hTERT基因反义核酸对K562细胞端粒酶活性的影响

探讨人类端粒酶逆转录酶（ｈｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ,ｈＴＥＲＴ）基因的反义寡核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓ ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ,ＡＳＯＮＤ）对Ｋ５６２细胞端粒酶活性的影响。方法：采用多聚酶链反应－酶联免疫测定（ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ）方法检测人工合成的反义脱氧寡核苷酸处理Ｋ５６２细胞前后端粒酶活性的改变,以逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）分     

中国南方鼻咽鳞状细胞癌与EB病毒感染的关系

目的：探讨中国南方鼻咽癌高发区鼻咽鳞状细胞癌或称角化性鳞状细胞癌（Ｋｅｒａｔｉｎｉｚｉｎｇ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＫＳＣＣ）是否也如非角化性癌那样与ＥＢ病毒感染有密切的关系。方法：应用ＰＣＲ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ、原 位分子杂交和免疫组化法检测３８例鼻咽鳞状细胞癌细胞中有ＥＢ病毒ＤＮＡ及其产物ＥＢＮＡ－１,ＥＢＮＡ－２,ＥＢＥＲＳ,ＬＭＰ－１,ＺＥＢＲＡ,Ｅ     

大肠癌淋巴结微转移基因检测的意义

目的：应用反转录聚合酶链反应（ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ,ＲＴ－ＰＣＲ）法检测大肠癌的淋巴结微转移。方法：１７例行根治性手术的大肠癌患者,应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测切除的２０５个淋巴结中细胞角蛋白２０（ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ２０,ＣＫ２０）ｍＲＮＡ的表达,另取４例良性胃肠道疾病患者的３１个淋巴结作为阴性对照;并采用系列稀释试验检测本法     

Cx基因在胃癌细胞株中的表达及诱导分析

目的：探讨胃癌细胞株ＭＧＣ８０３在全反式维甲酸（ａｌｌ－ｒａｎｓ－ｒｅｔｉｎｏｉｃ,ＲＡ）、佛波酯（ｐｈｏｒｂｌｏ ｅｓｔｅｒ,ＴＰＡ）及二甲基亚砜（ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ,ＤＭＳＯ）３种诱导剂分别作用后,胃癌细胞中间隙连接蛋白（ｃｏｎｎｅｘｉｎ,Ｃｘ）基因表达变化。方法;采用比较多重ＲＴ－ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法检测。结果：维甲酸、二甲基亚地胃癌细胞基因组中Ｃｘ４３基     

子宫卵巢性索样肿瘤免疫组化研究

（目的）探讨子宫卵巢性索样肿瘤的组织发生学。（方法）应用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测１８例子宫卵巢性索样肿瘤石蜡切片中Ｋｅｒａｔｉｎ,ＥＭＡ,ＣＥＡ,Ｖｉｍｅｒｔｉｎ,Ａｃｔｉｎ,Ｄｅｓｍｉｎ,Ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ,ＣＤ３４,Ｓ－１００和ＮＳＥ１０种标记。（结果）性索上皮样细胞团ＶｉｍｅｒｔｉｎＡｃｔｉｎ１８例阳性,Ｄｅｓｍｉｎ１６例阳性,ＮＳＥ４例阳性,ＣＫ和ＥＭＡ各２例阳性,子宫内膜间质样细胞区Ｖ     

消化管类癌恶性程度与基因产物表达的相关性研究

目的 研究消化管类癌中分化抗原（ｃｈｒｏｍｏｇｒａｎｉｎＡ）,浸润转移相关抗原ｕｒｏｋｉｎａｓｅ,培殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）及细胞凋亡相关抗原ＢＭ－１的表达与该肿瘤恶性程度的关系。方法 应用免疫组化技术（ＳＡＢ法）检测随访８年以上的１３例（其中无转移９例,其他器官转移４例）消化管类癌肿瘤组织ｃｈｒｏｍｏｇｒａｎｉｎＡ,ｕｒｃｋｉｎａｓｅ,ＰＣ－ＮＡ及ＢＭ－１的表达状况,并分析这些基因产物表达与该肿     

大蒜素和亚硒酸钠对结肠癌细胞微卫星序列不稳定的抑制作用

目的：以ＲＥＲ（ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｅｒｒｏｒ）表型的结肠 主靶细胞,研究大蒜素（ｄｉａｌｌｙｌｉｒｉｓｕｌｆｉｄｅ,ＤＡＴ）和亚硒酸钠对肿瘤细胞微卫星序列（ｍｉ＃ｅｒｏｓａｔｅｌｌｉｒｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ,ＭＳ）突变的影响。方法：将含有外源性ＭＳ,（ｃａ）１４,的穿梭质粒ｐＣＭＶ－ＣＡＲ转染ＲＥＲ＾＋或ＲＥＲ－结肠癌细胞株ＲＫＯ或ＳＷ４８０。外源性（ｃａ）１４的突变可使质料标记基因ＬａｃＺ恢     

胃癌c－Ha－ras基因突变分析方法的建立及临床应用研究

本文应用多聚酶ＤＮＡ链延伸反应产物限制性酶切片段多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）和单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）两种方法同时检测了２０例胃癌中ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变．本文显示ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ均是检ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变的简便、快速和敏感的方法，适用于临床大批量肿瘤标本的检测。     

ｄｄＰＣＲ与 ＡＲＭＳ-ＰＣＲ检 测 ＮＳＣＬＣ患者ＥＧＦＲ基因Ｔ７９０Ｍ突变的比较研究

目的：通过对比微滴式数字 ＰＣＲ（ｄｒｏｐｌｅｔｄｉｇｉｔａｌＰＣＲ,ｄｄＰＣＲ）和突变扩增阻滞系统 ＰＣＲ（ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅｆｒａｃ ｔｏｒｙｍｕｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍＰＣＲ,ＡＲＭＳ ＰＣＲ）检测非小细胞肺癌（ｎｏｎ ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）表皮生长因子受体（ｅｐｉ ｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＥＧＦＲ）基因 Ｔ７９０Ｍ突变的检测效能,综合分析两种检测方法的优势及适用范围。方法： 回顾性收集 １１５例 ＮＳＣＬＣ患者的标本,同时使用 ｄｄＰＣＲ和 ＡＲＭＳ ＰＣＲ两种方法检测 ＥＧＦＲ基因 Ｔ７９０Ｍ突变状态, 比较两种方法的检测结果,并分析不同样本类型对 ｄｄＰＣＲ检测结果的影响。结果：ｄｄＰＣＲ检测 Ｔ７９０Ｍ阳性率为 ６５．２％,ＡＲＭＳ ＰＣＲ阳性率为 ２７．８％,ｄｄＰＣＲ检测敏感性显著高于 ＡＲＭＳ ＰＣＲ（Ｐ＜０．０５）,两种方法检测一致率为 ６２．６％。ｄｄＰＣＲ＋ＡＲＭＳ－样本的 Ｔ７９０Ｍ平均阳性微滴数和平均突变丰度（１１,０．３５％）均显著低于 ｄｄＰＣＲ＋ＡＲＭＳ ＋样本（６３２．３,１７．７％）。ｄｄＰＣＲ检测基因组 ＤＮＡ和外周血游离 ＤＮＡ阳性率分别为 ５５．９％和 ７８．７％,不同样本类 型 Ｔ７９０Ｍ突变阳性微滴数和突变丰度无显著差别。结论：ｄｄＰＣＲ和 ＡＲＭＳ ＰＣＲ均可用于 ＮＳＣＬＣ患者 ＥＧＦＲ基因 Ｔ７９０Ｍ突变检测,二者具有良好的一致性,ｄｄＰＣＲ具有更高的灵敏性,在检测突变丰度较低的样本方面具有优势。     

食管癌APC／MCC,DCC的基因杂合丢失的研究

目的 研究ＡＰＣａｄｅｎｏｍａｔｏｕｓ ｐｏｌｙｐｏｓｉｓ ｃｏｌｉ）,ＭＣＣ（ｍｕｔａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ和ＤＣＣ（ｄｅｌｅｔｅｄ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｒ）基因在人食管癌组织中的变化。方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及限制性片段长度多态现象（ＲＦＬＰ）法检测了４６例食管癌组织中ＡＰＣ、ＭＣＣ和ＤＣＣ基因的杂合缺失。结果 ＡＰＣ、ＭＣＣ和ＤＣＣ位点的杂     

大肠癌患者外周血中细胞角蛋白19和癌胚抗原的表达及临床意义

目的:应用巢式逆转录聚合酶链反应（nested RT-PCR）技术检测大肠癌患者外周血中CK19 mRNA、CEA mRNA的表达及临床意义,探讨其作为大肠癌微转移检测分子标记物的可能性。方法:应用巢式RT-PCR技术检测20例健康人、20例大肠腺瘤疾病患者和90例大肠癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA的表达。结果:大肠癌组CK19 mRNA和CEA mRNA表达的阳性率为58.89%（53/90）和53.33%（48/90）;20例健康人外周血中无CK19 mRNA和CEA mRNA的表达; 20例大肠腺瘤疾病患者有1例CK19 mRNA的表达,阳性率为5.00%（1/20）,无CEA mRNA的表达。大肠癌患者中CK19 mRNA、CEA mRNA的阳性率与肿瘤分期及肿瘤转移有显著相关性（P＜0.05)。结论:CK19 mRNA和CEA mRNA作为检测大肠癌患者外周血微转移的分子标记物具有良好的敏感度和特异性,同时可作为判断大肠癌患者的预后指标。     

乳腺癌患者外周血中CEA mRNA表达的检测及临床意义

目的探讨RT—PCR法检测乳腺癌患者外周血中的CEA mRNA表达的情况及在乳腺癌外周血微转移诊断中的应用。方法采用RT—PCR法,检测46例乳腺癌患者外周血中CEA mRNA表达情况,以良性乳腺疾病患者及健康志愿者外周血标本作为对照。结果46例乳腺癌患者外周血中CEA mRNA阳性率为32．6％。对照组中CEA mRNA表达均为阴性。CEA mRNA的阳性表达与患者的TNM分期、腋淋巴结状况差异有统计学意义（P〈0．05）,而与患者的年龄、原发肿瘤大小、病理类型以及激素受体状况等差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论CEA mRNA可作为标志物来检测乳腺癌患者外周血中微转移,有助于指导临床治疗及判断预后。     

早期乳腺癌CEA mRNA阳性循环细胞检测及其临床意义

[目的]研究早期乳腺癌外周血中CEAmRNA阳性循环肿瘤细胞的临床意义。[方法]检测50例早期乳腺癌患者、24例乳腺良性疾病患者和20例健康志愿者外周血CEAmRNA阳性细胞。[结果]早期乳腺癌患者外周血CEAmRNA阳性率为14．0％,CEAmRNA阳性率与TNM分期（P=0．004）、肿瘤大小（P=0．027）、血清CEA（P=0．000）水平异常升高显著性相关。CEAmRNA阳性患者中位无瘤生存期为18个月,与阴性患者比较差异有统计学意义（P=0．000）。[结论]CEAmRNA阳性循环肿瘤细胞可能是早期乳腺癌患者监测复发转移的重要指标和独立的预后因素。     

肺癌患者三种微转移标志物临床意义的比较研究

目的评价肺癌患者外周血LUNX mRNA 、CK19 mRNA、CEA mRNA诊断微转移的特异性、敏感性,探索肺癌患者微转移的早期诊断.方法以肺部良性疾病30例、健康人10例的外周血为对照,以LUNX mRNA 、CK19 mRNA、CEA mRNA的表达为指标,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测48例肺癌患者外周血、手术切除区域44个淋巴结的微转移,并根据淋巴结病理切片、临床分期、随访过程中复发转移率评价微转移的临床意义.结果①LUNX mRNA、CK19 mRNA、CEA mRNA在肺癌组织的表达率均为100%(35/35).②48例肺癌患者外周血中LUNX mRNA阳性30例(62.5%),CK19 mRNA阳性24例(50.0%),CEA mRNA阳性32例(66.7%);44枚肺癌患者手术切除的区域淋巴结,LUNX mRNA阳性16枚(36.4%),CK19 mRNA阳性12枚(27.3%),CEA mRNA阳性18枚(40.9%).③30例肺部良性疾病患者外周血中,CK19 mRNA表达阳性2例(6.7%),LUNX mRNA或CEA mRNA表达均阴性;10例健康人外周血和11枚取自肺良性疾病患者的淋巴结,3个指标检测结果均为阴性.④44枚肺癌区域淋巴结中,普通病理组织学检出6枚(13.6%)有癌转移,阳性率明显低于RT-PCR检测结果(P<0.05).⑤3种微转移指标的阳性率均随TNM分期的增加而升高(P=0.01).⑥随访发现外周血微转移阳性患者的复发率高于阴性患者.结论 LUNX mRNA、CK19 mRNA 、CEA mRNA有可能成为监测肺癌微转移的分子标志.     

胃癌患者外周血CEA mRNA表达相关病理因素分析

目的 探讨胃癌患者外周血CEA mRNA表达的相关病理因素.方法 对2004年1月至2004年6月手术治疗的38例胃癌患者外周血CEA mRNA表达进行检测,并回顾性分析胃癌患者年龄、性别、胃癌原发部位、大体类型、组织学类型、淋巴结转移以及胃癌组织p53和CerbB-2表达等临床病理因素与胃癌患者外周血CEA mRNA表达的关系.结果 胃癌患者外周血CEA mRNA表达的阳性率为60.5%（23/38）.单因素分析显示：胃癌患者外周血CEA mRNA表达与胃癌原发病灶部位（P〈0.05）、组织学类型（P〈0.05）及淋巴结转移（P〈0.05）相关;多因素Logistic回归分析表明：胃癌淋巴结转移、胃癌原发病灶部位为影响胃癌患者外周血CEA mRNA表达的独立因素.结论 胃癌血道转移的高危因素为胃窦癌和淋巴结转移.     

食管鳞癌患者外周血中APRIL mRNA的表达意义

目的采用实时荧光定量PCR方法检测食管鳞癌患者及正常对照外周血中APRIL mRNA、CEA mRNA水平。探讨外周血中APRIL mRNA与CEA mRNA的表达水平与肿瘤的病理分期及转移等临床诸因素的相关性,并探讨其临床意义。方法应用SYBR GreenⅠ荧光RT-PCR方法检测63例食管鳞癌患者APRIL mRNA和CEA mRNA术前3 d外周静脉血中的表达,并与20例健康人的外周血进行对比分析,建立荧光RT-PCR检测外周血APRIL mRNA、CEA mRNA的方法,并将结果与肿瘤的临床病理、转移等诸因素进行相关性分析。结果63例食管癌患者外周静脉血中CEA mR-NA的阳性率为68.3%,APRIL mRNA为65.1%。同时检测这两种靶基因,如果至少表达其中一种即可记为阳性表达者,其阳性率提高为81.1%。外周静脉血中APRIL mRNA的表达水平与CEA mRNA的表达水平呈正相关性。结论RT-PCR联合检测APRLL mRNA和CEA mRNA可以增加食管鳞癌外周血检测的敏感性,为了解肿瘤的恶性生物学行为(侵袭和转移)提供依据,为指导临床治疗方案的选择,判断预后及监测疗效提供帮助。