一种观察细菌荚膜的简易染色法

荚膜染色在微生物学的实验教学中是一项常用而有一定难度的染色方法。目前常用的黑斯法和密尔法虽经多次改进，技术难度仍较大，常出现荚膜着色不好、染液配制麻烦、操作复杂等问题。经过我们在实践中摸索，发现一种改良方法，操作简单，染色后细菌荚膜清晰，与细菌之间对比反差明显，用于教学实验效果良好。现报告如下。[第一段]     

改良的细菌荚膜染色法

荚膜(capsule)是某些细菌细胞壁外的一层黏液性物质,其厚度≥0.2 μm且边界明显.通常认为荚膜与细菌的致病性有关,在细菌鉴定中有重要意义.传统的细菌荚膜染色法有Hiss法、Muir法、墨汁负染法以及常用的吕氏美蓝染色法等,但这些荚膜染色法的染色效果往往不够理想[1～4].改良荚膜染色法是在吕氏美蓝染色法的基础上进行改良,染色效果良好,现报告如下.     

PAS染色液延长使用时间的方法探索

<正>PAS染色方法是一种常用的特殊组织染色方法,主要用于糖原、基底膜、真菌、淀粉样物等的染色。PAS染色液试剂(Schif试剂)容易变质,需要经常重新配置,这样既浪费试剂,又增加工作量。我科工作人员经过常期工作探索,找到一种可以延长PAS染色液使用时间的方法,现简述如下。     

改良Hiss氏荚膜染色法

常用的细菌荚膜染色法有Hiss氏法[1]墨汁负染法、Muir法[2]及王全德[3]等人的方法，其中Hiss氏法被认为是经典的方法，但该方法的加热染色过程不易掌握，作者将此改为不加热染色，能显示出清晰的荚膜。l材料与方法1．二动物昆明种小鼠，体重209左右，由新乡医学院动物室提供。1．2试剂与菌种皿型肺炎链球菌购自河南医科大学微免教研室，甲醇（AP）购自北京化工三厂，Hiss氏染液、20％CuSO4，用前配制。13方法取皿型肺炎链球菌感染致死的小鼠腹腔液徐片，充分自然干燥。取徐片30张作对照组，按Hiss氏经典法染色镜检；另取涂片为实验组进…     

细菌荚膜染色的改良

荚膜染色是细菌鉴定的常用技术之一,笔者在传统方法的基础上经过多次试验得出一种方法简便,染色后荚膜清晰、结果稳定,染色标本存放三年仍保持良好效果,现报道如下。1 染液配制1.1 刚果红4.5g溶于100ml蒸馏水(此液可长期存放),用时此液5份与血清1份混合(可用生化室剩余血清);5％稀盐酸;结晶紫染液(革兰氏     

一种细菌荚膜的快速染色方法

荚膜是细菌的一种特殊结构,对染料亲和力弱,不易着色。为了便于观察其形态,临床上普遍采用黑斯氏法、密尔氏法等对细菌荚膜进行染色。笔者将雷比格尔染色法加以改进,对炭疽杆菌荚膜进行了染色,收到良好效果。现将该方法介绍如下。     

NAP染色在感染性发热中的应用

发热是内科中最常见的症状。发热的原因绝大多数是病毒或细菌感染。如何快速准确地鉴别出感染性发热是细菌还是病毒引起的,对病人的治疗有重要意义。硝基蓝四氮唑(NBT)试验对鉴别细菌与病毒性感染有重要参考价值[1]。但是,我们在多年的实践中发现NBT试验有以下缺点:它所用的试剂需要自己配制,质量不易得到保证,并且容易失效。中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色是血细胞化学染色中一种常用的染色方法。我们通过实践发现NAP染色与NBT试验都能快速、比较准确地鉴别出病毒感染与细菌感染。     

血细胞高碘酸-雪夫染色法的改进

血细胞高碘酸-雪夫氏(periodic acid-Schiff,PAS)染色法是常用的血细胞化学染色方法之一,对于一些疾病的鉴别诊断有着重要作用.目前国内一些文献介绍的PAS染色法,不仅基质液Schiff试剂配制程序繁琐,并且染色时间较长,给临床、教学和科研工作带来了诸多不便.我们报告一种Schiff试剂配制程序简单而且染色时间较短的血细胞PAS染色法.     

细菌荚膜染色法的改进

细菌荚膜不易着色,需用特殊染色法。而且荚膜易被加热固定步骤所破坏,而失去原有形态。我们用荚膜保护液,并使用石炭酸碱性美蓝染色液,加温染色。既能保护荚膜不受破坏,并通过加热增强着色性,使细菌荚膜清晰易观察。1 材料与方法试剂:石炭酸复红液,20%硫酸铜,1%碱性美蓝;荚膜保护液:血清(灭活人或动物血清)、20%蔗糖生理盐水,三者比例1∶1∶3;丙酮方法:第1步用12—18小时培养物,第2步,取保护液1滴放于玻片上,然后取可疑菌落混匀制成菌膜,自然干燥。第3步将涂片放入丙酮缸中,固定2—3分钟,取出自然干燥。     

三种常用细菌染色法的改良

微生物中常用的细菌染色方法有多种,其中荚膜染色、鞭毛染色、抗酸染色等染色方法操作较为复杂,不易掌握。本文参考有关文献报道,结合教学经验,对上述三种染色方法上加以改进,实验结果显示改进后不仅操作简便,且染色效果较好。     

细菌性阴道病阴道分泌物革兰染色与细菌性阴道病联合试剂检测的临床意义

目的探讨细菌性阴道病(BV)阴道分泌物革兰染色与BV联合试剂检测的临床意义。方法选取2017年6月至2019年6月至禹州市妇幼保健院就诊的60例疑似BV患者,所有患者取其阴道分泌物行革兰染色与BV联合试剂检测,以Amsel法为金标准,分析BV阴道分泌物革兰染色与BV联合试剂检测的临床意义。结果 60例患者经Amsel法检测,43例确诊。革兰染色与BV联合试剂检测的准确性为91.67%(55/60),灵敏度为93.02%(40/43),特异度为88.23%(15/17),阳性预测值为95.24%(40/42),阴性预测值为83.33%(15/18)。经Kappa一致性检验,革兰染色与BV联合试剂诊断BV的结果和Amsel法检测一致性较高(Kappa=0.798,P<0.001)。绘制受试者操作特征曲线(ROC),显示革兰染色与BV联合试剂诊断BV的曲线下面积(AUC)为0.906(95%CI:0.806～997)。结论将革兰染色与BV联合试剂检测应用于BV的临床诊断中,准确性、灵敏度、特异度均较高,与Amsel法检测的一致性较高,可为疾病的临床诊治提供可靠的检测依据。     

几种细菌染色方法的改良

细菌是一类原核细胞型微生物。因菌体小半透明,要想更清楚地观察其大小和形态,需经染色和显微镜放大后才能看到。常用的细菌染色法有单染法和复染法。复染法是用两种以上的染料染色,可将细菌染成不同颜色,除可观察细菌的形态外还能鉴别细菌。主要有革兰染色法、抗酸染色法、特殊染色法.笔者为了克服传统染色方法存在的不足,将革兰染色法、抗酸染色法、荚膜染色法、     

介绍一种药物致热原测定的微量快速鲎试验法

鲎试验对于药物致热原检测及制药工序的质控具有重要的实用价值。在实践中,参照国外经验,探索了一种微量快速的鲎试验法,比通常所用的试管法简便、快速、敏感、省试剂,现介绍如下。材料与方法一、材料(一) 鲎试剂:取浙江宁海鲎(东方鲎),沿胸节和腹节间的关节正中线以输液器密闭采     

Schiff试剂配制方法的改进和体会

DNA是遗传的物质基础,应用Feulsen反应法显示细胞DNA是常用的组化染色技术,其中Schiff试剂是染色成败的关键因素。Schiff试剂（希夫试剂）,又称品红醛试剂,与醛类反应呈紫红色。它有多种不同的配制方法,归结起来有经典热配法和冷配法掰。以前经常采用的热配法,配制过程繁琐,常会因一个步骤的偏差而造成配制失败,笔者改用冷配法,收到了与热配法同样的染色效果,现将体会介绍如下。     

不同方法配制希夫试剂的染色效果

在糖原、粘液的过碘酸希夫反应 (PAS)和核酸的富尔根染色技术中 ,希夫试剂是染色成败的关键因素之一 ,另外 ,该试剂还可用来显示真菌、脂褐素等物质。长期以来希夫试剂的配制有加热配制和冷配法 ,前者较为经典但步骤繁琐 ,后者的优点在于配制相对简单、易学。本文探讨不同配制法在过碘酸希夫反应和富尔根反应中的效果。1　材料和方法按文献以四种方法 (a)经典热配法 [1 ]、(b) Stowell传统法、(c) L illie冷配法、(d)冷配法 [2 ] ,分别制备希夫试剂。用PHS- 2 C精密数显酸度计 (上海伟业仪器厂 )测定 p H值。选取外检中大致正常胃粘膜、…     

阿尔辛蓝直接显示快速鉴定新型隐球菌

新型隐球菌荚膜内含有大量的酸性黏多糖 ,在 PH1～ 2的情况下 ,荚膜可被阿尔辛蓝染为深蓝色 ,菌体呈淡蓝色 ,细胞核及其他结构清晰 ;其他酵母样真菌、细胞等均不被着色 (无酸性黏多糖成分 )。该法经临床实践应用 ,具有简单快捷、准确可靠、容易掌握、染色对比清晰。现介绍如下。1　试剂配制 :取进口分装阿尔辛蓝 (alcian blue) 1.0 g,冰醋酸 1.0 m L,蒸馏水 99m L ,溶解即成 10 g/ L 酸性阿尔辛蓝溶液。2　操作方法及结果观察 :取一洁净玻片加 10 g/ L阿尔辛蓝溶液一小滴 ,加离心沉淀标本或培养物于其上 ,混匀 ,立即加盖玻片 ,用低倍或高…     

AgNOR胶银一步染色法的应用体会

自Howell等将核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)染色法简化为胶银一步法以来,AgNOR染色法已被病理学家、细胞学家及植物学家应用于各自领域内有问题的研究。病理学家主要应用于肿瘤预合等的研究。由于胶银一步法简单易行,不需昂贵的设备和试剂,故在一般试验室皆可开展,不失为一种值得推广的研究和辅助诊断手段。作者在对肿瘤进行AgNOR定量对比研究中,按国内现行常用的AgNOR胶银一步染色法常规,配制贮存液、染色液及染色过程,发现下列问题常是影响染色质量的因素:(1)试剂中不溶性残渣沉     

LAB试剂盒制备及其在免疫组织化学上的应用

LAB试剂盒(Labeled Avidin Biotin kit,简称(LAB kit)是一种灵敏度高、特异性强、重复性好的新款试剂,具有应用方便和快速等优点。近年来,国外该类试剂广泛应用于免疫组化染色、ELISA方法的检测、电泳印迹法(immunoblot)、单克隆抗体的筛选和检测以及肿瘤免疫诊断和治疗等方面。国内目前BAS(Biotin-Avidin System)试剂依赖亍进口。因此,LAB kit的制备是有较大的实用价值和经济效益。本文将扼要报道LAB kit制备和在免疫组化上的应用。     

白假丝酵母菌不同菌株荚膜的对比性观察

目的:观察白假丝酵母菌标准菌株(CCCMC1a、ATCC 14053)与临床分离菌株(C1-1、C1-2、C1-3、C1-4)于不同条件下荚膜层的厚度变化。方法:(1)将实验菌种沙保氏琼脂36小时培养物用生理盐水配成约含1×109个/ml的菌悬液,家兔耳缘静脉注射,1ml/只,同时用BALB/c小鼠腹腔注射,0.5ml/只;待实验动物发病后解剖动物,分别取家兔肾组织印片及小鼠腹腔液涂片进行Hiss荚膜染色镜检,用显微测微计测量荚膜层的厚度,各菌株随机计数40个酵母细胞的荚膜层的厚度值,取各菌株荚膜层厚度的均值进行比较。(2)实验菌株沙保氏液体培养物与同一菌株的抗血清作荚膜肿胀实验及血清交叉实验,Hiss荚膜染色镜检。荚膜层厚度的测量与计算方法同前。结果:(1)标准菌株与临床分离菌株在家兔及小白鼠体内均可形成荚膜,荚膜层的厚度可因不同菌种(株)和不同环境而有差异(均值在0.25~0.58μm不等;P<0.01或<0.05),边界明显。(2)用全菌抗血清作荚膜肿胀实验,可见菌细胞的荚膜明显加宽,且菌株之间可出现交叉阳性。结论:白假丝酵母菌的荚膜厚度可因不同菌种(株)和不同环境而有差异;荚膜肿胀实验显示各菌株除与相应抗血清作用出现荚膜肿胀实验阳性外菌株之间还可出现血清交叉阳性。     

白带常规检查加做革兰氏染色的检测与分析

白带常规检查是妇科检查中的一种常用检测项目 ,它为阴道炎的诊断、治疗提供较可靠依据。我科在近两年白带常规检查中加做了革兰氏染色这一检测项目 ,使阳性率的检出明显上升 ,现将结果报告如下。试剂和方法1 　 试剂　生理盐水 ,结晶紫溶液 ,碘液 ,95 %乙醇溶液 ,沙黄复染液。2 　 方法　按照全国临床检验操作规程规定的方法和诊断标准[1] 严格执行 ,取阴道分泌物 ,用生理盐水涂片 ,在高倍镜下观察结果 (为常规检查 ,此法为盐水稀释法 ) ,然后对其进行革兰氏染色 ,待干后用油镜观察结果 (此法为革兰氏染色法 )。结　　果　　用两种方法对照…