的。     

Ⅰ型γ分泌酶抑制剂抗恶性胶质瘤的体外/体内实验研究

目的 明确γ-分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibtor,GSI)对恶性胶质瘤细胞体外、体内的抗瘤作用,并初步探讨其机制。方法 通过MTT法观察GSI-Ⅰ对胶质瘤细胞株U87及U251生长曲线的抑制作用;以DAPI染色法观察GSI-Ⅰ作用后是否导致细胞凋亡;用荧光定量RT-PCR法检测GSI-Ⅰ对胶质瘤细胞中Notch信号的阻断作用,并通过Western-blot检测GSI-Ⅰ对胶质瘤细胞内抗凋亡蛋白Akt的表达及磷酸化水平的影响;最后,采用裸鼠成瘤实验验证GSI-Ⅰ对胶质瘤细胞体内增殖的抑制作用,以及GSI-Ⅰ对瘤组织的毒性作用。结果 GSI-Ⅰ可显著抑制U87及U251细胞的生长曲线,并直接诱导细胞凋亡。GSI-Ⅰ可有效阻断细胞内Notch信号通路转导,并下调抗凋亡蛋白Akt的活性。动物实验结果显示,GSI-Ⅰ预处理可降低U251细胞的体内成瘤能力,而瘤周注射GSI-Ⅰ可导致瘤组织大面积坏死。结论 GSI-Ⅰ有明确的体外、体内抗恶性胶质瘤效应,其可能机制为下调细胞内Notch信号通路及抗凋亡通路,但具体分子机制仍需进一步研究。     

合成的纳米炭对羟基喜树碱的吸附和缓释作用的实验研究

目的 评价采用气相合成法制备的纳米炭对羟基喜树碱的吸附和释放效果.方法 将羟基喜树碱与纳米炭制备成混悬液(HCPT-CN),采用透析法,紫外分光光度计检测HCPT-CN达平衡时透析液中游离HCPT的浓度,计算出该混悬液的释药率、吸附率和载药量并与HCPT溶液对照.结果 HCPT溶液、HCPT-CN混悬液体外释药34 h达最高值,释药率分别为97.6%、60.0%;该混悬液对3.108mg HCPT的吸附率为40%,吸附量为0.01656 mg/mg.结论 采用气相合成法制备的纳米炭对HCPT具有一定的吸附和缓释作用,但尚需进一步改进.     

仿生矿化前后静电纺复合支架的性能对比

目的：用10倍模拟体液（10×SBF）仿生矿化丝素/壳聚糖（SF/CS）电纺支架制备骨仿生支架,并对比矿化前后支架的物理性能及诱导细胞成骨分化的能力。方法：通过扫描电镜（SEM）、傅里叶红外光谱（FT?IR）、吸水率和力学性能检测对比矿化前后支架成分及物理性能。通过活细胞染色和Cell Counting Kit?8（CCK?8）对比仿生矿化对于人骨髓间充质干细胞（HBMSC）在支架上黏附和增殖的影响。通过碱性磷酸酶（ALP）染色和茜素红染色（ARS）对比支架矿化前后对HBMSC成骨分化的诱导能力。结果：SEM、FT?IR、吸水率和力学性能证实了矿化的成功及支架物理性能的提高。活细胞染色和CCK8证明仿生矿化行为并未增加支架的细胞毒性,ALP和ARS证明矿化后支架更易诱导HBMSC的成骨分化。结论：经SBF仿生矿化后支架较原支架更符合骨组织工程的要求。     

人胶质瘤细胞的侵袭能力和胶原溶解作用的体外研究

目的：观察人胶质瘤细胞的体外侵袭能力及对胶原的溶解作用。方法：在体外用Boyden小室侵袭实验评价人恶性胶质瘤细胞株U87MG穿过Matrigel基膜胶的迁移能力;用琼脂-明胶凝胶观察U87MG细胞条件培养基对基质胶原溶解的影响。结果：U87MG胶质瘤细胞穿过Matrigel膜的细胞数明显多于加入EDTA或加入抗MMP-2抗体的U87MG胶质瘤细胞的穿膜细胞数（P<0.01）,而后两者穿膜细胞数之间的差异无显著性（P>0.05）,EDTA或抗MMP-2抗体对U87MG细胞的穿膜细胞数有明显的抑制作用,抑制率分别为79.2%和77.1%。U87MG细胞条件培养液能在凝胶孔周围引起明显增大的透明环,用EDTA或抗MMP-2抗体抑制MMP-2酶活性可明显减少透明环的形成。结论：U87MG胶质瘤细胞的侵袭能力和胶原降解作用取决于MMP-2,提示MMP-2在胶质瘤侵袭生长中起重要作用。     

人脂肪干细胞复合珊瑚支架在三维培养下成骨活性的初步研究

目的探讨人脂肪干细胞（ADSCs）作为种子细胞复合珊瑚支架材料在体外三维培养下的成骨活性。方法取行脂肪抽吸术患者的脂肪组织,I型胶原酶消化进行培养,贴壁细胞传代,取第2代细胞进行诱导,培养基中添加成骨诱导剂地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸和维生素D3。成骨诱导后复合珊瑚继续培养,以未诱导的ADSCs复合物为对照,进行生长曲线、DIO染色后的共聚焦荧光显微镜、碱性磷酸酶（AKP）和骨钙蛋白（OCN）生物化学定量检测。结果7～8d后ADSCs在材料上生长进入平台期,诱导ADSCs复合珊瑚7d后生长良好。诱导ADSCsAKP表达随着时间的推移不断增强,而且在检测的各个时间点,诱导ADSCsAKP表达水平均明显高于未诱导ADSCs（均P〈0．05）。诱导ADSCs在珊瑚支架上第7天后检测到OCN表达,并一直增高,且从第7天开始OCN表达均明显高于未诱导ADSCs（均P〈0.05）。结论脂肪干细胞复合珊瑚支架在三维培养下能够向成骨细胞表型分化。     

胶质瘤中hsa-miR-20a的表达及对细胞增殖的影响

目的探讨hsa-miR-20在胶质瘤中的表达情况及对胶质瘤细胞增殖的影响。方法应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法检测正常脑组织和不同级别脑胶质瘤组织中miR-20a的表达情况;脂质体转染miR-20a模拟物后,通过MTT比色法及流式细胞术观察胶质瘤U251细胞增殖的变化。结果 (1)与正常脑组织相比,胶质瘤组织miR-20a的表达水平显著增高(P=0.035);(2)胶质瘤组织恶性程度越高,miR-20a表达越高(P<0.001);(3)u251细胞转染miR-20a模拟物后,增殖能力明显加快,S期细胞比例明显增多(P<0.001)。结论 miR-20a能促进胶质瘤细胞的增殖,其高表达在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用。     

Biocompatibility evaluation of electrospun aligned poly(propylene carbonate) nanofibrous scaffolds with peripheral nerve tissues and cells in vitro

Background  Peripheral nerve regeneration across large gaps is clinically challenging. Scaffold design plays a pivotal role in nerve tissue engineering. Recently, nanofibrous scaffolds have proven a suitable environment for cell attachment and proliferation due to similarities of their physical properties to natural extracellular matrix. Poly(propylene carbonate) (PPC) nanofibrous scaffolds have been investigated for vascular tissue engineering. However, no reports exist of PPC nanofibrous scaffolds for nerve tissue engineering. This study aimed to evaluate the potential role of aligned and random PPC nanofibrous scaffolds as substrates for peripheral nerve tissue and cells in nerve tissue engineering.

Methods  Aligned and random PPC nanofibrous scaffolds were fabricated by electrospinning and their chemical characterization were carried out using scanning electron microscopy (SEM). Dorsal root ganglia (DRG) from Sprague-Dawley rats were cultured on the nanofibrous substrates for 7 days. Neurite outgrowth and Schwann-cell migration from DRG were observed and quantified using immunocytochemistry and SEM. Schwann cells derived from rat sciatic nerves were cultured in electrospun PPC scaffold-extract fluid for 24, 48, 72 hours and 7 days. The viability of Schwann cells was evaluated by 3-[4,5-dimethyl(thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl] tetrazolium bromide (MTT) assay.

Results  The diameter of aligned and random fibers ranged between 800 nm and 1200 nm, and the thickness of the films was approximately 10–20 μm. Quantification of aligned fiber films revealed approximately 90% alignment of all fibers along the longitudinal axis. However, with random fiber films, the alignment of fibers was random through all angle bins. Rat DRG explants were grown on PPC nanofiber films for up to 1 week. On the aligned fiber films, the majority of neurite outgrowth and Schwann cell migration from the DRG extended unidirectionally, parallel to the aligned fibers. However, on the random fiber films, neurite outgrowth and Schwann cell migration were randomly distributed. A comparison of cumulative neurite lengths from cultured DRGs indicated that neurites grew faster on aligned PPC films ((2537.6±987.3) μm) than randomly-distributed fibers ((493.5±50.6) μm). The average distance of Schwann cell migration on aligned PPC nanofibrous films ((2803.5±943.6) μm) were significantly greater than those on random fibers ((625.3±47.8) μm). The viability of Schwann cells cultured in aligned PPC scaffold extract fluid was not significantly different from that in the plain DMEM/F12 medium at all time points after seeding.

Conclusions  The aligned PPC nanofibrous film, but not the randomly-oriented fibers, significantly enhanced peripheral nerve regeneration in vitro, indicating the substantial role of topographical cues in stimulating endogenous nerve repair mechanisms. Aligned PPC nanofibrous scaffolds may be a promising biomaterial for nerve regeneration.

     

靶向survivin基因RNAi沉默表达对恶性胶质瘤细胞侵袭的影响

目的 探讨存活素(survivin)基因对胶质瘤细胞侵袭的影响和可能机制.方法 应用survivin基因小干扰RNA(siRNA)转染处理胶质瘤SNB19细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测survivin基因mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞集落生长数和侵袭力.采用Western blot 方法检测癌细胞尿激酶纤溶酶原激活物(uPA)蛋白水平.结果 survivin siRNA转染组细胞的survivin基因mRNA和蛋白水平明显下调.转染组胶质瘤细胞集落生长数和癌细胞穿膜细胞数明显下调,且与浓度相关.转染组癌细胞uPA蛋白水平明显下降.结论 Survivin基因在胶质瘤细胞侵袭中起着重要作用,采用靶向survivin siRNA转染可抑制其侵袭能力.其机制可能与下凋uPA基因表达有关.     

电纺纳米银/碳纳米纤维敷料的制备及抗菌效果评价

目的：利用静电纺丝技术制备纳米纤维敷料,并研究其抗菌效果。方法：采用聚丙烯腈(PAN)为前驱体高分子,利用静电纺丝技术及高温碳化方法制备碳纳米纤维敷料,并通过银镜反应制备纳米银/碳纳米纤维复合敷料。将2种样本与庆大霉素纸片及优拓（urgotul）敷料采用Kirby-Baucer法进行体外抑菌实验。结果：成功制备出具有纳米级支架结构且负载纳米银的的创面敷料。体外抑菌实验结果显示,纳米银/碳纳米纤维复合敷料和优拓对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌标准菌株均有较好的抑菌效果;纳米银/碳纳米纤维复合敷料对于金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌抑菌效果优于优拓,但对大肠杆菌的抑制效果低于优拓;碳纳米纤维未显示出具有抑菌能力。结论：纳米银/碳纳米纤维复合敷料具有纳米级支架结构,是具有较好抗菌能力的烧伤创面敷料。     

SN-38对K562细胞的增殖抑制、凋亡诱导及其与塞来昔布联合化疗的协同作用

目的观察SN-38对慢性粒细胞白血病(CML)急变细胞株K562增殖抑制及凋亡诱导作用,并探讨其作用机制及与塞来昔布联合化疗的协同作用。方法采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪以AnnexinⅤ/PI双标记法检测细胞凋亡,PI单染法检测细胞周期;特异性荧光底物检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活性;Western blot法检测凋亡相关蛋白表达变化。以CalcuSyn药效学软件计算联合指数(CI),评价SN-38与塞来昔布对K562细胞的联合效应。结果 SN-38对K562细胞具有时间和浓度依赖性的增殖抑制作用,SN-38可以诱导K562细胞凋亡,伴随G2/M期细胞比例持续下降,Caspase-3、Caspase-8及Caspase-9活性以时间依赖方式升高,并显著下调K562细胞的Survivin蛋白表达。SN-38与塞来昔布联合化疗后,K562细胞增殖抑制率较两单药组明显增强;两药在低浓度时具有剂量依赖的协同效应(Fa<0.87)。结论 SN-38体外抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能通过下调Survivin表达,并激活Caspase有关。SN-38与塞来昔布联合应用对K562细胞具有剂量依赖的协同细胞毒效应。     

他莫昔芬对人胶质瘤细胞的抑制作用

目的:探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂,他莫昔芬对人胶质瘤细胞U251生长的作用。方法:U251细胞PKCα和雌激素受体(ER)的表达用免疫组化,细胞活性分析用台盼蓝实验和四唑盐(MTT)比色实验,细胞增殖和凋亡,通过流式细胞仪进行检测,PKC抑制剂他莫昔芬(TAM)作用终浓度为5,2.5,1.25μg/m l;治疗对照为卡莫司汀(BCNU),终浓度与TAM相同。结果:细胞PKCα表达阳性,ER表达阴性。加入TAM后,U251细胞变老,脱落,细胞总数减少;活细胞比例为(82.553±12.187)%,MTT比色吸光值为0.607±0.079,空白对照组为(98.683±1.993)%和0.865±0.103,BCNU组(68.159±16.587)%和0.610±0.087,TAM组与空白对照组比较,细胞活力明显下降(P<0.001),与BCNU组比较无统计学差异;流式细胞仪检测显示TAM组G2-M期细胞相对空白对照组增多,为(12.418±3.646)%,TAM组细胞凋亡为(6.435±3.347)%,空白对照组为(1.205±0.985)%,二者有显著差异(P<0.001),并且有随着剂量减小,凋亡细胞增多的趋势(P=0.033)。提示增殖抑制,凋亡增加,卡莫司汀组表现为S期细胞增加,凋亡细胞比例比TAM明显减少(P=0.018)。结论:他莫昔芬对人U251胶质瘤细胞生长具有明显的抑制作用,可以作为人胶质瘤治疗后选方法。     

D-核糖交联胶原/纤维蛋白胶复合支架的制备及体外性能研究

目的制备与D-核糖交联的胶原/纤维蛋白胶复合支架,并探讨含有不同浓度D-核糖的交联液对复合支架体外性能的影响。方法根据交联液中D-核糖浓度将制备的复合支架分为对照组和A、B、C、D、E组。对照组为未交联的复合支架;A、B、C、D组胶原分别与含不同浓度(0.1、0.2、0.4、0.8 mol·L~(-1))D-核糖的交联液在室温条件下交联24 h;E组胶原与戊二醛在室温条件下交联24 h。观察交联剂浓度对复合支架的机械性能、降解特性等的影响。采用细胞活力试剂盒(CCK-8)检测复合支架的浸提液对脐带间充质干细胞活性的影响。结果 C、D、E组孔隙率与对照组及A、B组比较差异均有统计学意义(P<0.05);C、D、E组孔隙率两两比较差异均无统计学意义(P>0.05);对照组及A、B组孔隙率两两比较差异亦均无统计学意义(P>0.05)。A、B、C、D、E组复合支架的拉伸强度均高于对照组,断裂伸长率均低于对照组(P<0.05);B、C、D、E组复合支架的拉伸强度均高于A组,断裂伸长率均低于A组(P<0.05);C、D、E组复合支架的拉伸强度均高于B组,断裂伸长率均低于B组(P<0.05);C、D、E 3组复合支架的拉伸强度和断裂伸长率两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组及A、B、C、D、E组在各时间点的降解质量百分率均呈现降低的趋势。C、D、E组复合支架在4、8、16、24、32、40和48 h时降解质量百分率均低于对照组及A、B组(P<0.05);C、D、E组复合支架在各时间点的降解质量百分率两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。各组24、48 h时细胞活力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组及A、B、C、D组在24、48 h细胞活力均高于E组(P<0.05);对照组及A、B、C、D组在24、48 h细胞活力两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 D-核糖作为交联剂,浓度为0.4 mol·L~(-1)即能较好改善胶原/纤维蛋白胶复合支架的体外机械性能和降解速率,且细胞毒性小。