大鼠变应性鼻炎模型中T-bet/GATA-3基因表达的研究

目的探讨大鼠变应性鼻炎模型中血液单核细胞中T-bet/GATA-3基因表达及在变应性鼻炎发生发展中的作用.方法 20只SD大鼠,雌雄各半,随机分为实验组和对照组,每组各10只.实验组用卵蛋白致敏,以氢氧化铝溶胶和灭活的百日咳杆菌为佐剂,卵蛋白滴鼻建立大鼠变应性鼻炎模型,对照组以氢氧化铝溶胶和灭活的百日咳杆菌生理盐水皮下注射生理盐水滴鼻.在末次激发10 h,心脏采血,分离血浆和单核细胞.用ELISA法检测血浆中IL-4和INF-γ的水平,用RT-PCR法测定单核细胞中T-bet/GATA-3 mRNA的表达,对结果进行统计学分析.结果实验组血浆中IL-4和INF-γ（x±s）的水平分别是（14.241±1.963）和（12.364±2.524）Pg/mL;T-bet mRNA和GATA-3 mRNA（x±s）相对表达量分别为（0.433±0.514）和（1.029±0.690）.对照组血浆中IL-4和INF-γ（x±s）的水平分别是（4.916±0.600）和（16.303±5.335）Pg/mL;T-bet mRNA和GATA-3 mRNA（x±s）相对表达量分别为（0.495±0.103）和（0.550±0.119）.实验组血浆中IFN-γ的量减少并低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,而IL-4的含量明显高于对照组,差异具有显著性（P〈0.001）;实验组中T-bet mRNA的相对表达量与对照组相比无明显变化,无统计学意义（P〉0.05）,而实验组中GATA-3 mRNA相对表达量明显高于对照组,二者比较有统计学意义（P〈0.05）.结论大鼠变应性鼻炎模型中,GATA-3的过表达导致GATA-3和T-bet表达比例失衡,进而导致Th1/Th2细胞的免疫紊乱,GATA-3和T-bet表达比例失衡可能是变应性鼻炎发生的基因基础.     

过敏性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中白介素9及转录因子PU.1表达水平的研究

目的 探讨辅助性T细胞9(Th9细胞)相关细胞因子白介素（IL）-9 mRNA/蛋白及转录因子PU.1 mRNA在过敏性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中的表达及其作用。方法 2014年7月选取SPF级Balb/c小鼠16只,采用随机数字表法分为两组,每组8只。实验组小鼠使用鸡卵清蛋白致敏,建立过敏性鼻炎小鼠模型;对照组小鼠同期使用0.9%氯化钠溶液。每组采用随机数字表法取4只小鼠,病理检查证明造模成功。每组剩余4只小鼠取鼻黏膜,采用实时荧光定量PCR法检测小鼠鼻黏膜组织中IL-9、转录因子PU.1 mRNA表达水平,采用流式微球术检测小鼠鼻黏膜组织中IL-9表达水平。结果 实验组小鼠鼻黏膜组织中IL-9 mRNA表达水平〔（21.88±1.82）与（1.03±0.11）〕、转录因子PU.1 mRNA表达水平〔（24.63±1.88）与（1.02±0.07）〕高于对照组（P＜0.05）。实验组小鼠鼻黏膜组织中IL-9表达水平〔（66.9±4.4）pg/ml与（20.9±2.1）pg/ml〕高于对照组（P＜0.05）。小鼠鼻黏膜组织中IL-9 mRNA表达水平与转录因子PU.1 mRNA表达水平呈正相关（r=0.952,P＜0.001）。结论 Th9细胞相关细胞因子IL-9和转录因子PU.1参与过敏性鼻炎的发生发展过程,该结果将有希望提高对过敏性鼻炎发病机制的了解,为过敏性鼻炎免疫调节治疗潜在靶点的选择提供新的线索。     

IL-17和IL-23在变应性鼻炎患者血清中的表达及意义

 【目的】 探讨白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-23(IL-23)在变应性鼻炎患者血清中的表达及其与血清特异性IgE的相关性。【方法】 研究对象分为变应性鼻炎组(24例)和正常对照组(12例),分别收集受试者的血清,采用瑞典Pharmacia公司UniCAP 100E全自动免疫荧光定量分析系统检测常见吸入性变应原血清特异性IgE、ELISA法检测血清中IL-17和IL-23表达情况。【结果】12例正常对照组者血清sIgE结果均为0级,24例变应性鼻炎患者血清sIgE的浓度为2 ~ 6级。IL-17和IL-23在变应性鼻炎患者组血清中的水平分别为(165 ± 39)pg/ mL 和(79 ± 26)pg/ mL,在正常对照组分别为(68 ± 18)pg/ mL,和(14 ± 4)pg/ mL,,变应性鼻炎患者血清IL-17和IL-23 含量高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)。变应性鼻炎患者血清IL-17与IL-23、血清sIgE呈正相关(相关系数分别为0.533和0.687,P < 0.01),IL-23含量与血清sIgE浓度呈正相关(相关系数为0.513,P < 0.05)。【结论】 IL-17和IL-23在变应性鼻炎的发病机制中可能起重要的作用。     

CC16及转录因子T-bet、GATA-3对支气管哮喘患者气道炎症的调控作用

目的探讨Clara细胞分泌蛋白(CC16)及转录因子T-bet、GATA-3在支气管哮喘患者气道炎症中的价值。方法采取病例对照研究,收集25例哮喘急性发作期患者和33例健康对照组。采外周静脉血分离血浆,提取外周血单个核细胞(PBMC),用ELISA测定血浆中CC16、IFN-γ、IL-4的水平;用RT-PCR法检测PBMC转录因子T-bet mRNA和Gata-3 mRNA表达水平。结果哮喘组CC16及IFN-γ分别为(21.96±7.31)ng/mL和(118.73±22.59)pg/mL,明显低于对照组[(64.88±25.27)ng/mL和(145.53±29.50)pg/mL,P均0.01],哮喘组IL-4高于对照组[(425.22±4.37)pg/mL比(69.72±10.15)pg/mL,P0.01]。哮喘组T-bet mRNA、T-bet/GATA-3表达水平(0.12±0.01,0.25±0.04)显著低于对照组(0.48±0.12,1.89±0.65)(P均0.01),GATA-3 mRNA表达(0.45±0.05)较对照组(0.30±0.08)明显升高(P0.01)。CC16与T-bet mRNA表达水平、T-bet/GATA-3呈正相关(r值分别为0.792和0.761,P均0.01);与GATA-3 mRNA无明显相关性(r=-0.146,P=0.551)。结论哮喘患者CC16水平降低,对气道炎症的保护性削弱,可能与T-bet/GATA-3和IFN-γ/IL-4的失衡有关。     

变应性鼻炎和变应性哮喘大鼠淋巴细胞T-bet和GATA-3 mRNA的表达

目的:探讨T-bet和GATA-3的失衡表达在变应性鼻炎和变应性哮喘中的作用.方法:将30只大鼠随机分成变应性鼻炎组、变应性哮喘组及正常对照组(n=10),相应建立模型.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测3组大鼠淋巴细胞T-bet和GATA-3 mRNA的表达.结果:变应性鼻炎组和变应性哮喘组大鼠T-bet mRNA的相对表达量分别为(0.12±0.07)及(0.09±0.02),较正常组的(0.60±0.09)减少(P均<0.05);GATA-3 mRNA的相对表达量分别为(1.38±0.15)及(1.41±0.21),较正常组的(0.92±0.21)增多(P均<0.05);而变应性鼻炎组和变应性哮喘组间2个指标比较,差异均无统计学意义(P均>0.05).结论:T-bet和GATA-3的失衡表达可能是上下呼吸道变应性炎症发生的一个共同因素.纠正其平衡很可能为治疗变应性鼻炎和变应性哮喘提供一条新思路.     

黄芪调节哮喘失衡表达转录因子T-bet/GATA-3的研究

目的:观察T细胞特异转录因子T-bet/GATA-3在支气管哮喘中失衡表达,探讨黄芪对其调节作用?方法:50只雄性SPF级SD大鼠随机分为对照组(C组)?哮喘组(A组)?黄芪低(H1组)?中(H2组)?高(H3组)剂量组,20只雄性SPF级致敏SD大鼠脾脏中分离获得CD4+T细胞,分为对照组(C组),OVA干预组(A组),黄芪干预组低(H1组)?中(H2组)?高(H3组)?HE染色观察气道病理改变;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞因子(IL)-4,5和IFN-γ含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定法检测T-bet和GATA-3 mRNA表达;免疫印迹(Western blot)法检测T-bet和GATA-3蛋白表达?结果:在大鼠肺组织中嗜酸粒细胞(EOS)?淋巴细胞?管壁面积/支气管管腔内周长(WA/Pi)和支气管平滑肌面积/支气管管腔内周长(ASM/Pi)A组比C组明显增多或增厚(P均< 0.01),H1?H2?H3组中不同程度的减少或减轻(P > 0.05);血清中IL-4和IL-5含量A组高于C组(P均< 0.01),H1?H2?H3组剂量组均低于A组(P均< 0.01),血清中IFN-γ含量A组远低于C组(P均< 0.01),H1?H2?H3组明显高于A组(P均< 0.01),CD4+T细胞培养上清液中H1?H2?H3组IL-4和IL-5含量均降低,同时增加IFN-γ含量,与A组比较,差异均有统计学意义(P均< 0.01);肺组织和CD4+T细胞中T-bet mRNA和蛋白表达H1?H2?H3组高于A组(P均< 0.01);而GATA-3mRNA和蛋白表达H1?H2?H3组低于A组(P均< 0.01)?结论:T细胞特异转录因子T-bet/GATA-3在哮喘中失衡表达,黄芪抑制哮喘气道炎症可能通过双向调节T-bet和GATA-3平衡来实现     

T-bet、GATA-3、Foxm1在慢性鼻窦炎黏膜组织中的表达及与炎症分子表达的相关性

目的:研究T-bet、GATA-3、Foxm1在慢性鼻窦炎(CRS)黏膜组织中的表达及其与炎症分子表达的相关性。方法:选择2015年6月~2017年2月期间在胜利医院接受鼻内镜下手术的鼻窦炎患者和鼻中隔偏曲患者,分别作为CRS组和对照组。术中采集鼻黏膜组织,检测T-bet、GATA-3、Foxm1的mRNA表达量及炎症反应分子的蛋白表达量。结果:CRS组患者鼻黏膜组织中T-bet、GATA-3、Foxm1的mRNA表达量以及白介素(IL)-1β、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-4、IL-5、IL-19、IL-20R1、IL-20R2、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、PI3K、Akt、GSK-3β、p38MAPK的蛋白表达量均显著高于对照组;CRS患者鼻黏膜组织中T-bet、GATA-3、Foxm1的mRNA表达量与IL-1β、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5、IL-19、IL-20R1、IL-20R2、MMP2、MMP9、PI3K、Akt、GSK-3β、p38MAPK的蛋白表达量呈正相关关系。结论:慢性鼻窦炎黏膜组织中T-bet、GATA-3、Foxm1的高表达能够激活Th1、Th2免疫反应并引起黏膜炎症反应。     

白细胞介素-10对小鼠弓形虫眼病眼部炎症的影响

 【目的】 探讨白细胞介素-10(IL-10)对弓形虫眼病小鼠视网膜组织炎症和体内γ-干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。【方法】 将120只C57BL/6小鼠分为3组:①对照组40只;②感染组(实验A组)40只;③IL-10干预组(实验B组)40只。腹腔注射弓形虫感染小鼠后,观察小鼠眼部的组织学切片,对眼球和外周血做基因检测;注射IL-10后,观察其对眼部炎症反应和体内IFN-γ和TNF-α水平的影响。【结果】 弓形虫感染第6天,在实验组小鼠眼部和外周血中均可检测到小鼠P30基因;房水中IFN-γ(4531.4 pg/mL)和TNF-α(1572.3 pg/mL)的浓度升高;血清中IFN-γ(456 ± 39) pg/mL和TNF-α(14.6 ± 2.2)pg/mL的浓度升高;视网膜组织可见到弓形虫,且出现明显的炎症反应;IL-10注射后,房水中IFN-γ(2482.7 pg/mL)和TNF-α(1248.1 pg/mL)的浓度降低,血清中IFN-γ(266 ± 27)pg/mL和TNF-α(12.1 ± 1.9)pg/mL的浓度降低,但仍高于对照组,视网膜组织中仍可见到弓形虫,但炎症反应减轻,将三组血清中两种细胞因子的浓度组间差异进行方差分析,P < 0.01,表明差别具有统计学意义。【结论】 小鼠急性眼部弓形虫感染病变主要集中在视网膜,IL-10可减轻弓形虫感染小鼠的眼部炎症反应。     

转录因子T-bet/GATA-3在支气管哮喘小鼠中的表达及地塞米松的干预作用

目的:探讨核因子T-bet/GATA-3在支气管哮喘小鼠发病机制中的作用,观察地塞米松干预后T-bet、GATA-3 mRNA的变化.方法:建立卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠模型;24只BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组及地塞米松治疗组.地塞米松腹腔注射(2 mg/kg)给药.HE染色观察气道炎症变化;采用RT-PCR方法检测T-bet、GATA-3 mRNA的表达:流式细胞技术检测小鼠脾脏CD4T细胞IFN-γ、IL4水平.结果:与正常组相比,哮喘组小鼠GATA-3 mRNA表达显著增Dn(P<0.05).T-bet mRNA水平明显降低(P<0.05),IFN-γ水平明显降低(P<0.01),IL-4水平明显升高(P<0.05);经地塞米松干预后,肺组织GATA-3、T-bet mRNA均有所降低,以GATA-3 mRNA降低更为明显,IL-4表达明显降低(P<0.05),而IFN-γ水平有减少倾向.结论:支气管哮喘小鼠T-bet/GATA-3表达失衡与气道炎症密切相关,地塞米松通过抑制GATA-3和T-bet的表达,调节IL-4/IFN-γ比率并纠正Th1/Th2平衡失调,可能是其治疗哮喘的机制之一.     

变应性鼻炎小鼠鼻黏膜水通道蛋白5的表达

目的探讨水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中的表达。方法应用qPCR和Western blot分别检测20只正常小鼠和20只变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中AQP5 mRNA和蛋白的表达。结果变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中AQP5mRNA和蛋白显著高于正常小鼠(P<0.05)。结论 AQP5在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中高表达,对AQP5的研究开发可能会成为变应性鼻炎新的基因治疗靶点。     

Mechanism of Immune Hyporesponsiveness Induced by Recipient-derived Immature Dendritic Cells in Liver Transplantation Rat

Objective To investigate the mechanism of immune hyporesponsiveness induced by donor-antigen-unloaded recipient-derived immature dendritic cell (imDC) of liver grafts in rats.Methods Forty Sprague-Dawley rats (donor) and forty male Wistar rats (recipient) were randomly divided into 4 groups:control,cyclosporine A (CsA),mature DC (mDC),and imDC groups respectively,with 10 donor rats and 10 recipient rats in each group.Recipient rats in CsA group were treated with 10 mg·kg-1·d-1 CsA starting day 2 after the t...     

Si-GATA-3对AR小鼠PBMCs中Th1/Th2细胞亚群功能的体外调节

目的 研究RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体si-GATA-3在体外对变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）小鼠PBMCs中Th2、Th1细胞亚群功能的调节作用。方法 构建RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体siGATA-3,并进行包装、纯化和滴定。BALB/C小鼠随机分为AR组和正常对照组。用卵蛋白构建BALB/C小鼠变应性鼻炎模型,抽取其外周血并分离外周血中单个核细胞（PBMCs）,随机分为3组,即si-GATA-3组、siNC组和AR组。进行细胞培养,然后分别用si-GATA-3、si-NC和生理盐水对3组变应性鼻炎小鼠的PBMCs进行干预72 h,用生理盐水代替si-GATA-3干预正常对照组小鼠的PBMCs。干预结束分离PBMCs和细胞培养上清液。分别用荧光定量qPCR和Western bloting方法检测PBMCs中GATA-3 mRNA、T-bet mRNA和GATA-3、T-bet蛋白的相对表达量;用ELISA技术检测细胞培养上清液中IL-4和IFN-γ的含量。结果 构建出RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体si-GATA-3,其滴度为5...     

螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清白细胞介素-4和干扰素-γ水平的影响

目的 :观察螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清白细胞介素 - 4 (IL- γ)和干扰素 - γ(IFN- γ)的影响 ,以探讨其治疗机制。方法 :用卵清蛋白致敏大鼠制成变应性鼻炎动物模型 ,口服螺旋藻治疗 ,观察其行为学差异 ;用组织病理学方法观察鼻黏膜改变 ;用酶联免疫吸附法 (EL ISA)对血清中 IL - 4和 IFN-γ进行检测。结果 :行为学得分 ,阳性对照组 (7.8± 1.0 3)明显高于实验组 (1.6± 1.35 )和正常对照组 (0 ) ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ;实验组鼻黏膜炎性反应明显轻于阳性对照组 ,实验组 IFN-γ水平明显高于阳性对照组 ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ,实验组 IL - 4水平明显低于阳性对照组 ,差异有极显著性意义 (P<0 .0 1)。结论 :螺旋藻通过调节 IFN-γ和 IL - 4的表达 ,纠正失衡的 Th1 / Th2 的细胞因子网络而对变应性鼻炎产生治疗作用。     

大蒜新素对变应性鼻炎患者外周血白介素4和γ干扰素的影响

目的 研究大蒜新素对变应性鼻炎患者外周血白介素4(interleukin,IL-4)和γ干扰素(interferon,IFN-γ)的影响.方法 66例研究对象均来自云南省中医医院,变应性鼻炎患者44例,其中男21例,女23例,年龄22～48岁(中位数36岁),均经变应原皮肤点刺试验确诊,变应性鼻炎患者被分为药物治疗组和阳性对照组,各22例.药物治疗组患者口服大蒜新素40 mg,4次/d,共14 d;阳性对照组患者口服等剂量的淀粉胶囊,时间、频次相同.阴性对照组22例,其中男10例,女12例,年龄20～42岁(中位数33岁),每日口服大蒜新素40 mg,4次/d,共14日.实验前与实验结束后各抽取外周静脉血5 mL,分离出血浆,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中IL-4和IFN-γ的浓度.结果 药物治疗组、阳性对照组、阴性对照组分别有3例、3例、4例退出实验;药物治疗组、阳性对照组、阴性对照组服实验前、后血浆中IL-4的浓度(pg/mL)分别为53.20±10.10、51.94±10.40、35.67±5.69 和35.87±8.82、50.27±9.68、33.53±4.86;血浆中IFN-γ的浓度(pg/mL)分别为45.66±9.43、46.04±10.87、65.11±10.93 和57.01±13.34、45.64±8.90、71.07±8.51.实验前,药物治疗组与阳性对照组患者血浆IFN-γ和IL-4水平均无显著性差异(P＞0.05),分别与阴性对照组比较,变应性鼻炎患者血清中IL-4水平明显高于阴性对照组,而IFN-γ水平明显低于阴性对照组,均有显著性差异(P＜0.05).实验后,药物治疗组血浆IL-4水平明显低于阳性对照组,而IFN-γ水平明显高于阳性对照组,但仍低于阴性对照组,均有统计学意义(P＜0.05),药物治疗组IL-4水平接近阴性对照组,无显著性差异(P＞0.05).药物治疗组实验后IL-4水平较实验前明显下降,而IFN-γ水平较实验前明显升高,均有显著性差异(P＜0.05).阴性对照组实验后血清IFN-γ水平有所升高,有显著性差异(P＜0.05),而IL-4水平稍有下降,无统计学意义(P＞0.05).阳性对照组患者血浆IL-4水平和IFN-γ水平实验前、后无明显变化.结论 大蒜新素能明显改善变应性鼻炎患者的临床症状,其作用机制可能是通过降低血浆中IL-4的浓度,同时升高IFN-γ水平,恢复Th1和Th2细胞因子的平衡.     

Serum IL-10 Level in Allergic Rhinitis Patients and Its Effect on Serum Total IgE

disease.Itsepisodeisregulatedbymanykindsofcytokines.IL10isoneofthem,whichisanim portantnaturalimmuneregulatorandmainlypro ducedbyTh2cells.Itcaninhibittheantigen pres entingeffectsofmacrophagecellsandtheprolifer ationofactiveTcells,andsuppresstheintensityofinflammation[1,2].ItalsoplaysanimportantroleintheproductionofimmunoglobulineE.ThisstudysurveyedthelevelsofserumIL10inallergicrhinitispatientstoinvestigateitsrolesinthepath ogenesisofallergicrhinitisanditscorrelationtotheserumtotalimmunoglu…     

转录因子GATA3对变应性鼻炎大鼠白细胞介素4和白细胞介素5的调控作用

目的探讨转录因子GATA3对变应性鼻炎大鼠白细胞介素4和白细胞介素5的调控作用。方珐取Wistar大鼠32只。随机平均分为A组（对照组）和B组（实验组），B组采用卵清蛋白、氢氧化铝建立大鼠AR模型。通过免疫组化和酶联免疫吸附试验，第30天取鼻腔灌洗液测定白细胞介素4和白细胞介素5浓度；黏膜切片观察鼻腔组织病理学改变及转录因子GATA3的表达。结果B组大鼠鼻腔灌洗液中IL-4、IL-5水平分别为（90．5±18．8）pg／mL和（59．6±11．4）pg／mL，明显高于A组（3．8±1．5）pg／mL、（10．8±2．0）pg／mL，差异具有统计学意义（P值均〈0．01）。B组大鼠鼻腔黏膜充血、水肿，黏膜层增厚，并有嗜酸细胞为主的炎性细胞浸润。免疫组织化学显示，B组鼻腔黏膜中GATA3表达增加，且与细胞因子IL-4、IL-5水平之间存在相关性。结论变应性鼻炎大鼠鼻黏膜GATA3表达增高与IL-4、IL-5上调有关。     

Intranasal application of Epstein-Barr virus/lipoplex to abrogate eosinophillia in murine model of allergic rhinitis

Allergic rhinitis is strongly associated with thenasal mucosal inflammation caused by theoverproduction of cytokines secreted by the allergen specific type-2 T helper (Th2) cells. Th2 cytokines, such as interleukin (IL)-4 and IL-5, can induce eosinophil infiltration and hyperresponsiveness of nasal mucosa.1 IL-12, a heterodimeric cytokine, which strongly promotes the differentiation of the type-1 T helper (Th1) phenotype and suppresses the expression of Th2 cytokines. Therefore, immunother…