慢性酒精性肝病对乙肝疫苗预防接种效果的影响及其应对策略

目的 探讨慢性酒精性肝病对乙肝疫苗接种效果的影响及应对策略.方法 选取来自两个免疫接种中心的65例慢性酒精性肝病患者和40例同期接受预防接种、年龄及性别匹配的健康个体,均按照标准的免疫程序(0、1、6个月)注射重组乙肝疫苗.采用化学发光法检测抗HBs滴度,流式细胞术检测外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞的百分含量.对低应答和无应答的慢性酒精性肝病患者分别以20μg和40μg重组酵母疫苗进行再免疫接种,检测复种后抗HBs滴度.结果 慢性酒精性肝病患者和健康对照组在完成1个标准乙肝疫苗接种程序后1个月,血清抗HBs阳转率分别为92.3％和97.5％(P＜0.05),低/无应答率分别为21.55％和7.5％(P＜0.05).低/无应答的14例慢性酒精性肝病患者中,各有7例分别接受40μg和20μg重组酵母疫苗再接种,前者再接种后-抗HBs的阳转率(85.71％)显著高于后者(71.43％,P＜0.05).乙肝疫苗接种前1周及完成接种后1个月时慢性酒精性肝病患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分含量(分别为6.41％±2.34％、7.02％±2.83％)均明显低于健康对照(分别为10.02％±1.83％、10.04％±2.14％,P＜0.05).结论 慢性酒精性肝病可能是影响乙肝疫苗接种效果的因素之一,其机制可能与下调CD4+CD25+调节性T细胞百分含量有关.应用40μg重组酵母疫苗可提高慢性酒精性肝病患者乙肝疫苗接种的成功率.     

芋螺毒素GI抗血清制备及中和活性研究

目的 测定芋螺毒素GI与牛血清白蛋白(BSA)偶联物免疫小鼠后产生的抗血清是否具有中和GI毒素作用.方法 戊二醛法制备GI-BSA偶联物,免疫小鼠,制备GI小鼠抗血清,应用抗血清的抗体中和实验,验证其对GI的解毒作用.结果 SDS-PAGE蛋白电泳结果显示,GI与BSA成功偶联,GI-BSA在>标志物相对分子质量(120×103)处有两条新蛋白带;GI-BSA(99 μg/只)每隔2周免疫1次,共免疫4次,第4次免疫后第10天抗血清中和滴度效价>1:64 000;混合100及200 μl 小鼠抗血清与≥1 LD50剂量GI,腹腔注射,100 μl 血清可使1×LD50毒素(16.3 μg/kg)组小鼠75%存活,200 μl血清可使25.8 μg/kg毒素组小鼠75%存活.结论 基于GI-BSA半抗原免疫的小鼠抗血清对GI毒素具有明显的解毒作用.     

巨噬细胞活性MRI对多发性硬化大鼠模型中枢神经系统病灶诊断价值的初步研究

目的 探讨巨噬细胞活性成像(MAI)对多发性硬化(MS)模型大鼠脑和脊髓病灶的诊断价值.方法 20只正常Lewis大鼠用数字表法随机分成实验组15只,对照组5只.应用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55(MOG35-55)致敏实验组大鼠制备MS动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE),大鼠首次急性发病后第3天行MR检查.分别对大鼠脑和脊髓行T2WI、T1WI和Gd-DTPA增强T1WI的三维容积扫描.经大鼠尾静脉注入超微超顺磁性氧化铁(USPIO)24 h后行USPIO增强T2WI(即MAI).利用工作站专业软件获得大鼠脑和脊髓冠状面、横断面和矢状面的重组图像,并与常规图像进行比较.结果 成功建立MOG35-55-EAE模型大鼠15只.MOG35-55-EAE大鼠急性发病期相关的中枢神经系统病灶多数分布在脑内(58/63),少数位于脊髓(5/63).常规MRI上病灶表现为T2WI高信号、T1WI低信号,部分出现Gd-DTPA强化.在MAI图像上病灶呈低信号,部分USPIO强化病灶在T2WI上呈等信号,病灶的USPIO强化与Gd-DTPA强化表现不完全一致.T2WI(14/15)和MAI(13/15)对MOG35-55-EAE大鼠急性期病灶的敏感度高,两者联合对病灶的检出率高达100%(15/15),增强T1WI的敏感度相对较低(7/15).对照组大鼠MAI未见异常.结论 MAI弥补传统MR检查技术的不足,能监测EAE的炎症反应,与常规T2WI联合能提高MOG35-55-EAE大鼠病灶的检出率;Gd-DTPA增强能显示EAE血脑屏障破坏的早期活动性病灶,MAI与之联合成像对EAE病灶的诊断和监测有互补作用.     

BALB/c小鼠格雷夫斯病模型的构建

目的 通过免疫电穿孔的方法,构建稳定的BALB/c小鼠（简称小鼠）格雷夫斯病（GD）模型.方法 制备重组质粒pcDNA3.1/TSHR268.将50只小鼠按随机数字表法分为实验组（30只）、对照组（10只）和空白组（10只）.分别于实验第1、4、7、10周在实验组小鼠双后肢腓肠肌注射重组质粒,在对照组及空白组小鼠相同位置注射相同体积生理盐水;实验组及对照组小鼠每次注射后在注射区域行电穿孔加强免疫.以放射免疫法检测小鼠血清T4,ELISA法检测小鼠TRAb氨基端（TRAb N）抗体和TRAb羧基端（TRAb C）抗体.对模型小鼠进行甲状腺^99Tc^mO4^-显像及甲状腺形态学、病理学分析.多组间均数比较采用单因素方差分析及最小显著差异t检验.结果 实验组建模成功率为80％（24/30）.24只成功建模的BALB/c小鼠血清T4由第0周的（16.06±5.16） nmol/L升高至第12周的（95.04±68.92） nmol/L（F=18.906,t=-5.598,P＜0.05）,TRAb N抗体由第0周的（0.006±0.002） U/L升高至第12周的（0.251±0.110） U/L（F=47.491,t =-10.869,P＜0.05）,TRAbC抗体由第0周的（11.176±2.635） ×10^3任意单位（AU）/L升高至第12周的（46.395±22.001）×10^3 AU/L（F=14.642,t=-7.787,P＜0.05）.停止免疫后的第18周,小鼠血清T4为（36.64±23.68） nmoL/L、TRAb N抗体为（0.094±0.053） U/L、TRAb C抗体为（24.456±6.725）×10^3 AU/L,均有所下降,但仍明显高于免疫前水平（t=-4.161、-8.085和-9.008,均P＜0.05）.对照组与空白组小鼠T4、TRAb N抗体及TRAb C抗体在免疫前后均未见明显变化.经过4次免疫,实验组小鼠甲状腺对^99Tc^mO4^-的摄取能力较对照组及空白组明显增强.GD模型小鼠甲状腺较正常BALB/c小鼠体积增大,病理学检查可见甲状腺组织淋巴细胞浸润.结论 重组质粒pcDNA3.1/TSHR268＋免疫电穿孔方法可成功构建BALB/c小鼠GD模型.     

胎球蛋白A的纯化及其对3T3-L1脂肪细胞胰岛素通路的抑制作用

目的 对胎球蛋白A(AHSG)蛋白进行纯化,并探讨其对脂肪细胞胰岛素通路的调节作用.方法 通过硫酸铵沉淀、PEG沉淀、DEAE离子交换和Protamine亲和层析方法纯化血浆中的AHSG蛋白.培养3T3-L1前脂肪细胞并分化为成熟脂肪细胞,置于低糖DMEM培养基培养,然后加入终浓度为100μg/ml和600μg/ml的AHSG及终浓度为600μg/ml的人白蛋白(HAS)分别进行培养,最后用不同浓度(0、10、20nmol/L)的胰岛素刺激细胞.采用Western blotting检测AHSG和HSA对3T3-L1脂肪细胞胰岛素下游分子IRS-1和Akt的磷酸化水平的影响.结果 从血浆中纯化的AHSG蛋白纯度达90%以上.纯化的AHSG在100μg/ml浓度下可以减弱胰岛素对IRS-1蛋白磷酸化的影响,在600μg/ml浓度下可以完全抑制IRS-1蛋白磷酸化;纯化的AHSG在100μg/ml浓度下可以减弱胰岛素对Akt蛋白磷酸化的影响,在600μg/ml的浓度下可以明显抑制Akt蛋白的磷酸化,而600μg/ml的HAS则不能抑制IRS-1和Akt蛋白的磷酸化.结论 从血清中纯化出的AHSG在生理浓度下可以抑制胰岛素对3T3-L1细胞中IRS-1和Akt蛋白的磷酸化作用,在脂肪细胞胰岛素通路中扮演着重要角色.     

载鲑鱼降钙素新型重组酿酒酵母的降血钙活性研究

目的 研究表达鲑鱼降钙素(sCT)基因的表面展示型酿酒酵母经口服给药后对Wistar大鼠血清钙含量的影响.方法 鲑鱼降钙素基因克隆到表面展示型载体pYD1,LiAC法转化酿酒酵母EBY100菌株后获得转化子yAGA2-sCT.在荧光显微镜下检测FITC标记的转基凶酵母重组鲑鱼降钙素的表达情况.载鲑鱼降钙素重组酿酒酵母经冷冻干燥处理后分别以0.1、0.5g/kg和5g/kg浓度灌喂Wlstar大鼠,分别列入低、中、高剂量实验组(n=6);另设阳性药物组(皮下注射200mU/kg的密钙息,n=6))和2个条件对照组(分别灌喂5g/kg冷冻干燥的yAGA2-V5菌株和30μg的密钙息,n=6).眼球丛静脉毛细采血管取血后测定血钙值.结果 荧光显微镜下观察到重组酿酒酵母yAGA2-sCT成功表达了sCT蛋白.载鲑鱼降钙素重组酿酒酵母对大鼠的降血钙活性呈现剂量效应,实验组3个不同剂量的亚组中,高剂量组5g/kg载鲑鱼降钙素酵母yAGA2-sCT的降血钙活性最为显著(P<0.01),且在第2h时降血钙效应达到最大.口服5g/kg的yAGA2-sCT的高剂量组在2h之后,大鼠血钙值从2.685±0.023mmol/L 降低到2.355±0.012mmol/L.结论 5g/kg的载鲑鱼降钙素酵母yAGA2-sCT能明显降低血钙值,是实现鲑鱼降钙素口服的一种可能的新途径.     

治疗型双质粒HBV DNA疫苗对食蟹猴免疫功能的影响

目的评价治疗型双质粒HBV DNA疫苗(简称HBV DNA疫苗)诱导食蟹猴HBV特异性体液免疫和细胞免疫的效果。方法30只食蟹猴随机均分为5组(雌雄各半),分别重复肌注高剂量2000μg/kg、中剂量660μg/kg、低剂量200μg/kgEP介导HBV DNA疫苗,330μg/kg EP介导的佐剂质粒和PBS对照。在不同时间点以酶联免疫吸附法(ELISA)及酶联免疫斑点法(ELIS-POT)检测其血清抗-HBs水平并计数外周血单个核细胞(PBMCs)HBsAg特异性分泌IFN-γ的T细胞频数。结果食蟹猴接种不同剂量HBV DNA疫苗后第10周起均产生不同滴度的特异性抗体。16周时EP介导的HBV DNA疫苗高、中、低剂量组各3只食蟹猴中分别有3、2、3只HBsAg特异性IFN-γT细胞计数阳性;29周时高、中、低剂量组全部动物应答呈阳性,其计数结果分别为30.0±13.5SFCs/3×105PBMCs,30.7±26.3SFCs/3×105PBMCs及17.7±6.4SFCs/3×105 PBMCs;而相同时间点佐剂组和PBS对照组3只食蟹猴均为阴性。结论EP介导的HBV DNA疫苗能有效诱导食蟹猴产生HBsAg特异性体液和细胞免疫应答。     

融合基因治疗大鼠C6胶质瘤的MR扩散加权成像研究

目的 观察常规MR结合扩散加权成像(DWI)在胶质瘤治疗早期疗效的作用.方法 雄性Wistar大鼠50只通过脑立体定向仪于右侧尾状核接种X6胶质瘤细胞10μl(5×105个细胞).于接种后第1周MR检查确认有肿瘤生长后再将其分为对照组和治疗组,其中治疗组大鼠采用上述接种方法于颅内相同位置注入107空斑形成单位的携带血管抑素与内皮抑素融合基因的重组单纯疱疹病毒.分别于接种后第1、2、3周行MR常规及DWI检查,并于每次检查结束后各组分别有2只(第1周)、8只(第2周)及剩余全部大鼠(第3周)安乐死后进行病理检查.对照组与治疗组间不同时间肿瘤体积、表观扩散系数(ADC)值、相同时间不同区域间ADC值的差异比较进行t检验及秩和检验.结果 共43只大鼠见肿瘤生长,成瘤率为86%.对照组与治疗组大鼠C6胶质瘤的体积在第2周时分别为90.60及91.64 mm3,2组间肿瘤体积差异无统计学意义(Z=-0.14,P＞0.05);第3周时2组大鼠肿瘤体积分别为156.64和29.64mm3,两者差异有统计学意义(Z=-3.45,P＜0.01).第2周时治疗组与对照组肿瘤中心的AI)C值分别为(1.20±0.25)×10-3、(0.99±0.08)×10-3 mm2/s,肿瘤边缘的ADC值分别为(1.00±0.25)×10=-3、(0.83±0.12)×10-3 mm2/s,治疗组不同区域的ADC值均高于对照组(t值分别为-4.11,-2.62,P值均＜0.05).第3周时治疗组与对照组肿瘤中心的ADC值分别为(0.92±0.21)×10-3、(0.99±0.09)×10-3 mm2/s,肿瘤边缘的ADC值分别为(0.8l±0.19)×10-3、(0.78±0.11)×10-3 mm2/s,不同区域2组间比较差异无统计学意义(t值分别为0.82,-0.46,P值均＞0.05).结论 DWI能有效地反映大鼠C6脑胶质瘤的组织微观情况;可以早于肿瘤体积发生变化前发现治疗对肿瘤局部细胞状态的影响,从而在肿瘤的疗效观察和预测方面将有更大的发展空间和应用价值.     

大鼠急性脊髓损伤后外周血T淋巴细胞亚群的改变

目的 探讨大鼠急性脊髓损伤后外周血T淋巴细胞亚群的改变. 方法 健康SD大鼠40只,分为正常对照组、手术对照组、100 g·cm组及200 g·cm组,每组10只.采用改良Allen法建立大鼠脊髓损伤模型.于伤后12 h、36 h、5 d、9 d采集眼部血,采用流式细胞仪检测大鼠脊髓损伤后不同时间外周血T淋巴细胞表型CD4及CD8的表达水平. 结果 大鼠脊髓损伤后外周血T淋巴细胞表达的CD4值降低,伤后36 h降至最低为(30.40±4.76)%(100 g·cm组)及(26.54±9.34)%(200 g·cm组),均低于正常对照组(P＜0.01);而CD8的表达变化不明显;伤后36 h,100 g·cm组CD4/CD8比值为1.81±0.55,200 g·cm组为1.29±0.50,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 大鼠急性脊髓损伤后细胞免疫反应低下,损伤程度越重,CD4值及CD4/CD8比值降低就越明显.CD4/CD8比值可作为早期判断脊髓受损严重程度及预后的一个预测指标.     

人型结核分枝杆菌H37Ra在构建实验性自身免疫性重症肌无力大鼠模型中的应用

 目的 探讨人型结核分枝杆菌H37Ra在以鼠源性乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段(R97-116)为免疫原构建重症肌无力动物模型实验中的作用。方法 以R97-116为免疫原于Lewis大鼠皮下及足垫进行皮下接种,以是否添加H37Ra为条件将20只动物分为实验组和对照组,同时设置空白对照组(10只)。比较各组间行为学、体重及乙酰胆碱受体抗体滴度差异。结果 实验组动物局部炎性反应明显,3只动物死亡,6只出现无力症状,1只未出现明显异常表现,6只有无力症状大鼠抗体均呈阳性。对照组大鼠接种处也有局部炎性反应,仅有2只出现轻度无力症状,其中1只抗体可疑阳性,另1只阴性。实验组大鼠体重[(190.21±8.35)g]明显低于对照组[(243.22±7.98)g]和空白对照组[(251.22±5.81)g],差异有统计学意义(P<0.05),对照组和空白对照组差异无统计学意义。结论 H37Ra为本实验成功的必要试剂。     

Optimization of the system of medical service of students of Cadet Schools of the Ministry of Defense of the Russian Federation

One of the factors of the successful military career guidance Cadet schools students is preserving and promoting their health. Medical support of children and adolescents aged 10-17 years should include the full range of medical and preventive measures defined for this group. The state of providing outpatient care for pupils at the Cadet School in St. Petersburg was studied. These results show that full medical care in accordance with the standards can be based only on children's health clinics. It is important that the organization of medical support pupils cadet schools should be cooperate with civilian health care.     

带状疱疹83例误诊原因分析

带状疱疹是由水痘—带状疱疾病毒引起的皮肤科常见疾病。其主要的病理损害,一是受累神经的严重炎症性浸润,继而导致受侵犯神经节内神经细胞变性、坏死;二是皮肤的水泡。迅速抑制神经节和相应的感觉神经纤维的充血、水肿和坏死,防止粘连形成,达到迅速镇痛、改善皮损,缩短病程及防止后遗症的发生是治疗的关键。因而,尽早明确诊断,     

Analysis of the results of the international comparison of activity measurements of a solution of Fe

The results of an international comparison of activity measurements of a solution of ⁵⁵Fe organized by the BIPM in 2005 are reported and analysed. This exercise, which follows the procedures of the CIPM mutual recognition arrangement to update older comparisons, is a renewal of the comparison organized by the BIPM that took place in 1978. A EUROMET comparison was organized in 1996 specifically to compare activity measurements of a ⁵⁵Fe solution by means of liquid-scintillation techniques. Results of these three comparisons are presented and discussed in this paper.

The radionuclide solution was provided by the NPL, which also distributed the samples to the participants. The activity of the ampoules was measured by 16 laboratories using 12 methods producing 25 results. Some general considerations on uncertainty assessments pertaining to the different techniques used are drawn. The outcome of four different estimators is compared from which the presence of at least one outlier can be confirmed. Further measurements should be made to try to reduce the discrepancy between the results. To date the outcome of the present comparison does not show an improvement to that of the 1996 comparison.     

Estimation of accumulated dose of radiation by method of ESR-spectrometry of dental enamel of mammals

ESR-spectrometry was used to investigate radiation-induced paramagnetic centers in enamel of mammals: carnivores (polar bear and fox), ungulates (reindeer, European bison, moose), and man. Values at half the microwave power saturation of the radiation signal, P_1/2, evaluated at room temperature, was found to range from 16 to 26 mW for animals and man. A new approach to discrimination of the radiation induced signal from the total ESR spectrum of reindeer enamel is proposed. ‘Dose-response’ dependencies of enamel of different species mammals were measured within the dose range from 0.48 up to 10.08 Gy. Estimations of ‘radiosensitivity’ enamel of carnivores and ungulates showed good agreement with radiosensitivity enamel of man by ESR method.     

Evaluation of the results of various technics of non-surgical therapy of varicocele

A new method of non-surgical treatment of varicocele syndrome is described: it consists in sclerotherapy of spermatic vein by trans-femoral percutaneous catheterization with balloon-catheters. In 8 cases venous thrombosis has been induced by direct electric clotting. The techniques and a 6 months follow-up are discussed. It is pointed out that this procedure should be considered as the method of choice for tubular lesions and sub-fertility prophylaxis in young people and in childhood.     

延迟性脾破裂误漏诊原因分析

目的探讨延迟性脾破裂误漏诊原因和预防措施.方法回顾性分析总结12例延迟性脾破裂中的诊断和误漏诊的经验与教训.结果本组延迟性脾破裂的误漏诊5例(41.66%).对多发伤与脾破裂并存可能认识不足,外伤史轻微或伤员隐瞒外伤史,缺乏腹痛-缓解-突然再腹痛的典型病史,缺乏“对冲性脾破裂”力学分析和整体化诊断思路等为其误漏诊的主要原因.结论详细的外伤史和全面系统检查,重视腹以外多发伤掩盖腹内脏器伤及延迟性脾破裂可能.确立外伤-腹内脏器伤-脾破裂整体化诊断思路.不间断地辅以B超检查脾形态学变化和腹内有无积液,腹腔穿刺确定有无血腹、X线胸腹部检查观察左侧胸肋角和膈肌运动情况、必要时CT检查以尽早发现脾包膜下血肿,降低延迟性脾破裂误漏诊率.