新型组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体的克隆及表达

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是以丝氨酸为活性中心的蛋白酶。它激活纤溶酶原成为纤溶酶,这依赖于纤维蛋白,它不能单独激活循环血流中的纤溶酶原。由于其对纤维蛋白有很高的亲和力,故血栓形成时,它能特异地和血栓中的纤维蛋白结合,纤溶酶也通过其赖氨酸残基与纤维蛋白结合,形成三元复合物。这样的机理决定了t-PA可选择性地溶解血栓中的纤维蛋白,而对血流中的纤维蛋白原、凝固因子等没有破坏作用。但由于t-PA在体内的半衰期甚短(约5分钟),且在血浆中已被纤溶酶原激活抑制剂抑制,故临床上溶栓时需大剂量连续用药,不仅费用昂贵而且有引起系统性纤溶系统出血的危险。因此设计半衰期延长,且亲和力不变甚至提高的t-     

尿激酶的研究进展

尿激酶(urokinase简写UK,EC 3.4.99.26)是从新鲜人尿里提取的并经过连续柱层析纯化得来的一种溶血栓药物。它能激活纤溶酶原转化为有活性的纤溶酶,纤溶酶能使不溶性的纤维蛋白转变为可溶性小肽,从而使血栓溶解。因此,临床上多用于治疗血栓形成、血栓栓塞等症。随着对尿激酶研究的     

t-PA分子的结构与功能及其临床效用

纤溶酶原激活剂(plasminogen activators,PAs)是与细胞膜有关、精氨酸特异性的丝氨酸类蛋白酶,广泛存在于机体组织和体液中。PAs激活纤溶酶原生成纤溶酶,后者降解血凝块中的纤维蛋白网,达到溶解血栓的效果。另一方面,PAs的生成增多与原发性恶性肿瘤及肿瘤转移有一定关系。     

活血I号对深静脉血栓形成大鼠纤溶系统功能和静脉内皮结构的影响

背景:临床应用玄参、麦冬、当归、红花等组成的活血I号方能预防人工关节置换后下肢深静脉血栓。目的:为进一步阐明活血I号作用机制,观察其对下肢深静脉血栓形成大鼠纤溶系统功能和静脉内皮结构的影响。方法:采用结扎下腔静脉的方法制备大鼠深静脉血栓模型。分别给予不同剂量的活血I号,阳性对照药为脉络舒通颗粒,模型对照组给予生理盐水,并设立不结扎静脉的假手术组。手术后不同时间点测定大鼠深静脉血栓湿质量、血浆中组织型纤溶酶原活化剂和纤溶酶原活化剂抑制物水平的变化;电镜下观察大鼠结扎后下腔静脉内皮细胞形态组织学变化情况。结果与结论:与模型组对照组相比,活血I号各组均能显著降低大鼠血栓湿质量(P0.05或P0.01),升高大鼠血浆组织型纤溶酶原活化剂的含量(P0.05,P0.01);高剂量组于造模后1,3,6d,中剂量组于造模后3,6d,低剂量组于造模后3d,均可降低大鼠血浆纤溶酶原活化剂抑制物的水平(P0.05)。与模型对照组相比,低剂量组和高剂量组于造模第1,3天粗面内质网明显,线粒体呈凝聚态;第6天,胶原纤维开始增多。提示活血I号能有效抑制血栓的形成,保护血管内皮细胞,其作用机制与通过提高组织型纤溶酶原活化剂活性,抑制纤溶酶原活化剂的分泌及活性有关。     

血纤溶酶原激活物及其基因工程研究进展

血栓病对人体健康及生命危害极大,溶解血栓需要激活血纤溶酶原(plasminogen)生成血纤溶酶(plasmin),将血纤维蛋白网降解成可溶性物。目前血纤溶酶原激活物(plasminogen activator,简称PA)有三类:来说是一种异种蛋白,本文主要谈尿激酶及组织型血纤溶酶原激活物。尿激酶是从人尿中提取的制品,无抗原性、变态反应,毒性作用和副作用较小,且能自大量新鲜尿液提自细菌分离的链激酶及葡激酶;人尿中分离的尿激酶和自组织或细胞分离的组织型血纤溶酶原激活物。它们均为蛋白酶,其溶血栓的作用如下:链激酶、葡激酶均为细菌蛋白,对机体     

纤溶酶原激活剂与单克隆抗体

纤溶酶原激活剂是治疗血栓疾病的主要药物。迄今研究较多的纤溶酶原激活剂有:链激酶、尿激酶和组织型纤溶酶原激活3种。它们都具有一定的溶血栓作用,但都存在不同程度的出血倾向。增强PA制剂的纤溶原特异性则是减少周身出血,提高溶血栓效果的主要途径之一。利用单抗导向纤溶作用或用基因工程方法构建高效特异的融合蛋白,为增强PA制剂的纤溶特异性开创了美妙的前景。     

尿激酶与肿瘤转移

尿激酶是一种丝氨酸蛋白水解酶,它能激活纤溶酶原成为纤溶酶,降解胞外基质,从而利于细胞迁移。肿瘤转移是导致肿瘤恶化和肿瘤病人死亡的主要原因之一。以尿激酶为中心,尿激酶受体介导的纤溶酶原激活系统在肿瘤转移过程中扮演了重要角色。     

应用高放大率显微镜分析纤维蛋白溶解系统功能低下患者的活血细胞行为特征

目的为血栓前状态的血标本检测提供细微、动态的细胞学行为指标。方法本研究采用“清华同方”高放大率显微系统（ＴＨＭＩ—ＵＰ型,可放大１６０００倍）对ＥＬＴ（优球蛋白溶解时间）延迟、组织纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）含量减少、纤溶酶原激活物抑制物（ＰＡＩ）及ａ２纤溶抑制物活性增高的标本进行检测。结果可见明显的红细胞聚集、血小板聚集和循环内皮细胞（ＣＥＣ）,这些因子对血栓的最终形成具有重要意义。结论纤溶蛋白溶解系统各项指标的检测在临床上应用广泛,常用来反映机体血栓前状态,其特异性一直是关注焦点,本实验利用高放大率显微系统从分析活血细胞的行为出发,为血栓前状态的血标本检测提供了更微细的细胞学行为特征。     

抗纤维蛋白和t-PA/UK双特异性单克隆抗体的制备和应用

目前常用于溶解血栓的药物有组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogenactivator,t-PA)、尿激酶(urokinase,UK,u-PA)、单链型尿激酶(single-chainu-PA,Scu-PA)以及甲氧苯甲酰纤溶酶原—链激酶复合物(APSAC)等。t-PA因能与纤维蛋白结合而激活,认为是一种高     

纤溶酶原激活物抑制剂-1与肥胖

纤 溶系统由纤溶酶原、纤溶酶原激活物 ( plasminogenac tivatorPA)和激活物特异性抑制剂 (plasminogenacti vatorinhibitorPAI)、纤溶酶及纤溶酶抑制物组成 ,其主要功能是通过纤溶酶溶解纤维蛋白而将其从循环系统中清除出去。PAI是纤溶系统活性主要的生理调节物 ,它在体内有多种形式 ,包括内皮细胞型 (PAI 1)、胎盘型 (PAI 2 )、尿型 (PAI 3)和连接蛋白酶 1(proteasenexin 1) ,其中PAI 1在纤溶活性调节中起着重要作用 ,它主要灭活组织型纤溶酶原激活物 (t PA)。PAI 1和t PA之间的平衡对维持纤溶系统正常功能十分重要。临床和流…     

一组纤溶活性测定方法及其在溶栓药研究中的应用

本文介绍一组大鼠肢体血管灌流模型、纤维蛋白平板测定、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳和纤维蛋白自显影方法系列,用以观察纤溶系统的功能状态。通过纤溶酶原激活剂的释放作用,其活性大小及免疫学特性,研究溶栓药对纤溶系统的作用及机理,从而为临床血栓性疾病的用药和治疗提供帮助。     

纤溶系统及其异常与血栓性疾病的关系及溶栓药物研究发展方向

纤维蛋白溶解系统与凝血系统活性的动态平衡是维持血液在血管中正常流动的基础。纤溶系统的异常,尤其是PAI-1水平的升高所致的纤溶活性的下降,是血栓性疾病的重要诱因之一。本文系统地介绍了纤溶系统的生理作用及其调节,以及它的异常在血栓性疾病发病中的作用。同时介绍了溶栓药物的现状及最新研究方向。     

凝血酶激活的纤溶抑制物: 新的凝血纤溶调控因子

凝血酶激活的纤溶抑制物(Thrombin—activatable fibrinolysis inhibitor，简称TAFI)，作为凝血及纤溶调控因子，是近十年来国外医学界研究的热点之一；TAFI的基础研究是对经典凝血及纤溶调控机制的重要补充；在体内主要由凝血酶、凝血酶调节蛋白、纤溶酶、肝素、胰蛋白酶等物质激活而导致纤溶机制受抑，血栓溶解时间延长，从而增加血栓形成的危险性。TAFI在体内还参与缓激肽、补体等活性物质的调节。动物血栓模型运用TAFI拮抗剂与溶栓剂联合治疗，取得良好效果。国外医学界对TAFI与血液、心血管、内分泌等系统疾病的发病关系已展开广泛研究。     

t-PA cDNA基因转移与基因治疗

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)能够特异、高效地溶解血栓,在纤溶系统中起着重要作用,t-PA与其抑制物(PAI)的平衡失调,可导致多种疾病的发生。基因转移技术使外源t-PA cDNA成功地在血管内皮细胞中得以表达,为防治以血栓形成为主要病理变化的血管性疾病开辟了广阔的前景。     

纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)研究新进展

纤溶酶原激活剂(plasminogen activator,PA)激活纤溶酶原生成纤溶酶是纤溶过程的中心环节。纤溶酶原激活剂抑制物(plasminogen activator inhibitor,PAI)特异性地抑制PA(t-PA及u-PA)活性,其作用迅速,又称为快速作用抑制物。PAI在体内分布很广,对纤溶活性起着决定性作用,某些栓塞病患者血浆PAI活性显著升高,因此     

人α干扰素对人肉瘤细胞纤维蛋白溶解活性的抑制作用

恶性肿瘤溶解纤维蛋白的能力较强。这与瘤细胞的扩散,转移,以及肿瘤在体内的迅速增长有密切关系,这种能力在于肿瘤细胞可生成,并释放纤溶酶原的活化物(Plasminogeo activator)。该活化物,是一种蛋白酶,可使体液中的纤溶酶原转变为纤溶酶。     

蝮蛇毒抗栓酶的促纤溶和抗凝血作用的实验研究

本工作利用大鼠衄管灌流及异丙肾上腺素(ISP)性AMI模型,以体外纤维蛋白溶解活性、纤溶酶原激活剂(PA)活性,血浆纤溶酶(PL)活性、凝血酶原时间(PT)、白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)等变化,观察蛇毒抗栓酶(SVATE)的促纤溶、抗凝血和心肌保护作用。结果表明,SVATE有缴活纤溶怍用,它能逆转ISP性AMI大鼠PL活性的降低,这种作用是由于激活PA导致PL生成增加。同时对内源凝血系统有一定抑制作用。此外保护心肌、降低死亡率。     

纤溶酶原激活剂的放射酶分析

我所对纤溶酶原激活剂（ＰＬＧＡ）的测定建立了一项新方法，纤溶酶原在其激活上生成纤溶酶，该酶能特异地水解包被＾１２５Ｉ－纤维蛋白底物生成可溶性的＾１３５Ｉ－多肽产物。通过测定产物的放射性强度，计算了样口中纤溶酶原激活剂活怀。该方法是具有高度特异性和灵敏度，并且简单快速，可为凝、溶务基础研究和临床血栓病的防治服务。     

uPA和PAI-1在肺纤维化中的作用

慢性炎症和纤维化疾病都以炎性细胞和介质的聚集为特征 ,并且细胞外基质及纤溶酶系统均有明显的改变。目前发现 ,纤溶酶原激活系统的改变是肺纤维化发展中一个非常关键的环节。研究表明各种肺纤维化患者的支气管灌洗液 (BAL)中纤溶酶原活性受到的损害往往是由于尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)缺失 ,以及纤溶酶原激活因子抑制物 1(PAI 1)表达增加所致。     

蚓激酶（普恩复）的临床应用

蚓激酶是以中药地龙为原料的一种纯天然药物。它主要含有纤维蛋白溶酶和类似组织型纤溶酶原激活物的多份酶制剂。具有溶解血栓和防止血栓形成的双重药理作用。主要用于缺血性心脑血管疾病的预防和治疗。经全国临床广泛使用后，其应用范围不断拓宽，尤其是在微循环检测指导下，开拓了临床应用的新领域。现就普恩复与微循环的关系以及临床应用简述如下。1药理作用中药地龙具有清热定惊、通络、平喘、利尿等功效。1983年在国际血栓、止血会议上，报告了地龙提取物的溶栓作用，并命名为蚓激酶（Lumbrokinase），是一种以蛋白水解酶为主的多份酶…