松果菊苷对脑缺血大鼠纹状体细胞外液中单胺类神经递质的影响

目的研究松果菊苷(ECH)对局灶型脑缺血大鼠纹状体细胞外液中单胺类递质的影响,以探讨ECH对脑神经保护作用的可能机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、ECH高、低剂量组和川芎嗪(CXQ)组。各组大鼠给予相应的药物或生理盐水腹腔注射,每天1次,连续7 d。给药第3天,脑纹状体埋置探针套管,末次给药1 h后,制作大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),造模后立刻进行微透析,将透析液注入高效液相-电化学检测器(HPLC-ECD)测定各组纹状体细胞外液中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟吲哚乙酸(HIAA)的含量。结果与对照组相比,模型组NE、DA、5-HT水平升高,其酸性代谢产物DOPAC,HVA,HIAA也随之升高。与模型组比较,ECH高、低剂量组(30、15 mg.kg-1.d-1)和CXQ组的6种物质的含量均有所降低。结论 ECH的神经保护作用可能与对抗脑缺血后单胺类神经递质的升高有关。     

松果菊苷对脑缺血大鼠双侧脑组织中单胺类神经递质的影响

目的:研究对比大鼠脑缺血后缺血区和非缺血区单胺类神经递质及其代谢产物的变化,考察松果菊苷(ECH)对大鼠脑缺血后双侧脑组织中单胺类神经递质及其代谢产物的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术对照组、模型组、ECH高、低剂量组(30,15 mg.kg-1.d-1)和川芎嗪组(CXQ,30 mg.kg-1.d-1)。各组大鼠腹腔注射相应的药物或生理盐水,qd,连续7 d。于给药d 3,进行大脑双侧脑组织纹状体埋置探针套管,末次给药1 h后,制作大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),造模后立刻进行微透析,将透析液注入高效液相-电化学检测器(HPLC-ECD),测定各组缺血后300 min内纹状体细胞外液中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、3,4二羟苯乙酸(DOPAC)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)的含量。结果:与假手术组相比,各模型组脑缺血后两侧脑组织细胞外液中5种物质水平均升高;与模型组比较,ECH高、低剂量组与CXQ组5种物质的峰值含量均有所降低。结论:大鼠脑缺血后,非缺血区单胺类神经递质及代谢产物升高,ECH对抗脑缺血损伤的作用可能与降低脑内单胺类神经递质的升高有关。     

松果菊苷对阿尔采末病大鼠海马、皮质内神经递质水平的影响

目的研究松果菊苷(ECH)对阿尔采末病(AD)模型大鼠海马、大脑皮质细胞外液中单胺类神经递质水平的影响,为ECH改善学习记忆力提供理论依据。方法 60只SD大鼠随机分为模型组、ECH低、中、高剂量组、阳性药石杉碱甲组以及假手术组。采用腹腔内注射D-半乳糖,并在右侧海马内注射Aβ25-35复制AD模型。Morris水迷宫评价各组大鼠学习记忆能力,应用脑双位点双通道同步微透析采样技术,联合运用高效液相-电化学法测定大鼠海马和皮质细胞外液中NA、DA、5-HT的含量。结果水迷宫结果显示,与假手术组相比,AD模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05),停留在原平台象限时间明显缩短(P<0.05);与模型组相比,ECH低、中、高剂量组均使大鼠学习记忆能力有不同程度的提高,ECH组逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),停留在原平台象限时间明显延长(P<0.05)。同时,模型组较假手术组大脑皮质、海马中的NA、DA、5-HT明显降低(P<0.05);ECH组较模型组脑内单胺类神经递质水平恢复至接近正常水平。结论 ECH可以改善AD大鼠学习记忆力,并且明显升高海马、皮质细胞外液中单胺类神经递质的含量,具有一定的抗AD作用。并且ECH中、高剂量组、阳性药石杉碱甲组在提高学习记忆能力方面作用优于ECH低剂量组。     

松果菊苷对脑缺血大鼠纹状体细胞外液中氨基酸水平的影响

目的研究松果菊苷(ECH)对急性脑缺血大鼠纹状体细胞外液中4种氨基酸水平和脑梗死率的影响,以探讨ECH对脑神经保护作用的可能机制。方法 SD大鼠随机分为假手术对照组、模型组、阳性药川芎嗪组(CXQ,40 mg.kg-1)、ECH高剂量(ECH 40 mg.kg-1)组、ECH低剂量(ECH 20mg.kg-1)组和ECH配伍冰片(ECH 40 mg.kg-1,冰片400mg.kg-1)组。各组大鼠给予相应的药物或者生理盐水腹腔注射,每天1次,连续7 d。在给药d 3,脑纹状体埋置探针套管,末次给药1 h后,制作大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),模型成功后立刻进行微透析。将透析液注入高效液相-荧光检测器(HPLC-RF),此方法较氨基酸分析仪相比较,具有最低检测限低等特点,检测各组纹状体细胞外液中天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量。结果与假手术对照组相比,模型组的Asp、Glu、Gly、GABA水平均明显升高;ECH给药组与模型组相比,ECH高剂量组能明显降低Asp、Glu的水平,而ECH低剂量组与ECH配伍冰片组Asp、Glu降低均不明显;ECH高、低组与配伍冰片组对Gly、GABA的影响均不明显;与模型组相比,ECH高、低剂量组能明显地缩小脑梗死面积。结论 ECH对脑神经的保护作用可能与对抗脑缺血后兴奋性氨基酸升高有关。     

松果菊苷对6-羟基多巴胺急性损伤大鼠纹状体细胞外液中单胺类递质的影响

目的研究松果菊苷(ECH)对6-羟基多巴胺(6-OH-DA)急性损伤大鼠纹状体细胞外液中单胺类递质的影响,以探讨ECH对脑神经保护作用的可能机制。方法30只大鼠随机分为对照组、模型组、ECH高、低剂量组和美多芭(MD)组。除对照组纹状体内注射等量生理盐水外,其余各组注射6-OHDA4μl(3g·L-1)制作大鼠多巴胺(DA)能神经元损伤的急性模型,术后给予各组动物相应药物或生理盐水腹腔注射,每天1次,于d7进行微透析试验,将透析液注入高效液相—电化学检测器(HPLC-ECD)测定各组纹状体细胞外液中DA、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量。结果与对照组相比,模型组动物纹状体细胞外液中DA、DOPAC和HVA含量均明显降低(P<0.01);而ECH高、低剂量组(3.5、7mg.kg-1)和美多芭(MD)组3种物质的含量则高于模型组,两两相比差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论ECH对6-OHDA急性损伤所致大鼠纹状体细胞外液中的DA及其代谢产物含量减少具有较好的预防作用。     

松果菊苷对帕金森病模型小鼠黑质纹状体蛋白表达影响的双向电泳分析

目的观察松果菊苷对MPTP致小鼠帕金森病(PD)模型中对动物行为学和对黑质纹状体组织蛋白表达的影响,在蛋白质水平探讨松果菊苷的多巴胺能神经元保护作用机制。方法以MPTP损伤建立C57BL/6小鼠PD模型,通过自主活动实验和滚筒实验观察动物行为学表现,用双向电泳、图像分析、质谱鉴定等蛋白质组学技术研究松果菊苷对MPTP致小鼠PD模型行为学的影响和黑质纹状体组织蛋白表达的变化。结果①经MPTP诱导,小鼠的自主活动次数、滚筒运动潜伏期均低于对照组(P<0.01);经松果菊苷(20mg.kg-1)预处理后,MPTP诱导小鼠的行为学表现明显改善(P<0.01)。②经过双向电泳及PDQuest软件分析,硝酸银染色,对照组、模型组和松果菊苷给药组分别分离出282个、269个和236个的蛋白质斑点。对一个稳定差异表达的斑点进行MALDI-TOF质谱鉴定,数据库检索结果为胆绿素还原酶B。结论松果菊苷对MPTP致小鼠PD模型的行为学障碍具有改善作用,其神经保护作用机制可能与胆绿素还原酶B水平降低有关。     

白松片对慢性应激大鼠海马单胺类神经递质含量的影响

目的:观察中药白松片对应激大鼠海马单胺类神经递质含量的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠42只,随机分为正常对照组、模型对照组、氟西汀对照组(1.8mg·kg-1)及白松片3个剂量(4.32,13.0,21.6g·kg-1,生药量)组。每只大鼠每日灌胃给药1次,连续14d。给药d6始,通过强迫游泳建立应激大鼠模型。用高效液相色谱-电化学法测定大鼠海马单胺类神经递质及其代谢产物的含量。结果:模型对照组大鼠海马去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)含量及多巴胺/3,4-二羟苯乙酸(DA/DOPAC)和5-羟色胺/5-羟吲哚乙酸(5-HT/5-HIAA)的比值分别为(4.7±s1.3)nmol·g-1,(47±12)nmol·g-1,(0.97±0.22)nmol·g-1,19±4,0.23±0.06,低于正常对照组(P<0.05或P<0.01);NE/5-HT比值(4.9±0.9)高于正常对照组(P<0.01);用白松片预防给药可使模型大鼠海马NE,DA和5-HT含量及NE/5HT,DA/DOPAC和5-HT/5-HIAA的比值恢复至正常水平(P<0.05或P<0.01)。结论:白松片可能通过提高NE,DA及5-HT的含量并降低其代谢率来发挥其抗抑郁作用。     

高效液相色谱-电化学法测定大鼠纹状体细胞外液中单胺类神经递质含量

目的:建立应用常规高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)测定大鼠脑微透析液中单胺类神经递质及其代谢产物。方法:将探针插入大鼠右侧纹状体,在清醒自由活动状态下,用Ringer氏液以1.5μL.min-1的速度灌流,每20 min收集l管透析液,将其注入HPLC-ECD仪,考察本方法的专属性、线性范围、精密度和准确度等,并对其中所含的NE、DA、DOPAC、HIAA、HVA和5-HT进行含量测定。结果:各递质在0.025～0.5 ng.μL-1范围内线性关系良好,方法加样回收完全,日间日内测定均RSD<3.8%。结论:本实验选用了高效液相色谱与电化学检测器连用的方法测定神经递质的含量,该方法简单准确、灵敏、特异性好。     

熄风静宁颗粒对多发性抽动症大鼠HPA轴及纹状体单胺类神经递质的影响

目的 探讨熄风静宁颗粒（XFJNG）对多发性抽动症（TS）模型大鼠HPA轴及纹状体单胺类神经递质的影响。方法 采用连续7 d ip亚氨基二丙腈（IDPN,150 mg/kg）建立TS大鼠模型,造模成功后将大鼠随机分为模型组、氟哌啶醇（0.5 mg/kg）组、XFJNG（6 mg/kg,临床等效剂量）组,同时设立对照组,每组10只,连续给药4周。于给药第0、1、2、3、4周进行刻板运动评分;末次给药后24 h杀鼠取材,试剂盒法检测各组大鼠纹状体内多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）含量,下丘脑及血清促肾上腺皮质素释放激素（CRH）含量,血清促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）含量;取肾上腺组织,进行HE染色,光学显微镜下观察大鼠肾上腺组织形态。结果 与模型组比较,给药4周后,氟哌啶醇和XFJNG组大鼠刻板运动评分均显著降低,纹状体DA、NE、5-HT的水平均显著升高,血清及下丘脑CRH水平均显著降低,血清ACTH及CORT水平均显著降低,差异均具有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较,模型组大鼠肾上腺细胞体积较小,染色深,细胞质占比较大,空泡明显减少;氟哌啶醇、XFJNG组大鼠肾上腺细胞质染色相对模型组较浅,空泡数量增多。结论 熄风静宁颗粒可能通过抑制大鼠纹状体DA系统失衡及HPA轴功能亢进来改善大鼠TS症状。     

高热量饲料喂养大鼠对其脑中单胺类神经递质的影响

目的：研究高热量饲料诱发胰岛素抵抗（IR）动物模型大鼠脑内单胺类神经递质的变化方法：SD大鼠随机分为正常组和由高糖、高脂肪组成的高热量饲料喂养的模型组，模型组大鼠于高热量饲料喂养前一次性腹腔注射小剂量链脲霉素，自行配制高热量饲料，原材料由中国医学科学院实验动物研究所繁育厂提供。喂养18周，其问动态观察体重、胰岛素耐晕、糖耐量、糖异生及血脂，处死动物后称量腹腔脂肪，并测定肝脏组织FFA，TG及TC；在冰浴上迅速取其前脑，称重，加入适量的冰冷0．4MHCLO4溶液中，用超声波细胞粉碎机粉碎匀浆，离心（4℃，15，000g，10min），取上清，与一半体积的钾溶液混合，离心（4℃，15，000g，10min），取上清50μl进样HPLC-ECD分析，用反相高效液相色谱电化学检测法测定单胺类神经递质及其代谢产物（NE、DA、DOPAC、5-HT、5-HIAA）的含量。结果：给予高热量饲料6周可诱发实验动物产生以腹型肥胖、糖耐量异常、胰岛素耐量异常、糖异生能力增强、肝脏脂质沉积等为特征的氓动物模型，高热量饲料的加工方式影响氓动物模型的形成；给予高热量饲料大鼠模型组前脑中的单胺类神经递质及其代谢产物与正常对照组比NE、DA、DOPAC、5-HT、5-HIAA分别升高了8．5、1．5、1．7、1．8、2．1倍，其中除DA外均有统计学差异。结论：高热量饲料可诱发氓动物模型，且能使脑内单胺类神经递质及其代谢产物升高，但受饲料的加工方式的影响。     

Selective monoamine oxidase subtype inhibition and striatal extracellular dopamine in the guinea-pig

Striatal microdialysate levels of dopamine (DA) in conscious guinea-pigs were measured following acute (1 day) and chronic (21 days) treatment with deprenyl (2 and 0.25 mg kg(-1) s.c., respectively) or clorgyline (4 and 1 mg kg(-1) s.c., respectively), as well as by combination treatment using the same doses of the two inhibitors. These treatments caused selective inhibition of monoamine oxidase type B (MAO-B) or monoamine oxidase type A (MAO-A) respectively. Neither acute nor chronic treatments with deprenyl or clorgyline increased basal or KCl-induced DA levels. Acute and chronic clorgyline treatments were accompanied by significant reductions in striatal microdialysate 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC) and homovanillic acid (HVA). On the other hand, both acute and chronic deprenyl treatments were accompanied by significant increases in microdialysate HVA with no effect on DOPAC levels. Acute or chronic combined treatment with clorgyline and deprenyl increased tissue but not microdialysate DA levels. The combination treatment given chronically also reduced KCl-induced DA release but enhanced amphetamine-induced DA release. Microdialysate DA levels increased to a smaller extent in guinea-pig than in rat following local striatal infusion of GBR-12909 (100 microM). The difference between guinea-pigs and rats in the response to GBR-12909, could be the result of a lower dopaminergic innervation and/or density of DA transporter. This difference may explain why striatal microdialysate DA levels increased following chronic deprenyl treatment in the rat but not in the guinea-pig.     

Neuroprotective effects of echinacoside in the mouse MPTP model of Parkinson's disease

In the present study, we investigated the neuroprotective effects of echinacoside, a phenylethanoid glycoside extracted from the medicinal Chinese herb Cistanches salsa, against 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)-induced dopaminergic toxicity. We confirmed that exposure to MPTP in mice leads to permanent behavioral deficits and depletion of dopamine and its metabolites. When administered prior to MPTP, echinacoside reduced behavioral deficits, increased striatal dopamine and dopamine metabolite levels, reduced cell death, and led to a marked increase in tyrosine hydroxylase expression relative to mice treated with MPTP alone. In addition, pre-treatment with echinacoside significantly reduced caspase-3 and caspase-8 activation in 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP(+))-induced apoptosis in cerebellar granule neurons. Taken together, these findings suggest that echinacoside improves the behavioral and neurochemical outcomes in MPTP mice model of Parkinson's disease and inhibits caspase-3 and caspase-8 activation in cerebellar granule neurons, making the compound an attractive candidate treatment for various neurodegenerative disorders, including Parkinson's disease.     

钩藤碱对脑缺血大鼠纹状体及海马单胺类递质含量的影响(英文)

目的　探索钩藤碱对大鼠脑缺血损伤的机制。方法　采用大鼠大脑中动脉缺血模型 ,利用微透析方法收集正常及脑缺血后不同时间点纹状体和海马细胞外液 (透析液 )。经反相高效液相电化学法检测其单胺类神经递质含量的变化。结果　大鼠脑缺血后纹状体和海马细胞外液中 5 羟吲哚乙酸 (5 HIAA)、3,4 二羟苯酰乙酸 (DOPAC)和高香草酸(HVA)含量下降 ,去甲肾上腺素 (NE)含量上升 ,钩藤碱能升高脑缺血后细胞外液 5 HIAA ,DOPAC和HVA的含量 ,降低NE的含量。结论　钩藤碱能调节脑缺血大鼠纹状体内和海马单胺类神经递质及代谢物的含量