免疫抑制比浊法测定糖化血红蛋白A1c

目的　评价糖化血红蛋白A1c(HbA1c)的免疫抑制比浊测定法。方法　通过重复试验、回收试验、干扰试验、方法比较实验、线性关系的检测评价免疫抑制比浊法 ,测定正常人和糖尿病人HbA1c标本共 90例 ,并与微柱法进行比较。结果　正常线性范围 2 %～ 2 0 % ,批内变异系数 (CV)值正常人和糖尿病人 1.0 9%和 1.30 % ,日间CV值 2 .91%和 2 .6 5 %。回收率 90 .9%～ 10 1.2 %。胆红素 2 4 8μmol·L-1、甘油三酯 8.8mmol·L-1、抗坏血酸 5 0mg·dl-1时对测定无明显干扰。与微柱法比较 ,Y =0 .95 0 5X +0 .0 30 5 (r =0 .974 0 )。正常组HbA1c为 6 .85 %± 0 .37%与糖尿病组 10 .2 1%± 1.92 %相比有显著差异 (P <0 .0 1)。结论　免疫抑制比浊法测定HbA1c具有较高稳定性和特异性 ,可作为自动化检测HbA1c的首选方法     

TBARS比色测定血浆低密度脂蛋白的研究

目的 :建立和改良血浆低密度脂蛋白 (LDL)直接测定法。方法 :TBARS比色法。结果 :该方法线性范围 0～ 10mmol/L ,与酶法相关 r=0 .985 3 ,批内CV =1.5 1% ,批内CV =2 .84% ,平均回收率 10 0 .4%。结论 :该法结果准确可靠 ,灵敏度高 ,测定范围大 ,适于临床应用。LDL C正常参考值 18～ 42岁为 2 .5 3± 0 .82mmol/L ;43～ 63岁为 3 .0 1± 1.2mmol/L。     

免疫抑制法直接测定血清高密度脂蛋白胆固醇试剂盒的评价

目的 :评价免疫抑制法直接测定血清高密度脂蛋白胆固醇 (HDL -C)试剂盒是否符合临床应用要求。方法 :将免疫抑制法与磷钨酸———镁法 (PTA)和选择性抑制法进行比较 ,并分析其线性范围、精密度、准确度和干扰因素。结果 :免疫抑制法 (Y)与PTA法 (X1)的回归方程为Y =0 .993X1 0 .2 1 3,r =0 .981 ;与选择性抑制法 (X2 )的回归方程为Y =1 .0 1X2 0 .1 77) ,r =0 .971 ;Y与X1、X2 所测得的均值无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;HDL -C浓度在 0 5 1～ 2 .5 5mmol/L范围内线性良好。对高、中、低血清标本进行精密度测定 ,批内CV值分别为 1 35 %、1 6 7%和 2 0 1 % ,日间CV值分别为 2 78%、3 1 4%和 3 43%。回收率为 97 8%～ 1 0 0 .9% ,平均回收率为 99 2 %。胆红素 ( <2 5 0 μmol/L)、血红蛋白 ( <5 g/L) ,抗坏血酸 ( <2 0 0 μmol/L)、TG( <1 0mmol/L)不干扰测定。 结论 :日本和光公司生产的免疫抑制法直接测定血清HDL -C试剂盒符合临床应用要求 ,可用于自动化分析     

血清肌酐的电极法测定及其评价

用电极法测定血清肌酐含量。该法具有测定速度快 ,受内源性物质及药物的影响较小的优点。批内 :CV为 1.83% ,批间 :CV为 2 .72 % ,平均回收率为 10 0 .6 % ,线性范围可达 2 5 6 0 μmol/L。本法与碱性苦味酸法比较 ( n =5 0 ) ,P >0 .0 5 ,相关系数r =0 .99。     

水溶性新显色剂5-Br-PADCAP直接光度法测定血清铁试剂盒的研制与评价

目的 :研制 5 Br PADCAP直接光度法测定血清铁试剂盒 ,并评价其应用价值 ,以用于血清中微量铁的测定。方法 :在表面活性剂存在下 ,以 2 (5 溴 2 吡啶偶氮 ) 5 [(N ,N 二羧基甲基 )氨基 ]苯酚 (5 Br PAD CAP)作显色剂用手工分析法和自动分析法测定血清铁。结果 :该法线性范围为 0～ 140 μmol/L ,手工分析法和自动分析法平均回收率为 10 0 .0 %和 10 0 .2 % ,批内变异系数 (CV)和批间变异系数分别为 0 .0 19～ 0 .0 2 1、0 .0 10～ 0 .0 14和 0 .0 2 2～ 0 .0 2 9、0 .0 15～ 0 .0 2 1,与原子吸收分光光度法比较具有良好的相关性 ,线性回归方程和相关系数分别为Y =0 .992 8X +0 .2 3 3 9,r=0 .992 7和Y =0 .993 3X +0 .2 5 62 ,r=0 .9819,5 8例健康男性和 47例健康女性血清铁含量分别为 8.19～ 2 7.71μmol/L、10 .10～ 3 1.0 2 μmol/L和 8.0 4～ 2 7.68μmol/L、10 .2 2～ 3 0 .82μmol/L( x± 2s)。 结论 :用 5 Br PADCAP直接光度法试剂盒测定血清铁方法简便、灵敏可靠 ,适合临床应用     

偶氮氯膦I显色EDTA褪色法测定血清钙

目的　建立灵敏度高、选择性好、试剂稳定的血清钙偶氮氯膦Ⅰ显色EDTA褪色测定法。方法　在 2 氨基 2 甲基 1,3 丙二醇 (AMP)缓冲介质中 ,偶氮氯膦Ⅰ与钙络合显色 ,加入EDTA使钙解离 ,测定吸光度的下降来分析血清钙。对反应条件和方法性能进行系统研究。结果　线性范围 0 - 5 .0mmol/L ,回收率为 97.5 - 99.2 % ,平均 98.4 %。批内变异系数 (CV)和批间变异系数 (CV)分别为 0 .98%和 1.93%。与邻甲酚酞络合酮 (OCPC) (X1)比较 :Y =1.0 0 5X1- 0 .0 32 ,r=0 .994 ;与偶氮胂Ⅲ(X2 )比较 :Y =1.0 0 2X2 - 0 .0 2 5 ,r=0 .996 :血清胆红素高达 5 0 0umol/L ,血红蛋白 10g/L ,镁 2 .5 0mmol/L及intralipid高达 15mmolL时均对本法无显著干扰。结论　该法具有简便、快速、试剂稳定和灵敏可靠的优点 ,适合血清钙的手工测定和自动分析。     

胰岛素检测与临床评估

目的　对血清胰岛素 (Ins)检测进行方法学考核 ,并测定 2型糖尿病、高血压病、高血脂的Ins水平。方法　用放免法检测 6 8例健康人作为对照组 ,116例为病例组 (其中 2型糖尿病 2 1例 ,高血压病 34例 ,高胆固醇血症 32例 ,高甘油三酯 2 9例 )的空腹血清Ins进行比较分析。结果　对照组Ins为 10 .5 6± 3 .0 7mIU/L( x±s) ,批内变异系数 (CV) 3.8%～ 8.9% ,批间变异系数 (CV) 6 .8%～ 9.6 % ,反应误差关系 (RER) 0 .0 35 ,平均回收率 95 .7% ,非特异性结合率 (NSB) 3.82 %。对照组与病例各组比较有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　通过实验将进一步论证高胰岛素血症、胰岛素抵抗在多种代谢相关疾病发病中起着重要的作用 ,同时已成为相关疾病的共同病理生理基础。     

STAGO四通道血凝仪应用评价及质量控制

目的　评价STAGO四通道半自动血凝仪的性能 ,并进行有关指标的质量控制。方法　对血浆凝血酶原时间 (PT)、活化部分凝血酶原时间 (APTT)、纤维蛋白原 (FIB)精密度测定及血浆凝血酶原时间、纤维蛋白原的线性分析 ;新旧杯及质控与自制质控血浆比较。结果　PT、FIB线性结果显示 (r =0 .9999、r=- 0 .9880 ) ;精密度PT、APTT、FIBCV <1.13% ,质控批间变异系数 (CV)<1.2 2 % ;批间变异系数 ( 1～ 30d)CV <1.2 6 %、水平 11～ 30d与 30～ 6 0d比较无显著性差异P >0 .0 5,自制质控血浆 1～ 30d与 30～6 0d比较显著性差异P <0 .0 0 1;新与旧杯比较无显著性差异P >0 .0 5。结论　STAGO四通道半自动血凝仪具有较先进的磁珠—凝固检测方法 ,使用联机自动方式提高检测精密度及灵敏度 ,但应严格按照仪器使用与操作 ,做好质量控制 ,为临床提供可靠的结果     

吡啶偶氮酚比色法应用于自动生化分析仪测定血清锌

目的　将吡啶偶氮酚 (5 Br PAPS)比色法应用于自动生化分析仪 (简称本法 )测定血清锌 ,以寻求简便、易行的测定血清锌的方法。方法　用本法对 12 2 2例入托体检正常儿童进行血清锌测定 ,同时用火焰原子吸收分光光度法测定作为对照。统计方法采用卡方检验。结果　用本法检测的显色络合物最大吸收峰为 5 60nm ,线性范围 0～ 5 9.98μmol·L-1,回收率98.7%～ 10 4.5 % ,批内CV =2 .5 % ,批间CV =3 .0 4%。本法与火焰原子吸收分光光度法比较 ,r =0 .970 ,P <0 .0 0 1,两法具有良好的相关性。用本法调查 12 2 2例入托体检正常儿童血清锌 ,平均值为 (12 .61± 2 .2 4) μmol·L-1。结论　使用本法测定血清锌可以取代手工比色法和火焰原子吸收分光光度法 ,能满足临床需要 ,试剂易得 ,显色稳定、敏感 ,且省力、省时 ,具有推广应用价值     

偶氮胂III检测血清镁试剂盒的研制

目的 :研制一种快速、灵敏、稳定性好的检测试剂盒 ,用于血清镁测定。方法 :用国产试剂偶氮胂Ⅲ作显色剂 ,用分光光度法测定血清镁。结果 :用该试剂盒进行血清镁测定 ,显色络合物最大吸收波长为6 4 5nm ,线性范围达 2 .4 7mmol·L-1,表观摩尔吸光系数为 1.6 2× 10 4L·mol-1·cm-1。回收率为 98.2 %～ 10 3.5 % ,批内变异系数 (cv)和批间变异系数分别为 2 .4 %与 3.5 % ,与AAS法 (X)法比较具有良好的相关性 ,Y =1.0 0 9X - 0 .0 2 ,r=0 .985 1,P >0 .0 5 ,83例健康人血清镁含量为 0 .6 9～ 1.2 5mmol·L-1( x± 2s)。 结论 :用该试剂盒进行血清镁测定具有灵敏度高、准确性好、试剂空白值低、操作快速简便及使用范围广等优点 ,适合临床常规应用     

电极法与酶法CO_2测定的相关性

目的 :探讨电极法与酶法 CO2 测定的相关性。方法 :采用 CO2 电极法与酶法对一般标本和溶血、黄疸、乳糜标本进行测定及统计。结果 :批内 CV为 :电极法 1.91%～ 2 .87% ,酶法 3.2 3%～ 4 .2 8% ;批间 CV为 :电极法 2 .13%～ 3.0 2 % ,酶法 4 .0 1%～ 5 .6 3%。二种方法线性范围均最少可达 4 8.3mmol/ L。平均回收率 :电极法 10 0 .5 7% ,酶法 10 0 .78%。相关性 :r=0 .998,且两者差异无显著意义 (P>0 .0 5 )。结论 :电极法与酶法测定 CO2 结果准确 ,相关性好 ,干扰因素少     

LDL-C直接测定法在生化分析仪上的应用

用日本第一化学药品株式会社LDL—C试剂盒在BeckmanCX4型自动生化分析仪上直接测定血清LDL—C含量。方法批内CV 0 37%～ 1 11% ,批间CV为 2 11%～ 3 0 2 % (n =2 0 )。平均回收率为 98 9% ,在 8 10mmol/L浓度范围内呈良好线性关系。TG <5 0 0mmol/L时与聚乙烯硫酸沉淀法 (X1)及Friedewald(X2 )公式计算结果相关良好 ,回归方程分别为Y =0 988X1+0 0 47,r=0 95 1,Y =0 96 1X2 +0 0 5 2 ,r=0 930。LDL—C直接测定法简单、快速 ,用血量少 ,勿需沉淀分离 ,适宜于自动化分析。     

偶氮胂M分光光度法测定血清钙

目的建立简便、灵敏、准确的分光光度法测定血清钙.方法在掩蔽剂8-羟基喹啉-5-磺酸存在的条件下,用偶氮胂M作显色剂,分光光度法测定血清钙.结果钙配合物最大吸收波长为640nm,线性范围0～5.0mmol/L,摩尔吸光数为2.06×104L*mol-1*cm-1.回收率为99.8%,批内变异系数(CV)为1.55%,批间变异系数为2.15%,与原子吸收分光光度法(X)比较具有良好的相关性,Y=0.1268X+0.0024,r=0.9991,P＞0.05.结论本法测定血清钙用血量少、方法简便、灵敏可靠,适合临床应用.     

低渗氯化钠法测定血红蛋白

目的　建立一种无毒无害、干扰因素小的血红蛋白 (Hemoglobin ,Hb)测定方法 :低渗氯化钠法 (简称低渗法 ) ,以替代含有剧毒品氰化钾的氰化高铁血红蛋白 (HiCN)法。方法　用低渗法和HiCN法对 10 0例患者的标本进行对照实验 ,同时对吸收光谱、线性、回收试验、精密度、干扰试验、色泽的稳定性、两种方法的差异性等进行实验研究。结果　两种方法吸收峰都在 5 40nm处 ,低渗法的吸收峰值高于HiCN法 ;回收试验 :低渗法为 10 7 8%～ 94 6% ,HiCN法为 10 4 7%～ 96 5 % ;批内精密度 :低渗法CV=1 3 95 % ,HiCN法CV =1 92 5 % ;批间精密度 :低、中、高三种Hb浓度 ,低渗法平均值CV分别为 2 4% ,2 1% ,1 2 % ,HiCN法平均值CV分别为 3 8% ,2 3 % ,1 3 % ;日间重复性 :低渗法CV =1 2 0 % ,HiCN法CV =1 74% ;干扰试验 :高脂肪血清、高黄疸血清、高白细胞、高球蛋白、温度、pH( 7 0～ 8 5 )对低渗法测定Hb ,结果无影响 ;低渗法 1min内可完全溶血 ,放置 48h比色无影响 ;两种方法的配对t检验 ,t=-0 92 1,P>0 0 5 ,无显著性差异。结论　两种方法的结果无显著性差异 ,低渗法溶血快速 ,无毒无害 ,废液无需处理 ,干扰因素小 ,显色稳定 ,容易保存 ,价格低廉 ,优于HiCN法。     

尿中多胺的毛细管电泳激光诱导荧光测定法

目的 :建立高效毛细管区带电泳 (CZE)激光诱导荧光 (LIF)测定人尿中多胺 (POL)的新方法。方法 :样品用 5mmol/L的HClO4分离蛋白 ,样品中多胺与异硫氰酸荧光素 (FITC)完成衍生反应后 ,用四甲基乙二胺(TEMED)作内标 ,在 15mmol/L的硼酸盐缓冲液 (pH 8.5 )中 ,运用毛细管区带电泳进行色谱分离 ,以激光诱导荧光测定法测定多胺。结果 :多胺测定在 10～ 2 0 0 μg/L范围内具有良好的线性关系 (r =0 .996 ) ,最低检测限为 16μg/L ,日内变异系数 (CV) 3.5 1%～ 4 .6 1% ,日间变异系数 (CV) 3.74 %～ 4 .83% ,方法平均回收率为 96 .0 0 %～ 99.33%。结论 :本方法简便、快速、定量可靠 ,可用于临床实验室测定人尿中多胺水平     

微量荧光法在苯丙酮尿症诊治中的应用

目的 :探讨微量荧光法定量苯丙氨酸在苯丙酮尿症 (PKU)诊治中的应用。方法 :对芬兰 L absystem s公司生产的新生儿苯丙氨酸定量试剂盒及设备进行方法学鉴定 ,并测定 194 7例新生儿和 2 8例经典苯丙酮尿症患儿及 8例持续性高苯丙氨酸血症患儿末梢血中苯丙氨酸 (Phe)水平观察其实用性。结果 :经实验方法学鉴定 ,本法高、中、低各浓度批内平均变异系数 (CV)为0 .0 36 ,0 .0 6 9,0 .0 6 8,批间平均变异系数 (CV)为 0 .12 4 ;最低检测极限为 31μmol/ L ;平均重现率为 98.4 %。新生儿血苯丙氨酸水平正常参考范围 :31～ 12 0 μmol/ L。 2 8例经典苯丙酮尿症和 8例持续性高苯丙氨酸血症患儿血苯丙氨酸平均含量分别为 186 7μmol/ L(s=4 0 9.8)和 76 9μmol/ L(s=2 2 6 .2 ) ,三者间有显著性差异 P<0 .0 0 1。患儿治疗前后苯丙氨酸平均含量有明显差异 P<0 .0 0 1。结论 :微量荧光法定量准确操作简便适于 PKU诊治观察     

时间分辨荧光免疫分析法检测甲胎蛋白的临床应用

目的:评价时间分辨荧光免疫(TRF)分析法检测甲胎蛋白(AFP)的临床应用。方法:对血清标本做批内批间重复性测定、回收试验及TRF分析法与放射免疫分析法进行AFP对比测定。结果:用高、中、低3种浓度AFP标准品进行批内测定,n=10 ,所得结果计算CV值,分别为2 .8% ,3.1%和3.6 % ;批间连测10 d,CV值分别为3.36% ,3.8%和4 .2 %。回收试验回收率为95 .8%～10 2 .6 %。2种方法呈正相关,回归方程Y=0 .988+0 .938X,r=0 .986 9。临床应用对16 1例临床血清标本(其中女性87例,男性74例)进行检测,结果稳定可靠。结论:酶免疫法作定量检测,误差较大且酶标记物不稳定;放射免疫法因其具有放射性而污染环境;化学发光免疫法其灵敏度、精密度高,但其仪器、试剂价格较高,不适用于中小医院开展。TRF分析法检测AFP灵敏度高、重复性好、不污染环境是取代酶免疫法和放射免疫法的最佳免疫分析技术。     

含吐温α—萘磷酸盐速率法测定酸性磷酸酶

应用国产酸性磷酸酶测定试剂添加吐温增溶,使反应呈色试液透明,从而确立了结果可靠的血清酸性磷酸酶测定法。本法酶反应产物的显色化合物最大吸收波长仍为405nm,批内CV=2.2%～3.6%;批间CV=3.2%～3.4%;线性范围至少在0～42u L。正常参考值(X±2s).男性为5.7～9.7u/L,女性4.9～8.4u/L,本法(Y)与Bessey·Lowry法(X)法比较结果相一致(Y=1.026X 1.5,n=30)。本法反应液完全透明。准确性可靠,重复性好。     

ELISA法定量测定血清AFP的价值

建立了血清学标志物AFP的ELISA定量测定法。灵敏度为 10ng/ml,线性范围为 10～4 0 0ng/ml;批内变异系数分别为 3 9%、6 3%和 8 7% ;批间变异系数分别为 4 7%、7 1%和9 2 %。平均回收率为 95 7%。该法与放射免疫法比较 :r =0 .9687,^y =1.0 2 7x 2 .0 1,t =0 .370 2 ,p >0 .0 5。该法没有同位素污染 ,所用试剂效期长 ,不需特殊设备 ,操作简便 ,容易掌握。     

电化学发光免疫分析法测定血清胰岛素效果评价

①目的　探讨电化学发光免疫分析 (ECLIA)法测定血清胰岛素的效果及临床应用价值。②方法采用ECLIA法和放射免疫分析 (RIA)法分别测定糖尿病病人的血清胰岛素含量 ,并用酶联免疫法 (ELISA)测定C 肽含量 ,并对测定结果进行分析比较。③结果　ECLIA法测定胰岛素的批内与批间变异系数分别为 1.97% ,2 .5 6 % ,平均回收率是 99.5 % ;RIA法的批内与批间变异系数分别为 10 .18% ,13.2 1% ,平均回收率是 93.4 % ;E CLIA及RIA法所测胰岛素含量与ELISA法所测C 肽含量均呈正相关 (r =0 .94 ,0 .91,P均 <0 .0 1)。④结论ECLIA法测胰岛素的各技术参数优于RIA法 ,该方法能较好评价胰岛B细胞功能 ,且操作简便 ,检测速度快 ,具有重要临床应用价值。