基于指纹图谱、抗氧化谱效相关性及多成分含量的诃子炮制方法优选

目的 基于指纹图谱、抗氧化谱效相关性及多成分含量比较诃子生品及不同炮制品的异同,为寻找与经典古法相近的诃子现代炮制方法提供参考。方法 分别以10批诃子生品及不同炮制品(单炒品、麸煨品、砂烫品、煻灰火煨品、炒炭品、酒蒸品)为检测样品,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立不同样品的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,对色谱峰进行指认,并进行化学计量学分析;采用HPLC法测定8种指认成分的含量。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法测定诃子生品及不同炮制品的抗氧化能力,并进行谱效关系分析。结果 从诃子生品及不同炮制品的指纹图谱中共识别出20个共有峰,各样品的相似度均大于0.9;共指认出9个共有峰,分别为色谱峰2(诃子次酸)、3(没食子酸)、6(安石榴苷A)、8(安石榴苷B)、12(柯里拉京)、15(诃黎勒酸)、18(鞣花酸)、19(1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖)、20(诃子酸)。与生品比较,诃子不同炮制品中上述8种成分的含量(安石榴苷A、B均记为安石榴苷)均发生了变化,其中诃子炒炭品、酒蒸品较其他炮制品含量变化更明显。化学计量学分析表明,诃子...     

基于HPLC指纹图谱结合多元统计分析不同炮制方式对九制女贞子化学成分的影响

目的：探究并比较女贞子在九蒸九晒和九蒸九烘不同干燥工艺过程中的外观性状、浸出物和化学成分的变化。方法：按照《中国药典》方法对女贞子生品及炮制品进行醇溶性浸出物测定,采用高效液相色谱法（HPLC）对其化学成分进行分析比较,并运用聚类分析法（HCA）进行模式识别研究。结果：女贞子在两种干燥方式的炮制过程中醇溶性浸出物均呈现先降低后增加的趋势;建立了生品、炮制品的指纹图谱,共标定26个共有峰,指认8个成分,新增加a、b、c 3个成分;HCA分析可将九蒸九晒和九蒸九烘炮制品归为一类。结论：本研究建立的指纹图谱法能清晰地掌握女贞子九制过程中化学成分的动态变化,结合浸出物和HCA结果分析,表明九蒸九晒和九蒸九烘炮制工艺无显著差异,可考虑用九蒸九烘的现代工艺代替传统的九蒸九晒工艺。     

山楂饮片及炮制品的HPLC特征图谱研究

目的:建立山楂饮片及炮制品的高效液相色谱(HPLC)特征图谱,分析山楂饮片炮制前后化学成分与功效变化,建立质量评价标准。方法:采用反相HPLC法,梯度洗脱,分别测定山楂饮片及炮制品醇提取物的特征图谱。结果:11批山楂饮片中均标示出13个特征峰;山楂焦品共标出11个特征峰;山楂炭品共标示出9个特征峰。通过对色谱峰的分析,山楂焦品和山楂炭品均检测出山楂饮片中的7个共有峰;另外标示出了3个特征峰,分别为5-羟甲基糠醛、绿原酸、金丝桃苷。结论:山楂饮片炮制前后的特征图谱存在显著差异。该方法准确可靠,为山楂饮片和山楂炮制品质量标准的制定提供了参考依据。     

滴水珠生品与炮制品化学成分的比较研究

目的：研究滴水珠炮制前、后化学成分的变化。方法：采用不同方法对滴水珠生品进行炮制,对其主要成分进行含量测定,并对生品和炮制品的指纹图谱进行比较。结果：生物碱含量高低顺序为生品〉法制品〉白矾制品〉姜制品;尿苷含量高低顺序为生品〉白矾制品〉姜制品〉法制品;腺苷含量高低顺序为生品〉姜制品〉白矾制品〉法制品。炮制品的指纹图谱与生品比较,主峰数目有所变化,峰高有不同程度的减小。结论：滴水珠药材经炮制后化学成分有变化,总生物碱、尿苷和腺苷的含量均有所降低。     

决明子生品及炮制品的HPLC指纹特征研究

目的:研究决明子生品及炮制品的高效液相色谱(HPLC)指纹特征,为建立决明子药材的HPLC指纹图谱提供依据。方法:样品用1.5mol.L-1盐酸溶液加热水解,用氯仿回流提取,采用梯度洗脱技术进行HPLC分离分析。用聚类分析方法处理色谱指纹信息,比较色谱以大黄酚为参照色谱峰的18个特征峰的信息、单波长的全部指纹信息及220～550nm全波长的二维指纹图谱的信息。结果:决明子生品及炮制品中有数种化学成分的含量高于大黄酚的含量。决明子生品与炮制品的色谱指纹特征比较接近,但有差别。结论:所得指纹图谱中决明子水解液的脂溶性成分分离良好,大黄酚、大黄素、大黄素甲醚3个纯色谱峰得到确认。采用220～550nm全波长二维指纹图谱的指纹信息较采用单波长全部色谱指纹信息及特征峰指纹信息的聚类结果更加可靠。     

金银花体外抗流感病毒细胞代谢成分研究

目的考察金银花药物成分经正常细胞及感染流感病毒细胞代谢后,金银花主要成分的变化情况。方法应用中药指纹图谱技术,将得到的色谱图导入指纹图谱相似度评价系统进行分析,比较各组间的标准指纹图谱主要特征色谱峰,找出与金银花抗流感作用相关的差异色谱峰。结果以培养基空白组为对照,正常细胞给药组、病毒细胞给药组各主要特征峰的峰面积表现出整体下降趋势。8号峰面积明显下降,2号峰、7号峰与c号峰与培养基空白组及金银花对照药材比较,相对峰面积成倍增加。结论 2、7、8、c号峰对应的化合物可能与金银花抗流感病毒活性密切相关。     

党参生品及不同米炒党参UPLC指纹图谱比较研究

目的 比较小米和大米炒制党参Codonopsis Radix前后的指纹图谱差异。方法 采用超高效液相色谱（UPLC）法,色谱柱为Agilent Poroshell SB-C₁₈,流动相为乙腈-0.15%冰醋酸水（梯度洗脱）,体积流量为0.3 mL/min,检测波长为267 nm,柱温为30℃,进样量为1 μL。以党参炔苷为参照,建立生党参、小米炒党参、大米炒党参（各9批）的UPLC指纹图谱;运用《中药指纹图谱相似度评价系统（2012版）》进行相似度评价及共有峰指认;运用SPSS 20.0软件进行聚类分析;使用数据统计软件SSPS 20.0与SIMCA 14.1进行主成分分析。UPLC法检测大米炒党参、小米炒党参、生党参各9批饮片中5-羟甲基糠醛（5-HMF）和党参炔苷含量。结果 9批党参生品的UPLC指纹图谱有6个共有峰,小米炒党参和大米炒党参分别均有10个共有峰,相似度均大于0.90;指认了5-HMF、党参炔苷2个共有峰,党参“米”炒后UPLC指纹图谱共有峰特征明显,小米炒党参和大米炒党参的UPLC指纹图谱未见明显差异。聚类分析和主成分分析结果一致,9批党参生品聚为一类,而小米炒党参和大米炒党参聚为另一类。与生党参比较,大米炒党参和小米炒党参中5-HMF含量均显著升高（P<0.01）,3种饮片党参炔苷含量无明显差异。结论 成功建立了党参生品及小米炒党参、大米炒党参的UPLC指纹图谱,不同炮制辅料对米炒党参中化学成分的影响趋势相同,但程度不同。     

正交实验法优选川芎饮片的生产工艺

目的筛选川芎饮片的最佳生产工艺,摸索稳定可控的质量标准。方法以挥发油和阿魏酸的含量为指标,采用正交试验筛选出川芎饮片的最佳生产工艺,并对川芎生品、酒炒品、酒烘品3种炮制品的质量进行对比。结果3种炮制品在成分上基本一致。川芎生品挥发油含量最高,而酒炒品与酒烘品的阿魏酸含量次之,酒烘品各项指标又比酒炒品略高。结论用烘制法代替炒制法可行,且生产工艺更易控制,适合大规模加工。     

苍术炮制前后指纹图谱及主要成分含量变化研究

摘要：目的:建立苍术及其炮制品的HPLC指纹图谱,并对其所含的6个有效成分进行定量分析。方法:采用HPLC,Waters XTERRA C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相乙腈-0.8%磷酸溶液梯度洗脱,检测波长为220 nm（检测苍术酮、β-桉叶醇、苍术苷A和白术内酯Ⅲ）、270 nm（检测苍术素和苍术素醇）,流速为0.8 ml·min-1,建立生苍术和麸炒苍术的HPLC指纹图谱,通过相似度评价、聚类分析对苍术炮制前后指纹图谱进行分析,并对苍术素、苍术素醇、苍术酮、β-桉叶醇、白术内酯Ⅲ、苍术苷A进行含量测定。结果:建立了苍术及其炮制品的指纹图谱,以苍术素为参照峰,生苍术标定了21个共有峰,麸炒苍术标定了20个共有峰,与各自对照指纹图谱的相似度均大于0.955。苍术素、苍术素醇、苍术酮、β-桉叶醇、白术内酯Ⅲ、苍术苷A在炮制前的质量分数分别为3.157 3,0.663 6,1.026 2,1.001 4,0.242 7,0.238 5 mg·g-1;经炮制后,上述6种成分中的苍术酮消失,苍术素、苍术素醇、β-桉叶醇、白术内酯Ⅲ、苍术苷A在麸炒苍术中的含量分别为2.701 9,0.539 2,0.800 8,0.313 5,0.321 4 mg·g-1。结论:苍术的HPLC指纹图谱在炮制前后发生了明显变化,通过对比共有峰的保留时间和色谱图,指认出部分成分;并发现20号峰为苍术的特有峰,因此峰20可用于区别生苍术和麸炒苍术; 6个有效成分含量在炮制前后均发生了一定程度的变化,样品中苍术素、苍术素醇、苍术酮、β-桉叶醇含量排序为苍术>麸炒苍术,样品中白术内酯Ⅲ和苍术苷A含量排序则为麸炒苍术>苍术。     

基于HPLC指纹图谱及化学计量学筛选醋青皮质量标志物

目的:分析比较青皮醋炙前后化学成分的变化,筛选醋青皮的质量标志物。方法:建立10批青皮醋炙前后HPLC指纹图谱,采用相似度分析、主成分分析和聚类分析等化学计量学方法,分析青皮醋炙前后化学成分差异。结果:生青皮标定了8个共有色谱峰,醋青皮标定了9个共有色谱峰,醋青皮色谱图中5号峰为新增共有色谱峰。化学计量学分析生青皮、醋青皮可以各自聚类,2种饮片的主要差异成分峰为1号峰(辛弗林)和5号峰(未知成分)。结论:建立的指纹图谱能够系统地反映生青皮和醋青皮化学成分的差异,醋炙后成分(5号峰)可以作为区别青皮生、醋饮片的质量标志物,可为制定更加合理的醋青皮质量标准和研究青皮醋炙炮制原理提供科学依据。     

黄芪炮制工艺优化及不同炮制品成分比较

目的:优化黄芪蜜炙、盐炙、醋炙工艺,并比较不同炮制品水溶出物溶出率、黄芪甲苷含量差异。方法:采用均匀设计试验,以加辅料(蜜、盐、醋)倍数、浸泡时间、炒制时间、炒制温度为考察因素,以水溶出物溶出率、黄芪甲苷含量的综合评分为指标,优选炮制工艺;采用香草醛-硫酸比色法测定黄芪甲苷含量。结果:蜜炙、盐炙、醋炙最优工艺为加蜜、盐、醋倍数分别为1:7、1:1、1:1(均为V/V),炒制时间分别为13、5、5min,炒制温度分别为70、240、70℃,浸泡时间均为0.5h;盐炙黄芪水溶出物溶出率高于醋炙品,且有显著性差异(P<0.01),而3种炮制方法下黄芪甲苷含量差异不明显。结论:所选工艺稳定、可靠;不同炮制方法对水溶出物有显著性影响。     

泸州古蔺山银花指纹图谱及一测多评同时检测研究

目的:建立HPLC指纹图谱及一测多评同时检测泸州古蔺山银花中9个成分的质量分析方法。方法:以绿原酸为参照物,建立泸州古蔺山银花HPLC指纹图谱,并采用斜率校正法计算其与新绿原酸、隐绿原酸、獐牙菜苷、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、灰毡毛忍冬皂苷乙及川续断皂苷乙的相对校正因子,分别用外标法和一测多评法计算含量。结果:建立了10批古蔺山银花HPLC指纹图谱,相似度均在0.99以上,标定了11个共有峰,指认了其中9个共有峰,并分别采用外标法和一测多评检测其含量,二者无显著差异。结论:实验将一测多评和指纹图谱相结合评价泸州古蔺山银花的质量,该方法准确、简便、可行,为更全面控制山银花的质量提供参考依据。     

金银花水提物及醇提物体外抗菌实验

目的：研究金银花水提物及不同浓度醇提物的体外抑菌和杀菌作用。方法：测定金银花水提物及25%、50%、75%、90%醇提物的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果：金银花水提物及醇提物均对金黄色葡萄球菌有较明显抑菌及杀菌作用,对痢疾杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌的抑菌和杀菌效果一般,高浓度醇提物对铜绿假单胞菌和大肠埃希菌的抗菌作用不明显。结论：金银花不同溶剂提取物对供试菌均有一定的抑菌作用,是有研究、开发价值的天然抗菌中草药。     

不同提取工艺对维C银翘片中绿原酸含量的影响

目的:探讨不同提取工艺对维C银翘片中绿原酸含量的影响。方法:根据各味中药材所含成分的理化性质,以绿原酸含量为指标对现行工艺进行考察,比较山银花单独煎煮,山银花与连翘、荆芥按照处方比例合并共煎对绿原酸提取率的影响。结果:最佳提取工艺为:山银花、连翘、荆芥按照处方比例合并共煎(1h×2)。结论:该提取工艺使绿原酸的含量达到2010年版《中国药典》的规定,且工艺简单高效,适合工业化生产。     

HPLC法测定抗601合剂中绿原酸的含量

目的建立抗601合剂中金银花有效成分绿原酸含量测定的方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Hy-persil ODS(4.0 mm×125 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(15∶85∶0.5),流速1.0 ml.min-1,检测波长为327 nm,柱温27℃。供试品溶液加50%甲醇-水溶液,超声震荡,取上清液。结果绿原酸进样浓度在0.2～2μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为98.3%,RSD为0.79%(n=6)。结论所用方法准确、简便可行、重现性好,可作为抗601合剂的质量控制方法。     

基于HPLC指纹图谱抗感颗粒质量评价研究

目的：建立抗感颗粒高效液相色谱指纹图谱测定方法。方法采用 Kromasil 100-5C18色谱柱,以乙腈-0.4％磷酸溶液为流动相梯度洗脱,波长切换模式进行检测（检测波长为327 nm 和230 nm）,建立抗感颗粒的对照指纹图谱,并对66批抗感颗粒进行质量评价。结果通过《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004年版进行评价,66批抗感颗粒中18批相似度结果偏低,不足0.90。金银花多个指标成分含量偏低是相似度测定结果偏低的主要原因。结论建立的高效液相色谱指纹图谱具有良好的精密度、重复性和稳定性,适用于抗感颗粒批间均一性的质量评价。     

山银花、金银花中掺伪钾盐检验方法的研究

目的建立测定银花类药材中掺伪钾盐的补充检验方法。方法火焰类型为空气／乙炔,采用钾空心阴极灯,钾检测波长为766．5nm,乙炔气流量为1．7L／min,空气流量为13．5—15．0L／min,狭缝2．0nm。结果钾离子质量浓度在0．2632～2．632μg／mL范围内与吸光度具有良好的线性关系（r=0．99902）,平均回收率为98．48％,RSD为1．44％（n=6）。结论所用方法简单、快速、准确、重现性好,适用于测定山银花、金银花中钾盐的含量。     

银翘解毒丸质量评价方法研究

目的建立银翘解毒丸指纹图谱及多成分同时定量分析法,为其质量控制及评价提供技术支持。方法采用高效液相色谱-二极管阵列(HPLC-DAD)法建立指纹图谱,并同时测定绿原酸、连翘酯苷A、牛蒡苷3个指标性成分的含量,对26批银翘解毒丸进行分析;采用高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)法初步筛查山银花替代金银花非法投料情况。结果银翘解毒丸指纹图谱中标定了15个共有峰,相似度为0.709~0.997;聚类分析结果显示,指纹图谱相似度为0.85以下的样品为质量存疑。26批样品中有5批质量存疑;2批绿原酸及牛蒡苷的含量极低,3批连翘酯苷A的含量极低,质量分析结果与指纹图谱结果具有一致性。26批样品中,山银花阳性检出3批,阳性检出率为11.54%。结论该方法准确、可靠,可检测不按标准投料、非法投料等问题,可用于银翘解毒丸的质量控制及评价。     

HPLC同时测定山银花中绿原酸和木犀草苷的含量△

目的:建立同时测定山银花中绿原酸和木犀草苷含量的高效液相色谱法。方法:采用Phenomenex LunaC18柱(250mm×4.6mm,5μm)分离,以乙腈和0.4%醋酸溶液进行梯度洗脱,检测波长350nm。结果:绿原酸在77.15～771.5mg·L-1线性关系良好,平均回收率在101.7%(RSD1.71%);木犀草苷在1.536～15.36mg·L-1线性关系良好,平均回收率在101.6%(RSD2.03%)。结论:该方法简便,准确,快速易行,可同时测定山银花中绿原酸和木犀草苷的含量。     

金银花与山银花生物指纹图谱比较研究(英文)

采用微量量热法从生物热活性角度,对金银花与山银花的生物指纹图谱进行比较研究。本文以山银花中的灰毡毛忍冬为例,考察不同浓度的金银花与灰毡毛忍冬提取液对志贺痢疾杆菌的抑制作用,测定其产热变化规律。以产热曲线和热动力学参数为评价指标,客观地表征金银花与灰毡毛忍冬对志贺痢疾杆菌生长代谢的影响,并对实验结果做了相似性分析。结果显示,金银花与灰毡毛忍冬有很强的抑制志贺痢疾杆菌生长代谢的作用且两者有很好的相似性。生物评价应与化学分析法相结合来控制中药质量,来共同确保中药的安全和疗效。