妊娠高血压综合征胎盘组织中细胞凋亡的观察

目的: 观察妊娠高血压综合征(妊高征)胎盘组织中的细胞凋亡现象,探讨胎盘细胞凋亡在妊高征发生发展中的作用. 方法: 选取妊高征患者胎盘组织及正常晚孕胎盘组织各16例,用光镜、电镜及TUNEL法观察计数细胞凋亡现象. 结果: 在晚孕胎盘组织中可观察到凋亡细胞,妊高征组细胞凋亡发生率的中位数及四分位数范围为0.37%(0.15%～0.49%),正常对照组为0.12%(0.08%～0.19%). 二者之间有显著性差异 (P<0.05). 结论: 妊高征胎盘组织中细胞凋亡增多,可能在妊高征发生发展过程中有重要作用.     

妊娠高血压综合征胎盘细胞凋亡的研究

目的 :通过观察妊娠高血压综合征 (PIH)患者胎盘细胞凋亡的情况 ,了解细胞凋亡在PIH发病中的作用。 方法 :采用DNA缺口原位标记Tunel’s技术 ,测定 2 4例PIH患者胎盘不同部位细胞凋亡指数 ,以 2 4例正常妊娠妇女胎盘作为对照 ,并用电镜的超微结构改变来证实。 结果 :PIH组胎盘滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞凋亡指数分别为 (5 .36± 2 .5 0 ) %、(6 .4 8± 3.70 ) %、(5 .6 3± 2 .80 ) % ,对照组分别为 (3.91± 1.6 5 ) %、(5 .39±1.76 ) %、(4.0 8± 1.97) % ,与PIH组相比差异均有统计学意义 (P <0 .0 1) ;电镜显示PIH患者胎盘滋养细胞与合体滋养细胞均有不同程度的异常形态变化。 结论 :细胞凋亡是PIH不良妊娠结局的重要因素之一 ,是影响胎盘功能的直接原因     

妊娠高血压综合征胎盘细胞凋亡的研究

目的:观察妊娠高血压综合征(PIH)患者胎盘细胞凋亡的情况。方法:采用DNA缺口原位标记Tunels’技术,测定30例PIH患者和24例正常妊娠胎盘不同部位细胞凋亡指数,并以电镜的超微结构来证实。结果:PIH组胎盘绒毛滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞凋亡指数分别为(5.46±2.60)%(、7.48±3.90)%(、5.73±2.89)%,对照组分别为(3.95±1.75)%(、5.42±1.96)%(、4.08±1.99)%,两组相比差异均有统计学意义(P<0.01);电镜显示PIH患者胎盘绒毛滋养细胞与合体滋养细胞均有不同程度的异常形态变化。结论:细胞凋亡是PIH形成的重要因素之一,是影响胎盘功能的直接原因。     

基于PI3K/Akt通路沉默miR-26b对妊娠期高血压胎盘滋养细胞增殖、凋亡的影响

目的 分析沉默微小RNA-26b（Micro RNA-26b,miR-26b）对妊娠期高血压胎盘滋养细胞增殖、凋亡及磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B（phosphoinositide-3 kinase/protein kinase B,PI3K/Akt）通路的影响。 方法 购买人胎盘滋养细胞,使用100 μmol/L N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导胎盘滋养细胞模拟妊娠期高血压微环境,分为细胞空白组（N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导胎盘滋养细胞）、过表达组（N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导胎盘滋养细胞后做miR-26b过表达质粒转染）、沉默组（N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导胎盘滋养细胞后做miR-26b沉默质粒转染）。检测3组细胞增殖、细胞凋亡、细胞PI3K/Akt通路蛋白表达情况。 结果 与空白组相比,过表达组miR-26b表达量升高,沉默组miR-26b表达量降低（P＜0.05）,说明miR-26b转染成功。过表达组24 h、48 h、72 h细胞增殖率逐渐降低,沉默组逐渐升高,3组在组间、时点间、组间·时点间差异均有统计学意义（P＜0.05）。与空白组相比,过表达组PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bcl-2蛋白表达量降低,Bax蛋白表达量升高（P＜0.05）;与空白组相比,沉默组PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bcl-2蛋白表达量升高,Bax蛋白表达量降低（P＜0.05）;与过表达组相比,沉默组PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bcl-2蛋白表达量升高,Bax蛋白表达量降低（P＜0.05）。 结论 沉默miR-26b可抑制妊娠期高血压胎盘滋养细胞凋亡、促进增殖,其作用机制可能与PI3K/Akt通路被激活相关。     

妊娠高血压综合征患者胎盘肝细胞生长因子表达与脐动脉血流测定

目的:探讨妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中肝细胞生长因子(HGF)的表达及脐动脉血流动力学的测定。方法:正常妊娠妇女20例(正常晚孕组);妊高症患者58例(其中轻度17例,中度20例,重度21例),产前行多普勒超声检测脐血流阻力指标(子宫动脉收缩期末最大血流速度与舒张期末最大血流速度之比(S/D)、血管阻力指数(RI)、血流搏动指数(PI)),产后采用免疫组织化学SP法检测胎盘组织肝细胞生长因子(HGF)的表达强度。结果:HGF主要表达于绒毛间质细胞及绒毛血管内皮细胞胞浆,重度妊高征组胎盘HGF表达强度显著低于正常晚孕组(H=7.395,P=0.007),且其各项脐血流指数均较正常晚孕组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度及中度妊高征组的胎盘HGF表达强度及各项脐血流指数与正常晚孕组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。胎盘间质细胞HGF表达强度与脐血流阻力指标S/D、PI值呈负相关(rs=-0.376,P=0.001,rs=-0.333,P=0.003)。结论:妊高征患者HGF分泌减少可能是引起妊高征胎盘生理性血管重铸障碍的原因之一。     

孕妇外周血中胎儿有核红细胞数量在妊高征中的变化

比较妊高征与正常孕妇外周血及胎盘组织绒毛内胎儿有核红细胞 (NRBC)的数量 ,探讨 NRBC出现频率在妊高征中的变化。对 2 8名孕龄 2 7～ 4 1周 ,年龄 2 0～ 39岁 (包括 18名妊高征 )的孕妇外周血进行不连续密度梯度离心 ,对分离后的细胞进行制片、染色 ,显微镜下进行 NRBC计数 ,比较组间差异 ;终止妊娠时 ,对胎盘组织进行病理切片 ,显微镜下进行 NRBC计数 ,比较组间差异。结果发现 18名妊高征孕妇外周血中 NRBC数目为 (2 5 .2 8± 10 .97)个 / 7ml;同孕龄正常妊娠妇女外周血中 NRBC数目为 (12 .5 0± 5 .4 4 )个 / 7ml,两者间有显著性差异 (P<0 .0 1)。妊高征孕妇胎盘绒毛内 NRBC数目为 (3.83± 3.2 0 )个 / 4 0 HP;同孕龄正常孕妇胎盘绒毛内 NRBC数目为 (0 .6 0± 0 .70 )个 / 4 0 HP,两者间有显著性差异 (P<0 .0 1)。提示孕高征孕妇外周血与胎盘组织绒毛内 NRBC数目明显升高 ,为妊高征的早期预测和病情评估提供新思路     

Effects of lead exposure on placental cellular apoptosis and endoplasmic reticulum stress in rats

Background Lead exposure during pregnancy contributes to fetal abortion and/or teratogenesis.Endoplasmic reticulum （ER） apoptosis can be induced by various pathological conditions when ER function is disturbed.However,it is unclear whether ER stress and apoptosis play a role in the etiology of lead-exposed disease status.We aimed to investigate whether lead induced placental apoptosis and subsequent toxicity is initiated by ER apoptosis via caspase-12.Methods Sixty-three female Wistar rats were exposed to lead in drinking water during various gestational periods.Blood lead level was determined by atomic absorption spectrophotometry.Placental cytoplasmic organelles were examined by electronic microscopy.Placental caspase-12 mRNA expression was evaluated by qRT-PCR.TUNEL assay was used to determine the placental apoptosis.Results Lead exposure significant induced ER apoptosis compared to that of the controls （P ＜0.05）,accompanied with increased caspase-12 mRNA expression.Significant differences of caspase-12 mRNA expression levels were observed among the four groups （F=13.78,P ＜0.05）.Apoptotic index （AI） was significantly increased in experimental groups compared to that of the controls （F=96.15,P ＜0.05）.In lead-exposed groups,trophoblast cells underwent degeneration and fibrin deposition; Mitochondria were swollen and decreased in number; ER swelling,expansion,and vacuolization were observed.Conclusion Lead exposure contributes to placental apoptosis,as well as increased caspase-12 mRNA expression,which in turn promoted ER stress.     

The Expression of PLF in Placenta in Pregnancy-Induced Hypertension and the Relationship between the PLF and Serum VCAM-1

Summary:To study the expression of placental isoferritin(PLF)in placental tissue of pregnancy-in-duced hypertension(PIH)and the relationship between the level of expression of PLF and theamount of vascular cell adhesion molecule-1(VCAM-1)in serum,immunohistochemical techniquewas used to detect the expression of PLF in placenta tissue in 45 PIH patients(PIH group)and 15normal pregnant women(normal group).High resolution pathological image analysis system(HPIAS-100)was employed to determine the quantity of PLF.The VCAM-1 in serum was exam-ined by enzyme linked immunoabsorbent assay(ELISA).The results showed that the levels of PLFexpressions in moderate and severe PIH patients were significantly lower than that of normal group(P<0.01).The serum VCAM-1 was significantly decreased in PIH group(1310±177ρ/mg/ml)than that of normal group(609±72ρ/ng/ml,P<0.01).The significant negative correlation exist-ed betweene the expression of PLF in placental tissue and the serum VACM-1(r=0.58,P<0.01).It was concluded     

不同药物中期引产胎盘上的凋亡相关因子表达

目的 探讨中期引产胎盘的结构变化及几种凋亡因子表达特征.方法 中孕引产胎盘20例及足月分娩胎盘5例,常规石蜡包埋和切片,切片做HE染色、免疫组化,观察胎盘的微细结构和几种凋亡相关因子的变化,并与正常胎盘进行比较.结果 引产胎盘呈现出比对照组更严重的变性、坏死及炎性浸润.中孕引产和足月分娩胎盘的Bax 、Bcl-2和Fas-L在蜕膜细胞和合体滋养细胞呈现阳性,而Caspase-9表达不一.结论 胎盘合体滋养细胞的过度凋亡以终止胎盘功能导致分娩,可能是依沙吖啶主要作用之一;中孕引产药物将对机体引起类似"移植排斥"的免疫反应而致胎儿"流产".     

妊娠高血压综合征患者胎盘组织中核因子-kB的表达

目的观察妊娠高血压综合征患者胎盘组织中NF-kB的表达及其与病情轻重的关系.方法通过免疫组织化学方法检测轻、中、重妊娠高血压综合征患者胎盘组织中NF-kB的表达情况.结果妊娠高血压综合征患者胎盘组织中NF-kB被激活,其激活程度与妊高征病情轻重呈正相关.结论提示妊娠高血压综合征患者胎盘组织中NF-kB的激活参与了妊高征免疫发病机制.     

正常妊娠和妊高征患者母儿血浆与红细胞内镁含量的变化

目的 探讨正常妊娠和妊高征患者母儿镁代谢状况。方法 采用全自动生化分析仪测定正常妊娠(25例)和妊高征(25例)患者母儿血浆与红细胞内镁离子浓度，并与正常妇女(15例)比较。结果 正常妊娠组和妊高征组母血浆和红细胞内镁离子含量均显著低于正常妇女组；妊高征组母体和新生儿红细胞内镁离子含量显著低于正常妊娠组。结论 正常妊娠母体和妊高征母儿均存在镁缺乏，且可能与妊高征发病有关，提示妊娠后需进行补镁治疗。     

妊高征患者胎盘组织细胞信号及传递蛋白相关基因表达的变化

目的：观察妊高征患者胎盘组织细胞信号及传递蛋白相关基因表达的变化。方法：TRIzol法抽提6例妊高征患者和5例正常妊娠产妇胎盘组织总RNA并纯化mRNA；应用cDNA阵列检测与细胞信号和传递蛋白相关的1651个基因表达变化，信号扫描仪分析结果。结果：在1651条与细胞信号和传递蛋白相关基因中，妊高征胎盘组织与正常妊娠胎盘组织之间存在差异表达基因32个，包括上调基因26个，下调基因6个，其中已知基因31个，1个为未知基因EST片段。一些与介导免疫、水钠调节、细胞生长相关的基因表达上调。下调基因中也涉及了与免疫、水钠调节相关的基因。结论：妊高征的发病机制可能涉及了一些细胞信号和传递蛋白相关基因表达的变化。     

妊高征患者胎盘组织VEGF和bax的表达及其相互关系

目的　观察血管内皮生长因子 (VEGF)和促凋亡基因bax在妊娠高血压综合征 (简称妊高征 )患者胎盘组织中的表达及两者之间的相关性。方法　用SP免疫组化染色法检测 4 5例妊高征胎盘组织 (妊高征组 )和 2 0例正常妊娠胎盘组织 (对照组 )中VEGF和bax的表达。结果　在中、重度妊高征胎盘组织中VEGF表达明显低于轻度妊高征组和正常对照组 (P <0 0 5 ) ;bax在中、重度妊高征胎盘组织中表达明显高于轻度妊高征组和正常对照组 (P <0 0 5 ) ;胎盘组织中VEGF的表达水平和bax的表达水平呈负相关。结论　妊娠期胎盘滋养层细胞的促凋亡基因bax表达上升和VEGF表达下调之间密切相关 ,并参与了妊高征的发生、发展。     

早产胎盘绒毛细胞的增殖和凋亡

目的 研究胎盘绒毛细胞增殖和细胞凋亡与早产的关系.方法 用免疫组化ABC法和DNA缺口原位末端标记技术(TUNEL法),对20例早产妇女(观察组)和20例足月产妇女(对照组)的胎盘组织进行分析,检测其增殖细胞和凋亡细胞.结果 早产胎盘绒毛细胞增殖指数和细胞凋亡指数分别是(31.77±1.92)%和(3.37±1.20)%,正常足月产胎盘绒毛细胞增殖指数和细胞凋亡指数分别是(20.24±1.32)%和(10.64±1.57)%.两组间差异有显著性(P＜0.05).结论 胎盘绒毛细胞增殖和凋亡在早产中无特殊意义.早产和足月产都是自然分娩而胎盘绒毛细胞增殖和凋亡指数不一致(有差异).提示分娩发动可能与细胞增殖和凋亡无关.     

川芎嗪对妊高征患者血中SOD、MDA、NO、ET、TXA2、PGI2及母儿结局的影响

目的探讨川芎嗪对妊高征患者血中SOD、MDA、NO、ET、TXA2、PGI2及母儿结局的影响。方法川芎嗪治疗中度妊高征患者各75例,观察患者的SOD、MDA、NO、ET、TXA2、PGI2、平均动脉压、尿蛋白、眼底动脉的变化情况。结果治疗后患者SOD、NO、PGI2、ET、MDA、TXA2较前比较均有显著改善(P<0.05);治疗前后平均动脉压变化无显著差异(P>0.05);尿蛋白较治疗前有明显改善(P<0.05)。结论川芎嗪治疗妊高征时能改善母血中SOD、MDA、NO、ET、TXA2、PGI2。     

重度妊高征胎盘组织细胞凋亡与HSP70, bax的表达

目的: 观察重度妊高征(SPIH)胎盘组织细胞凋亡现象,研究热休克蛋白70(HSP70)及bax在胎盘组织细胞凋亡中的作用.方法: 随机选取SPIH患者及正常晚孕胎盘组织各25例,用光镜、电镜观察细胞凋亡现象.免疫组化观察HSP70, bax在正常妊娠及SPIH胎盘组织中的表达,Western blot检测HSP70在二者之间的蛋白表达差异. 结果: 在晚孕胎盘组织中可见到凋亡细胞,SPIH组细胞凋亡发生率的中位数及四分位数范围为0.36 %(0.20%-0.46%),正常对照组为0.15%(0.09%-0.21%).二者之间有显著性差异(P<0.05). HSP70在SPIH组与对照组的阳性表达率分别为100%和93%,无显著性差异.但在表达强度上有明显的差别(P<0.01).Western blot的结果显示HSP70在SPIH胎盘组织中的表达增强.bax在SPIH组的阳性率为84%,对照组为43%,有显著性差异(P<0.01).结论: SPIH胎盘组织细胞凋亡增多与bax的表达上调有一致性;HSP70不能抑制胎盘细胞凋亡,可能对胎盘的组织细胞有保护调节的作用.     

妊娠高血压综合征患者胎盘组织中血红素氧合酶的表达

目的:探讨血红素氧合酶(HO)的2种同工酶(诱导型HO1和组织型HO2)在正常妊娠晚期和妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中的基因及蛋白表达。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法测定正常妊娠和妊高症患者各30例胎盘组织中HO1mRNA及HO2mRNA的表达;并采用免疫组化方法进行HO蛋白半定量分析。结果:①妊高征组HO1mRNA的相对表达量为0.34±0.18,HO2mRNA为0.88±0.57,分别与正常妊娠组(0.46±0.30和0.87±0.28)比较差异均无统计学意义(P>0.05);2组均显示HO1mRNA的表达弱于HO2mRNA。②免疫组化显示HO1在妊高征组胎盘绒毛滋养细胞和血管内皮细胞的染色分数分别为8.1±2.6和1.9±0.5,分别与正常妊娠组(9.3±2.0和2.4±0.3)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。妊高征组HO2蛋白在胎盘血管内皮细胞的表达为4.5±2.6,明显低于正常妊娠组(6.9±3.7,P<0.05);HO2在滋养细胞的表达2组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胎盘血管内皮细胞HO2表达降低可能在妊高征胎盘血管灌注不足和胎盘组织损伤的病理中发挥重要作用。     

妊娠高血压综合征患者血清人胎盘催乳素测定与胎盘病理检查分析

目的：探讨妊娠高血压综合征（妊高征）患者血清人胎盘催乳素（HPL）水平的变化与胎盘病理的关系。方法：选择重度妊娠高血压综合征患者33例为妊高征组，正常晚期妊娠妇女52例为对照组。采用放射免疫学方法检测血清中HPL值，于光学显微镜下，观察每例胎盘标本HE染色切片。结果：妊高征组血清HPL值与对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05）；胎盘病理结果显示：妊高征组终未游离绒毛总数与对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05），含有的合体滋养细胞结节，细胞滋养细胞增生，纤维素样坏死和血管合体细胞膜的终末游离绒毛数与对照组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：妊高征患者合体细胞结节增多，胎盘纤维素样坏死增多，血管合体细胞膜减少，但滋养细胞增殖，HPL下降不明显。因此对于妊高征患者HPL值不能准确地反映胎盘功能。     

重度子痫前期患者胎盘滋养细胞凋亡现象的研究

目的:分析重度子痫前期患者胎盘滋养细胞凋亡特征,探讨滋养细胞凋亡现象与子痫前期病因及病理生理学之间的关系.方法:采用电镜扫描、原位细胞凋亡标记(TUNEL)及流式细胞仪技术,以正常妊娠妇女胎盘滋养细胞为对照,检测重度子痫前期患者胎盘组织中的滋养细胞凋亡.结果:①电镜下,重度子痫前期患者胎盘滋养细胞的超微结构均存在细胞核形态不规则、核膜固缩、异染色质异常分布、细胞质内线粒体基质变深、嵴模糊或排列紊乱、滋养细胞空泡化等凋亡形态学变化;②TUNEL法检测发现,重度子痫前期患者胎盘组织中存在较多凋亡滋养细胞,而正常胎盘组织中少见凋亡滋养细胞;③正常胎盘滋养细胞流式细胞检测图中凋亡细胞峰(Apo峰)不明显,重度子痫前期患者胎盘滋养细胞的流式细胞检测图中均存在较明显的亚二倍体DNA含量细胞峰(Apo峰).结论:重度子痫前期患者胎盘存在滋养细胞凋亡特征,可能与子痫前期的发生发展密切相关.     

Altered expression of adipose differentiation-related protein gene in placental tissue of pre-eclampsia

Objective: To investigate the altered expression of lipid metabolism-related gene adipose differentiation-related protein (ADRP) in pre-eclampsia. Methods: Semi-quantitative RT-PCR and Western blotting were used to validate the altered expression of ADRP gene between pre-eclamptic placentas (pre-eclampsia group) and normotensive placentas (control group) respectively. In situ hybridization (ISH) was used to localize ADRP mRNA in pre-eclamptic placentas. Results: There was a significant difference in the levels of placental ADRP mRNA between pre-eclampsia group and control group (1. 98±0. 50 vs 1. 09±0. 20, P<0. 01). Western blotting showed that placentas both in pre-eclampsia group and control group expressed the special ADRP band at 48. 1 kD. The relative levels of ADRP protein in pre-eclampsia group were significantly higher than those of control group (0. 40 ±0. 19 vs 0. 19 ±0. 09, P<0. 01 ). ADRP mRNA was diffusely distributed in pre-eclamptic placentas. Their positive staining existed in cytoplasm of trophoblast. Conclusion: Abnormal expression of ADRP gene in pre-eclamptic placenta may be associated with the pathogenesis of pre-eclampsia.