非小细胞肺癌血循环微转移的临床研究进展

  目的  探讨检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血Lunx mRNA表达对于诊断肿瘤微转移的临床价值。  方法  采用荧光定量RT-PCR技术分别对98例NSCLC患者和20例正常对照组外周血Lunx mRNA的表达进行检测分析。  结果  NSCLC组患者外周血Lunx mRNA的阳性率为74.5%, 显著高于对照组的15%(χ²=25.642, P < 0.05);Ⅲ期NSCLC患者的阳性率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者的阳性率(χ²=21.014, P < 0.05);淋巴结转移阳性和阴性患者的外周血中CK19mRNA阳性率分别为93.2%和46.2%, 差异有统计学意义(χ²=27.372, P < 0.05);不同细胞分化程度与NSCLC患者外周血微转移阳性率有密切关系(χ²=30.004, P < 0.05);NSCLC患者外周血微转移与年龄、性别、吸烟史、原发肿瘤部位无密切关系(P>0.05)。  结论  Lunx mRNA的高表达可能与非小细胞肺癌的微转移有关, 可作为检测NSCLC患者微转移的分子标志物, 其有助于早期诊断肺癌转移, 指导临床分期和治疗。     

检测LUNX mRNA表达诊断非小细胞肺癌微转移的可行性及其临床意义

背景与目的 微转移的检测对非小细胞肺癌的个体化治疗和指示预后具有重要意义。LUNX为近年新发现的人类肺组织特异性基因。本研究的目的是检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者LUNX mRNA的表达情况，探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法 选择初治的NSCLC患者62例，以肺部良性疾病10例与健康人10例作为对照组，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-RT—PCR）和普通RT—PCR技术，检测肺癌、良性病变肺组织、骨髓和外周血LUNX mRNA的表达。结果肺癌和良性病变肺组织中LUNX mRNA阳性表达率均为100％。肺良性病变组骨髓及外周血标本和健康对照组外周血标本中LUNX mRNA表达皆为阴性。62例NSCLC患者骨髓LUNX mRNA阳性表达率为38．7％（24／62），外周血LUNX mRNA阳性表达率为29．0％（18／62），至少一项阳性表达者占45．2％（28／62）；骨髓LUNX mRNA阳性表达率随分期升高且有统计学意义（P=0．02），与病理类型、肿瘤分化程度无明显关系；外周血LUNX mRNA表达与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度均无明显关系。NSCLC患者骨髓和外周血LUNX mRNA表达有相关性（P〈0．001）。结论 LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者微转移的特异、敏感的分子标志物，可能有助于早期诊断肺癌转移，从而指导临床分期和治疗。     

检测CK19 mRNA、CEA mRNA诊断非小细胞肺癌外周血微转移

目的 探讨检测细胞角蛋白(cytokeratin 19，CK19)mRNA、癌胚抗原(cancer embryonic antigen，CEA)mRNA诊断非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)患者外周血微转移的临床意义。方法 应用RT-PCR法检测35例NSCLC患者外周血中的CK19mRNA、CEAmRNA，并以20例良性病变、20例健康人作对照。结果 35例NSCLC患者外周血CK19mRNA、CEAmRNA阳性表达率分别为40％和57％，两者均阳性者40％，两者均阴性者43％；肺良性疾病患者20例，CK19mRNA阳性2例(10％)，无CEAmRNA阳性者；20例健康对照2个指标检测结果均为阴性。随访发现CK-19mRNA阳性、CEAmRNA阳性和二者均阴性患者的远处转移率分别为50％、56％和27％。结论CEAmRNA和CK19mRNA是检测肺癌患者外周血微转移的良好标志物，检测外周血微转移有助于预测肺癌患者预后。     

非小细胞肺癌微转移检测及其临床意义

肺癌是人类常见的恶性肿瘤，肺癌患者的预后与肿瘤的复发和转移有着密切的关系。近十多年来我们对于肺癌的发生发展规律有了进一步的认识，对其治疗也取得了很大的进展，但非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）的生存率并未得到明显的提高。Coello等报道，Ⅰ期NSCLC患者，在肿瘤完全切除后，其复发率仍高达25％～50％。因此在手术前判断常规检查不能发现的隐匿存在于手术切除范围以外的淋巴结／远隔脏器及血液中的微量转移癌细胞，就显得格外重要。     

非小细胞肺癌术中外周血CEA mRNA的检测及意义

目的: 研究手术对非小细胞肺癌(NSCLC)外周血微转移的影响。 方法: 对70例NSCLC患者、18例肺部良性疾病患者于手术开始时、结扎肺静脉时和结扎肺静脉后1小时取外周静脉血,采用逆转录巢式聚合酶链反应(nested-RT-PCR)和微流控芯片(micro-fluid-chip)方法对外周血CEA mRNA进行检测。 结果: CEA mRNA检测阳性率在手术开始时、结扎肺静脉时和结扎肺静脉后1小时的CEA mRNA检测阳性率分别为50.0%、62.8%和57.1%;经χ²检验,手术开始时和结扎肺静脉时阳性率比较,统计学有显著性差异(χ²=7.114,Plt;0.05);结扎肺静脉后1小时阳性率高于手术开始时,结扎肺静脉时阳性率高于结扎肺静脉后1小时,但统计学无显著性差异(P>0.05)。 结论: 手术操作会促进肿瘤细胞进入血液循环,先结扎并尽早结扎肺静脉可能会减少术中进入血液循环的肿瘤细胞数。     

检测MUC-1 mRNA对诊断非小细胞肺癌患者外周血微转移的意义

背景与目的:粘蛋白家族,包括MUC-1,通常被认为是上皮组织及其来源的肿瘤的产物.理论上如果在间叶组织来源的血液中找到MUC-1 mRNA即意味着癌转移.本研究探讨MUC-1 mRNA作为分子指标检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的可行性.方法:应用巢式RT-PCR技术检测60例非小细胞肺癌患者外周血中MUC-1基因的表达,并以15例肺良性疾病患者及20名健康人外周血作为对照,同时使用相同的方法,扩增非上皮细胞来源的细胞株K562,HL-60及上皮细胞来源的细胞株A549、MCF-7,以观察靶基因的表达情况.结果:病患组MUC-1 mRNA表达阳性率达80.0%(48/60).15例肺良性疾病患者及20例健康人外周血中MUC-1 mRNA表达阳性率分别为60.0%(9/15),65.0%(13/20),K562、HL-60及A549、MCF-7细胞株经巢式RT-PCR也可以扩增出靶基因的条带.结论:MUC-1 mRNA不是检测非小细胞肺癌外周血微转移的可靠指标.     

非小细胞肺癌微转移研究现状

近几年非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）的疗效有所提高，但其长期生存率仍较低，远处转移及局部复发是治疗失败的主要原因。Mountain的研究结果表明，一旦出现远处转移，5年生存率仅为1．7％。及早、准确地发现肿瘤转移显得十分重要。肿瘤转移包括传统意义上的转移和微转移（micrometastases）。CT，MRI，B超等检查一般只能发现重量〉1g或直径〉1cm的癌灶，而HE（hematoxylin and eosin）染色常规病理检查对淋巴结微转移漏诊率高达10％～30％。     

细胞角蛋白19mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及其对微转移的临床意义

目的通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CK19 mRNA的表达,探讨其对外周血微转移的意义。方法 NSCLC患者170例,肺良性疾病患者20例和健康志愿者20例作为对照,均在治疗前抽取外周血,通过RT-PCR法检测CK19 mRNA的表达,结合随访资料和生存时间进行分析。结果 NSCLC患者的CK19 mRNA阳性率为46.5%(79/170),对照组为5%(2/40),差异有统计学意义(P<0.01)。外周血CK19 mRNA阳性患者的远处转移发生率为32.4%(24/74),高于阴性患者的发生率(17.1%,14/82;P<0.05)。全组无瘤生存时间为37个月,外周血CK19 mRNA阳性组和阴性组的无瘤生存时间分别为30个月和45个月(P=0.003)。结论 CK19 mRNA是一种检测NSCLC外周血微转移的较好方法,对判断病程发展和指导临床治疗具有重要意义,是预测复发转移和预后不良的辅助指标。     

非小细胞肺癌外周血肺特异性X蛋白mRNA的表达

目的探讨非小细胞肺癌患者外周血中人类肺特异性X蛋白(Lunx)mRNA的表达情况。方法选取2012年6月至2014年10月间收治的60例非小细胞肺癌患者作为研究组,选取同期健康体检人员(健康对照组)40名及肺部良性疾病者(肺部良性疾病组)30例作为对照。采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)法定量检测患者外周血中Lunx mRNA的表达情况,并分析Lunx mRNA表达情况及其与临床病理特征的关系。结果研究组患者Lunx mRNA表达阳性者34例(56.7%)。健康对照组及肺部良性疾病组患者Lunx mRNA表达阴性。Lunx mRNA表达与研究组患者临床分期相关(P<0.05),但与患者性别、病理分型、性别及分化程度等均无关(均P>0.05)。结论应用FQ-RT-PCR法定量检测非小细胞肺癌患者外周血中Lunx mRNA敏感性及特异性均较高,从而为临床早期诊断肺癌微转移提供一定帮助,并指导临床病理分期及治疗方案的选择,改善其预后。     

非小细胞肺癌化疗前后外周血LUNX mRNA检测的临床意义

 目的 通过检测中晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血中循环癌细胞的Lunx mRNA表达情况,探讨全身化疗对外周血循环癌细胞的影响。 方法 NSCLC组为63例中晚期NSCLC患者,化疗方案为含铂类的两药联合方案,化疗2周期后评价客观疗效。分别在化疗前、化疗1周期后、化疗2周期后抽取外周血静脉血。肺部良性疾病患者10例和健康志愿者10例为对照组。用RT PCR法检测外周血中循环癌细胞Lunx mRNA的表达情况。 结果 NSCLC组化疗前外周血Lunx mRNA阳性表达率为73.02%,而肺部良性疾病患者和健康志愿者外周血均没有表达。外周血循环癌细胞Lunx mRNA表达情况与年龄、性别、不同病理类型、行为状态评分的关系不密切,而与临床分期密切相关（P=0.04）。化疗完成2周期的60例中CR 0例,PR 21例、SD 23例、PD16例。外周血Lunx mRNA阳性率在化疗1周期和2周期后均为38.33%,较化疗前显著降低（P=0.00）。Lunx mRNA阳性率在PR、SD、PD三个亚组分别为23.81%、26.09%、75.00%,PR组和SD组的阳性率较化疗前显著降低（P=0.01、P=0.00）,而PD组与化疗前 相比差异无统计学意义（P=0.65）。 结论 Lunx mRNA是检测NSCLC外周血微转移的良好分子标志物。患者临床分期越晚,外周血循环癌细胞阳性率越高。全身化疗可显著降低有效或稳定患者的外周血循环癌细胞检出率,对病情进展的患者则没有作用,而且这种变化在化疗初始阶段即已出现,可帮助我们提前判断化疗对病情的控制情况,从而制定更合理的治疗计划。     

非小细胞肺癌患者外周血CEA mRNA表达及临床意义

 目的：检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CEA表达情况,探讨其作为分子标志物检测 NSCLC微转移的可行性。方法：应用RT-PCR技术检测48例NSCLC患者,15例肺良性疾病(BLD)患者 和10例健康人外周血CEA mRNA的表达。结果：NSCLC患者CEA mRNA的阳性表达率明显高于BLD患 者和健康对照组(P<0.01)。Ⅰ~Ⅳ期NSCLC患者外周血中CEA mRNA阳性表达率分别为27.8%、 83.3%、61.5%和100%。NSCLC患者外周血CEA阳性表达与临床分期及淋巴结转移密切相关 (P<0.05),而与病理类型及分化程度无关(P>0.05)。结论：检测外周血CEA mRNA表达可作为诊 断NSCLC患者微转移的一个有价值的参考指标。     

CD25和HLA-DR在非小细胞肺癌外周血中表达的临床意义

目的:观察非小细胞肺癌患者外周血T淋巴细胞活化抗原CD3+/CD25+和CD3+/HLA-DR+的表达,进一步探讨患者的免疫功能。方法:应用流式细胞双色免疫荧光标记技术对58例肺癌患者外周血T淋巴细胞活化抗原CD3-PE和CD25/HLA-DR-FITC表达进行荧光免疫检测,并与良性病变组(n=29)和正常对照组(n=29)进行对比研究。结果:58例肺癌患者外周血T淋巴细胞中CD3+/CD25+和CD3+/HLA-DR+表达明显低于良性病变组和正常对照组(P<0.01);良性病变组和正常对照组之间无显著性差异。肺癌伴淋巴结转移CD3+/CD25+和CD3+/HLA-DR+低于不伴淋巴结转移者(P<0.01);Ⅲ期、Ⅳ期和Ⅰ期、Ⅱ期之间CD25和HLA—DR表达,有显著性差异(P<0.01);CD3+/CD25+和CD3+/HLA—DR+表达与肺癌组织学分级及年龄有明显相关性(P<0.05或P<0.01);与鳞癌和腺癌及患者的性别没有相关性。手术后外周血CD3+/CD25+和CD3+/HLA-DR+的表达高于手术前(P<0.01或P<0.05);术后一月后外周血中CD3+/CD25+和CD3+/HLA-DR+的表达水平与术后一周时的表达水平相比无显著性差异。结论:应用流式细胞仪检测外周血CD3+/CD25+和CD3+/HLA-DR+的表达水平对了解患者的免疫状态、病情判断、预后评估及进行免疫治疗具有重要的意义。     

非小细胞肺癌外周血微转移的研究现状及进展

近年来肺癌发病率不断上升.全球每年大约有1 100 000人死于肺癌[1].手术是NSCLC首选的治疗方法,但Coello等[2]报道Ⅰ期NSCLC患者,术后复发率仍高达25%-50%.     

KDR mRNA在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

 目的探讨血管内皮生长因子受体-2(KDR)与微血管密度表达与非小细胞肺癌(NSCLC)生物学行为与预后的关系。方法分别应用原位分子杂交及免疫组织化学方法检测62例NSCLC和16例肺良性瘤样病变组织中的KDRmRNA、MVD的表达。结果(1)NSCLC与肺的良性瘤样病变MVD、KDRmRNA的表达具有显著性差异(P<0.01),肺癌MVD随KDRmRNA表达增强而增多,两者呈正相关。(2)MVD和KDRmRNA的表达在肺腺癌高于肺鳞癌(P<0.01)两者随淋巴结转移、TNM分期的进展而升高(P<0.01)。(3)生存期<5年者MVD和KDRmRNA的表达显著高于生存期>5年者(P<0.01)。结论MVD和KDRmRNA的表达与NSCLC的发生、发展、转移关系密切,可以作为评估NSCLC生物学行为及预后判断的指标,KDR可能成为NSCLC的一个潜在的抗血管生成治疗的靶点。     

肺癌外周血EGFR突变检测及其临床意义

目的：通过血浆循环DNA的基因突变检测,筛选表皮生长因子受体（E-GFR）突变型肺癌患者,探讨突变特征及其在肺癌靶向治疗中的意义。方法：选取2009年9月至2010年5月苏州大学附属第一医院及上海市三甲类医院收治的96例肺癌患者的血浆以及其中59例相对应的肿瘤组织中提取DNA,采用PCR扩增和基因测序的方法检测EGFR基因的突变。结果：96例肺癌血样中检测出EGFR突变17例,其突变率为17.7%。在这些突变的样本中,外显子19和21突变分别占88.2% （15/17） 和11.8% （2/17）,其中直接测序法检测出EGFR纯合突变3例 ［L858R 2例,del E746-A750 （1）1例］, 杂合突变14例。对14例杂合突变样本进一步通过单克隆基因测序法确定其突变类型为del E746-A750 （2） 9例、 del E746-A750 （1） 3例、del L747-S752 2例。EGFR基因突变多见于肺腺癌 （包括腺鳞癌）患者, 与患者的性别与吸烟史无明显相关性。59例肺癌患者肿瘤组织的进一步分析证明,血浆EGFR基因突变类型与患者自身肿瘤的突变类型相同, 表明血浆DNA检测到的EGFR突变与原发肿瘤检测到的突变相一致。结论：肺癌患者的血浆循环DNA与相对应的肿瘤组织DNA的EGFR基因突变类型一致; 此外, 相对于传统的 “金标准” 直接测序法而言, 单克隆基因测序的方法能够更精确地判断基因的突变类型。这种简便且微创地检测血浆循环DNA的方法可应用于肺癌EG?FR基因突变的诊断, 从而预测靶向治疗的疗效。     

肺癌患者外周血中Chemerin的测定及临床意义

背景与目的 Chemerin是近来发现的一种类似于趋化因子的趋化蛋白,能够通过与其受体ChemR23的结合发挥对树突状细胞和巨噬细胞的免疫趋化作用,研究表明Chemerin的活化能够增强APC的吞噬作用及抗原递呈作用.随着研究的深入,Chemerin在肿瘤的发生发展过程中的作用也引起人们的重视.本实验中我们通过研究Chemerin在肺癌患者外周血中的表达来进一步探索Chemerin与肺癌的关系.方法 实验选取肺癌患者与健康体检者作为研究对象,应用ELISA法检测两组实验对象外周血中Chemerin的浓度,采用t检验比较两组间统计学差异.应用t检验及单因素方差分析比较肺癌患者外周血中Chemerin的浓度与年龄、性别、病理类型、分化程度、淋巴结转移情况、UICC分期等临床病理指标的关系.结果 42例肺癌患者外周血中Chemerin的浓度与31例健康体检者外周血中Chemerin的浓度具有明显统计学差异,肺癌患者外周血中Chemerin的浓度(1 965.81 pg/mL±374.03 pg/mL)显著高于健康体检者(1 111.44 pg/mL±250.72 pg/mL)(P＜0.001).肺癌患者外周血Chemerin浓度与各临床病理指标间均无统计学差异.结论 Chemerin可能具有作为肺癌的诊断标记的潜力.     

非小细胞肺癌患者外周血和肺癌组织中ZIC1启动子甲基化检测的临床意义

目的 探讨ZIC1基因在NSCLC患者外周血和肺肿瘤组织中的甲基化状态,及其对NSCLC的预后评估意义.方法 选取95例NSCLC患者外周血、癌和癌旁组织,另选取95例健康体检者外周血为对照组.用MSP法比较外周血和癌组织的ZIC1甲基化检出率;分析ZIC1在外周血和癌组织的甲基化和NSCLC临床病理因素的相关性.结果...