重症监护病房患者下呼吸道标本中肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的了解该院ICU患者下呼吸道标本中分离的108株肺炎克雷伯菌(KPN)的耐药情况,为临床治疗合理使用抗菌药物提供依据。方法对108株KPN进行回顾性分析,采用梅里埃VITEK2-Compact全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏试验,超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测均按照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)标准的确认方法进行操作,并采用Whonet5.6软件对其进行耐药性分析。结果 108株KPN中产ESBLs菌株检出42株,检出率占38.90%。KPN对碳青霉烯类抗菌药物高度敏感。结论 KPN是常见的致病菌,碳青霉烯类抗菌药物对临床分离的KPN具有良好的抗菌活性,可作为治疗的首选药物。     

由四种质控盲样菌混和于盐水的检测

四种质控菌同时放入盐水中，进行微生物质控考核。由于各种细菌同时存在盐水中，各细菌的生长速度不同，存在营养竞争，细菌间代谢物的相互利用，遗传物质的转移及覆盖，给检测增加了难度。这就要求检验人员鉴定思路清晰，多方面做充分的准备，才能使实验准确、全面。通过微生物实验室的质量控制，可以及时发现实验室的不足，实验室在经历一次实验室的质控考核后。整个管理水平和技术水平都得到提高。现将由大连市疾病预防控制中心微生物细菌定组织的一次盲样菌考核的鉴定过程报告如下：     

临床细菌和真菌快速诊断技术

随着越来越多介入性医疗技术的使用,以及细菌对抗菌药物耐药性的发展,微生物感染给临床治疗提出了越来越多的挑战,及时开始正确的抗菌药物治疗,对挽救患者的生命至关重要.因此,临床越来越迫切需要微生物实验室能快速检测感染病原菌.本文拟提醒临床微生物实验室重视病原菌的快速诊断技术.     

三种自动化微生物培养系统检测性能比较及评价

目的比较3种自动化微生物培养系统(Versa TERK、BACTEC FX、Bact/Alert 3D)的细菌检测性能,探讨快速及准确的病原学检测方法。方法使用3种不同检测原理的自动化微生物培养系统对11株标准菌株进行培养检测,比较不同浓度的菌液在需氧和厌氧瓶中的检出时间,对3种自动化微生物培养系统检测效果进行评价。结果 3种自动化微生物培养系统5 d内均检测出11株标准菌株,在需氧瓶中所有细菌平均检出时间最短的依次是Versa TERK (13.44 h)、BACTEC FX (22.13 h)、Bact/Alert 3D (26.61 h);而在厌氧瓶中,所有细菌的平均检出时间最短的依次是BACTEC FX(15.86 h)、Bact/Alert 3D (17.52 h)、Versa TERK (17.65 h)。在所有细菌中,大肠埃希氏菌最早被检出,该菌在Versa TERK需氧瓶中被检出时间最短(7.43±0.75 h);白色假丝酵母菌被检出时间最晚,该菌在Versa TERK需氧瓶中被检出时间最短(20.26±1.25 h)。同时3种自动化微生物培养系统均能检出30 CFU/mL、50 CFU/mL、100 CFU/mL、200 CFU/mL 4个浓度的细菌,且细菌的浓度会影响微生物培养系统的检出时间,浓度越高,细菌检出时间越短。结论 3种自动化微生物培养系统均可满足采供机构全血及血液成分细菌检测的需求,其中Versa TERK的细菌检出时间略早于另外2种系统;另外细菌浓度的改变会影响3种自动化血微生物培养系统的检出时间。     

肺炎链球菌实验室转化模型的方法学研究

目的 建立肺炎链球菌的实验室转化模型,以便于对该菌的各种目的基因进行重组改造。方法 通过检测细菌的吸光度值,在特定的菌密度时利用感受态刺激因子(CSP)诱导,采用血平板培养筛选的方法,获取发生转化了的菌株。通过抗生素培养基培养和PCR鉴定是否发生转化。结果 发现不同肺炎链球菌株的转化最适菌密度不同,构建了肺炎链球菌感受态缺陷菌株,建立了肺炎链球菌在实验室的转化模型。结论 实验室条件下,在不同菌密度时可利用CSP诱导肺炎链球菌成为感受态而发生转化。     

肺炎链球菌实验室转化模型的方法学研究

目的 建立肺炎链球茵的实验室转化模型，以便于对该茵的各种目的基因进行重组改造。方法 通过检测细菌的光妻当竺，皇冀定的茵密度时利用感受态刺激因子(CSP)诱导，采用血平板培养筛选的方法，获取发生转化了的菌株。通过抗生素培养基和PCR鉴定是否发生转化。结果 发现不同肺炎链球菌株的转化最适茵密度不同，构建了肺炎链球菌感受态缺陷菌株，建立了肺炎链球菌在实验室的转化模型。结论 实验室条件下，在不同茵密度时可利用CSP诱导肺炎链球菌成为感受态而发生转化。     

结核分枝杆菌动物建模试验中ABSL-3实验室内生物安全评估

目的通过在动物生物安全三级(ABSL-3)实验室内对结核分枝杆菌(MTB)动物建模过程采样监测,为实验室生物安全评估提供依据。方法在经中国合格评定国家认可委员会(CNAS)认可并由卫生部批准的,可从事MTB等高致病性病原微生物实验动物研究工作的ABSL-3实验室内实施MTB动物建模,在实验过程中进行空气和物体表面采样。用快速分子诊断和常规病原学方法对样本进行特异性检测分析。结果生物安全三级(BSL-3)实验室使用后的清场工作可以大大减少实验室环境的细菌量,BSL-3实验室在日常使用中也会存在少量的环境微生物,由于负压强度和使用频率的差异,核心区的环境洁净度明显高于准备间。70%乙醇喷洒消毒及擦拭可以使准备间物体表面的细菌量检出率从59.26%下降到9.38%;核心区物体表面的环境细菌检出率从6.59%下降到1.52%,核心区MTB检出率从10.99%下降到0。在ABSL-3实验室和生物安全柜双重负压环境下,可避免空气中MTB气溶胶污染。结论 ABSL-3实验室的负压环境和正确的防护及消毒措施对实验室操作人员的生物安全有重要的防护作用。     

细菌快速检测技术及其应用

正目前,临床微生物实验室对可疑感染标本的细菌检查基于形态学显微镜检、培养和生化反应,其操作繁杂、影响因素多、周期长。随着生物学技术的发展,感染细菌的检查已深入到分子水平,如PCR技术、基因芯片技术、质谱技术等,大幅缩短细菌检查周期,且自动化程度高,准确可靠,有的还可高通量检测。1微生物传感器技术微生物传感器技术在床旁诊断中的应用主要是基于核酸或菌体的检测。     

室间质评中耐药表型检测结果分析

目的促进临床微生物实验室积极开展耐药表型检测,提高实验室整体检测水平。方法由临床检验中心统一发放菌种,要求各实验室在给定的几项耐药表型检测中根据鉴定结果选择一至两项,严格按照CLSI推荐的方法进行检测,并在规定的时间内回报结果。结果做耐药表型检测的6株细菌平均鉴定符合率为96%,对它们表型试验的选择以及最终检测结果的影响相对较小。6株菌耐药表型检测平均符合率为71%,其中200710号标本检测符合率较低,MRSA检测符合率为48%,D-试验检测符合率为43%。结论室间质评中增加耐药表型检测能够有效促进临床微生物室重视细菌耐药性检测,提高耐药性检测水平。     

口腔综合治疗台高速涡轮机水路的细菌污染状况

背景:以往关于口腔综合治疗台水路细菌污染状况的研究较多,但口腔专科医院不同科室间因业务内容不同,其对口腔综合治疗台高速涡轮机水路的影响如何尚未见报道.目的:评估口腔专科医院不同专业各科室口腔综合治疗台高速涡轮机水路的细菌污染状况,以期为各科室制定个性化的感染控制措施提供依据.设计、时间及地点:横断面调查,于2007-05/2008-03完成实验及数据整理,取样于广东省口腔医院,细菌学检测于南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物实验室完成.材料:普通营养琼脂、血平板、微生物生化反应鉴定系统、链球菌凝集试验试剂盒、革兰染色液等购自广东环凯微生物试剂公司.方法:广东省口腔医院80张口腔综合治疗台接无菌高速涡轮机后取水样,取样时间为2007-05/10隔周星期五下班后,每机每次取6 mL,共取10次.采用常规微生物分离鉴定技术进行细菌学检测.主要观测指标:水样中细菌浓度和葡萄球菌、链球菌、放线菌3种细菌的检出率.结果:口腔医院各临床科室口腔综合治疗台高速涡轮机水路水样中细菌浓度5.15×10~1.59×10~3 cfu/mL,平均5.67×10~2 cfu/mL,牙周病科水样细菌浓度最高,口腔颌面外科水样细菌浓度最低,各科室间差异有显著性意义(P=0.000);各科室间水样3种细菌的检出率差异亦有显著性意义(p=0.000).结论:口腔专科医院不同科室的口腔综合治疗台高速涡轮机水路细菌污染状况不同,对于高速涡轮机使用频率较低的科室建议将空踩口腔综合治疗台高速涡轮机水路放水列入每天工作常规,而对于临床业务污染较严重的科室还应考虑采用额外的感染控制措施.     

重庆市2011-2020年临床微生物室间质量评价运行总结分析

目的分析重庆市2011-2020年临床微生物项目室间质量评价运行情况,为提高该市临床微生物鉴定和药物灵敏度检测能力提供依据。方法收集2011-2020年参加该市临床检验中心临床微生物项目室间质量评价实验室结果,对结果进行统计分析。结果2011-2020年参加的实验室从93家发展至138家,合格率从61.3%到94.2%。10年共发放100株细菌,涉及35个菌属,55个菌种。细菌鉴定和药物灵敏度正确率逐年增高,少见菌鉴定和一些药物灵敏度检测仍存在一些问题。结论通过临床微生物室间质量评价,发现实验室检测的不足,持续改进,提高实验室的检测能力,为临床诊疗提供可靠的依据。     

同时产ESBLs和AmpC酶菌株的表型检测及其意义

目的：探讨同时产ESBLs和AmpC酶菌株的表型检测方法。方法：应用VITEK2微生物鉴定系统鉴定临床分离的细菌标本，用双纸片增效确证试验进行验证。对产ESBLs的细菌，用头孢西丁筛查试验、三维试验、Tris—EDTA法和粗提酶检测法检测AmpC酶。结果：365株肠杆菌科细菌中检出ESBLs菌株93株（25．5％），CLSI确证试验阳性菌株88株（94．6％）。头孢两丁筛查阳性的26株菌中检出同时产ESBLS和AmpC酶菌1株。结论：应用表型检测法可在临床标本中检出同时产ESBLS和AmpC酶菌株；以CSLI确证试验检测ESBLs，以酶粗提物直接测定法、Tris—EDTA法进行AmpC酶检测，对同时产两种酶的临床菌株进行筛查。其操作易行、结果可靠、便于临床推广应用。     

检验科键盘、鼠标、门把手、电话的微生物监测结果分析

目的通过调查检验科的键盘、鼠标、门把手、电话的微生物分布情况,及时找出存在的问题,减少医院感染的发生。方法对检验科各实验室及其办公室的键盘、鼠标、门把手、电话进行微生物监测,并对其结果进行分析。结果 101份标本中62份有细菌、真菌生长,键盘和鼠标的微生物检出率最高,其次是电话机,门把手的检出率较低。其中又以临床基础检验室和临床生化检验室的细菌、真菌检出率高,临床微生物检验室和血液检验室较低。结论检验科的键盘、鼠标等存在较严重的污染,其工作人员应重视电脑键盘、鼠标、电话机及门把手的定期清洁、消毒,并做到先洗手后操作,将医院感染的危险因素降到最低水平。     

Molecular methods for the detection of Mycoplasma and ureaplasma infections in humans: a paper from the 2011 william beaumont hospital symposium on molecular pathology

Mycoplasma and Ureaplasma species are well-known human pathogens responsible for a broad array of inflammatory conditions involving the respiratory and urogenital tracts of neonates, children, and adults. Greater attention is being given to these organisms in diagnostic microbiology, largely as a result of improved methods for their laboratory detection, made possible by powerful molecular-based techniques that can be used for primary detection in clinical specimens. For slow-growing species, such as Mycoplasma pneumoniae and Mycoplasma genitalium, molecular-based detection is the only practical means for rapid microbiological diagnosis. Most molecular-based methods used for detection and characterization of conventional bacteria have been applied to these organisms. A complete genome sequence is available for one or more strains of all of the important human pathogens in the Mycoplasma and Ureaplasma genera. Information gained from genome analyses and improvements in efficiency of DNA sequencing are expected to significantly advance the field of molecular detection and genotyping during the next few years. This review provides a summary and critical review of methods suitable for detection and characterization of mycoplasmas and ureaplasmas of humans, with emphasis on molecular genotypic techniques.     

重症监护病房的病原菌分布及药物敏感性分析

目的了解本院重症监护病房（ICU）感染病原菌的分布及对抗菌药物的敏感性。方法对本院ICU住院患者因感染而分离出的403株细菌用Phoenix-100全自动微生物鉴定和药敏系统进行菌种鉴定、药敏分析和耐药机制检测。采用WHONET软件进行统计分析。结果从ICU620例住院患者的标本中共分离出403株细菌。分离率排在前6位的细菌分别是鲍曼不动杆菌占19．4％,铜绿假单胞菌占18．1％,肺炎克雷伯菌占17．9％,金黄色葡萄球菌占15．4％,大肠埃希菌占7．7％,嗜麦芽寡养单胞菌占5．5％。药物敏感试验提示所分离到的病原菌绝大多数呈现多重耐药。特别是对临床上最常使用的头孢三代和氟喹诺酮类抗茵药物有较高的耐药率。结论从本院ICU病房分离到的病原菌来看,其耐药问题相当严重,应加强细菌耐药性监测,指导临床合理使用抗菌药物,有效的预防和控制感染。     

MALDI-TOF mass spectrometry tools for bacterial identification in clinical microbiology laboratory

Since the early 1980s, mass spectrometry has emerged as a particularly powerful tool for analysis and characterization of proteins in research. Recently, bacteriologists have focused their attention on the use of mass spectrometry (MS) for bacterial identification, especially Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time-Of-Flight (MALDI-TOF). Moreover, recent publications have evaluated MALDI-TOF in microbiology laboratory for routine use. MALDI-TOF-MS is a rapid, precise, and cost-effective method for identification of intact bacteria, compared to conventional phenotypic techniques or molecular biology. Furthermore, it allows identification of bacteria directly from clinical samples (blood cultures for example).The goal of this review was to update recent data concerning routine identification of microorganisms by MALDI-TOF in the clinical microbiology laboratory.     

Computerized management of information in the microbiology section of a hospital laboratory. Personal experience

We installed in our microbiology laboratory a new computerized management system with a dedicated software for the needs of the department. The system allow us to give to the clinician the reports of microbiological data in a shorter time and to store them permanently. The computer system doesn't modify the existing organization of work, samples acceptance, execution of microbiological and serological tests and the report of the results, but make them faster, safer and more efficient. The system also shows the possibilities of epidemiological researches and statistical studies. These data are very interesting and useful for the relationship between the laboratory and general wards.     

我市部分医疗机构口腔诊疗用水供水系统状况调查

目的了解我市医疗机构口腔诊疗用水供水方式、供水装置消毒及微生物检测等现状。方法采用自编调查问卷,调查内容包括供水方式、供水装置消毒频次与方法及微生物检测等,对我市40家医疗机构口腔诊疗用水供水系统状况进行调查。结果我市口腔诊疗用水供水方式主要有自来水、加过滤装置、纯净水、反渗水,8所医院每季度进行微生物检测,菌落数范围50-2 500 cfu/mL,菌落数超过合格标准经清洗或更换过滤膜、消毒储水罐后检测均合格。结论口腔治疗需要安全的水质,控制口腔诊疗用水微生物污染是医疗机构口腔科医院感染管理的重要环节。     

呼吸机管路更换频率对呼吸机相关肺炎发病率的影响

目的 探讨呼吸机管路更换频率对呼吸机相关肺炎(VAP)发病率的影响.方法 选择2008年3月至2010年9月人住我院综合性ICU、急诊科、呼吸内科、神经外科机械通气患者,随机分为呼吸机管路每周更换2次组与呼吸机管路每周更换1次组;目标性监测记录使用呼吸机患者的临床症状和体征变化;采集不同部位微生物标本送检,并进行统计学分析.结果 呼吸机管路每周更换2次组VAP的发生率为28.30%(15/53),每周更换1次组为35.84%(19/53),组间比较差异无统计学意义(P=0.533);呼吸机管路每周更换2次组呼吸机管路病原微生物检出率为44.49%(271/609),每周更换1次组为48.16%(289/600),组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);组间呼吸机管路不同部位病原微生物检出情况比较,差异无统计学意义(P＞0.05);VAP的病原微生物以革兰阴性菌为主,鲍曼不动杆菌检出占首位.结论 呼吸机管路更换频率不影响VAP的发病率,建议使用中的呼吸机管路每7天更换1次;同时应加强护理人员专科技术培训,从多环节降低医院感染的发生率.

Abstract：

Objective To explore the effect of ventilator circuit change frequency on the incidence of ventilator-associated pneumonia (VAP). Methods Patients receiving mechanical ventilation in the ICU,Department of Emergency, Respiratory Department and Department of Neurosurgery from March 2008 to September 2010 were randomized into two groups. For these two groups ,the ventilator circuit was changed once or twice a week. The recorded parameters included the clinical symptoms and signs of the ventilated patients. Samples at different parts of the circuit were collected for microbiological detection. The data were analyzed statistically. Results The incidence of VAP was 28. 30% ( 13/53 ) in twice-a-week group and 35.84%( 19/53 ) in once-a-week group. There was no significant difference between the two groups. The rates for positive microbiological detection in the circuit were 48. 16% and 44. 49% for once-a-week and twice-a-week group,respectively. No significant difference was observed ( P ＞ 0.05 ). Moreover, there was no significant difference in terms of the microbiology positivity between different parts of the circuit(P ＞ 0. 05 ). Gram-negative bacteria were the main pathogen of VAP with Acinetobacter baumannii ranking at the top. Conclusion Frequency of Ventilator circuit change does not influence the incidence of VAP. We suggest that the frequency for ventilator circuit change should be once a week. At the same time, the nurse staff should be trained for specific technology and the incidence of hospital infection should be controlled at multiple rings of the chain.