锰的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经元细胞进行微团培养,研究了锰的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示锰的半数存活抑制浓度（ＩＣＶ５０）为１８．０μｍｏｌ／Ｌ。染毒组的细胞集落形成率降低,细胞体积小,细胞间神经纤维减少等形态学变化,其中前者呈剂量－效应关系,表明锰可抑制胚胎神经元细胞的分化,半数分化抑制浓度（ＩＣＤ５０）为１０．０μｍｏｌ／Ｌ１半数存活抑制浓度与半数分化抑制浓度的比值（Ｖ／Ｄ）均大于１     

氟化钠的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养（微团试验）研究了氟化钠（ＮａＦ）的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示ＮａＦ的半数存活抑制浓度（ＩＣＶ５０）为１５．０μｇ／ｍｌ。染毒组的细胞集落形成率降低，细胞体积小，细胞间神经细胞纤维减少，其中前者呈剂量－效应关系，表明ＮａＦ可抑制胚胎神经细胞的分化，半数分化抑制浓度（ＩＣｄ５０）为３．０μｇ／ｍｌ，半数存活抑制浓度与半数分化抑制浓度的比值（ｖ／ｄ）大于５．０。本研究表明抑制细胞分化可能是ＮａＦ致发育危害的重要作用机理     

氟化钠的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养了氟化钠的细胞生及其对神经元分化的细胞毒性试验提示ＮａＦ的半数存活抑制浓度为１５．０μｇ／ｍｌ。染毒组的细胞集落形成率降低，细胞体积小，细胞间神经细胞纤维减少，其中前者呈剂量－效应关系，表明ＮａＦ可抑制胚胎细胞的分化，半数分化抑制浓度为３．０μｇ／ｍｌ，半数存活抑制２与半数分化抑制浓度的比值大于５．０。本表明抑制细胞分化可能是ＮａＦ致发育危害的重要作用机理。     

丙烯腈对胚胎大鼠脊髓神经细胞毒性作用的研究

目的：研究丙烯腈(ACN)对脊髓神经细胞分化和增殖的毒性效应关系，并探讨其机制。方法：采用大鼠胚胎脊髓神经细胞进行原代微团培养，观察不同浓度0．02、0．2、2．0、20．0、40．0、60．0、80．0、100．0μmol／L的丙烯腈(ACN)对细胞分化增殖的影响，并利用图象分析细胞形态变化及MTT测定细胞活性。结果：各组丙烯腈明显抑制脊髓神经细胞的增殖和分化，集落形成率明显减少，细胞体积小。其半数分化抑制浓度(ICD50)25μmol／L，半数存活抑制浓度(ICV50)为55μmol／L，并显示浓度效应关系。结论：丙烯腈能抑制脊髓神经细胞的增殖和分化，可能是与其抑制蛋白质合成。     

氯化锂对大鼠胚胎中脑神经细胞毒性作用的研究

目的：研究氯化锂的体外致畸作用，探测氯化锂的体外毒性作用结果判断标准。方法：取SD大鼠中脑神经组织，进行体外原代微团培养。分别加入不同浓度的氯化锂，在相差显微镜下观察细胞生长发育情况。结果：氯化锂对大鼠胚胎中脑神经细胞半数抑制分化浓度(ICD50)为8．6μg／ml，半数存活抑制浓度(ICV50)为6．4μg／ml。结论：微量元素锂对中脑神经细胞的半数分化抑制浓度(ICD50)为8．6μg／ml，(V／D)比值为1．3μg／ml。表明氯化锂只是一种细胞毒性物质，而非致畸物。     

神经生长因子对四氯化碳致毒性拮抗效应的初步探讨

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养,研究神经生长因子（NGF2．5S）对不同浓度的四氯化碳（CCl4）致毒性拮抗效应．观察细胞分化以及细胞形态的影响同时做了CCl4的毒性试验并与正常细胞分化进行了比较。结果表示,染毒组的细胞集落数形成率明显降低,细胞体积小．细胞间神经纤维减少．表明CCl4可抑制胚胎中脑神经细胞的分化．其半数生长抑制浓度（ICV50）为10．0μmol／L,并显剂量-效应关系。当NGF2.5S和CCl4混合后,在低浓度的CCl4情况下,微团中的集落形成率有明显的增加．ICV50为50．0μmol／L时,NGF2．5S也能促进细胞分化的功能．因此．NGF2.5S对CCl4有一定的拮抗效应。     

苯对小鼠胚胎肢芽和中脑细胞分化与增殖的影响

目的 探讨苯对胚胎肢芽、中脑细胞分化和增殖的影响及对肢芽器官发育的影响.方法 分离12d龄小鼠胚胎肢芽和中脑细胞进行微团培养,观察肢芽和中脑细胞的分化与增殖;结果 随着苯染毒浓度的增加,胚胎肢芽细胞分化为软骨细胞的集落数逐渐减少,中脑细胞形成神经集落数减少、体积小,集落细胞间突起数量减少,肢芽细胞和中脑细胞增殖率下降,均具有较明显的剂量-效应关系;苯对肢芽细胞的半数分化抑制浓度(dID50)和半数增殖抑制浓度(pID50)分别为89.93μmol/L和396.77μmol/L,对中脑细胞的dID50和pID50分别为116.29μmol/L和831.46μmol/L,对细胞分化的抑制作用大于对增殖的抑制作用.结论 苯对胚胎中脑及肢芽细胞的分化和增殖有特异性抑制作用,可能对胚胎骨和脑具有发育毒性.     

神经生长因子对四氯化碳致毒性拮抗效应的初步探讨

利用大鼠胚胎中脑神经细胞原代微团培养,研究神经生长因子（ＮＧＦ２．５Ｓ）对不同浓度的四氯化碳（ＣＣｌ４）致毒性拮抗效应,观察细胞分化以及细胞形态的影响,同时做了ＣＣｌ４的毒性试验并与正常细胞的分化进行了比较,结果表示,染毒组的细胞集落数形成率明显降低,细胞体积小,细胞间神经纤维减少,表明ＣＣｌ４可抑制胚胎中脑神经细胞的分化,其半数生长抑制浓度（ＩＣＶ５０）为１０．０μｍｏｌ／Ｌ,并显剂量－效应关系     

四氯化碳对胚胎神经细胞分化和膜结构的影响

用大鼠胚胎中脑物经细胞作原代微团培养,培养物经不同浓度四氯化碳染毒,研究四氯化碳对细胞分化的影响,并用扫描电镜观察细胞形态和膜结构的变化。结果表明,处于分化前期的胚胎中脑细胞经5天培养形成细胞集落,用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫化学法鉴定,集落中的细胞是已分化的神经元细胞。四氯化碳可抑制细胞分化,并显示剂量——效应关系,其半数生长抑制浓度(ICV50)和半数分化抑制浓度(ICd50)分别为10.0和1.0μmol/L,V/D值为10。扫描电镜显示四氯化碳可引起细胞形态的改变和膜结构的损伤。经四氯化碳染毒的细胞脂质过氧化作用增强,并与细胞膜被破坏的程度一致。认为四氯化碳具体外细胞致畸作用。     

丙烯腈对体外培养鼠胚胎肢芽细胞增殖分化的研究

目的：研究丙烯腈(actylonitrile,ACN)对大鼠胚胎肢芽细胞增殖分化的影响。方法：13d的大鼠胚胎脊髓组织,经取材、分离、消化后作原代细胞培养,加入不同浓度的ACN0．01,0．1,1．0,10．0,50．0,100．0,200．0μg／ml,从细胞形态学及细胞计数角度观察细胞生长与分化过程,同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性并与对照组进行比较。结果：各组ACN明显抑制胚胎肢芽细胞的增殖和分化,集落形成率明显减少,细胞体积小;其半数分化抑制剂量(ICD50)为29μg／ml,半数存活抑制剂量(ICV50)为42μg／ml,均显示剂量效应关系。结论：ACN能抑制胚胎肢芽细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成,并引起脂质过氧化有关。     

半夏总生物碱对人乳腺癌细胞增殖的抑制作用

目的探讨半夏总生物碱(total alkaloids from pinellia ternate,TATP)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S增殖的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolil tetracolium,MTT)比色法以及集落形成率实验,检测不同浓度的TATP对MDA-MB-435S细胞株的生长抑制作用。应用单细胞凝胶电泳分析检测TATP导致MDA-MB-435S细胞的DNA损伤情况。结果人乳腺癌细胞MDA-MB-435S经TATP处理后,其体外增殖能力受到明显抑制且与药物剂量、作用时间呈正相关,经TATP作用24、48、72h后的半数抑制浓度分别为:98.37μg/ml、52.16μg/ml、33.63μg/ml。单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE)中,TATP组细胞尾DNA含量、尾长及尾动量与对照组有统计学差异(P<0.01),且呈现浓度依赖性。结论在体外培养条件下,TATP能明显抑制MDA-MB-435S细胞增殖,其机制可能与DNA的损伤作用有关。     

4种源于虎皮楠的生物碱对人肝癌细胞株HepG-2增殖的影响

目的研究源于虎皮楠的生物碱对HepG-2增殖的影响。方法采用MTT法测定源于虎皮楠的生物碱对HepG-2细胞的抑制率及IC50。结果有4种生物碱可显著抑制HepG-2细胞增殖,作用72h后,IC50分别为3.874、1.671、0.745、2.954μg/mL,并有明显的时效和量效关系。结论虎皮楠中提取的生物碱在体外具有明显的抑制HepG-2细胞增殖的作用。     

杀虫脒和双甲脒对大鼠前脑α2—肾上腺受体结合抑制效应的研究

Chlordimeform (CDM) and Amitraz (AMZ) are two formamidine pesticides. CDM and AMZ inhibited the binding of 3H-Clonidine, 3H-Yohimbine to Alpha 2-adrenoreceptor of rat forebrain tissue in vitro with IC50 values of 62-68 mumol/L (CDM) and 95-110 mumol/L (AMZ). In vivo the administration of CDM and AMZ by ip showed the effect of inhibition on the binding and significant correlation of dose-effect r = 0.995 (CDM), 0.884 (AMZ). Time course test indicated that the lasting inhibition effect of CDM following exposure was shorter than AMZ. Similar results were observed with plasma in vitro. Comparing inhibition effects on rat forebrain tissue, directly induced by CDM and AMZ at different doses, with the results from the plasma of treated rats in vitro, there was a significant correlation r = 0.973 (CDM), 0.909 (AMZ). It showed that the inhibition effect of both CDM and AMZ was linked to the concentration of compounds chemical and their metabolites in blood. Time course and washing test indicated that the inhibition effect by CDM and AMZ was reversible.     

硫酸软骨素纳米硒可抑制T-2毒素诱导的大骨节病软骨细胞凋亡

目的确定硫酸软骨素纳米硒对T-2毒素干预体外大骨节病软骨细胞生长的影响。方法合成并表征硫酸软骨素纳米硒粒
子,依据《大骨节病临床诊断标准》（WS/T 207-2010）,选择Ⅱ/Ⅲ度KBD患者6例关节软骨进行体外分离、培养。分别给予硫酸
软骨素纳米硒联合T-2毒素进行干预,采用MTT、HE染色和流式细胞仪观察细胞生长和凋亡的变化。结果合成的硫酸软骨素
纳米硒中硒的含量为10.1%,可在蒸馏水中自组装成粒径为30~200 nm纳米粒子,红外图谱提示纳米硒与硫酸软骨素可能以共
价键的方式结合;硫酸软骨素纳米硒在浓度为50~200 ng/ml可有效抑制20 ng/ml T-2毒素诱导大骨节病软骨细胞的凋亡作用,
降低T-2毒素诱导软骨细胞的早期凋亡率［（8.64±1.57）%,P<0.05］。结论硫酸软骨素纳米硒具有抗T-2毒素诱导软骨细胞凋亡
的作用,可作为一种潜在的治疗大骨节病的药物制剂。
     

羟基喜树碱诱导非小细胞肺癌细胞株凋亡实验研究

目的 应用流式细胞仪观察羟基喜树碱对非小细胞肺癌细胞株体外生长的影响,了解羟基喜树碱对非小细胞肺癌细胞株的效应,为临床治疗非小细胞肺癌提供理论依据.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,测定HCPT对非小细胞肺癌细胞株EBC-1和A-549的生长及集落形成的抑制作用,并绘制量-效曲线.流式细胞仪检测羟基喜树碱诱导非小细胞肺癌细胞株凋亡.结果 羟基喜树碱对非小细胞肺癌细胞株的集落形成抑制试验明显呈剂量依赖性,HCPT和DDP对EBC-1(鳞状上皮)和A549(腺癌)的24h的50%抑制浓度(IC50)分别为67ng/L和154ng/L;4 950ng/L和58 101ng/L,明显高于顺铂(P＜0.01),羟基喜树碱可诱导EBC-1和A549细胞株发生S G2/M期阻滞,HCPT引起凋亡,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 羟基喜树碱可显著诱导非小细胞肺癌细胞株发生凋亡,对EBC-1和A549细胞株体外增殖有明显抑制作用.     

反义BCR/ABL寡核苷酸体外抑制K562细胞的研究

目的：探讨反义ＢＣＲ和ＡＢＬ融合基因（ＢＣＲ／ＡＢＬ融合基因）寡核苷酸体外抑制Ｋ５６２细胞的作用及机制。方法：采用Ｋ５６２细胞培养,观察反义ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸体外对Ｋ５６２细胞数、台盼蓝拒染率及克隆形成等的影响。结果：经反义ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸ｂ３ａ２（ＡＳｂ３ａ２）处理后培养８ｄ的Ｋ５６２克隆抑制率达６０６９％,液体培养中细胞数从２４ｈ开始较对照组减少,细胞存活率从８ｈ开始即较对照组明显下降,ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸ｂ２ａ２（ＡＳｂ２ａ２）及无义寡核苷酸对Ｋ５６２细胞数和存活率无明显影响;３种寡核苷酸对ＨＬ６０细胞数和存活率也无影响。结论：ＡＳｂ３ａ２对Ｋ５６２细胞有序列特异性的抑制作用。ＡＳｂ３ａ２的这种抑制作用可能在于它诱导Ｋ５６２细胞的凋亡。     

神经生长因子对胚胎神经细胞分化的影响

利用大鼠胚胎中脑细胞作原代微团培养，研究了不同浓度的神经生长因子（ＮＧＦ２．５ｓ）对中脑细胞分化的影响。结果表明：微团中的集落形成率明显增加，并且显示了剂量一效应关系。我们认为神经生长因子（ＮＧＦ２．５ｓ）能促进中脑细胞的生长。     

蛞蝓提取物抑制A549细胞及其小鼠移植瘤的生长

目的观察蛞蝓提取物（LE）对体外培养人肺癌（A549）细胞及其小鼠移植瘤生长的影响。方法运用平皿集落形成法,检测LE对A549细胞锚定依赖性生长的影响;通过光镜观察LE对小鼠移植瘤的组织形态改变;小鼠移植瘤模型治疗实验评估LE在体治疗肺癌的有效性。结果LE可抑制体外培养A549细胞锚定依赖性生长,呈剂量依赖性。LE腹腔注射给药能导致小鼠移植瘤组织的局灶性坏死;50mg／kg,100mg／kgLE腹腔注射给药具有抑制小鼠移植瘤生长作用。结论蛞蝓提取物对人肺癌A549细胞有生长抑制作用。     

人胚胎干细胞体外培养及特性分析

目的探讨人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)的体外培养及其特性。方法 hESCs接种于饲养层细胞,培养液为含20%Knockout SR的Knockout DMEM,其中添加10 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),通过观察细胞形态、免疫细胞化学技术分析hESCs表面标志分子SSEA-3、SSEA-4、SSEA-1和TRA-1-60的表达,鉴定hESCs的未分化状态;G显带技术分析细胞染色体核型。同时,通过分析hESCs体外形成胚胎体、体内生成畸胎瘤的情况,鉴定hESCs的分化潜能。结果 hESCs在饲养层细胞上呈克隆生长,细胞为二倍体核型。hESCs表达SSEA-3、SSEA-4、以及TRA-1-60细胞表面特征性标志。体内、外分化实验证实hESCs具备多分化潜能。结论 hESCs在体外培养条件下能够保持未分化状态和发育的全能性,为进一步探索hESCs的诱导分化,以及hESCs的应用研究提供可行性保证。     

BUT－6010的抗肿瘤活性实验研究

目的研究BUT-6010对肿瘤的抑制作用。方法体外抗肿瘤实验：选取9种人源肿瘤细胞株,并将其分为BUT-6010组、顺铂阳性对照组、细胞对照组和培养基空白对照组,MTS法测定抑制率和IC50值;体内抗肿瘤实验：实验分为BUT-6010 10mg／kg组、BUT-6010 20mg／kg组、BUT-6010 30mg／kg组、顺铂阳性对照组（2．5mg／kg）和模型组。通过对S180荷瘤小鼠瘤重的研究,观察BUT-6010的体内抗肿瘤作用。结果BUT-6010对9种人癌细胞株的IC50均小于顺铂。顺铂（2．5mg／kg）的抑瘤率达51．8％（P〈0．05）,BUT-6010（30mg／kg）抑瘤率为52．8％（P〈0．05）。结论BUT-6010（30mg／kg）的安全性与有效性同顺铂（2．5mg/kg）相当。