选择卵蛋白致敏豚鼠建立哮喘模型实验研究

目的探讨选择卵蛋白 (OVA) 致敏豚鼠建立哮喘模型的意义及其效果, 并分析模型建立的注意事项。方法选用健康豚鼠24 只, 随机均分成哮喘模型组 (A组)、模型对照组 (B组)。A组采用 OVA致敏+OVA气雾攻击建立模型; B组给予相同剂量的生理盐水替代卵蛋白雾化, 余同A组。检测A组与B组豚鼠支气管肺泡灌洗液 (BALF) 中炎症细胞分类及计数, 并进行比较, 观察肺组织病理形态学表现。结果A组豚鼠激发哮喘均表现出不同程度的过敏反应症状, B组无明显反应。A组与 B组支气管肺泡灌洗液中嗜酸性细胞数分别为(97 .70±58. 03) ×106/L与 (11 .68±9. 95) ×106/L, 比较 P<0. 01; 中性粒细胞数分别为 (24. 30±16 .52) ×106/L与 (8 .68±6 .63) ×106/L, 比较P<0 .05。光镜肺组织病理形态学检查, A组可见炎症细胞渗出, 上皮细胞变性, 部分脱落坏死, 嗜酸性粒细胞浸润明显, 而B组细支气管上皮细胞规整, 管腔内无明显炎症渗出物; 实验过程中A组与B组均死亡2只, 存活率均为83. 3%。结论卵蛋白致敏豚鼠哮喘模型建立方法简便、可靠, 成功率高, 值得相关哮喘动物实验推荐使用, 清洁卫生的饲养环境是模型顺利建立的重要保证。     

类风湿关节炎贫血大鼠模型的建立及评价

目的 建立类风湿关节炎贫血(rheumatoid arthritis and anemia,RA-A)的大鼠模型,为进一步研究其机制和治疗提供良好的动物模型.方法 选用雄性Wistar大鼠30只,体重150～ 170 g,随机分为正常对照组、模型Ⅰ组和模型Ⅱ组,各10只.正常对照组在大鼠左后肢足趾注射生理盐水0.625 ml/kg;模型Ⅰ组同一部位注射2.5 mg/ml的Ⅱ型胶原1.5 ml与5 ml弗氏完全佐剂乳化的乳化液0.625 ml/kg;模型Ⅱ组在模型Ⅰ组的基础上,于大鼠左侧大腿肌肉注射肿瘤坏死因子-α(TNF-α)1.25 μg/kg构建大鼠模型.分别测定干预后不同时间点血液中红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)以关节肿胀度和大鼠体重;并于造模第39天,检测血清白介素-6(IL-6)、IL-1、TNF-α、干扰素-γ(IFN-γ)含量及大鼠关节软骨组织病理学变化.结果 造模第2、5、10、17和39天模型Ⅰ组和Ⅱ组体重低于正常对照组(P＜0.01),踝关节肿胀度均高于正常对照组(P＜0.01).造模第10、17和39天,模型Ⅱ组RBC和HGB均低于正常对照组和模型Ⅰ组(P＜0 01),且模型Ⅰ组均低于正常对照组(P＜0.01).造模第39天,模型Ⅱ组IL-6、IL-1、TNF-α和IFN-γ水平均高于正常对照组和模型Ⅰ组(P＜0.01),且模型Ⅰ组均高于正常对照组(P＜0.01).模型Ⅱ组关节软骨组织病理损伤较正常对照组和模型Ⅰ组严重.结论 本研究方法成功获得RA-A的动物模型,是适合研究RA-A发病机制及其治疗的模型.     

大鼠T7脊髓半横切损伤模型的建立及饲养护理

目的制备SD大鼠T7脊髓半横切动物模型,模拟脊髓损伤,为后期治疗脊髓损伤研究提供实验数据。方法24只健康SD大鼠随机分为对照组及脊髓损伤组,每组12只。SCI组咬除T6～8棘突及相应椎板,暴露相应脊髓,定量切除T7右半侧脊髓组织;对照组仅切除相应椎板。术后行人工排尿、排便等护理,于3d、7d分别进行BBB运动功能评分及感觉诱发电位（sensory evoked potentials,SEP）检测,并取T7脊髓行组织学观察。结果SCI组所有动物在术后均表现出典型的脊髓半切症状;BBB运动功能评分低于8分;术后3d及7d损伤组检测不到SEP,而对照组潜伏期轻度延长及波幅轻度下降;脊髓形态学观察显示该方法达到脊髓半横切要求;术后SCI组大鼠无死亡。结论大鼠T7脊髓半横切损伤模型建立成功,有效的术后护理可提高模型大鼠的生存率。     

一种建立大鼠动脉硬化模型的方法

目的利用大剂量维生素D3注射和高脂喂养结合的方法建立大鼠动脉粥样硬化(AS)模型。方法 6周龄雄性SD大鼠腹腔注射维生素D3,高脂饲料喂养大鼠。连续监测大鼠不同时间段的血脂水平、血液生化指标以及其病理变化。结果 1 AS模型组的TC、TG、HDL、LDL、血钙(Ca2+)显著高于正常对照组。2 HE染色,模型组大鼠的主动脉内膜下可见巨噬细胞及钙沉积,内弹力膜断裂,少量斑块沉积,而正常大鼠无病变的产生。结论该方法能够诱导大鼠高脂血症症状的发生,并逐渐在动脉内膜下形成粥样斑块,大鼠动脉硬化模型可成功建立。     

大鼠前列腺炎模型的建立

目的探索实验性前列腺炎发病机制,为中药药效学研究提供组织学依据。方法将角叉菜胶和标准大肠埃希菌直接注射SD大鼠前列腺内,手术后1、3、5、7d分批解剖,进行外观和组织学观察。结果形成典型的前列腺炎动物模型。结论用上述造模方法形成的大鼠前列腺炎,可以为中药药效学研究提供可靠的动物模型。     

不同方法构建大鼠实验性牙周炎模型的研究

目的建立实验性牙周炎动物模型,为研究不同时期、不同程度牙周炎发生、发展及治疗提供依据。方法采用200～250gWistar大鼠,丝线或正畸结扎丝结扎大鼠上颌第一磨牙,分别于2、4、6周取材观察其病理学变化。结果与对照组相比正畸结扎丝组大鼠在临床及病理组织学方面均出现不同程度牙龈出血、牙周袋形成、牙槽骨吸收的牙周炎表现;丝线结扎组观察期内丝线大部分脱落,未诱导出牙周炎表现。结论正畸结扎丝法成功建立大鼠牙周炎动物模型,能模拟临床牙周炎的自然发生过程,可以研究牙周病不同程度的病理变化。     

2型糖尿病大鼠模型的建立与评价

目的：建立具有胰岛素抵抗特征、发病过程近似于人类2型糖尿病的动物模型。方法：雄性Wistar大鼠喂以富含不饱和脂肪酸的特殊高脂肪膳食5周，诱发出胰岛素抵抗．继之以小剂量链脲佐菌素（STZ，25mg／kg，腹腔注射）导致胰岛素代偿性分泌障碍，诱发高血糖症。应用正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术评价大鼠的胰岛素敏感性。结果：与常规饲料喂养大鼠相比，高脂膳食组的葡萄糖输注率显著降低，空腹血浆胰岛素显著升高。STZ注射后1周高脂膳食组大鼠血糖中度升高，血胰岛素下降，但仍高于普通饲料喂养组，且高脂血症和胰岛素抵抗继续存在。高脂饲料喂养组及高脂饲料＋小剂量STZ注射组大鼠的葡萄糖输注率显著低于正常对照组。结论：通过高脂膳食结合小剂量STZ注射成功复制出了实验性2型糖尿病动物模型，它是研究2型糖尿病发病机制、药物研究和胰岛素抵抗相关疾病的理想动物模型．     

地龙注射液对哮喘大鼠肺功能的影响

目的观察腹腔注射地龙注射液对哮喘大鼠肺通气功能和气道阻力的影响。方法应用随机分组的方法将大鼠分为实验4周、8周和12周组,每组又分别分为哮喘组、地塞米松干预组、地龙干预组和对照组,每个小组8只动物。用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏加雾化吸入诱喘的方法制成哮喘模型,地龙和地塞米松干预组诱喘前分别给予地龙注射液腹腔注射和地塞米松雾化吸入,应用Maclab数据系统记录分析大鼠肺通气功能和气道阻力。结果实验4周组,各组间肺顺应性差异无统计学意义,哮喘组与其余3组比较,气道阻力明显增高(P<0.01)、每分通气量降低(P<0.01)、呼吸频率增快(P<0.01);实验8周和12周,哮喘组气道阻力明显增加,每分通气量降低,肺顺应性下降,呼吸频率增快(P<0.01或0.05),而地龙组和地塞米松组与对照组比较,气道阻力增高(P<0.05)、呼吸频率增快(P<0.05)、每分通气量降低(P<0.01)、肺顺应性下降(P<0.05);地龙组与地塞米松组间各项肺功能指标差异均无统计学意义。结论地龙注射液可缓解哮喘大鼠支气管痉挛,降低气道阻力,改善肺功能。     

热传导法构建大鼠宫腔粘连模型的研究

目的 采用热传导法损伤大鼠子宫内膜,建立稳定的大鼠宫腔粘连模型.方法 将48只雌性SD大鼠随机分为4组,每组12只.假手术组:仅开腹穿刺左侧子宫,无热损伤;热损伤10 s组、15 s组和20 s组分别采用100℃热水导管损伤大鼠左侧宫腔10 s、15 s和20 s.分别于造模后3、7、14和21 d每组大鼠处死3只,收集双侧子宫进行病理学鉴定,采用HE染色观察各组大鼠子宫内膜形态变化及腺体数量,Masson染色分析各组子宫内膜纤维化程度.结果 与假手术组相比,热损伤10 s组造模后14 d即可达到自我修复,宫腔形态基本恢复,有大量腺体新生;热损伤15 s组造模后14 d宫腔形态狭小,肌层完整,大量胶原纤维聚集形成致密粘连,较大程度的符合人类宫腔粘连的病理表现;热损伤20 s组造模后7、14和21 d宫腔已完全封闭,肌层结构紊乱,未见腺体结构,内膜过度受损.与假手术组比较,热损伤10 s组、15 s组和20 s组子宫内膜腺体数目依次降低,而子宫内膜纤维化面积比依次增高,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 以100℃的热水导管损伤大鼠宫腔15 s,造模14 d后可成功构建稳定的大鼠宫腔粘连模型.     

实验性溃疡性结肠炎大鼠模型的建立

目的采用三硝基苯磺酸（TNBS）诱导大鼠溃疡性结肠炎动物模型,探讨与人溃疡性结肠炎（UC）的相似程度。方法 TNBS/乙醇法制作溃疡性结肠炎动物模型,分别于造模后1、3、7周3个时间段动态观察模型鼠的一般状态、结肠黏膜大体和病理及电镜变化。同时检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）含量。结果大鼠的一般情况、大体病理及组织学病理及电镜变化均与人类溃疡性结肠炎类似,并且血清TNF-α、IL-2、IL-4含量变化亦与人类溃疡性结肠炎的变化基本一致。结论 TNBS可以成功诱导大鼠溃疡性结肠炎动物模型,一般情况、大体与病理表现与人UC的相似度高,有急、慢性转变过程等,而且是免疫学模型,可用于UC免疫学方面的研究。     

Mtb诱导的SD大鼠佐剂性关节炎模型的建立及评价

目的建立一种实验性SD大鼠佐剂性关节炎模型,为类风湿关节炎的研究提供一种简单、实用、可靠的动物模型。方法采用热杀死结核分枝杆菌H37Ra(Mtb)与矿物油混匀,一次性经尾根部皮下注射,诱导SD大鼠实验性类风湿关节炎的发生。在实验周期内,定期检测实验动物体重、血常规,并进行关节炎临床评分、足趾容积测定,以流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群变化;以ELASA方法测定血清TNF-α,关节组织中IL-1、IL-6和内皮生长因子(VEGF)水平;同时检测SD大鼠后腿踝关节软骨及滑膜的病理变化,以X-光检查验证模型骨侵蚀程度,通过多项综合指标评价该模型的可靠性。结果SD大鼠经Mtb免疫14d后,大鼠体重明显减轻,外周血白细胞、血小板及单核细胞数明显升高,T淋巴细胞亚群CD4/CD8比值增高。从免疫Mtb10d开始,模型组动物足趾和踝关节出现炎症信号,14～16d达到高峰。免疫28d后,大鼠外周血TNF-α水平升高,关节滑膜组织中IL-1和IL-6及VEGF水平上调。显微镜下病理检测结果显示,模型大鼠关节滑膜增生,淋巴细胞浸润,关节软骨增生。结论由Mtb诱导的SD大鼠关节炎模型与临床RA特征相近,具有模型复制成功率高、操作简单、经济实用等特点,可广泛用于抗类风湿关节炎药物的筛选及实验研究中。     

大鼠胶原诱导性关节炎模型的制备及评价

目的:制备型胶原诱导性关节炎大鼠模型(CIA模型)。方法:将40只大鼠随机分为正常组和模型组。以酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测模型组和正常组大鼠血清中炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,同时采用组织病理学和X线摄片的方法显示关节炎大鼠的发病程度和病理学特征。结果:与正常组相比,模型组在免疫后第36天关节肿胀达到最高峰。ELISA法检测结果显示模型组TNF-α的水平均较正常组大鼠明显增高(P<0.05)。组织病理学和X射线摄片结果显示,关节软骨组织、骨组织和滑膜组织呈典型的关节炎病变。结论:胶原诱导的大鼠关节炎模型,其病理特征和人类类风湿关节炎(RA)极为相似,为进一步深入研究人类RA的发病机制及其临床治疗提供了有价值的实验材料。     

SD大鼠血管内皮细胞损伤模型的制作方法

目的 建立SD大鼠血管内皮细胞损伤模型.方法 SD大鼠随机分为正常对照组和模型组.模型组大鼠皮下注射稀释1.5倍的肾上腺素0.05mg·100g~(-1)(tid),连续5d.于d 4起,每2次给药间将大鼠置于0℃冰水中5min.正常对照组则皮下注射等量NS.于d6,2组大鼠自颈总动脉取血,分别测定CEC计数、t-PA、PAI活性、6-keto-PGF_(1a)含量及血小板最大聚集率.结果 模型组较正常对照组大鼠CEC计数、PAI活性、血小板最大聚集率明显升高(P<0.01),t-PA活性、6-keto-PGFl_(1a)含量降低(P＜0.01;P＜0.05).结论 大剂量肾上腺素加冰泳刺激能造成SD大鼠血管内皮细胞损伤.     

Wistar大鼠2型糖尿病动物模型的建立

目的　建立 2型糖尿病的动物模型。方法　①给Wistar大鼠灌胃脂肪乳 10d ,记录饮食、饮水、体重变化 ,用毛细血管法和正糖钳技术判定胰岛素抗性。同时测定血清中空腹血糖、丙二醛 (MDA)和游离脂肪酸 (FFA) ;②采用不同的给药方式给灌胃脂肪乳大鼠腹腔注射四氧嘧啶 ,将 72h后血糖值≥ 16 7mmol·L-1者定为 2型糖尿病大鼠。结果　①与正常对照组比较 ,灌胃脂肪乳大鼠的体重、饮食、饮水及内脏脂肪重量均明显增高 (P <0 0 5 ) ;②灌胃脂肪乳后 ,大鼠KITT值由正常对照组 6 8± 1 5下降为 4 5± 0 9(P <0 0 5 )。正糖钳实验结果表明高脂组大鼠葡萄糖输注速率(GIR)较正常大鼠葡萄糖输注速率明显下降 ;③四氧嘧啶给药剂量为第一天 12 0mg·kg-1,第二天 10 0mg·kg-1时 ,糖尿病动物模型成模率可达 90 %。结论　通过灌胃脂肪乳建立了伴有胰岛素抵抗的Wistar大鼠 2型糖尿病的动物模型。     

SD大鼠阳虚便秘模型的建立及评价

目的在中医药理论指导下建立SD大鼠阳虚便秘动物模型并对其进行评价。方法应用山西白醋加活性炭冰水法制作阳虚便秘动物模型。观察模型动物的一般生物学特征变化,进行模型动物的排便和在体结肠肌电等实验,检测模型动物的胃肠激素、肠神经递质等客观指标。结果造模后,模型动物的一般生物学特征表现为:腹胀、披毛蓬松、倦怠蜷缩、体重减轻、大便色黑、干燥;与空白对照组比较,模型动物的首粒排便时间明显延迟,6h内排便粒数明显减少,结肠收缩频率明显降低、结肠收缩幅度减弱,胃肠激素、肠神经递质分泌紊乱;经通便灵药物治疗后,上述症状和指标明显改善。造模后动物恢复6d,与空白对照组比较,其首粒排便时间和6h内排便粒数仍有差异。结论应用山西白醋加活性炭冰水能复制出稳定的SD大鼠阳虚便秘模型。     

子宫肌瘤动物模型的建立

目的建立适合于临床发病机制研究和药物筛选的动物子宫肌瘤模型。方法取性成熟豚鼠,双侧摘除卵巢,以不同频率给予不同剂量雌激素(E2)诱导,使之形成子宫肌瘤,并于不同时间卒死动物,观察子宫形态的变化,计算成瘤率,并与人子宫肌瘤病理组织学特征相比较,确定E2诱导子宫肌瘤形成的最佳剂量、给药频率和实验周期。同时测定血清中雌(E2)、孕激素(P)浓度及组织中雌、孕激素受体(ER、PR)的表达。结果皮下注射E2100μg/只,2次/wk,连续12 wk后,豚鼠子宫明显变形,肌层增生,肉眼可见浆膜下肌瘤或肌壁间瘤形成,并伴有继发性改变。病理组织学检查结果显示,肌瘤细胞呈长梭形,编织状或栅状排列,细胞核呈短棒状或卵圆形,显示明显的子宫肌瘤特征,与人子宫肌瘤病理组织学特征相似。血清E2浓度升高,组织中雌、孕激素受体表达明显增强。结论双侧摘除卵巢的豚鼠皮下注射E2100μg/只,2次/wk,连续12 wk后可建立与人类相似的动物子宫肌瘤模型,适合用于临床发病机制研究和药物筛选。     

地塞米松对哮喘动物模型支气管平滑肌MLCK表达的影响

目的观察地塞米松(DXM)对哮喘动物模型支气管平滑肌肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达的影响,探讨MLCK在哮喘发病中的作用。方法24只♂SD大鼠,随机等分为正常对照组、哮喘模型组和地塞米松组。以卵蛋白(OVA)诱发大鼠支气管哮喘模型。地塞米松组大鼠于每次激发前1h给予腹腔注射地塞米松0.5mg·kg-1。用免疫组织化学法和免疫印迹法分析三组大鼠支气管平滑肌中MLCK表达。结果免疫组织化学法分析显示DXM组大鼠支气管平滑肌MLCK的表达低于哮喘模型组(P<0.05),但与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。同时,免疫印迹法检测也表明哮喘模型组大鼠smMLCK表达高于正常对照组及地塞米松组。结论MLCK参与支气管哮喘的发病,地塞米松通过下调哮喘大鼠支气管平滑肌MLCK表达,可能是糖皮质激素治疗哮喘的一种机制。     

脊髓损伤模型的制备及行为学评分

目的：通过对模型的制备模拟脊髓损伤,研究其病理生理变化及脊髓组织的病理分析,为后期的干细胞治疗提供了实验信息。方法：8周龄小鼠,咬除T12～L1棘突及相应椎板,用纤维剪刀将脊髓右侧剪断,将分离的肌肉缝合封闭椎管缺损,缝合皮肤,制成脊髓损伤模型。分不同的时间行为学评分,8周后病理检测。结果：假手术组在不同时间行为学评分较高,而实验组评分很低。脊髓损伤区出现明显的病理改变。结论：实验组与对照组相比具有显著差异且脊髓损伤区域出现胶质细胞增生、嗜神经现象等,从而为进一步研究脊髓损伤提供了较为可靠的模型。     

SD大鼠寒积里实证模型的建立与评价

目的在中医理论指导下建立SD大鼠寒积里实证动物模型并对其进行评价。方法应用先冰水后高岭土灌胃方法制作寒积里实证动物模型。观察模型动物的一般生物学特征变化,进行模型动物的排便和尾部温度测量实验,检测模型动物的肠神经递质、胃肠激素、cAMP和cGMP等客观指标。结果造模后,模型动物的一般生物学特征表现为:披毛蓬松、好聚集饲养笼一端、大便干燥,摄食量降低;与空白对照组比较,模型组动物的6 h排便粒数明显减少,尾部温度明显降低,胃动素、血管活性肠肽、P物质分泌紊乱,cAMP/cGMP降低,经大黄附子汤治疗后,上述症状和指标改善。结论应用先冰水后高岭土灌胃方法能复制出稳定的SD大鼠寒积里实证模型。