非小细胞肺癌患者血清miR-141及miR-224的表达及其临床意义

目的 探讨miR-141及miR-224在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法 采用RT-PCR检测128例NSCLC患者,60例良性病变患者(良性组)和60例健康体检者(对照组)血清miR-141,miR-224及鳞状细胞癌相关抗原(SCC-Ag)表达水平,分析miR-141及miR-224表达水平与NSCLC临床病理特征的关系。应用ROC曲线评价miR-141,miR-224及SCC-Ag对NSCLC诊断的灵敏度和特异度,Pearson相关分析NSCLC患者血清miR-141与miR-224,SCC-Ag的相关性。结果 NSCLC组血清miR-141,miR-224及SCC-Ag表达水平均明显高于良性组和对照组[miR-141(2^-ΔΔCt):2.56±0.48 vs 1.08±0.24和1.02±0.21; miR-224(2^-ΔΔCt):3.94±0.82 vs 1.42±0.35和1.26±0.30; SCC-Ag(ng/ml):2.75±1.36 vs 0.64±0.47和0.52±0.24,F=8.719～11.573,均P<0.01]。在NSCLC患者中血清miR-141及miR-224表达水平与病理分期、病理分级及淋巴结转移相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-141,miR-224及SCC-Ag(ng/ml)诊断NSCLC的最佳截值分别为1.84,2.85,2.03,三项联合诊断NSCLC的AUC(0.913)最大,其敏感度和特异度较好,分别为92.5%和82.7%。Pearson相关分析显示,血清miR-141与miR-224,SCC-Ag呈正相关(r=0.782,0.594,均P<0.01),血清miR-224与SCC-Ag呈正相关(r=0.594,P<0.01)。结论 血清miR-141及miR-224在NSCLC患者中明显上调,且与患者的临床病理特征相关,有望作为诊断NSCLC的新型生物标志物。     

HPV阳性宫颈癌和CIN患者血浆miR-150,SCCA及CA125的表达及临床意义

目的 探讨血浆miR-150,鳞状细胞癌抗原(SCCA)及糖类抗原125(CA125)在人乳头瘤病毒(HPV)阳性宫颈癌患者中的表达及临床意义。方法采用RT-PCR检测108例HPV阳性宫颈癌患者(宫颈癌组),40例HPV阳性宫颈上皮内瘤变(CIN)患者(CIN组)和40例HPV单纯阳性/HPV阳性子宫良性病变者(对照组)血浆miR-150,SCCA及CA125水平,分析miR-150表达与宫颈癌临床病理特征的关系。应用ROC曲线评价miR-150,SCCA及CA125在HPV阳性宫颈癌患者中的早期诊断价值,多元Logistic回归模型分析三项指标与HPV阳性宫颈癌的关系。结果 宫颈癌组血浆miR-150,SCCA及CA125表达水平均明显高于CIN组和对照组[miR-150(2^-ΔΔCt):10.28±4.16,4.72±1.18和1.83±0.64; SCCA(ng/ml):9.86±2.14,3.18±0.85和1.35±0.34; CA125(U/ml):46.26±11.58,19.14±7.05和16.42±5.83,F=16.427,13.205,8.719,均P<0.01]。HPV阳性宫颈癌患者血浆miR-150表达水平与临床分期、淋巴结转移及浸润深度相关(P<0.05)。血浆miR-150诊断HPV阳性宫颈癌和CIN的最佳截值分别为8.25和3.46,敏感度和特异度分别为87.0%和84.3%,81.0%和80.2%。Logistic回归分析显示,血浆miR-150和SCCA水平升高是HPV阳性宫颈癌发生的独立危险因素[OR(95%CI)=2.107(1.915～2.814),OR(95%CI)=1.583(1.327～2.036)]。结论 血浆miR-150在HPV阳性宫颈癌患者中明显上调,可作为HPV阳性宫颈癌早期诊断和CIN鉴别诊断的生物学标志物。     

miR-491-5p在原发免疫性血小板减少症患者中的表达及临床意义

目的 研究miR-491-5p在原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)初发患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中的表达水平及临床意义。方法 选取2014年9月～2015年9月解放军第100医院血液科住院的初诊ITP患者40例(初诊组),经治疗后完全缓解者22例(完全缓解组),40例健康体检者为对照组。采集外周静脉血2 ml,分离PBMC,提取细胞总RNA,逆转录合成cDNA,以U6为内参,应用实时荧光定量PCR(real time PCR)的方法检测miR-491-5p的表达量; 分析miR-491-5p与血小板计数之间的相关性。结果 初诊组(5.07±1.70)与对照组(1.92±0.95)外周血单个核细胞miR-491-5p的表达相比上调,差异有统计学意义(t=9.36,P<0.01); 治疗后完全缓解组(2.32±1.07 )与其初诊时(4.95±0.83)外周血单个核细胞miR-491-5p的表达相比下调,差异有统计学意义(t=8.94,P<0.01); ITP患者外周血单个核细胞中miR-491-5p的表达量与血小板计数呈负相关(r=-0.769 7,P<0.05)。结论 miR-491-5p在ITP初发患者外周血单个核细胞中高表达,表明其可能与ITP的发病相关,或成为未来ITP诊疗潜在的标志物。     

血清microRNA126和microRNA1检测对心衰诊断价值的研究

目的 探讨血液中microRNA-126(miR-126)和microRNA-1(mir-1)在心衰患者中的诊断及预后评估价值。方法 选择2015年9月～2017年1月心内科住院病人心梗后心衰患者(AMI组)45例,扩心病心衰患者(DCM组)30例,健康体检者(健康对照组)20例,采用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测其血清中miR-126和miR-1的相对含量,进行统计学分析。结果 ①患者组与对照组的miR-126和miR-1分别为0.76±0.012 vs 1.01±0.145和0.54±0.09 vs1.27±0.649,与对照组比较,患者组显著低于对照组,差异具有统计学意义(t=72.14,38.05,均P<0.001); AMI组与DCM组相比较,差异无统计学意义(均P>0.005)。②患者组中miR-126,miR-1与NTproBNP,cTnT,心胸比均呈负相关,与LVEF呈正相关,相关系数分别为:-0.427,-0.578; -0.716,-0.534; -0.311,-0.631; 0.557和0.435,均P<0.005; ③miR-126和miR-1诊断心衰的ROC曲线下面积为0.52和0.51,最佳cutoff值分别为0.549和0.53,灵敏度为55%和65.3%,特异度为85%和78.2%,准确度为87.1%和90.2%,联合检测NTproBNP和cTnT诊断心衰的灵敏度、特异度分别为69.3%和92.6%。④血清miR-1,miR-126水平与患者1年主要不良心脏事件(MACE)及死亡率无关,相对危险度为(2.35,0.53,P>0.005)。结论 用ROC曲线分析的结果表明,miR-126和miR-1对于心衰具有诊断价值,联合NTproBNP和cTnT对心衰诊断和治疗更有意义,但不能用于心衰病因的区分,且对患者1年的预后及不良事件预测无意义。     

血浆Dickkopf同源物1检测对肝细胞癌的诊断价值

目的 探讨检测血浆Dickkopf同源物1(DKK1)对肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法 选取2014年11月～2015年12月南通市第三人民医院已确诊的HCC患者48例,肝硬化(LC)20例,慢性乙型肝炎(CHB)20例,选择排除其他慢性疾病的健康体检者(HC)20例,采用ELISA方法定量检测血浆中DKK1浓度,同时采用美国雅培i2000微粒子化学发光免疫分析仪检测其AFP。同时比较分析其ROC曲线及相关性。结果 HCC组DKK1水平均显著高于LC组、CHB组和HC组(Z=-4.132～-5.828,P均<0.001)。DKK1对HCC诊断价值的ROC曲线下面积为0.889,95%置信区间为0.831～0.947,DKK1诊断HCC最佳cutoff值为565 ng/L,其诊断灵敏度为93.8%,特异度为70%,AFP的ROC曲线下面积为0.759,95%置信区间为0.667～0.850。DKK1的AUC显著>AFP(Z=2.28,P=0.022)。DKK1和AFP两指标间无相关性(r=0.148,P=0.316),其中有21例AFP<20 μg/L而其DKK1>565 ng/L的诊断临界值。结论 检测血浆中DKK1可以作为AFP诊断HCC的有效补充,尤其是DKK1对AFP阴性HCC患者的早期诊断价值值得关注。     

血浆miR-324-5p对单纯性先天性心脏病早期诊断的应用评估

目的：研究单纯性先天性心脏病（CHD）患者血浆中 miR-324-5p表达变化,评价其在 CHD诊断方面的临床应用价值。方法收集2012年6月～2013年2月76例CHD患儿及13例健康正常对照血清标本,应用 Real-time PCR检测血浆中miR-324-5p表达变化,通过受试者工作曲线（ROC）,评价血浆 miR-324-5p在 CHD诊断方面的临床应用价值。结果与正常对照相比,单纯性CHD患者外周血浆miR-324-5p表达升高（P＝0.032）;受试者工作曲线（ROC）分析显示,曲线下面积（AUC）为0.731,最佳诊断临界值为0.1161,敏感度为64.5％,特异度为84.6％。结论血浆 miR-324-5p作为CHD早期排除诊断的生物学标志物并具有一定的临床应用价值,但还需要与其它指标联合应用。     

血清外泌体miR-744-5p在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义

目的研究血清外泌体miR-744-5p在非小细胞肺癌中的表达变化及临床应用价值。方法回顾性研究。收集南方医科大学南方医院2016年11月至2018年2月就诊的92例非小细胞肺癌患者和91名健康对照者的血清,分离血清外泌体,同时进行RNA提取。应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清外泌体miR-744-5p的表达量,利用受试者工作特征(ROC)曲线评价外泌体miR-744-5p的诊断效能。结果非小细胞肺癌患者血清外泌体miR-744-5p的表达水平(0.0122±0.0197)较健康对照组(0.0936±0.0819)明显下调,差异有统计学意义(U=553.5,P<0.001)。在肺癌组中,早、晚期肺癌患者血清外泌体miR-744-5p的表达水平(0.0117±0.0139,0.0126±0.0212)与健康对照组相比,均明显降低(U=72.5,U=471.5,P均<0.001);肺腺癌外泌体miR-744-5p表达水平(0.0106±0.0203)低于肺鳞癌(0.0173±0.0178),差异具有统计学意义(U=394.5,P<0.001)。ROC曲线显示血清外泌体miR-744-5p能够有效区分非小细胞肺癌患者和健康人群,曲线下面积为0.9339(95%CI=0.8996~0.9681,P<0.0001);外泌体miRNA-744-5p能够有效诊断早期肺癌,曲线下面积为0.9431(95%CI=0.8837~1.0000,P<0.0001)。结论血清外泌体miR-744-5p有希望作为非小细胞肺癌非侵入性的分子诊断标志物,但尚需要进一步比较研究和扩大验证。     

miRNA-145和miRNA-143在川崎病患儿血浆中的表达及意义

目的 探讨miRNA-145和miRNA-143在儿童川崎病(kawasaki disease,KD)中表达水平及其辅助诊断价值。方法 共纳入45例确诊为川崎病的患儿,并依据心超结果分为:伴有冠状动脉损伤组(CAL组)19例,无冠状动脉损伤组(NCAL组)26例。同期匹配30例健康儿童作为对照组(NC组)。采用实时荧光定量PCR方法检测miRNA-145和miRNA-143在川崎病患儿发病急性期和治疗缓解期及正常儿童血浆中的表达水平。应用ROC曲线及AUC(95%CI)评估其作为诊断指标的效能。结果 miRNA-145及miRNA-143在CAL组患儿急性期的相对表达量为2.33±1.26和1.64±0.50,高于正常对照组,差异具有统计学意义(t=5.108,5.072,P<0.01); miRNA-145在CAL组缓解期相对表达量为1.55±0.49,高于NC组,差异具有统计学意义(t=3.837,P<0.01); miRNA-143在CAL组缓解期相对表达量为1.17±0.33,与NC组相比,差异无统计学意义(t=1.033,P>0.05); NCAL组急性期miRNA-145和miRNA-143的相对表达量分别为2.02±1.00和1.63±0.50,与NC组相比差异有统计学意义(t=4.746,5.261,P<0.01),缓解期两者表达量分别为1.07±0.18和1.12±0.16,与NC组相比,差异均无统计学意义(t=0.264 9,0.584 9,P>0.05)。miRNA-145用于KD急性期诊断的最佳临界值为1.697,敏感度为64.44%,特异度为90%,AUC为0.773 3,95%CI为0.667 0～0.879 7; miRNA-143的最佳临界值为1.361,敏感度为64.44%,特异度为86.67%,AUC为0.816 3,95%CI为0.722 5～0.910 0。结论 该研究表明,miRNA-145和miRNA-143可作为儿童川崎病急性期诊断的辅助指标。     

miR-205在ITP患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的 研究micro-RNA(miR-205)在原发性免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)患者外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMC)中的表达和意义。方法 收集43例ITP患者和38例健康人的外周静脉血2 ml,分离PBMC,提取细胞总RNA,逆转录合成cDNA,以U6为内参,应用实时荧光定量PCR(Real time PCR)的方法检测miR-205的表达量; 分析miR-205与血小板计数结果之间的相关性。结果 ITP初诊患者(Naive ITP)PBMC miR-205的表达水平与健康对照组相比上调(1.81±0.48 vs 0.92±0.25,t=10.31,P<0.01); 治疗后不完全缓解组(incmplete remissiongroup,IR group)和初诊患者相比,miR-205的表达水平差异无统计学意义(P=0.112),和正常对照组相比,则表达升高(1.63±0.65 vs 0.92±0.25,t=7.2,P<0.01); 14例治疗后完全缓解组(complete remission group,CR group)治疗后(After treatment)PBMC miR-205的表达低于治疗前(before treatment)的表达水平(1.07±0.43 vs 1.91±0.34,t=5.68,P<0.01); ITP患者PBMC中miR-205的表达量与血小板计数呈负相关(r=-0.0696,P<0.05)。结论 miR-205在ITP初诊患者PBMC中高表达,而治疗完全缓解后表达水平又降低,并且表达水平与血小板数量呈负相关,表明其可能与ITP的发生发展相关,或许会成为ITP诊疗新的标志物。     

风湿性心脏病伴房颤患者血浆sVCAM-1水平和eNOSmRNA表达与心内血栓形成的相关性研究

目的 探讨血浆可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)水平和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达在风湿性心脏病(rheumatic heart disease,RHD)伴房颤患者心内血栓形成中的临床应用。方法 收集2015年7月～2018年7月在陕西省商洛市中心医院心内科住院治疗的58例RHD患者的血液及临床资料进行回顾性分析,依据是否有心内血栓形成分为血栓组(28例)和无血栓组(30例)。采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测血浆eNOSmRNA的表达,采用酶联免疫吸附法检测血浆sVcAM-1水平。同时建立健康对照组(33例),比较分析以上指标的变化与RHD心内血栓形成的关系。结果 血浆eNOSmRNA在血栓组、无血栓组和对照组中的表达分别为0.21±0.05,0.49±0.13和0.99±0.27; 而血浆sVCAM-1在三组中的水平则分别为11.3±5.2,7.7±3.5和3.7±2.1 ng/L。与对照组比较,血浆sVCAM-1水平在血栓组和无血栓组中显著上调,而eNOSmRNA的表达则显著下调,其中血栓组两标志物的表达上调或下调更显著,以上结果的比较差异均有统计学意义(t=15.29～43.23,均P<0.01)。左房内径(LAD),D-二聚体(D-D)和收缩压(SBP)在血栓组、无血栓组和对照组中的结果分别为55.3±3.2,45.9±2.7和36.3±2.9 mm,2.83±0.67,1.67±0.32和0.35±0.19 mg/L,126.1±8.3,124.9±8.9和124.5±8.7 mmHg。血栓组和无血栓组的左房内径与对照组比较明显增大,血栓组增大更显著。血栓组和无血栓组的D-D水平高于对照组,其中血栓组D-D水平增高更显著。以上结果比较的差异均有统计学意义(t=9.67～37.97,均P<0.01)。各组间SBP的比较差异均无统计学意义(t=0.65～1.13,均P>0.05)。在血栓组和无血栓组中,sVCAM-1和eNOSmRNA分别与D-D水平和LAD具有相关性(r=0.839,-0.829,P<0.01),(r=0.799,-0.782,P<0.01)。sVCAM-1和eNOSmRNA诊断血栓形成的敏感度和特异度分别为70.3%和81.5%,77.3%和85.7%。以血栓组和无血栓组为因变量,sVCAM-1和eNOSmRNA的AUC分别为0.853(95%CI:0.747～0.960,P<0.01)和0.846(95%CI:0.736～0.957,P<0.01)。结论检测风湿性心脏病患者血浆sVCAM-1水平和eNOSmRNA表达可用于评价体内的凝血活性及纤溶活性,预测血栓形成的风险。     

血清CEA,CYFRA21-1,NSE水平在肺癌诊断与分型中的应用价值

目的 探讨血清癌胚抗原(CEA),细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1),神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平在肺癌诊断、分型中的应用价值。方法收集79例肺癌患者,75例肺部良性疾病患者和163例健康体检者的空腹血清,采用电化学发光法检测血清CEA,CYFRA21-1和NSE水平,比较三项指标在肺癌诊断中的敏感度、特异度及阳性率,并比较在发生转移和未发生转移的肺癌患者血清CEA,CYFRA21-1和NSE水平。结果 与健康组和肺部良性疾病患者组相比,肺癌患者血清CEA,CYFRA21-1和NSE水平均明显升高,差异具有统计学意义(χ2=48.208～104.889,P<0.01)。联合两项或三项血清标志物的检测能明显提高对肺癌诊断的敏感度,但特异度有所下降。在不同病理类型的肺癌中,血清CEA,CYFRA21-1和NSE水平分别在腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌中的阳性率较高。发生转移的肺癌患者中的血清CEA水平高于未转移的肺癌患者(Z=-3.056,P=0.002)。结论 联合检测血清CEA,CYFRA21-1和NSE水平在不同病理类型肺癌诊断及转移中具有一定临床价值。     

NRP-1和NRP-2在结直肠癌组织中的表达水平及临床意义

目的 探讨神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP-1)和NRP-2在结直肠癌组织中的表达水平及临床意义。方法 选取2014年12月～2015年9月期间湖北省恩施州中心医院65例结直肠癌患者和65例肠息肉患者作为研究对象,选择于同期健康检查的65例健康女性作为正常对照组。采用实时荧光定量技术(RT-PCR)检测入组对象血清NRP-1和NRP-2水平。结果 经RT-PCR检测,结直肠癌组NRP-1水平(36.51±4.62 μg/ml)高于肠息肉组(8.19±4.08 μg/ml)和健康对照组(7.92±4.05 μg/ml),差异有统计学意义(F=50.32,P=0.000),结直肠癌组NRP-2 mRNA水平(24.59±3.26 μg/ml)高于肠息肉组(5.47±1.11 μg/ml)和健康对照组(5.19±1.05 μg/ml),差异有统计学意义(F=49.36,P=0.000)。肠息肉组和健康对照组NRP-1和NRP-2 mRNA水平比较,差异无统计学意义(t=1.15,1.07,P=0.762,0.789)。经RT-PCR检测,随着患者病理分期的增加、分化程度的降低,结直肠癌组血清NRP-1和NRP-2 mRNA水平呈升高趋势,伴肝转移和淋巴结转移的结直肠癌患者,血清NRP-1和NRP-2 mRNA水平高于未出现肝转移和淋巴结转移的结直肠癌患者(P<0.05)。结直肠癌患者血清NRP-1和NRP-2 mRNA水平呈正相关(r=0.415,P=0.015)。结论 结直肠癌血清NRP-1,NRP-2水平高于肠息肉及健康人群。血清NRP-1和NRP-2水平与结直肠癌的临床病理及预后密切相关,NRP-1,NRP-2可能共同起作用。     

血浆硫氧还蛋白还原酶水平检测对宫颈癌早期诊断的价值研究

目的 检测和分析血浆硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin redyctase,TrxR)在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)患者中的水平变化,探讨其在宫颈癌早期辅助诊断中的价值。方法 选取2018年1～9月在南通市肿瘤医院确诊的78例宫颈癌和18例CIN患者及同期20例健康对照者的血浆,记录患者临床资料。运用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)检测血浆TrxR浓度; 同时对以上实验者的血浆用电化学发光法(electrochemical luminescence immunoassay,ECL)检测鳞状细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCCA)。统计分析二者对宫颈癌早期诊断的价值以及血浆TrxR与宫颈癌临床病理参数间的关系。结果 健康对照组、CIN组和宫颈癌组TrxR水平分别为2.46(0.98,4.21)μg/L,4.38(1.26,6.37)μg/L和5.98(4.02,15.01)μg/L,CIN组TrxR水平较健康对照组显著升高(U=33.5),宫颈癌组TrxR水平较健康对照组也显著升高(U=17.0),差异均有统计学意义(P<0.001)。健康对照组、CIN组和宫颈癌组SCCA水平分别为1.34(0.52,2.06)μg/L,1.61(0.72,2.34)μg/L和7.12(2.76,20.53)μg/L,CIN组较健康对照组SCCA水平升高,差异有统计学意义((U=48.1,P<0.01),宫颈癌组SCCA水平较健康对照组显著升高,差异有统计学意义(U=27.2,P<0.001)。受试者工作曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)显示血浆TrxR诊断宫颈癌的曲线下面积(aera under curve,AUC)是0.840(95%CI:0.761～0.902),敏感度和特异度分别为92.3%和68.4%,约登指数为60.7%。而血浆SCCA诊断宫颈癌的AUC是0.822(95%CI:0.740～0.886),敏感度和特异度分别为65.4%和86.8%,约登指数为52.2%。病理分期I/II期与III/IV期相比,TrxR水平差异无统计学意义(U=662.0,P=0.500 4),SCCA水平两组间差异有统计学意义(U=452.0,P=0.004 8)。宫颈癌患者TrxR水平与年龄、病理类型和FIGO分型无关(均P>0.05),而与细胞分化程度相关(U=496.0,P=0.034)。结论 TrxR水平的检测有助于宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的早期诊断,对于宫颈癌的早期预警和及早干预有着积极的意义。