嵌合抗CD20抗体Fab′片段诱导Raji细胞凋亡过程中活性氧自由基的变化

目的　研究嵌合抗CD2 0抗体Fab′片段对B淋巴细胞株Raji细胞活性氧自由基 (ROS)的影响。 方法　利用MTT法测定Fab′片段抑制细胞生长 ,形态学方法和DNA琼脂糖凝胶电泳法观察Fab′片段对细胞凋亡的影响 ,用DCFH DA和双氢罗丹明 1 2 3(DHR )标记细胞内活性氧(ROS)变化 ,并用流式细胞仪检测。结果　MTT法测定抗CD2 0抗体Fab′片段对Raji细胞的生长具有抑制作用 ,其抑制作用呈明显的剂量依赖性 ,电镜观察 ,可见“凋亡小体”出现 ,DNA电泳可见典型的“梯形”条带 ,抗CD2 0抗体Fab′片段能增加Raji细胞内ROS水平 ,且随浓度增加而增加。 结论　ROS水平升高在抗CD2 0抗体Fab′片段诱导Raji细胞凋亡的过程中起到重要作用     

抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体在小鼠体内性质的研究

目的：研究抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体的体内作用.方法：125I标记抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体采用氯胺T法,并采用昆明鼠和人K562耐药裸鼠移植瘤模型分别测定该微型双功能抗体在小鼠体内的药代动力学和体内组织分布：采用人K562耐药及敏感裸鼠移植瘤模型测定该微型双功能抗体介导的体内靶向杀伤活性及其不良反应.结果：抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体在昆明鼠体内的半衰期为2 h;尾静脉注射抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体6 h后,其在肿瘤部位的分布高于其他组织,在12 h和24 h时,其在肿瘤与血液分布的比率分别为2.69和8.09;抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体能介导人T细胞有效杀伤表达Pgp抗原的K562耐药细胞.结论：抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体能在裸鼠皮下人白血病细胞移植瘤部位富集,并能有效地抑制耐药白血病移植瘤的生长,无明显的不良反应.     

靶向CD19嵌合抗原受体T细胞体外构建、扩增及抗肿瘤活性研究

目的  探索特异性靶向CD19的嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor, CAR）T细胞的构建与制备方法,并研究其体外杀伤靶细胞的效果。方法  通过基因合成和分子克隆手段构建anti-CD19-CAR片段并将其插入plenti6.3慢病毒载体,利用293FT悬浮细胞系包装慢病毒并转染人外周血单个核细胞来源的CD3⁺ T细胞,通过流式细胞术鉴定转染效率,并通过实时无标记细胞分析法和细胞计数试剂盒8检测anti-CD19-CAR-T细胞体外杀伤效果。结果  获得了表达抗CD19的单链抗体基因的慢病毒,病毒滴度可达3.2×10⁸ 噬斑形成单位/ml。经慢病毒转染的CD3⁺ T细胞在体外培养14 d后,细胞扩增效率达(60.2±11.5)倍,anti-CD19-CAR-T细胞阳性率达90.57%。经检测,anti-CD19-CAR-T细胞均可有效杀伤CD19⁺靶细胞。结论  建立了基于无血清悬浮细胞系的anti-CD19-CAR慢病毒包装系统,成功构建靶向CD19抗原的CAR-T细胞,能特异性杀伤CD19+肿瘤细胞。     

盐酸博安霉素注射用原位凝胶的体内分布研究

考察盐酸博安霉素(BAM)注射用原位凝胶在裸鼠体内的扩散情况以评价原位凝胶对盐酸博安霉素的阻滞作用。以荧光染料异硫氰酸荧光素(FITC)标记盐酸博安霉素,制备异硫氰酸荧光素-盐酸博安霉素偶联物(FITC-BAM),采用透析袋透析和Sephadex G25葡聚糖凝胶柱对偶联物进行分离纯化,利用基质辅助激光解析电离/飞行时间(MALDI-TOF)质谱检测偶联效果。建立裸鼠皮下肝癌移植瘤模型,应用动物体内活体光学成像系统定时检测盐酸博安霉素在裸鼠体内的特异性分布情况。MALDI-TOF质谱检测结果显示,FITC成功与BAM发生偶联,且二者偶联的分子比主要为1∶1或2∶1。活体动物成像系统观察显示,盐酸博安霉素注射用原位凝胶组FITC-BAM的扩散较普通注射液组明显延迟。研究表明,将盐酸博安霉素制备成注射用原位凝胶制剂,能够阻滞药物在体内的释放,延长作用时间。     

治疗大B细胞淋巴瘤首个靶向CD-19抗体偶联药物——Loncastuximab Tesirine-lpyl

Loncastuximab Tesirine-lpyl(商品名Zynlonta)是靶向CD-19的抗体偶联药物。2021年4月23日,美国食品药品管理局(FDA)批准抗体偶联药物Loncastuximab Tesirine-lpyl用于治疗复发/难治性大B细胞淋巴瘤,并正在开发用于治疗非霍奇金淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤和急性淋巴细胞白血病。本文从药理作用及作用机制、药物代谢动力学、临床疗效评价、安全性评价、用法用量等方面对Loncastuximab Tesirinelpyl进行综述,旨在为临床合理用药提供参考。     

肿瘤靶向药物抗体-药物偶联物的研究进展

抗体-药物偶联物(Antibody-drug conjugates,ADC)具有单克隆抗体的靶向特异性和细胞毒素的抗肿瘤能力,其利用化学接头将细胞毒性药物与单克隆抗体偶联,与肿瘤部位的靶抗原结合后释放毒素.尽管概念简单,但是结构设计复杂、药物副作用明显和疗效欠佳等问题为其进一步研究应用带来了挑战.随着新技术的出现,AD...     

抗IV型胶原酶单抗3G11与力达霉素偶联物的抗肿瘤作用

目的观察抗IV型胶原酶单抗3G11与力达霉素（LDM）偶联物的抗肿瘤作用。方法 用MTT法测定其对肿瘤细胞的增殖抑制作用；用小鼠移植性肝癌H22观察体内抗肿瘤作用。结果3G11-LDM偶联物保留了单抗3G11与IV型胶原酶和靶细胞H22细胞的结合能力，体外试验H22细胞显示比游离LDM更强的细胞增殖抑制作用。体内3G11-LDM偶联物0.05和0.10 mg·kg^-1对小鼠移植性肝癌H22的抑瘤率分别为87.8%和97.2%，而游离LDM 0.05 mg·kg^-1的抑瘤率为67.1%， 且3G11-LDM偶联物组小鼠的中位生存时间比LDM组明显延长。结论3G11-LDM偶联物对小鼠移植性肝癌H22的抑瘤作用比LDM强，可能成为抗肿瘤靶向药物。     

肿瘤靶向抗体偶联物的研究进展

肿瘤靶向制剂已成为当今肿瘤治疗研究的热点,针对特定的靶点(抗原)可以制备相应的单抗。特异性单抗和蛋白毒素、放射性同位素、化疗药物偶联制备成相应的靶向抗体药物,这种抗体偶联物能增强药物的有效性,减少对正常组织的毒害。本文就三类肿瘤靶向抗体偶联物的特点、作用机制、上市药物以及发展趋势进行综述。     

载紫杉醇的PEG修饰的大黄酸偶联物胶束的细胞摄取及活体成像研究

目的 探究载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)修饰的大黄酸偶联物胶束的细胞摄取及活体成像情况。方法 将环境响应型荧光探针P4/P2与药物PTX共载于mPEG-羧甲基壳聚糖-大黄酸(CRmP)偶联物胶束中,制备(P4+PTX)/CRmP胶束。以MCF-7细胞为细胞模型,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析该胶束被MCF-7细胞摄取的情况;以H22皮下移植瘤小鼠为模型,在体和离体成像分析该胶束在体内的分布情况。结果 (P4+PTX)/CRmP胶束以完整的胶束形式被MCF-7细胞内吞摄入,分布于细胞质。(P2+PTX)/CRmP胶束在荷瘤小鼠的肝脏和肿瘤部位较多聚集,并于实验时间内在肿瘤部位不断累积。结论 该胶束以完整的胶束形式被肿瘤细胞摄取,在体内有一定的肝靶向性和肿瘤靶向性。     

平阳霉素与单克隆抗体Fab′片段偶联物的抗肿瘤作用

目的　研制一种以单抗Fab′片段为基础的抗肿瘤导向药物。方法　制备单抗3A5 Fab′片段及其与平阳霉素(PYM)偶联物Fab′-PYM后,测定Fab′-PYM与肿瘤细胞的免疫反应性、偶联物中PYM的抑菌活性、对肿瘤细胞的杀伤作用和体内抑瘤作用。结果　Fab′及Fab′-PYM保持了与靶细胞C26的免疫反应性;偶联物中PYM的抑菌活性为游离PYM的15%;Fab′-PYM对C26细胞的杀伤作用强于PYM;对非靶细胞KB的杀伤作用与PYM相似;ip和iv给药,Fab′-PYM对小鼠皮下接种的肠癌26生长抑制作用均强于3A5-PYM和PYM。结论　Fab′-PYM具有比PYM及3A5-PYM更强的体内外抗肿瘤作用。