榄香烯对人肝癌HepG-2细胞增殖及拓扑异构酶表达的影响

目的探讨榄香烯(elemene,ELE)对人肝癌HepG-2细胞增殖、凋亡以及DNA拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ(TOPOⅠ、TO-POⅡ)表达的影响。方法采用倒置显微镜观察ELE对HepG-2细胞形态学的影响;采用噻唑蓝还原法(MTT)观察ELE对HepG-2细胞增殖的影响;采用AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡;采用RT-PCR法检测ELE对HepG-2细胞TOPOⅠ和TOPOⅡmRNA表达的影响;采用Western blot法检测ELE对HepG-2细胞TOPOⅠ和TOPOⅡ蛋白表达的影响。结果 ELE抑制HepG-2细胞增殖,诱导细胞凋亡,呈时间和剂量依赖性;下调TOPOⅠ、TOPOⅡmRNA及蛋白的表达,呈剂量依赖性。结论 ELE能抑制人肝癌HepG-2细胞增殖,诱导细胞凋亡,下调TOPOⅠ、TOPOⅡ表达可能是其机制之一。     

非诺贝特抑制人胃癌MGC 803细胞增殖及机制

目的: 探讨非诺贝特对胃癌MGC 803细胞生物活性的影响及作用机制。方法: 采用MTT法检测非诺贝特对胃癌MGC 803细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术观察非诺贝特对MGC 803细胞周期和凋亡的影响;免疫荧光染色检测非诺贝特对MGC 803细胞Bcl-2/Bax蛋白表达及细胞生长的抑制作用;蛋白免疫印迹法(Western Blotting)检测非诺贝特对MGC 803细胞p-ERK1/2、p-AKT、ERK1/2 和AKT蛋白表达的影响。结果: 非诺贝特对MGC 803细胞增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性。非诺贝特使MGC 803细胞的周期阻滞于G2/M期,并诱导其凋亡,Bcl-2表达逐渐减少,Bax表达逐渐增加,且下调 ERK1/2和AKT蛋白的磷酸化水平,但对ERK1/2 和AKT蛋白表达水平没有影响。结论: 非诺贝特能够抑制胃癌MGC 803细胞增殖,并诱导其凋亡。其分子机制可能包括下调ERK1/2和AKT蛋白的磷酸化水平。     

异莲心碱对HepG2细胞周期和凋亡的影响

摘要：目的:研究异莲心碱对人肝癌Hep G2细胞周期与凋亡的影响。方法:采取流式细胞术检测不同浓度异莲心碱诱导Hep G2细胞24 h后对周期的影响; Hoechst33258染色观察异莲心碱诱导Hep G2细胞凋亡后细胞核形态的变化; JC-1染色检测细胞线粒体膜电位变化;蛋白免疫印记法(Western blot)检测Bax、Bcl-2蛋白的表达量。结果:流式结果显示,G0/G1期和G2/M期比例明显升高,而S期比例明显下降,并呈现剂量依赖性; Hoechst33258结果表明,药物诱导Hep G2细胞后,细胞数量减少,形态皱缩或改变,蓝色荧光加深; Western bolt检测可知,异莲心碱上调Bax蛋白并下调Bcl-2蛋白的表达水平。结论:异莲心碱可使Hep G2细胞阻滞于G0/G1期、G2/M期,诱导Hep G2细胞发生早期凋亡,其作用可能与Bax、Bcl-2两种凋亡蛋白表达水平变化相关。     

氟尿嘧啶通过激活促凋亡信号通路介导人肝癌细胞凋亡的治疗作用

目的研究氟尿嘧啶(5-Fu)通过激活促凋亡信号通路介导人肝癌细胞(HepG-2)凋亡的治疗作用。方法体外培养HepG-2细胞,分别在0(空白对照组)、40、80、160μM浓度5-Fu干预72 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定5-Fu对HepG-2的抑制作用,DAPI染色检查细胞形态学的改变,Western blot法测定内源性Fas蛋白以及cleaved-caspase-8表达水平。结果与空白对照组比较,5-Fu干预组明显抑制HepG-2的细胞增殖(P<0.01),诱导细胞凋亡。此外,5-Fu可有效上调HepG-2内源性Fas蛋白和cleaved-caspase-8表达水平(P<0.01)。结论氟尿嘧啶介导的抗肝癌作用是通过抑制HepG-2细胞增殖和激活内源性Fas信号通路而诱导癌细胞凋亡。     

华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡及拓扑异构酶Ⅱ的影响

目的观察华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖、凋亡及拓扑异构酶Ⅱ表达的影响。方法分为对照组与实验组(3个剂量0.10,0.21,0.42μg·mL-1华蟾素注射液);用MTT法观察华蟾素对HepG-2细胞增殖的影响;用流式细胞术法检测华蟾素对HepG-2细胞周期的影响;用逆转录—多聚酶连反应法检测华蟾素对肝癌HepG-2细胞拓扑异构酶Ⅱ(TOPO酶Ⅱ)的mRNA水平表达的影响;用蛋白免疫印迹法观察华蟾素对HepG-2细胞中TopoⅡ蛋白表达的影响。结果华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖具有抑制作用,呈时间和剂量依赖性;阻滞HepG-2细胞于S期,可明显下调TopoⅡmRNA(P<0.05)及蛋白的表达(P<0.05),均呈剂量依赖性。结论华蟾素注射液能够抑制人肝癌HepG-2细胞增殖,下调TOPOⅡ的表达是其可能的药效之一。     

华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖及周期的影响

目的探讨华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖及周期的影响。方法应用噻唑蓝还原法(MTT)检测华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖的影响;应用流式细胞术(FCM)检测HepG-2细胞周期分布;采用逆转录-多聚酶链反应技术(RT-PCR)检测华蟾素注射液对HepG-2细胞CyclinA和CDK2 mRNA表达水平的影响;应用比色定量法检测华蟾素注射液对HepG-2细胞内CDK2及CyclinA活性的影响。结果华蟾素注射液可以抑制HepG-2细胞增殖,其抑制作用具有时间和剂量依赖性;可将HepG2细胞阻滞于S期;抑制HepG-2细胞CDK2、CyclinAmRNA水平表达;使HepG-2细胞CyclinA、CDK2活性降低。结论华蟾素注射液能够抑制人肝癌HepG-2细胞增殖,并将细胞阻滞于S期,诱导细胞凋亡,机制可能是通过影响CyclinA、CDK2活性,下调CDK2、CyclinAmRNA水平表达实现的。     

盐酸埃克替尼对人非小细胞肺癌HCC827细胞凋亡及EGFR下游信号通路蛋白表达的影响

目的 探讨盐酸埃克替尼(Icotinib)对人非小细胞肺癌(NSCLC)HCC827细胞凋亡及EGFR下游信号通路蛋白表达的影响.方法 通过噻唑蓝比色(MTT)法检测Icotinib对HCC827细胞增殖的影响,流式细胞仪观察Icotinib对HCC827细胞凋亡的诱导作用,采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测表皮生长因子受体(EGFR)、蛋白激酶B(AKT)、胞外信号调节激酶(ERK)、p-EGFR、p-AKT、p-ERK和Survivin等EGFR下游信号通路蛋白的表达水平.结果 Icotinib抑制HCC827细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用具有浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05);随着Icotinib对HCC827细胞作用的药物浓度升高,p-EGFR、p-AKT、p-ERK和survivin等EGFR下游信号通路蛋白的表达水平均明显下调(P<0.05).结论 Icotinib可能通过抑制EGFR下游信号通路蛋白的表达,进而有效抑制HCC827细胞的增殖和诱导HCC827细胞的凋亡.     

沉默Rock2对肝癌细胞增殖及凋亡作用的研究

目的:探讨沉默Rock2基因对人肝癌细胞Huh-7和HepG2增殖和凋亡作用的影响.方法:实验分为空白对照组、干扰无意义组、转染PBS组及干扰Rock2组.将Rock2干扰质粒shRock2转染到人肝癌细胞Huh-7和HepG2中,通过实时荧光定量PCR检测Rock2 mRNA的表达水平;Western blot检测Rock2蛋白的表达水平;MTT比色法检测沉默Rock2后对Huh-7和HepG2细胞增殖抑制的影响;流式细胞术检测沉默Rock2对Huh-7和HepG2细胞周期及早期凋亡的变化.结果:将shRock2转染肝癌细胞系Huh-7和HepG2后,Rock2 mRNA以及Rock2蛋白的表达水平均明显下降.沉默Rock2表达后,MTT结果显示Huh-7和HepG2细胞较对照组细胞增殖能力明显减弱(P＜0.01);Huh-7和HepG2细胞G0/G1期细胞比例明显升高,而S期和G2/M期细胞比例明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);肝癌细胞的早期凋亡较对照组明显增加(P＜0.01).结论:沉默Rock2能明显抑制肝癌细胞系Huh-7和HepG2的增殖,并诱导其早期凋亡,提示Rock2可作为肝癌基因治疗的一个新的分子靶点.     

橘红素上调Cyclin B1和抑制ERK磷酸化诱导人胃癌AGS细胞周期阻滞

目的探讨橘红素对人胃癌AGS细胞增殖和周期的作用及其机制。方法采用MTT法观察橘红素对人AGS胃癌细胞增殖的作用;流式细胞仪检测橘红素对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素对Cyclin B1、Cyclin D1、Cyclin E1和ERK、p-ERK蛋白表达的影响。结果橘红素可明显抑制AGS胃癌细胞的增殖(P<0.01),呈时间和剂量依赖性。橘红素作用于AGS细胞24 h,S期细胞百分比明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);作用48和72 h,S期阻滞消失,G2/M期细胞百分比增高(P<0.05,P<0.01)。作用48 h,橘红素可上调Cyclin B1蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),对Cyclin D1和Cyclin E1蛋白表达无明显影响;对ERK蛋白表达无影响,可降低p-ERK蛋白的表达(P<0.01),且呈剂量依赖性。结论橘红素可明显抑制人AGS胃癌细胞的增殖,使细胞阻滞于S期和G2/M期,主要机制可能是通过抑制ERK磷酸化和上调CyclinB1蛋白表达。     

莱菔硫烷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的p38MAPK途径研究

目的:探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡过程中,p38MAPK途径的作用。方法:流式细胞仪检测SFN对HepG-2细胞凋亡率的影响,Western Blotting方法检测细胞内p38及p-p38蛋白表达。结果:SFN可明显诱导HepG-2细胞凋亡,10、20、40μmol/LSFN作用48h后,对HepG-2细胞的抑制率分别达到27.42%、46.53%、58.92%;10、20、40μmol/L的SFN可上调HepG-2细胞内p-p38蛋白的表达,而对p38的表达无明显影响。结论:SFN可诱导HepG-2细胞的凋亡,而且这一过程与阻断p38MAPK途径有关。