辽宁省丹东市鸭绿江沿岸2007年虫媒病毒分离鉴定

目的了解辽宁省丹东市鸭绿江沿岸虫媒病毒的种类和分布情况。方法使用诱蚊灯捕蚊,通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定。结果 2007年7月在辽宁省丹东市鸭绿江沿岸6个采集点采集到3属3种共3359只蚊虫标本,从中分离到11株病毒分离物,鉴定结果显示有5株为版纳病毒,3株为环状病毒样病毒,其余3株分离物有待进一步鉴定;版纳病毒新分离株序列分析结果显示,5株版纳病毒之间第12片段序列高度同源,核苷酸同源性为92.1%～99.8%;氨基酸同源性为92.8%～99.5%;并且与北京分离株和云南分离株同源性较高,核苷酸同源性为91.3%～98.7%;氨基酸同源性为90.8%～100%;系统进化分析提示,版纳病毒新分离株与北京、云南分离株位于同一个进化分支中。结论在辽宁省丹东市鸭绿江沿岸首次分离到版纳病毒和环状病毒样病毒,新分离版纳病毒与北京、云南分离株进化关系较近。     

贵州省不同地区2008年虫媒病毒调查

目的调查贵州省不同地区虫媒病毒分布状况,对采集的蚊虫标本进行病毒分离与鉴定。方法 2008年7月在贵州省黔西、德江、榕江和从江县的4个标本采集点使用诱蚊灯采集蚊虫标本,通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定;利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。结果采集到3属4种共计9160只蚊虫标本,从中分离到9株病毒,鉴定结果显示8株为盖塔病毒,1株为流行性乙型脑炎病毒(JEV);贵州省新分离盖塔病毒与原型株相比,核苷酸同源性为94.5%～94.9%,氨基酸同源性为97.4%～97.6%;新分离JEV与基因Ⅰ型JEV的同源性最高,系统进化分析结果显示属于基因Ⅰ型JEV。结论在贵州省分离到盖塔病毒和基因Ⅰ型JEV。盖塔病毒新分离株与我国其他省份分离株进化关系较近;JEV新分离株与四川省分离株进化关系较近。     

四川省虫媒病毒调查研究

目的通过对四川省虫媒病毒调查,了解乙脑主要流行区蚊虫及其虫媒病毒的分布状况,为防制提供依据。方法 2006-2008年在调查点蚊虫孳生高峰期采集蚊虫标本,进行分类鉴定,并用BHK细胞分离病毒,连续3代观察细胞病变情况;收获细胞病变阳性分离物进行血清学和分子生物学鉴定;采用MEGA3.1生物学软件完成氨基酸序列和病毒进化树分析。结果三带喙库蚊和骚扰阿蚊为乙脑流行区优势种群,分离11株虫媒病毒,其中8株经IFA和RT-PCR鉴定为乙脑病毒(JEV),均属于基因Ⅰ型JEV。E基因区段核苷酸和氨基酸比较发现,8株病毒之间核苷酸和氨基酸同源性分别为98.1%～100.0%和99.7%～100.0%;与2004年四川分离株的核苷酸同源性在97.8%～99.6%,氨基酸同源性在99.3%～100.0%。另外3株病毒在BHK细胞上出现病变时间较JEV快,用20种不同种属的虫媒病毒免疫腹水IFA鉴定和相关的引物进行PCR扩增,结果均为阴性。结论在四川省乙脑流行区有5种蚊虫,其中三带喙库蚊和骚扰阿蚊为优势种群,乙脑病毒由三带喙库蚊携带,其E区核苷酸和氨基酸相对保守,有利于采取针对性防控措施。同时,分离出3株不能鉴定的虫媒病毒,提示为我国不常见种型或尚未发现的新毒种,其生物学特性和对人类的致病性有待进一步研究。     

辽宁省部分地区2006年虫媒病毒分离鉴定

目的 调查辽宁省虫媒病毒的种类及分布.方法 2006年8月在辽宁省沈阳市、营口市、盘锦市、锦州市和丹东市采集蚊虫标本,利用组织细胞培养分离病毒,对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定.结果 5个市共采集蚊虫标本5410只,分离到8株阳性分离物,经鉴定其中3株(LN0684、LN0688、LN0689)为版纳病毒,1株(LN0636)为甲病毒属盖塔病毒,另外4株尚在鉴定.新分离的版纳病毒与我国此前的分离株处于同一个进化簇,核苷酸同源性91.2%～94.7%.新分离的盖塔病毒与韩国分离株(swine)在一个进化枝上,核苷酸同源性为99.2%,与俄罗斯分离株、中国大陆分离株及台湾分离株的核苷酸同源性在95%～99%之间.结论 2006年在辽宁省分离到3株版纳病毒、1株盖塔病毒和4株未知虫媒病毒.版纳病毒、盖塔病毒为辽宁省首次分离;盖塔病毒核苷酸同源性和韩国分离株最近.     

新型肠道病毒EV75的分子生物学鉴定

人类肠道病毒（HEV）由80多个血清型组成，分为5个组：脊髓灰质炎（脊灰）病毒和肠道病毒A～D组。对肠道病毒进行鉴定的金标准是用敏感的细胞系培养和分离病毒，继而用肠道病毒组合血清进行鉴定。但该法耗时、繁琐，且组合血清只能鉴定常见的一些病毒，无法对所有病毒特别是新型肠道病毒进行鉴定。最近文献报道，通过测定肠道病毒基因组VP1区的部分或整个序列，     

日本脑炎病毒

本文叙述分离和鉴定日本脑炎病毒的各种检验技术。分离与鉴定:用急性期(5～7病日以内)死亡不久的脑组织来分离日本脑炎病毒,通常分离率为30～40%。由于取材不易,近来设计了一种特殊的脑穿刺针,从尸体的鼻腔穿过脑底骨,可取出脑底的部分组织。用这方法能分离到病毒。如用萤光抗体法也能检出病毒抗原。     

ECHO_(30)型病毒引起的小儿脑脑膜炎和脑炎流行的病原学调查

本文报道1991年5～8月上海地区发生小儿脑脑膜炎和脑炎流行,从患儿的粪便标本和脑脊液标本中分离到14株病毒,阳性率分别为46.43%和14.29%。分离病毒经特异血清鉴定为ECHO_(30)型,该型病毒对1日龄乳鼠染毒无致病性;耐酸、耐乙醚;毒粒呈球形,直径为25～27nm。根据患儿恢复期血清中抗新分离病毒代毒株的中和抗体平均几何滴度为急性期的15.13倍,新分离病毒代表株免疫血清对本病毒和ECHO_(30)型病毒原型株的中和抗体滴度仅2倍之差,从而确定ECHO_(30)型病毒为本次流行的病原体。     

2010年安徽省蚊虫标本分离到基因Ⅰ型流行性乙型脑炎病毒

目的在安徽省不同地区开展流行性乙型脑炎病毒(JEV)病原学调查,了解当地JEV的基因型别及分子特征。方法 2010年8月在安徽省阜阳、淮南、安庆市的3个标本采集点使用诱蚊灯采集蚊虫标本,通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定;利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。结果采集到3属3种共计7651只蚊虫标本,通过组织培养技术分离得到11株病毒分离物,鉴定结果显示均为基因Ⅰ型JEV。安徽省JEV新分离株与基因Ⅰ型JEV的同源性最高,核苷酸同源性为96.8%～99.5%,氨基酸同源性为97.8%～100%。结论在安徽省首次分离到基因Ⅰ型JEV,与我国上海市及浙江省JEV分离株进化关系较近。     

2012-2013年毕节市流行性感冒病毒流行趋势分析研究

目的分析2012-2013年毕节市流行性感冒病毒培养及鉴定结果,为临床提供准确的流行性感冒病毒感染诊断和治疗依据。方法于2012-2013年对国家级流行性感冒样病例监测哨点医院采集送检的流行性感冒样病例的鼻咽拭子,进行Real-time PCR流行性感冒病毒核酸检测,如为PCR核酸阳性结果,则采用狗肾上皮细胞(MDCK)培养法分离及鉴定流行性感冒病毒。结果 2012-2013年毕节市流行性感冒病毒监测中心共收到送检的流行性感冒样病例监测标本1 437份,经PCR流行性感冒病毒核酸检测出阳性281份,阳性率19.6%;培养及鉴定出流行性感冒病毒31株,培养阳性率11.0%,其中2012年2月-2013年1月流行性感冒病毒核酸检测阳性104份,共培养及鉴定出流行性感冒病毒9株,培养阳性率8.7%,9株流行性感冒病毒鉴定分型,BY流行性感冒病毒1株、BV流行性感冒病毒3株、H3N2亚型流行性感冒病毒5株;2013年2月-2014年1月流行性感冒病毒核酸检测阳性177份,共培养及鉴定出流行性感冒病毒22株,培养阳性率12.4%,22株流行性感冒病毒鉴定分型,BY流行性感冒病毒12株、新H1N1亚型流行性感冒病毒10株。结论 2012年2月-2013年1月毕节市流行性感冒病毒以H3N2亚型和B型流行为主,2013年2月-2014年1月毕节市流行性感冒病毒以BY和新H1N1亚型流行为主,其中B型流行性感冒病毒为这两年的流行毒株。     

用RT—PCR快速检测血清中的登革热病毒及分型

目的：检测血清中的登革热（DF）病毒．并进行分型研究。方法：采用SiO2快速提取DF病毒RNA，用通用引物（D1～D4型）RT－PCR扩增方法，检测广东省1995年55份疑似DF患者急性期（1～7天）血清标本中的DF病毒RNA，并与病毒分离法相比较。结果；病毒分离阳性率为49．09％，RT－PCR的检出率为38．18％，敏感性为77．78％，特异性为100％，符合率为89．09％，两者差异无显著性（X2＝2．08，P＞0．05）。用通用引物扩增D1～D4型标准毒株和标本，出现511bp的扩增带，乙脑病毒不出现扩增带。用HinfⅠ、HaeⅢ、HincⅡ和Sau3aⅠ等4种限制性内切酶，对D1～D4型标准毒株的RT－PCR产物进行酶切分型，用琼脂糖电泳，结果HinfⅠ和HaeⅢ对D1～D4型均能酶切，Sau3aⅠ能酶切D1～D3型，HincⅡ能酶切D1和D4型。根据两种或以上的酶切结果，可以对DF病毒的型别作出鉴定。用这4种酶对5份标本进行酶切分型，结果与D1型标准毒株的电泳带型相同。结论：用本方法检出DF病毒的RNA仅需5～6小时，在2天内可以鉴定出型别，是诊断DF病毒感染的一种快速简单的方法。     

1996 outlook: systems, for-profit chains, medical groups, religious healthcare, managed care, post-acute care, finance, purchasing, info systems, labor, legal, construction

It's put-up-or-shut-up time for healthcare providers in 1996. Two years ago, everyone talked about fixing the healthcare system. Not much happened. Last year, providers and politicians concentrated on squeezing medical costs. According to some of Modern Healthcare's key beat reports, this year it's back to the basics of running a business.