DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化状态与肝细胞癌的关系研究

目的探讨DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化状态与肝细胞癌发生的相关性。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应检测33例肝细胞癌及相应的癌旁组织和20例正常对照肝组织中DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化状态,分析上述组织中两种基因甲基化状态与临床资料的关系。结果DKK-3和WIF-1基因在癌组织中甲基化率明显高于癌旁组织和正常组织(P<0.05,P<0.05),而癌旁组织和正常组织中DKK-3和WIF-1基因甲基化率相比无明显差异;癌组织中DKK-3基因甲基化与临床资料中年龄及肝硬化有关;癌组织中WIF-1基因甲基化与临床资料中乙肝表面抗原、肝硬化有关。结论DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化与HCC的发生相关;DKK-3和WIF-1基因致肝细胞癌的发生机制可能与肝硬化致肝细胞癌的发生机制不尽相同,两者是否有相互作用尚不清楚。     

肝癌患者血浆WIF基因甲基化检测临床研究

目的 研究WIF-1基因在肝癌组织和血浆中的表达关系以及与肝癌发生、转移乃至复发的临床意义.方法 收集南通大学附属肿瘤医院2008年3月～2009年10月间48例肝细胞癌(HCC)、癌旁组织、对应血浆及正常健康体检者血浆标本24例,诊断标准以病理诊断为标准.采用甲基化特异性PCR方法对所有组织和血浆标本WIF-1基因表达进行分析.结果 48例HCC患者临床标本中,25例WIF甲基化表达阳性,阳性率为52.08%;48例血浆中,15例WIF甲基化表达阳性,阳性率为31.25%,组织和血浆符合率为60%.癌旁组织以及健康对照组血浆中均未见WIF甲基化表达.WIF-1甲基化阳性与阴性患者中AFP、AFU表达均有明显差异(χ2=7.919,P<0.05;χ2=9.001 5,P<0.05);在与HBsAg关系中,发现WIF-1甲基化表达与HBsAg没有关系.15例血浆甲基化阳性的HCC患者中,10例复发或转移,占66.7%;33例非甲基化阳性者中,10例复发或转移,占30.3%,二者之间有明显的差异(χ2=5.61,P<0.05).结论 甲基化阴性患者预后明显优于阳性患者,监测高危人群的肝癌组织和血浆中WIF-1基因表达对肝癌患者早期转移复发有一定的临床诊断价值,临床上血浆中WIF-1表达检测可以代替组织中WIF-1基因表达,作为一种简便的方法易于临床推广应用,特别对AFP阴性的患者预后具有一定的临床价值.     

DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化状态与肝细胞癌的关系研究

目的探讨DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化状态与肝细胞癌发生的相关性。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应检测33例肝细胞癌及相应的癌旁组织和20例正常对照肝组织中DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化状态。分析上述组织中两种基因甲基化状态与临床资料的关系。结果DKK-3和WIF-1基因在癌组织中甲基化率明显高于癌旁组织和正常组织（P〈0．05,P〈0．05）,而癌旁组织和正常组织中DKK-3和WIF-1基因甲基化率相比无明显差异;癌组织中DKK-3基因甲基化与临床资料中年龄及肝硬化有关;癌组织中WIF-1基因甲基化与临床资料中乙肝表面抗原、肝硬化有关。结论DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化与HCC的发生相关;DKK-3和WIF-1基因致肝细胞癌的发生机制可能与肝硬化致肝细胞癌的发生机制不尽相同,两者是否有相互作用尚不清楚。     

胃癌相关甲基化分型与幽门螺杆菌感染的探讨

目的 探讨基因甲基化分型与幽门螺杆菌感染在胃癌预后中的临床价值。方法 使用甲基化特异性PCR技术分析75例胃癌病人血清中的CpG岛甲基化分型(CIMP),同时分析了40例健康人血清作为对照。APC,WIF-1,RUNX-3,DLC-1,SFRP-1,DKK和E-cad作为研究基因。幽门螺杆菌感染由血清抗幽门螺杆菌G抗体试验和快速脲酶试验确定。结果 7个基因胃癌组织中甲基化的频率如下:APC 48%,WIF-1 57.33%,RUNX-3 56%,DLC-1 50.67%,SFRP-1 52%,DKK54.67%和E-cad 48%; 血清中甲基化的频率如下:APC 30.67%,WIF-1 34.67%,RUNX-3 37.33%,DLC-1 29.33%,SFRP-1 33.33%,DKK 32%和E-cad 26.67%。CIMP+(定义为≥3甲基化基因)与47例(62.67%)胃癌组织标本和44例(58.67%)GC血清样品相关联。CIMP+与非肿瘤黏膜组织和健康人的血清无关联。在75例胃癌中,有51例(68%)为幽门螺杆菌阳性,24例(32%)为幽门螺杆菌阴性。在51例幽门螺杆菌感染胃癌组织中,36例为CIMP+,15例为CIMP-。相反,在24例幽门螺杆菌阴性病例中,11例为CIMP+,13例为CIMP-。两组CIMP表达差异有统计学意义(χ2=4.27,P<0.05)。在51例幽门螺杆菌阳性胃癌血清样本中,34例为CIMP+,17例为CIMP-。24例未感染血清样本中,10例CIMP+,14例CIMP-。两组间差异有统计学意义(χ2= 4.21,P<0.05)。经过两年随访,发现HP+/CIMP+和HP+/CIMP-两组转移、复发率明显不同,HP+/CIMP+病人有转移、复发倾向(P<0.05); 生存率二者未见明显不同(P>0.05)。结论 HP+/CIMP+的病人比HP+/CIMP-更易转移和复发。     

急性髓系白血病中DKK-3和WIF-1甲基化状态和mRNA表达的研究

目的:研究DKK-3和WIF-1在急性髓系白血病(AML)患者中的启动子甲基化状态和mRNA表达情况及其临床意义。方法:用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测56例AML患者骨髓标本和20例缺铁性贫血患者(对照组)骨髓标本中DKK-3和WIF-1启动子甲基化状态;用实时定量PCR检测上述标本中β-catenin、DKK-3和WIF-1mRNA表达情况,并分析其与临床资料及生存时间的关系。结果:AML组中DKK-3和WIF-1启动子甲基化率明显高于对照组(χ2=15.330,P0.001;χ2=17.371,P0.001),且与性别、年龄、临床分型无相关性。DKK-3和WIF-1 mRNA相对表达量在AML患者中依次为0.840±0.320和0.792±0.313,明显低于对照组的1.134±0.392和1.047±0.334(t=3.415,P=0.000;t=3.070,P=0.003)。AML患者骨髓标本β-catenin的mRNA相对表达量为0.756±0.304,高于对照组骨髓标本表达量0.342±0.105(t=5.943,P=0.001),且AML骨髓标本中DKK-3和WIF-1 mRNA相对表达量和β-catenin相对表达量呈均呈负相关性(r=-0.543;r=-0.562)。KaplanMeier生存曲线分析显示,DKK-3甲基化阳性组AML患者总体生存时间短于阴性组患者(χ2=3.957,P=0.042),而WIF-1甲基化阳性组AML患者总体生存时间亦短于阴性组患者(χ~2=4.520,P=0.029)。结论:AML患者中Wnt/β-catenin信号通路存在有异常激活,DKK-3和WIF-1启动子甲基化可能参与了Wnt通路激活及AML的发病过程并影响其总体预后。     

Reprimo和hMLH1基因甲基化在胃癌早期诊断价值的研究

目的 探讨Reprimo和hMLH1基因启动子区甲基化检测在胃癌早期诊断中的价值。方法 通过陕西省人民医院2013年9月～2014年4月收治的慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生患者50例、异型增生患者50例、胃癌患者50例,取内镜下胃活检组织,并取正常胃黏膜活检组织30例作为对照组,分析Reprimo基因和hMLH1基因启动子区甲基化表达情况,比较各组患者间的差异。结果 患者组的胃黏膜组织中Reprimo基因和hMLH1基因启动子区甲基化阳性率显著高于正常组,差异有统计学意义(P＜0.05)。Reprimo基因启动子区甲基化阳性率:慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生组28%(χ²=10.18,P＜0.05); 异型增生组56%(χ²=25.84,P＜0.05); 胃癌组62%(χ²=30.36,P＜0.05); hMLH1基因启动子区甲基化阳性率:慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生组20%(χ²=4.39,P＜0.05); 异型增生组44%(χ²=15.13,P＜0.05); 胃癌组48%(χ²=17.41,P＜0.05),检测的特异度高。结论 Reprimo和hMLH1基因甲基化检测在胃癌早期诊断中的价值很高,特异度高,是一种有效的诊断方式,在患者的临床诊断方面拥有广阔的治疗前景。     

血浆WIF-1 DNA甲基化与肝癌患者临床特征和预后的关系

目的:检测肝癌患者血浆WIF-1甲基化状态,研究其与临床各相关因素的关系及对肝癌患者预后的意义。方法:采用甲基化特异性PCR法检测肝癌患者和健康体检者血浆中提取DNA的WIF-1甲基化状态,结合临床特征(包括性别、年龄、肝硬化、AFP水平、Hbs Ag及临床分期)进行分析,探讨联合甲基化状态与临床特征之间的关系,分析其与肝癌患者复发转移和预后的关系。结果:96例肝癌患者血浆WIF-1甲基化阳性为31.4%,对照健康组无甲基化,差异有显著的统计学差异(P0.05)。肝癌血浆WIF-1甲基化状况与病人性别、年龄、抗-HBs、肝硬化无相关性(P0.05),与AFP水平、肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期相关(P0.05)。WIF-1甲基化阳性组较阴性组转移复发率高,存活率较甲基化阴性组低。结论:WIF-1基因甲基化是影响肝癌患者FPS(progression-free survival)和OS(overall survival)的危险因素,对肝癌复发转移预测具有重要的价值,有望成为评估肝癌预后的有效指标。     

基于TCGA数据库分析葡萄糖代谢相关基因与乳腺癌临床病理特性及预后相关性

目的 探究乳酸脱氢酶A(LDHA)、溶质载体家族16成员(SLC16A)1及SLC16A3基因与乳腺癌病理特征及预后的关系。方法 获取肿瘤基因组图谱数据库(TCGA)中1 060位乳腺癌患者的组织样本,分析LDHA、SLC16A1及SLC16A3基因表达量与乳腺癌临床病理特征及预后的关联性,用Kaplan-Meier生存分析绘制生存曲线,Cox比例风险回归模型进行单因素和多因素生存预后分析。结果 LDHA表达与远处转移(M分期)(χ²=5.560,P=0.018)、雌激素受体(ER)表达(χ²=8.532,P=0.003)、人表皮生长因子受体-2(HER-2)表达(χ²=4.418,P=0.036)相关;SLC16A1表达与年龄(χ²=8.040,P=0.005)、ER表达(χ²=17.428,P<0.01)、孕激素受体(PR)表达(χ²=5.486,P=0.019)相关;SLC16A3表达与ER表达(χ²=22.447,P&l...     

SFRP1基因甲基化在儿童急性淋巴细胞白血病中的临床意义

目的:探讨SFRP1基因及其甲基化在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的临床意义。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)检测43例新确诊ALL患儿化疗前(初发组)和诱导缓解化疗后d 46骨髓达完全缓解(缓解组)时的骨髓单个核细胞中SFRP1基因甲基化状态，实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SFRP1 mRNA表达，蛋白印迹(Western blot)法检测SFRP1蛋白表达，并收集患儿的临床资料，分析SFRP1基因甲基化在儿童ALL中的临床意义。结果:初发组SFRP1基因启动子甲基化阳性率(44.19%)明显高于缓解组(11.63%)(χ²=11.328,P <0.05)。初发组患儿骨髓单个核细胞中SFRP1 mRNA及蛋白相对表达量均显著低于缓解组(P <0.05)。初发组SFRP1基因启动子甲基化与危险度(χ²=15.613,P=0.000)及患儿生存(χ²=6.561,P=0.010)有关，SFRP1基因高甲基化患儿危险度明显升高、无事件生存时间缩短，而其他临床资料间无明显差异。结论:SFR...     

血清TAM和Cyfra21-1检测在食管癌诊断和化疗疗效判定中的价值

目的 探讨血清肿瘤相关物质(tumor associated material,TAM)和角化素蛋白片段19(Cyfra21-1)检测在食管癌诊断和化疗疗效判定中的价值。方法 选取2012年9月～2013年9月92例初诊食管癌和术后复发食管癌病人为研究对象,以同时期健康体检者为对照组,分别测定其血清TAM和Cyfra21-1水平,计算检测指标的灵敏度和特异度。另外,收集2012年9月～2014年4月化疗前血清TAM和Cyfra21-1均升高食管癌患者60例,化疗2周期后再次检测TAM和Cyfra21-1水平,以有效患者指标下降,进展患者指标上升计算判定符合率。结果 92例初诊和术后复发食管癌患者,血清TAM升高66例,Cyfra21-1升高47例,灵敏度分别为71.7%和51.1%(χ²=8.279,P=0.004)。对照组50例,TAM阴性47例,Cyfra21-1阴性46例,TAM特异度为94.0%,Cyfra21-1特异度为92.0%,差异无统计学意义(χ²=0.154,P=0.695)。接受化疗患者,有效25例,进展11例,TAM符合率为77.8%,Cyfra21-1符合率为75.0%,差异无统计学意义(χ²=0.077,P=0.781)。结论 TAM和Cyfra21-1为食管癌诊断和判定疗效的有用指标,并且TAM优于Cyfra21-1。     

食管癌组织中lnc RNA DNAJC3-AS1的表达及其与临床病理特征的相关性研究

目的 食管癌(esophageal cancer,EC)组织中lnc RNA DNAJC3-AS1的表达及其与临床病理特征的相关性研究.方法 选取2017年6月～2019年5月宝鸡市人民医院收集的246例EC患者的肿瘤组织及相应的癌旁正常组织为研究对象.通过实时荧光定量PCR法检测lnc RNA DNAJC3-AS1的...     

Galectin-3蛋白在人膀胱移行细胞癌诊断中的应用价值

目的探讨Galectin-3蛋白在人膀胱移行细胞癌诊断中的应用价值。 方法收集2015年1月至2018年1月就诊于山东宁阳县第一人民医院泌尿外科接受经尿道电切术治疗的膀胱移行细胞癌患者84例,所有患者符合世界卫生组织中泌尿系统肿瘤病理学和诊断学的标准。采用免疫组织化学法检测Galectin-3蛋白的表达阳性率,比较分析Galectin-3蛋白在膀胱移行细胞癌组织中表达阳性率,及在不同病理分级、临床分期、初发以及复发肿瘤中表达阳性率的差异。 结果Galectin-3蛋白在膀胱移行细胞癌组织的表达阳性率(66.67%,56/84)明显高于癌旁组织的表达阳性率(7.69%,4/52)(χ²＝17.65,P<0.01);病理分级为G2(68.75%,22/32)和G3级(94.12%,16/17)的低分化膀胱移行细胞癌的Galectin-3蛋白表达阳性率明显高于病理分级为G1级(42.86%,15/35)的高分化膀胱移行细胞癌组织的表达(χ²＝2.39,P<0.05);Galectin-3蛋白的表达阳性率随着临床分期的增高而增高,在临床分期为T3期时高达100.00%(12/12)(χ²＝10.44,P<0.01);Galectin-3蛋白在复发膀胱移行细胞癌组织的表达阳性率(69.23%,18/26)高于初发膀胱移行细胞癌组织(62.07%,36/58),两组比较差异无统计学意义(χ²＝0.35,P>0.05)。 结论Galectin-3可作为诊断膀胱移行细胞癌和评估严重程度的生物标志物。     

拮抗Wnt信号通路的CpG岛甲基化表型在肝癌预后中的临床价值

目的评价CpG岛甲基化表型（CIMP）在肝癌预后中的价值。方法收集108例肝癌（HCC）、癌旁组织、血浆及60例健康体检者血浆,采用甲基化特异性PCR方法对所有标本APC,SFRP-1,DKK-3和E-cad基因表达进行分析。结果APC在肝癌组织阳性中阳性表达率为44．44％,血浆为24．07％,APC血浆标本约为组织标本阳性表达的54．17％;SFRp-l则分别为37．04％和28．7％,血浆标本约为组织标本阳性的77．5％;DKK分别为36．1％和23．15％,血浆标本约为组织标本阳性的64．1％;E-cad分别为34．3％和16．67％,血浆标本约为组织标本阳性的48．65％。在肿瘤组织中CIMP状态与乙型肝炎表面抗原阳性与否、甲胎蛋白浓度以及肿瘤淋巴结转移有明显差异（P〈O．05）。丙型肝炎病毒抗体、肝硬化无明显差异。而在血浆中也发现CIMP状态与乙型肝炎表面抗原阳性与否、甲胎蛋白浓度以及肿瘤淋巴结转移有明显差异（P〈O．05）,与丙型肝炎病毒抗体、肝硬化无明显差异。经过一年随访后发现CIMP阳性组与CIMP阴性组在转移和复发上有明显不同。结论血浆中CIMP的表达可以作为晚期肝癌预后不良的分子标志。     

影响肝细胞癌射频消融术后疗效的相关因素分析

目的分析影响超声引导下射频消融术（RFA）治疗肝细胞癌（HCC）预后的相关因素。 方法收集2008年5月至2012年6月哈尔滨医科大学附属第一医院进行RFA治疗且随访资料完整的HCC患者104例,共147个病灶。随访36个月,记录HCC患者生存情况,采用超声造影监测RFA术后HCC患者局部复发的情况。采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验对影响HCC患者RFA术后预后的因素进行单因素分析,对单因素分析与HCC患者RFA术后预后有关的因素再采用Cox比例风险回归模型进行多因素分析。 结果104例HCC患者RFA术后半年、1、2、3年生存率分别为96.1%、92.0%、80.0%、53.3%,中位生存时间19个月,RFA术后1年局部复发率为13.6%。单因素分析结果显示术前肝功能Child-Pugh分级、首发癌、术后肝内产生新发病灶、消融范围、首选RFA治疗等因素与HCC患者RFA术后生存率有关（χ²=7.119,P=0.008;χ²=20.485,P=0.000;χ²=14.160,P=0.000;χ²=11.825,P=0.001;χ²=7.979,P=0.005）;多因素分析结果显示术前肝功能Child-Pugh分级、首发癌、术后肝内产生新发病灶为影响HCC患者RFA术后生存率的独立因素（P=0.001;P=0.005;P=0.003）。单因素分析结果显示,病毒标志物、首发癌、背景肝、肿瘤直径、肿瘤边界、邻近脏器或大血管、消融范围、首选RFA治疗等因素与HCC患者RFA术后1年局部复发率有关（χ²=7.234,P=0.007;χ²=9.083,P=0.003;χ²=7.791,P=0.005;χ²=13.042,P=0.000;χ²=20.657,P=0.000;χ²=58.615,P=0.000;χ²=6.681,P=0.010）;多因素分析结果显示,肿瘤边界、消融范围为影响HCC患者RFA术后1年局部复发率的独立因素（P=0.017;P=0.002）。 结论影响HCC患者RFA术后生存率的独立因素是术前肝功能Child-Pugh分级、首发癌、术后肝内产生新发病灶,影响HCC患者RFA术后1年局部复发率的独立因素是肿瘤边界、消融范围。为了提高HCC患者生存期、减少局部复发应对高危人群建立良好的观察随访制度,治疗中采取多学科合作方式及规范的治疗方案。     

Vimentin和Ki-67在肾癌中的表达及其临床意义

目的观察Vimentin和Ki-67在肾癌(RCC)组织中的表达,探讨Vimentin和Ki-67在RCC发生、发展中的作用及其相互关系。 方法收集2016年1月至2017年6月在济宁医学院附属医院泌尿外科行手术治疗的133例RCC患者的临床资料。应用免疫组化方法(SP法)检测不同组织中Vimentin和Ki-67的表达情况,并与肿瘤临床分期、组织学分级及肿瘤大小进行相关性分析。 结果Vimentin及Ki-67在RCC组织中均异常高表达,在癌旁正常肾组织中均不表达,差异具有统计学意义(χ²＝58.86,P<0.05;χ²＝26.67,P<0.05);Vimentin和Ki-67的表达在不同RCC患者性别(χ²＝4.07,1.16;P>0.05)、年龄(χ²＝0.03,0.87;P>0.05)、肿瘤位置(χ²＝0.00,0.00;P>0.05)之间的差异无统计学意义,在RCC的临床分期(χ²＝10.66,P<0.01;χ²＝19.88,P<0.01)、组织学分级(χ²＝13.79,P<0.01;χ²＝21.03,P<0.01)、肿瘤的大小(χ²＝19.52,P<0.01;χ²＝16.10,P<0.01)差异具有统计学意义,两者的表达呈正相关(r＝0.46,P<0.05)。 结论Vimentin和Ki-67参与了RCC的发生发展,其表达水平与组织学分级、临床分期、肿瘤大小有关,组织学分级越高、临床分期越晚、肿瘤体积越大,两者的表达水平越高,两者在肿瘤的进展中可能起到协同作用。     

系统性红斑狼疮患者乙型肝炎病毒感染的分析研究

目的 了解并分析系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)的感染状况。方法回顾性分析南京鼓楼医院2010年1月～2015年3月的866例SLE患者(SLE组)的临床资料; 并收集1 795例健康查体者(对照组)血清,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg),乙肝病毒表面抗体(HBsAb)及丙型肝炎(HCV)抗体。分析SLE组与对照组HBsAg,HBsAb及HCV抗体之间是否存在差异。结果 SLE患者中HBsAg阳性的共有17例,阳性率1.96%,对照组HBsAg阳性204例,阳性率为11.4%,两组之间差异具有统计学意义(χ²=67.81,P<0.000 1)。男性SLE患者阳性率5.26%,低于对照组的13.9%,差异具有统计学意义(χ²=4.58,P<0.05)。女性SLE患者HBsAg阳性率1.64%,也低于对照组的8.12%(χ²=35.65,P<0.0001)。在21～30,31～40和41～50岁三个年龄段中,SLE组HBsAg阳性率均低于对照组,差异均具有统计学意义(χ²分别为21.86,22.78和20.36; 均P<0.0001)。SLE患者中HBsAb阳性率与对照组差异无明显统计学意义(总:χ²=0.50,P=0.48; 男性:χ²=0.12,P=0.73; 女性:χ²=2.00,P=0.16)。结论 系统性红斑狼疮患者中乙型肝炎病毒感染率低于健康人群。