沈阳地区非综合征性耳聋患者的基因芯片检测结果分析

目的：探讨基因芯片技术在耳聋基因筛查的临床应用价值,了解沈阳地区非综合征性耳聋患者致病基因的分子特征。方法采集沈阳地区门诊或病房散发的非综合征性耳聋患者100例的外周血并提取DNA ,应用晶芯遗传性耳聋基因芯片试剂盒检测GJB2、GJB3、SLC26A4和线粒体12SrRNA 4个常见耳聋基因中的9个突变位点。结果在100例患者中,36例耳聋患者检出遗传性耳聋基因突变,检出阳性率为36．0％（36/100）;其中GJB2、SLC26A4、线粒体12S rRNA 和 GJB3基因突变的阳性检出率分别为20．0％（20/100）、14．0％（14/100）、2．0％（2/100）和0．0％（0/100）。检出致聋基因突变型19例,占被检出阳性总数的52．8％（19/36）,杂合基因突变型17例,占被检出阳性总数的47．2％（17/36）。结论中国人常见的4个致聋基因突变在沈阳地区人群中除GJB3外都有一定的检出率。     

海南地区非综合征遗传性耳聋四个常见基因突变的分析

目的：了解海南地区非综合征遗传性耳聋的四个常见基因突变情况。方法采用晶芯九项遗传性耳聋基因芯片检测试剂盒、微阵列芯片扫描仪及相应的遗传性耳聋基因芯片判别系统进行检测分析。结果429例临床标本中,共检出55例携带致聋突变,阳性率为12.82％。其中,5例（1.17％）线粒体DNA 12S rRNA突变,包括1555 A＞G均质突变4例,1494 C＞T均质突变1例;GJB2基因突变25例（5.83％）,其中包括235 del C纯合突变9例,235 del C/GJB2299 del AT复合杂合突变2例,235 del C单杂合突变10例,176 del 16单杂合突变4例;22例（5.13％）SLC26A4基因突变,包括IVS7-2A＞G纯合突变4例,2168 A＞G纯合突变1例,IVS7-2A＞G单杂合突变12例,2168 A＞G单杂合突变5例;3例（0.70％）GJB3基因突变,均为538 C＞T单杂合突变。在SLC26A4基因突变阳性的22例中,有4例临床诊断为双侧大前庭水管综合征,其基因突变型分别为3例 SLC26 A4基因 IVS7-2 A＞G纯合突变,1例 SLC26 A4基因2168 A＞G纯合突变。结论海南地区非综合征遗传性耳聋以 GJB2基因突变和 SLC26A4基因突变为主要耳聋突变基因。     

广州市地区7234例新生儿耳聋基因突变分析

目的分析广州地区7234例新生儿4个常见遗传性耳聋基因热点突变情况,为广州地区遗传性耳聋的防治提供依据。方法收集广州市天河区中山大学附属第三医院2015年6月至2019年1月分娩的7234例新生儿脐带血液标本进行耳聋基因热点检测,基因突变新生儿行Sanger测序验证及基因外显子测序。结果检测到耳聋基因突变携带者266例(3.68%),其中GJB2基因突变159例(22.0%),SLC26A4基因突变85例(1.18%)。在266例的基因携带者中,GJB2 c.235delC杂合突变占49.6%(132/266),SLC26A4 IVS7-2A>G突变占28.2%(75/266),其余位点占22.2%。携带者一代测序验证结果与耳聋基因筛查结果一致,基因外显子测序中发现有3名双重突变患儿,两例为GJB2 c.235 del C与GJB2 c.109G>A双重杂合突变患儿,另一例为SLC26A4 IVS 7-2 A>G与SLC26A4 c.1983C>A双重杂合突变患儿,3例患儿经父母血液标本验证,双重杂合位点分别遗传自父母。结论本研究7234例新生儿聋基因筛查中,GJB2基因突变频率最高,其次是SLC26A4基因,为耳聋儿童的早期发现与早期干预提供参考与指导。现行热点突变检测位点可能漏检其他突变位点,可根据本地检测情况调整或者制定适合本地的筛查方案。     

沧州市非综合征性耳聋患者常见耳聋基因突变的分析

目的：筛查沧州市非综合征青少年耳聋患者常见耳聋基因热点突变,初步了解该地区耳聋基因热点发生频率和突变谱系。方法对沧州市特殊教育学校的30例非综合征感觉神经性耳聋患者采集外周血5 mL,通过基因芯片检测技术对GJB2、GJB3、SLC26A4、线粒体12SrRNA基因20个位点进行测序。结果30例患者中共检出耳聋基因热点突变阳性者6例,阳性率为20%。其中GJB2基因突变235delC纯合突变2例,235delC杂合突变1例,299-300delAT 杂合突变1例, SLC26A4 IVS7-2A〉G 纯合突变1例,SLC26A4IVS7-2A〉G 合并 IVS7-2A〉G 杂合突变1例。结论 GJB2基因突变是引起非综合征性耳聋的主要致病基因,SLC26A4为最常见的耳聋突变基因。未检测到线粒体12SrRNA基因突变。     

河北沧州地区遗传性耳聋突变位点分析

摘要:目的：分析河北沧州地区遗传性耳聋的基因突变位点。 方法：对非综合征性耳聋患者（47人）和听力下降患者（21人）用基因芯片技术检测4个耳聋基因GJB2、GJB3、SLC26A4、线粒体DNA 12SrRNA的9个突变位点。 结果：耳聋组47例患者中耳聋基因突变者17例（36.2%）,GJB2基因突变15例（31.9%）,其中235delC纯合突变9例（19.1%）,235delC杂合突变1例（2.1%）,299delAT纯合突变2例（4.3%）,176del16和299delAT杂合突变1例（2.1%）,235delC和299delAT杂合突变2例（4.3%）;GJB3基因突变1例（2.1%）;SLC26A4基因突变1例（2.1%）。听力下降组21例患者中耳聋基因突变者7例（33.3%）,GJB2基因突变3例（14.3%）,SLC26A4基因突变者4例（19.0%）。结论：河北沧州地区主要见GJB2、GJB3及SLC26A4基因突变。     

中国东北地区非综合征性耳聋患者GJB2基因的致聋突变分析

目的分析58例中国东北地区非综合征性耳聋（nonsyndromic hearing impairment，NSm）患儿GJB2基因突变类型和频率。方法收集吉林省吉林市聋哑学校的58例非综合征性耳聋患儿（分别来自57个家庭）及37例听力正常家属的血样，经聚合酶链反应（Dolymerase chain reaction，PCR）扩增GJB2基因编码区。用酶切方法初步分析已知的233—235位点，进一步行DNA测序证实酶切结果并发现新的突变类型；同时对部分家属进行DNA测序，区分并证实致病突变位点或多态性改变。结果58例患儿中发现11例（18．97％）为233—235delC突变，其中7例（12．07％）为233—235delC纯合突变，4例（6．90％）为233—235delC杂合突变；发现1例35delG杂合突变；4例235delC杂合突变及1例35delG杂合突变者均伴有299—300delAT杂合突变。在患儿及听力正常的家属中均发现有G79A杂合及A341G杂合复合变异、G79A纯合及A341G纯合复合变异。结论东北地区NSHI患儿的GJB2突变热点为233—235delC，突变率为18．97％。233—235delC杂合及299—300delAT杂合复合突变、35delG杂合及299—300delAT杂合复合突变为致病突变。G79A杂合及A341G杂合复合变异、G79A纯合及A341G纯合复合变异为多态性改变。     

SLC12A3基因突变致成人Gitelman综合征4例

Gitelman综合征(Gitelman syndrome,GS)又称家族性低钾低镁综合征,1966年由Gitelman等[1]首次报道,是由编码肾脏远曲小管钠-氯协同转运蛋白(Na-Cl cotransporter,NCCT)的SLC12A3基因突变所致的常染色体隐性遗传病,曾长期被认为是Bartter综合征(Bar...     

SLC12A3基因突变Gitelman综合征并身材矮小1例临床分析

Gitelman综合征（Gitelman syndrome,GS）又被称为家族性低钾低镁血症,是一种以低钾低氯性碱中毒、低镁血症、低尿钙、高肾素活性为特征的常染色体隐性遗传的失盐性肾小管疾病,血压可正常或偏低。大多数患者经过“食补+药物”替代治疗有良好的预后,早期发现并予相应治疗,可显著提高患者生活质量。现将西安市儿童医院收治的1例Gitelman综合征并身材矮小患者临床资料及诊疗过程,结合相关文献学习,做如下报道。     

上海地区35例大前庭导水管综合征相关耳聋患者常见致病基因的分子诊断研究

目的:探讨上海地区大前庭导水管(EVA)综合征相关耳聋患者常见致病基因SLC26A4、FOXI1、KCNJ10及SLC26A4启动子c.-103位点的突变情况,在分子水平上明确该病的发病机制和诊断基础。方法:收集上海地区35例散发EVA综合征耳聋患者的外周血DNA样本及临床资料,利用巢式PCR扩增目的基因后直接测序的方法,对所有患者进行主要致病基因SLC26A4全编码序列及侧翼序列的检测,并针对无SLC26A4双等位基因突变的患者继续进行SLC26A4基因启动子c.-103位点、FOXI1和KCNJ10基因的突变检测。应用Sequencher4.9软件对上述测序结果进行分析。结果:23例(66%)和4例(11%)先证者分别具有SLC26A4双等位基因(纯合或复合杂合)和单等位基因突变。SLC26A4基因共有13种突变被检出,其中c.919-2A>G突变和p.R409H突变分别占总检出突变的64%(32/50)和8%(4/50)。8例(23%)先证者未检出SLC26A4基因突变。在无SLC26A4双等位基因突变的全部12例(34%)患者中,未检测出SLC26A4基因启动子c.-103位点、FOXI1和KCNJ10基因突变。结论:与已报道中国EVA综合征耳聋人群基因诊断数据相比,上海地区患者SLC26A4基因突变率明显偏低,体现出中国地域性人群遗传结构上的差异;其他报道致病基因FOXI1、KCNJ10及SLC26A4启动子c.-103位点突变不构成上海地区EVA综合征耳聋患者的主要病因。     

铜仁市育龄妇女耳聋基因突变检测结果分析

目的 分析铜仁市各族育龄妇女耳聋基因携带情况.方法 选取2019年8月至2020年10月在本院进行产前检查的育龄妇女1 723例为研究对象,采用广东凯普生物科技有限公司提供的耳聋基因检测杂交试剂盒对各族育龄女性进行遗传性耳聋4个基因GJB2、SLC26A4、GJB3、线粒体12SrRNA的21个突变位点筛查.结果 本次...     

杭州某社区603名老年人听力下降现状及其影响因素分析

目的了解老年人听力下降现状以及影响因素,为寻找延缓或改善老年人听力的康复手段提供参考。方法采用立意取样,应用自制社区老年人调查问卷和社会支持量表对杭州市某社区603名老年人进行面对面入户调查。结果听力异常的老年人占有一定比例,为36.5%,其中以听力略有下降者为主,占25.5%,而耳聋者较少,占1.2%;年龄、是否患有糖尿病、锻炼情况、社会支持度4个变量进入回归方程(P0.05),年龄较高者、患有糖尿病者,其听力下降明显;经常且规律锻炼者听力情况优于"偶尔"或"几乎无"锻炼者,"满意社会支持"者听力情况优于"较少或一般社会支持"者。结论杭州某社区老年人听力下降的发生率较高且影响因素复杂,主要与年龄、糖尿病患病情况、身体锻炼情况和社会支持度有关。提示应从老年人自身与社会支持角度积极防治影响老年人听力下降的因素。     

影响突发性聋听力损失的相关因素分析

【目的】探讨发病年龄及眩晕对突发性聋听力损失的影响。[方法]依发病年龄及是否伴眩晕进行分组，回顾分析本院1999-2004年202例（219耳）突发性聋患者的纯音测听结果。【结果】≤14岁患者（12耳）听力损失较14-60岁（184耳）和≥60岁患者（23耳）严重；伴眩晕65耳听力损失较不伴眩晕者（154耳）严重。【结论】在儿童及伴眩晕患者中突发性聋听力损失较严重。     

贵州三都水族居民葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因突变研究

为了了解贵州省少数民族居民葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PD)缺乏症的发病率、基因突变类型特点及分布特征，进一步从分子水平揭示G6PD基因突变的异质性，对贵州省三都水族自治县1090名当地水族居民采用噻唑蓝定性法、G6PD／6PGD活性比值法进行G6PD缺乏症的筛查，再经错配引物介导的聚合酶链反应/限制性酶切分析法检测中国人中最常见的3种G6PD基因突变型：1376G→T、1388G→A、95A→G。结果表明：在受检的1090人中，共检出G6PD缺乏症98例，检出率8．99％，在G6PD缺乏症中检出最常见的3种G6PD基因突变型：1376G→T24例；1388G→A12例；95A→G9例；并在国内首次检出1376G→T、95A→G复合型突变1例。1376G→T突变频率为0．245；1388G→A突变频率为0．122；95A→G突变频率为0．092。结论：1376G→T、1388G→A、95A→G为贵州省三都水族居民的常见G6PD突变型，这个结果提示贵州三都水族与中国其它少数民族在起源上可能有共同的渊源。     

Mutation analysis of SLC26A4 for Pendred syndrome and nonsyndromic hearing loss by high-resolution melting

Pendred syndrome and DFNB4 (autosomal recessive nonsyndromic congenital deafness, locus 4) are associated with autosomal recessive congenital sensorineural hearing loss and mutations in the SLC26A4 gene. Extensive allelic heterogeneity, however, necessitates analysis of all exons and splice sites to identify mutations for individual patients. Although Sanger sequencing is the gold standard for mutation detection, screening methods supplemented with targeted sequencing can provide a cost-effective alternative. One such method, denaturing high-performance liquid chromatography, was developed for clinical mutation detection in SLC26A4. However, this method inherently cannot distinguish homozygous changes from wild-type sequences. High-resolution melting (HRM), on the other hand, can detect heterozygous and homozygous changes cost-effectively, without any post-PCR modifications. We developed a closed-tube HRM mutation detection method specific for SLC26A4 that can be used in the clinical diagnostic setting. Twenty-eight primer pairs were designed to cover all 21 SLC26A4 exons and splice junction sequences. Using the resulting amplicons, initial HRM analysis detected all 45 variants previously identified by sequencing. Subsequently, a 384-well plate format was designed for up to three patient samples per run. Blinded HRM testing on these plates of patient samples collected over 1 year in a clinical diagnostic laboratory accurately detected all variants identified by sequencing. In conclusion, HRM with targeted sequencing is a reliable, simple, and cost-effective method for SLC26A4 mutation screening and detection.     

Identification of SLC26A3 mutations in a Korean patient with congenital chloride diarrhea

Congenital chloride diarrhea (CLD) is an autosomal recessive disorder with the hallmark of persistent watery Cl(-)-rich diarrhea from birth. Mutations in the solute carrier family 26, member 3 (SLC26A3) gene, which encodes a coupled Cl(-)/HCO(3)(-) exchanger in the ileum and colon, are known to cause CLD. Although there are a few reports of CLD patients in Korea, none of these had been confirmed by genetic analysis. Here, we describe the case of a Korean infant with clinical features of CLD. Using direct sequencing analysis, we identified 2 sequence variants: a missense variant of unknown significance (c.525G>C; p.Arg175 Ser) and a splicing mutation (c.2063-1G>T) in the SLC26A3 gene; these had been inherited from the father and mother, respectively. Whilst CLD is rare, its main symptom, diarrhea, is very common in infants. Hence, the diagnosis of CLD can prove difficult. Mutational analysis of the SLC26A3 gene should be considered as a viable method to confirm a diagnosis of CLD in Korean infants with persistent diarrhea.     

Analysis of Beta-Tubulin Gene Exon 4 Mutations in Advanced Stage III or IV Gastric Cancer

The mechanisms that cause chemoresistance of gastric cancer have yet to be elucidated. Taxanes and promising agents that were recently approved for treatment of advanced or recurrent gastric cancer. Mutations of beta-tubulin, which is a target of taxianes, have been shown to confer chemoresistance against these agents. The aim of the present study is to investigate the presence of mutations of the beta-tubulin in gastric cancer tissues. Sixty-six patients with advanced stage III or IV gastric cancer patients enrolled in this study. Paired samples of gastric cancer tissue and normal mucosa were obtained by endoscopy. The guanosine 5'-triphosphate (GTP)-binding site in exon 4 of the beta-tubulin gene was examined by polymerase chain reaction single-strand conformational polymorphism (PCR-SSCP) analysis, followed by sequencing of the products with abnormally shifted bands. SSCP analysis showed abnormal bands upstream of the GTP-binding site in 7 of the 66 patients, but sequence analysis found no nucleotide substitutions in these patients. Three variant bands were also detected down stream of the the GTP-binding site, but the sequences of the 3 products corresponded to those of two independent pseudogenes. Thus, none of the tumor samples showed mutation of the beta-tubulin exon 4 GTP-binding site. In conclusion, these findings suggest that mutations of the beta-tubulin gene are rare and are unlikely to be an important cause of taxane resistance to taxians.