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1.
摘要 目的:探讨转录因子Foxp3在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中的表达水平及其在SLE发病中的作用及意义。方法:选择SLE活动性、SLE非活动性患者和正常对照,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测SLE患者和正常对照组外周血单个核细胞中Foxp3mRNA和蛋白的表达水平。结果:活动期SLE组Foxp3mRNA和蛋白的表达水平明显低于SLE非活动性患者和正常对照(P<0.05),SLE非活动性患者Foxp3mRNA和蛋白的表达水平明显低于正常对照(P<0.05)。结论:SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3mRNA和蛋白的表达水平显著低于正常对照,随着SLE患者病情的好转,Foxp3mRNA和蛋白的表达水平逐渐增高。提示Foxp3与SLE疾病的活动性呈一定的线性相关关系。  相似文献   

2.
目的探讨人外周血单个核细胞中FOXP3mRNA的表达与CD4^+CD25^+Treg表达的相关性。方法提取人外周血单个核细胞总RNA,逆转录成mRNA,以β-actin为内参照,实时荧光定量RT-PCR检测29例哮喘患儿及24例同龄对照FOXP3mRNA的相对表达量,采用融解曲线和琼脂糖电泳鉴定PCR产物特异性;同时采用流式细胞技术检测CD4^+CD25^+Treg的比例。结果哮喘患儿组CD4^+CD25^+Treg细胞百分率明显低于同龄对照组,P〈0.01;FOXP3mRNA的表达也显著降低,P〈0.05;FOXP3和β-actin的融解曲线分析表明均仅有单一峰,Tm值分别为82.4℃和87.8℃;琼脂糖电泳显示都仅有单一扩增产物。结论应用SYBRGreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术检测FOXP3mRNA表达水平简便、经济、可行,哮喘患儿CD4^+CD25^+Treg明显降低可能参与哮喘发病,FOXP3表达降低可能是导致CD4^+CD25^+Treg发育障碍的重要因素。  相似文献   

3.
目的探讨外周血Th17细胞百分数和叉头状转录因子P3(FOXP3)水平在儿童支气管哮喘患者中的变化及意义。方法选取支气管哮喘患儿(哮喘组)和健康儿童(对照组)各30例,采用流式细胞术检测外周血Th17细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的百分数、实时荧光定量PCR检测外周血FOXP3mRNA的表达,ELISA法检测血浆中IL-17和IL-10的表达水平。结果哮喘组外周血Th17细胞百分数及血浆IL-17水平均高于对照组(P<0.05);哮喘组外周血FOXP3表达及血浆IL-10水平均低于对照组(P<0.05)。结论 Th17/FOXP3的失衡可能在儿童支气管哮喘的发病机制中起重要作用。  相似文献   

4.
目的 观察肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)、叉头样转录因子3(Foxp3)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4) mRNA在原发性肝癌患者外周血单个核细胞中的表达及意义。方法 前瞻性选择2019年1月至2019年12月至黄河三门峡医院进行原发性肝癌治疗的患者60例作为观察组。随机选择同一时间段至黄河三门峡医院进行体检的健康人员60人作为对照组。采用实时荧光定量(PCR)反应检测两组对象的TIPE2、Foxp3和CTLA-4 mRNA的表达情况;比较观察组不同病理分期、有无转移灶TIPE2、Foxp3和CTLA-4 mRNA表达情况差异;使用Pearson相关性分析,观察两组RIPE2、Foxp3和CTLA-4 mRNA水平与AFP、γ-GT、GP-73水平的相关性。结果 ①观察组TIPE2 mRNA水平低于对照组(0. 57±0. 09 vs. 0. 71±0. 12),Foxp3、CTLA-4 mRNA水平高于对照组(0. 70±0. 23vs. 0. 56±0. 13、0. 62±0. 20 vs. 0. 44±0. 13),差异具有统计学意义(P 0. 05)。②观察组不同肝癌分期患者TIPE2、Foxp3、CTLA-4 mRNA水平差异具有统计学意义(P 0. 05),Ⅱ、Ⅲ期患者TIPE2 mRNA低于Ⅰ期(0. 42±0. 10 vs.0. 34±0. 06 vs. 0. 69±0. 11),Foxp3、CTLA-4 mRNA水平高于I期(0. 72±0. 28 vs. 1. 23±0. 37 vs. 0. 59±0. 21、0. 59±0. 13 vs. 0. 98±0. 25 vs. 0. 37±0. 06),Ⅲ期患者TIPE2 mRNA低于Ⅱ期,Foxp3、CTLA-4 mRNA水平高于II期,差异具有统计学意义(P 0. 05)。③观察组中有转移灶患者TIPE2 mRNA水平低于无转移灶患者(0. 41±0. 10 vs. 0. 62±0. 21),Foxp3、CTLA-4 mRNA水平高于无转移灶患者(0. 94±0. 33 vs. 0. 61±0. 24、0. 90±0. 28 vs. 0. 56±0. 17),差异具有统计学意义(P 0. 05)。④使用Pearson相关性分析,结果发现TIPE2与AFP呈负相关(r=-0. 727,P 0. 05),其余无相关性(P 0. 05)。结论 原发性肝癌患者的TIPE2、Foxp3和CTLA-4 mRNA表达出现了异常,且在肿瘤发展的不同阶段均出现不同表达,因此考虑TIPE2、Foxp3和CTLA-4 mRNA表达在肝癌的发生发展中起重要作用。  相似文献   

5.
目的探讨人外周血单个核细胞中FOXP3mRNA的表达与CD4^+CD25^+Treg表达的相关性。方法提取人外周血单个核细胞总RNA,逆转录成mRNA,以β-actin为内参照,实时荧光定量RT-PCR检测29例哮喘患儿及24例同龄对照FOXP3mRNA的相对表达量,采用融解曲线和琼脂糖电泳鉴定PCR产物特异性;同时采用流式细胞技术检测CD4^+CD25^+Treg的比例。结果哮喘患儿组CD4^+CD25^+Treg细胞百分率明显低于同龄对照组,P〈0.01;FOXP3mRNA的表达也显著降低,P〈0.05;FOXP3和β-actin的融解曲线分析表明均仅有单一峰,Tm值分别为82.4℃和87.8℃;琼脂糖电泳显示都仅有单一扩增产物。结论应用SYBRGreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术检测FOXP3mRNA表达水平简便、经济、可行,哮喘患儿CD4^+CD25^+Treg明显降低可能参与哮喘发病,FOXP3表达降低可能是导致CD4^+CD25^+Treg发育障碍的重要因素。  相似文献   

6.
目的探讨肝移植自发免疫耐受大鼠移植物内Foxp3的表达。方法双袖套法建立大鼠原位肝脏移植模型。取肝组织,通过实时荧光定量PCR、检测大鼠移植肝内Foxp3 mRNA的表达。结果术后7 d,耐受组移植物内Foxp3 mRNA表达水平明显高于排斥组和同基因组(P<0.05),术后14 d,耐受组移植物内Foxp3 mRNA表达水平亦明显高于同基因组(P<0.05),术后28 d,耐受组与同基因组移植物内Foxp3 mRNA表达水平无明显差异(P>0.05)但仍高于正常值。结论转录因子Foxp3可能参与大鼠肝脏移植自发免疫耐受的形成。  相似文献   

7.
目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞中转录因子Toll样受体9(TLR9)和Foxp3在的表达,并探讨其意义以及二者的相关性,明确TLR9和Foxp3在SLE中的作用和意义。方法选择泰安市中心医院和山东大学齐鲁医院2012年10月至2014年6月门诊或住院SLE活动性患者33例、SLE非活动性患者30例,查体中心健康查体者23例作为正常对照,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常对照组和SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3和TLR9m RNA的表达水平。结果活动性SLE患者外周血单个核细胞中TLR9 m RNA的表达水平明显高于SLE非活动性患者和正常对照(P<0.05),非活动性SLE患者TLR9 m RNA的表达水平高于正常对照(P<0.05)。TLR9 m RNA水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)呈正相关(r=0.702,P<0.05)。活动性SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3 m RNA的表达水平明显低于SLE非活动性患者和正常对照(P<0.05),非活动性SLE患者Foxp3 m RNA的表达水平低于正常对照(P<0.05)。Foxp3 m RNA水平与SLEDAI呈负相关(r=-0.681,P<0.05)。在SLE患者外周血单个核细胞中TLR9和Foxp3的表达呈负相关。结论 SLE患者TLR9的表达与疾病活动性呈正相关,而Foxp3的表达与疾病活动性呈负相关。TLR9和Foxp3之间可能存在相互调节的作用,共同导致SLE的发生和发展。  相似文献   

8.
目的探讨细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)在脓毒症发病机制中的作用。方法选择36例脓毒症患者,30例健康志愿者为对照组,应用RT-PCR方法测定SOCS-3在外周血单个核细胞中的表达,并和患者APACHEⅡ评分进行相关分析。结果SOCS-3在脓毒症组和对照组的外周血单个核细胞中均有表达,脓毒症组较对照组表达显著增加(P〈0.001),SOCS-3 mRNA的表达和脓毒症A—PACHEⅡ评分呈负相关,相关系数(r)为-0.746(P〈0.01)。结论SOCS-3参与了脓毒症的发病过程,SOCS-3的表达在脓毒症患者中可能起着保护作用。  相似文献   

9.
谭国珍  李希清 《新医学》1999,30(11):639-640
目的 :了解系统性红斑狼疮 ( SL E)疾病中 T、B细胞的变化和两者之间的相互关系。方法 :采用 ABC免疫组化法检测了 3 0例 SL E患者治疗前、后外周血单个核细胞 ( PBMC)分化群 CD2 3、 CD2 5、 CD19的表达 ,并与 2 3名正常健康人作对照。结果 :SL E患者 PBMC CD2 3 、CD2 5 表达分别为 ( 7.9± 1.5 ) % ,( 2 7.2± 6.4 ) % ,均较正常组的 ( 1.6± 1.1) % ,( 4 .4± 1.7) %显著增高 ( P<0 .0 1)。经治疗病情稳定后 CD2 3 ( 2 .0± 1.2 ) % ,与正常组比较无显著性差异 ( P>0 .0 5 ) ;而 CD2 5 虽有下降 ( 10 .2± 6.7) % ,但仍较正常组显著增高 ( P<0 .0 1)。PBMCCD19 表达与正常组比较 ,无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。活动性 SL E患者 CD2 3 与 CD2 5 表达呈正相关 ( r=0 .4 0 0 8,P<0 .0 5 )。结论 :在 SL E活动期 T、B细胞均被激活 ,共同参与了 SL E免疫调节。B细胞活化与 T细胞激活有关且主要表现为质的异常 ,而 T细胞异常更难以纠正。  相似文献   

10.
目的通过分析特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化,探讨它们在ITP发生过程中的作用。方法流式细胞仪检测40例ITP患者治疗前后和30例健康对照者的外周血CD4+CD25+调节性T细胞的比例并分析比较。结果 40例ITP患者治疗前CD4+CD25+调节性T细胞的表达明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗后除无效组外,其表达明显高于治疗前(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05),初诊组与无效组比较差异无统计学意义(P>0.05);显效组、良效组和进步组均明显高于无效组(P<0.05),但良效组和进步组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ITP患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例降低,但治疗后随着病情的好转逐渐升高,提示CD4+CD25+调节性T细胞可能在ITP的发病中起着重要作用。  相似文献   

11.
目的 探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(TIM-3)和半乳糖凝集素-9(Galectin-9)基因在急性发作期哮喘患者外周血单个核细胞的表达及临床意义。方法 收集2014年1月~10月门诊急性发作期哮喘患者60例(排除不符合者15例,确定入选45例)及30例健康体检者(对照组),以实时定量RT-PCR法分别对哮喘患者及体检者外周血单个核细胞(PBMCs)中的TIM-3,Galectin-9和IFN-γ的表达情况进行同步测定,初步探讨TIM-3,Galectin-9在哮喘发病中的潜在作用。结果 急性发作期哮喘患者PBMCs中TIM-3,Galectin-9及IFN-γ mRNA水平均分别高于健康对照组(U=458.5,P=0.019; U=437.5,P=0.010; U=260,P<0.001),二者间的差异均有统计学意义。结论 TIM-3/Galectin-9可能参与了哮喘的发生、发展,TIM-3或(和)Galectin-9有可能为治疗哮喘提供一个新的靶点。  相似文献   

12.
BACKGROUND: Leptin is an adipokine initially considered as a molecule related exclusively to obesity but advances in research revealed its multiple roles in other physio-pathological mechanisms and particularly in the inflammatory ones. The aim of the present study was to demonstrate the presence of leptin in human Peripheral Blood Mononuclear Cells (PBMCs) and to quantify its mRNA in this type of tissue, closely related to inflammation. METHODS: Leptin mRNA was present in PBMCs of healthy individuals. Its expression was further studied in 83 individuals in relation to constitutional factors, anthropometric variables, blood pressure, lipid profile, glucose and markers of inflammation (C-reactive protein, lymphocyte count). RESULTS: Expression levels were significantly associated with systolic blood pressure (SBP) (p = 0.03) and diastolic blood pressure (DBP) (p = 0.003). Using a multiple regression analysis model, we showed that leptin mRNA levels explained 11% of the variation of SBP (p = 0.007) and of DBP (p = 0.003). These percentages remained at the same magnitude for SBP (9%) and for DBP (10%), after introducing BMI in the model. CONCLUSION: We report here for the first time, leptin expression in human PBMCs of healthy individuals. The associations found with blood pressure suggest a possible role of leptin in blood pressure regulation via PBMCs.  相似文献   

13.
目的 分析急性毛细支气管炎患儿外周血单个核细胞中沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)水平表达与预后的相关性。方法 选择2019年10月~2021年1月在唐山市妇幼保健院就诊的156例急性毛细支气管炎患儿作为研究对象,并根据出院后6个月是否发生喘息分为喘息组(n=51)和非喘息组(n=105)。用Ficoll密度梯度离心法分离外周血中单个核细胞,用蛋白质免疫印迹法检测单个核细胞中SIRT1水平。比较喘息组和非喘息组治疗前后SIRT1水平,并分析其与急性支气管炎治疗后喘息的关系。结果 喘息组的过敏史占比高于非喘息组[25.49%(13/51) vs 6.67%(7/105)],差异有统计学意义(χ2=10.882,P=0.001)。喘息组治疗前、治疗后的SIRT1水平均低于非喘息组(0.13±0.03 vs 0.18±0.05,0.31±0.06 vs 0.37±0.08),差异均有统计学意义(t=7.703,5.814,均P=0.000)。治疗前SIRT1判断急性毛细支气管炎患儿治疗后发生喘息的受试者工作特征(ROC)曲线下面积为...  相似文献   

14.
目的探讨肝损伤患者外周血单个核细胞(PBMCs)中IL-12mRNA的表达水平及其意义。方法采用RTPCR法检测36例慢性肝病患者(21例乙型肝炎、15例丙型肝炎)、17例急性重型肝炎患者、11例原发性肝癌患者和18例正常对照者中IL-12 P40 mRNA的表达水平。结果在肝损伤患者中.IL-12的表达较正常人显著增高(P〈0.001).其中急性重型肝炎患者的丧达水平显著高于慢性肝病组(P〈0.001)。而原发性肝癌患者IL-12 mRNA表达又高于急性重型肝炎(P=0.002),且与血清胆红素浓度和内毒素血症相关。结论IL-12可能促进肝脏的炎性损害.导致严重的肝细胞损伤。检测IL-12 mRNA表达水平对于了解肝损伤患者的肝损害程度、早期诊断和顶后具有重要意义。  相似文献   

15.
目的 探讨隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞中micorRNA-31表达情况及与疾病的相关性.方法 收集2007年9月-2012年8月期间,在上海长海医院和上海长征医院确诊的隐球菌脑膜炎患者和同期健康对照各30例,使用密度梯度离心法,分离30例隐球菌脑膜炎患者和30例健康对照外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),采用实时荧光定量PCR检测microRNA-31(miR-31)的表达,并分析其与患者临床特征(血清中IgG,IgA,IgM)和细胞因子(IL-4,IL-10,IFN-γ,TNF-α)的相关性.结果 与健康对照相比,隐球菌脑膜炎患者PBMCs中miR-31表达(0.856±0.231 vs 0.470±0.242)增高,差异有统计学意义(t=6.320,P<0.001)且与血清IL-4水平正相关(r=0.644,P<0.001),与IgG,IFN-γ负相关(r=0.645, 0.671;P值均<0.001).结论 提示miR-31可能通过调节炎症性细胞因子的产生,参与了隐球菌脑膜炎的发病机制,这为进一步研究隐球菌脑膜炎患者的表观遗传学调控提供了新的线索.  相似文献   

16.
目的:通过体外培养的方式。观察长效β2-受体激动剂福莫妥罗(formoterol),白三烯受体拮抗剂盂鲁斯特(montelukast)和扎鲁斯特(zafirlukast)3种药物对哮喘患外周血单个核细胞(PMBC)分泌白介素-4(IL-4),白介素-5(IL-5)的影响。方法:哮喘患26例。正常对照组10名,分离受试对象之外周血单个核细胞并接种于细胞培养板。药物孔相应加入montelukast,zafirlukast或formoterol预培养2h后,所有培养孔加植物血凝素(PHA)刺激培养48h,收集上清液,用ELISA法测定培养上清液中IL-4,IL-5的浓度并进行相应的统计学处理。结果:(1)哮喘组PBMC单纯经PHA刺激后,平均IL-4,IL-5的分泌水平高于健康组。(2)Montelukast,zafirlukast可导致哮喘组IL-5分泌下降,且有统计学意义。结论:Montelukast和zafirlukast均能抑制IL-5的分泌,前还可能对IL-4的分泌也具有抑制作用,因而有利于纠正哮喘患Th1/Th2的不平衡,本研究未见formotrol对IL-4,IL-5的分泌有影响。  相似文献   

17.
目的 研究micro-RNA(miR-205)在原发性免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)患者外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMC)中的表达和意义。方法 收集43例ITP患者和38例健康人的外周静脉血2 ml,分离PBMC,提取细胞总RNA,逆转录合成cDNA,以U6为内参,应用实时荧光定量PCR(Real time PCR)的方法检测miR-205的表达量; 分析miR-205与血小板计数结果之间的相关性。结果 ITP初诊患者(Naive ITP)PBMC miR-205的表达水平与健康对照组相比上调(1.81±0.48 vs 0.92±0.25,t=10.31,P<0.01); 治疗后不完全缓解组(incmplete remissiongroup,IR group)和初诊患者相比,miR-205的表达水平差异无统计学意义(P=0.112),和正常对照组相比,则表达升高(1.63±0.65 vs 0.92±0.25,t=7.2,P<0.01); 14例治疗后完全缓解组(complete remission group,CR group)治疗后(After treatment)PBMC miR-205的表达低于治疗前(before treatment)的表达水平(1.07±0.43 vs 1.91±0.34,t=5.68,P<0.01); ITP患者PBMC中miR-205的表达量与血小板计数呈负相关(r=-0.0696,P<0.05)。结论 miR-205在ITP初诊患者PBMC中高表达,而治疗完全缓解后表达水平又降低,并且表达水平与血小板数量呈负相关,表明其可能与ITP的发生发展相关,或许会成为ITP诊疗新的标志物。  相似文献   

18.
熊金河  胡绍先 《华西医学》2010,(8):1418-1420
目的检测B细胞成熟抗原(BCMA)mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)的表达水平,探讨BCMA在SLE发病中的意义。方法纳入2006年1-11月收治的36例SLE患者,同期17例健康志愿者作为对照组,采用半定量RT-PCR法检测外周血单个核细胞中BCMA mRNA的表达,并与SLE疾病活动指数(SLEDAI)进行相关性分析。结果 SLE患者组BCMA mRNA表达水平(0.598±0.230)均明显高于正常对照组(0.411±0.309)(P〈0.05)。SLE患者BCMA mRNA表达水平与SLEDAI评分无相关性(P=0.590)。结论 SLE患者BCMA mRNA表达水平的增高,可能在SLE的发病机制中具有一定的作用。  相似文献   

19.
目的 研究强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中Toll样受体(toll like receptors,TLRs)的表达及功能,并探讨TLRs在AS发病中的作用。方法 通过荧光定量PCR的方法检测21例AS患者及21例健康对照者PBMCs上TLR1~TLR10的表达; 采用ELISA的方法检测AS患者及健康对照者PBMCs中TLRs介导的细胞因子产生水平,并检测患者及健康对照血浆中细胞因子的水平。结果 与对照组相比,AS患者组PBMCs中TLR4的表达水平显著升高,差异具有统计学意义(P=0.004),其他TLRs在两组间的表达差异无统计学意义; AS患者PBMCs中TLR4介导的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的产生水平显著增高(P值分别为0.003和0.009); AS患者血浆中TNF-α的表达水平较健康对照组显著升高(P=0.021)。结论 AS患者PBMCs中TLR4的表达及细胞因子产生能力增强,TLR4通路可能在AS发病过程中起重要作用。  相似文献   

20.
目的:探讨原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)中TRAIL的表达及其在发病机制中的作用。方法使用Ficoll密度梯度离心法,收集28例ITP患者和30例健康对照的外周血单个核细胞(PBMC)。采用实时荧光定量PCR检测TRAIL基因的表达,采用 ELISA方法检测血清中细胞因子TNF-α,IFN-γ,IL-4和 IL-10的量,并分析TRAIL与患者TNF-α,INF-γ,IL-10和血小板计数的相关性。结果与健康对照组相比,ITP患者 PBMC中 TRAIL表达显著增高(2.80±0.43 vs 1.00±0.24,t=19.72,P<0.001)。与健康对照组相比,ITP患者血清中IFN-γ和TNF-α升高(52.43±11.04 pg/ml vs 23.26±8.15 pg/ml;69.14±10.89 pg/ml vs 36.14±13.17 pg/ml,t=10.36~11.50,P值均<0.001),IL-10降低(11.18±6.13 pg/ml vs 33.28±9.85 pg/ml,t=10.17,P<0.001),IL-4的变化差异无统计学意义(35.75±12.52 pg/ml vs 40.16±14.26 pg/ml,t=1.25,P>0.05)。且ITP患者TRAIL的表达与血清中IFN-γ,TNF-α正相关(r=0.432,0.541,P 值均<0.05),与 IL-10,血小板计数负相关(r=-0.424,-0.553,P 值均<0.05)。结论TRAIL可能通过介导细胞因子免疫紊乱,参与了 ITP的发生与发展,这为进一步研究 ITP的免疫干预治疗提供了新的线索和思路。  相似文献   

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