多巴胺系统及L-精氨酸/一氧化氮通路在大鼠心肌肥大中的作用研究

目的 探讨多巴胺系统及L-精氨酸／一氧化氮（L—Arg／NO）通路在大鼠心肌肥大动物模型中的作用及相关机制。方法 采用腹主动脉缩窄术复制大鼠心肌肥大动物模型。将Wistar大鼠随机分为4组：①腹主动脉缩窄术（AC）组；②假手术（SO）组；③L-精氨酸（L—Arg）组；④左旋硝基精氨酸甲酯（L—NAME）组。通过心肌肥大指数，心肌组织胶原染色，心功能检测等方法分析各组大鼠心肌组织肥大状况：采用RT—PCR和Western blot结合图像分析系统，观察药物干预后，心肌组织中多巴胺受体D1、D2mRNA和蛋白质表达变化：借助紫外分光光度计，分析心肌组织匀浆中一氧化氮（NO）水平和一氧化氮合酶（NOS）活性。结果 AC组左心肥大明显．表现为室内压显著升高，胶原增多；与SO组比较，腹主动脉缩窄术后D1、D2mRNA和蛋白质表达均明显降低（P〈0.01），NO、NOS水平明显下降（P〈0.01）；应用NOS抑制剂L-NAME预处理能够促进肥大的发生。使用NO合成的前体L-Arg干预，则抑制肥大发生。结论 压力负荷加大能引起心肌肥大。其机制可能与NO合成减少有关：大鼠心肌细胞内存在多巴胺受体D1、D2mRNA和蛋白质表达，心肌肥厚时二者均明显减低。     

高浓度Ca2+对大鼠脑线粒体呼吸功能的影响

应用分离的大鼠脑线粒体,给予外源性高浓度Ca^2＋及一氧化氮合酶（NOS）抑制剂-L-硝基-精氨酸甲酯（L—NAME）,检测一氧化氮（NO）含量及线粒体呼吸功能。结果显示高浓度Ca^2＋引起NO含量升高,线粒体呼吸功能降低,L—NAME通过抑制NOS活性使NO合成减少,对线粒体呼吸功能有保护作用。认为,外源性高浓度Ca^2＋可激活线粒体NOS,使NO合成增多,导致线粒体呼吸功能降低。     

左旋精氨酸甲酯及左旋精氨酸对应激状态下胃黏膜耐受性细胞保护作用的影响

目的：探讨内源性一氧化氮（NO）在应激状态下胃黏膜耐受性细胞保护中的作用及其可能的机制。方法：以重复浸水束缚应激（WRS）制作动物模型,以左旋精氨酸甲酯（L－NAME）或左旋精氨酸（L－Arg）抑制或促进内源性NO的合成,动态检测胃黏膜血流量（GMBF）、溃疡指数（UI）、黏膜一化氮含量的变化。结果：重复应激后,实验对照组大鼠UI明显下降,同时GMBF上升,黏膜内NO含量增高;L－NAME使WWRS引起的胃黏膜损伤加重,消除了GMBF的递增趋势,黏膜NO含量下降;而L－Arg可减轻WRS造成的黏膜损伤,GMBF、黏膜NO含量增相应增加;GMBF、UI、黏膜NO含量变化之间有相关关系。结论：内源性NO通过调节GMBF而介导耐受性细胞保护作用,L－NAME抑制其合成,延缓这一作用,L－Arg增加其合成,促进该作用。     

左旋哨基精氨酸甲基酯对大鼠食管静脉曲张影响的酶组化研究

目的：探讨一氧化氮（NO）在食管静脉曲张发生机制中的作用,初步观察使用一氧化氮合酶（NOS）抑制剂治疗食管静脉曲张的可能性。方法：采用NADPH－d黄递酶组化染色与图像分析方法,观察NOS抑制剂左旋肖基精氨酸甲基酯（L－NAME）灌胃给药对食管静脉曲张大鼠食管壁组织学改变及NOS表达平均光密度值的影响。结果：模型组食管、粘膜下静脉壁及食管浆膜外静脉壁粘膜上皮NOS表达较假手术组增多,给予L－NAME后,食管壁NOS表达显著下调（P＜0．01）,L－NAME组10只大鼠中7只食管浆膜外静脉和粘膜下静脉迂曲扩张情况较模型组减轻。结论;大鼠食管静脉曲张的发病机制中有NO的参与;L－NAME对大鼠食管静脉曲张具有一定保护作用。     

自发性高血压大鼠血清和心肌一氧化氮浓度的变化及L-精氨酸对其抑制作用

目的 :观察补充左旋精氨酸 4周后 12～ 13周龄自发性高血压大鼠 (SHR)血清和心肌组织一氧化氮(NO)浓度及血压的变化。方法 :通过腹腔注射补充NO合成前体———左旋精氨酸 (L Arg) 4周 ,硝酸还原酶法测定血清和心肌组织NO浓度 ;鼠尾压测量仪测量大鼠尾动脉的收缩压。结果 :治疗组SHR与对照组SHR相比心肌NO浓度降低 (P <0 .0 5 ) ,两组间血清NO浓度、血压差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论 :SHR 12～ 13周龄时体内NO呈代偿性地升高 ,通过腹腔注射慢性补充L Arg 4周使心肌组织NO浓度下降 ,但未能降低SHR已形成的高血压。     

一氧化氮与动脉粥样硬化的关系

动脉粥样硬化 ( AS)是危害人类健康的常见疾病之一 ,主要是血液和血管壁、血管壁各细胞间相互作用的结果。在 AS的发生过程中涉及血液和血管壁的众多细胞及其分泌的细胞因子。一氧化氮 ( NO)是这些细胞分泌的信息传递物质之一 ,免疫组化研究表明[1-3] ,一氧化氮合酶 ( NOS)信使核糖核酸 ( m RNA)广泛分布于心血管系统中 ,它在相当短的时间即可被Ca2 激活 ,并产生少量的 NO[4 ]。应用 NO的抑制剂 L-硝基 -精氨酸甲酯 ( L- NG- nitroarginine methylester,L- NAME)可使 AS病变面积明显增加 ,而 L-精氨酸( L - arginine,L - Arg)…     

β肾上腺素受体与左旋精氨酸/一氧化氮通路

自从发现血管内皮舒张因子 (EDRF)即一氧化氮(NO)后 ,其生物学作用引起众多学者关注。研究表明 :β肾上腺素受体 (β- AR)激活与左旋精氨酸 /一氧化氮 (L- Arg/ NO)通路存在密切关系。本文就这一关系的研究进展及其病理意义作一综述。1　 L- Arg/ NO系统体内许多细胞有 L- Arg/ NO合成通路 ,NO合成的底物是 L- Arg和氧 ,L- Arg作为 NO的前体物有高度的立体异构专一性。一氧化氮合酶 (NOS)是这一反应的唯一限速酶 ,产物是 NO与 L-瓜氨酸 (L -citrulline,L- Citn)。合成的 NO迅速扩散到邻近细胞 ,激活细胞内鸟苷酸环化酶 (GC…     

L-精氨酸甲酯对大鼠结肠炎性损伤的保护作用

目的 了解L-精氨酸甲酯(L-NAME)作为NOS抑制剂,对大鼠结肠炎性损伤的保护作用。方法：将实验大鼠随机分为对照组、损伤对照组、NAME1、NAME2、NAME3(即N1、N2、N3)组,实验采用三硝基苯磺酸(TNB）30mg 50％乙醇0．25ml给大鼠灌肠的结肠炎模型,并检测各组的溃疡指数(UI)、一氧化氮(NO)、MDA、GSH值。结果：1．N1、N2、N3组的NO、UI、MDA值低于损伤对照组,GSH值高于损伤对照组,对照组的损伤不明显。2．相关分析表示,NO与MDA存在正相关,与GSH存在负相关关系。结论：在结肠炎症反应中,NO过量生成具损伤作用;L-NAME通过抑制NOS活性,减少NO生成,具有一定的保护作用。     

高血压大鼠主动脉一氧化氮合成途径的变化

目的 观察高血压大鼠主动脉内膜，中膜和外膜一氧化氮合成途径的改变，并探讨其可能的病理生理意义。方法 Wistar大鼠缩窄腹主动脉复制高血压模型，动物随机分为对假手术组和高血压。取大鼠主动脉，分离血管内膜，中膜和外膜。分别测定其亚硝酸盐（NO2^-)生成量，一氧化氮合酶（NOS）活性及L－精氨酸（L－Arg)转运，免疫组化染色检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS)的分布。结果 与假手术组相比，高血压大鼠血中一氧化氮代谢产物（NOx)高26．2％（P＜0．05）；主动脉NO2^-生成低65．8％（P＜0．01），中膜及外膜孵育液的NO2^-生成量分别高59．6％和123．6％（均P＜0．01）；主动脉内膜NOS活性低59．3％（P＜0．01），中膜和外膜NOS活性分别高62．6％和118．7％（均P＜0．01），血管内膜L－Arg转运率低62．5％（P＜0．01），中膜和外膜L－Arg转运率分别高53．7％和99．8％（均P＜0．01）。iNOS免疫组化染色显示，高血压大鼠血管中膜和外膜尤其是外膜iNOS阳性染色明显增强。结论 高血压大鼠血管管一氧化氮合成与代谢发生改变，血管内膜L－Arg/NOS/NO途径受抑，而中膜和外膜尤其是外膜的L－Arg/NOS/NO系统的活性增强，血管生成的NO增多。提示血管中膜和外膜源NO增多在高血压时可能具有一定的代偿作用。     

N~ω—硝基—L—精氨酸甲酯增强大鼠慢性缺氧性肺高压的研究

目的:建立大鼠慢性缺氧性肺动脉高压(CHPH)摸型,通过注入N~ω—硝基—L—精氨酸甲酯(L—NAME)探讨内源性一氧化氮(NO)对CHPH的调节作用。方法:Wistar大鼠(n=30)进行1周及2周缺氧,每时程缺氧大鼠按性别、年龄、体重配伍,分至对照组、缺氧组、缺氧 L—NAME组。缺氧采用常压低氧舱法(O_2 11％,CO_2<3％),缺氧前腹腔注射L—NAME(4mg·Kg~(-1))。在1周及2周缺氧结束时对肺动脉平均压(PAMP)进行测定。结果:(1)缺氧1周及2周大鼠PAMP较对照组升高,其中缺氧2周大鼠比对照组PAMP升高有显著性(P<0.05)。(2)L—NAME明显增强大鼠PAMP(P<0.05)。 结论:(1)慢性缺氧可以引起肺动脉高压;(2)L—NAME对CHPH有增强作用说明内源性NO的释放对CH-PH起调节作用。     

左型精氨酸及左型精氨酸甲酯对心肌缺血-再灌注大鼠血压和心率的影响

本研究利用ＳＤ大鼠心肌缺血－再灌注模型,通过用左型精氨酸及左型精氨酸甲酯的干预,探讨一氧化氮对ＳＤ大鼠血压和心率的影响。实验分缺血－再灌注模型组、左型精氨酸干预组及左型精氨酸甲酯干预组。结果显示:左型精氨酸和左型精氨酸甲酯均减慢ＳＤ大鼠的心率;左型精氨酸具有降低血压作用,左型精氨酸甲酯具有升血压及抗低血压的作用。本文结果为临床应用一氧化氮制剂提供了实验依据。     

Influence of NG‐nitro‐L‐arginine methyl ester and L‐arginine on gastric mucosal tolerant cytoprotection under stress

OBJECTIVE : To determine the role of endogenous nitric oxide (NO) in gastric mucosal tolerant cytoprotection under stress and its possible mechanism. METHODS : Sprague–Dawley rats were exposed to repeated water immersion and restraint stress (WRS), during which N^G‐nitro‐L ‐arginine methyl ester (L ‐NAME), a non‐selective NO synthase inhibitor, and L ‐arginine (L ‐Arg), a substrate for NO synthesis, were administered to inhibit or promote the synthesis of endogenous NO, respectively. Gastric mucosal blood flow (GMBF) was measured with an LDF‐3 Flowmeter (Electronic Instrument Factory of Nankai University, Tianjin, China), the NO level in the gastric mucosa was monitored by the Griess reaction and gastric mucosal lesions were evaluated using the ulcer index (UI). The relationships between changes in GMBF, UI and NO content in the gastric mucosa were analyzed by linear correlation analysis. RESULTS : Repeated WRS induced gastric mucosal tolerant cytoprotection and this was accompanied by increased GMBF and NO levels in the gastric mucosa. Inhibition of endogenous NO synthesis by L ‐NAME worsened mucosal lesions induced by single WRS and, after repeated WRS, the adaptive incremence in GMBF was abolished and the NO content in the gastric mucosa was significantly reduced. In contrast, enhancement of endogenous NO synthesis by L ‐Arg attenuated mucosal erosions caused by single WRS. After repeated WRS, GMBF and the NO content in the mucosa increased gradually. Mucosal lesions were negligible after rats were exposed to the fourth WRS. CONCLUSIONS : During the tolerant cytoprotection, GMBF, UI and the NO content showed regular changes and there were good relationships between them. L ‐NAME and L ‐Arg changed the levels of endogenous NO, which, accordingly, affected GMBF and the gastric tolerance. By regulating GMBF, endogenous NO may play an important role in the gastric mucosal tolerant cytoprotection under stress. Inhibition of the synthesis of NO delayed the induction of tolerant cytoprotection, whereas increased NO synthesis promoted cytoprotection.     

一氧化氮在哮喘发病机制中的作用

目的通过观察一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）抑制剂亚硝基左旋精胺酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）对豚鼠离体气管张力收缩的影响及采用组织化学方法观察ＮＯＳ在豚鼠哮喘模型肺中的分布，了解一氧化氮（ＮＯ）在哮喘发病机制中的作用。方法用Ｌ－ＮＡＭＥ孵育豚鼠离体气管段后，观察对组织胺量效曲线的影响并与对照组比较；另用还原型辅酶ＮＡＤＰＨ－ｄ对豚鼠哮喘模型肺组织行组织化学染色。结果豚鼠离体气管段经Ｌ－ＮＡＭＥ孵育后，组胺诱发的张力曲线明显左移，其最大反应张力是对照组的１７０％（Ｐ＜０．０１）。ＮＡＤＰＨ组化染色可见哮喘模型组肺泡巨噬细胞显著增多，ＮＯＳ染色呈明显阳性反应，对照组肺泡巨噬细胞数极少，且未见ＮＯＳ染色阳性者。结论Ｌ－ＮＡＭＥ使组胺对豚鼠离体气管段收缩张力显著增加，通过增加ＮＯ生成可降低气道对组胺的反应性；哮喘时肺泡巨噬细胞显著增多，且ＮＯＳ染色呈明显阳性。提示在巨噬细胞中的ＮＯＳ作用下产生的ＮＯ在哮喘发病中起重要作用。     

乙酸性胃溃疡大鼠一氧化氮、内皮素及表皮生长因子受体相互关系研究

目的 :探讨一氧化氮 (NO)、内皮素 (ET- 1)、表皮生长因子受体 (EGFR)在乙酸性慢性胃溃疡大鼠中的作用及相互关系。方法 :采用乙酸性慢性胃溃疡疾病模型 ,游标卡尺测定溃疡指数 ,硝酸还原酶法测定 NO含量 ,放射免疫法检测血浆 ET- 1含量 ,SABC免疫组织化学方法及图像分析观察 EGFR在溃疡周围粘膜的表达。结果 :左旋精氨酸 (L - Arg)组溃疡指数与模型组及亚硝基左旋精氨酸 (L - NNA )组比较显差有显著性意义 (P <0 .0 5 ,<0 .0 1) ;L- Arg组血清 NO及血浆 ET- 1含量与对照组、模型组及 L- NNA组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ,<0 .0 1) ;L - NNA组血清 NO及血浆 ET- 1含量与模型组及对照组比较差异均有非常显著性意义 (均 P <0 .0 1) ;L -Arg组 EGFR表达较模型组、L- NNA组及对照组显著增加 (积分光密度值及阳性细胞占总面积百分比均 P <0 .0 5 ) ;L- NNA组 EGFR显著弱于模型组 (P<0 .0 1)。结论 :NO前体 L- Arg可以诱导、促进 NO合成 ,反馈性地抑制 ET- 1的释放 ,从而维持 NO和 ET的动态平衡及胃粘膜 EGFR正常水平表达 ,促进溃疡愈合。     

一氧化氮在实验性骨关节炎软骨细胞凋亡中的作用

目的　观察一氧化氮 (NO)在实验性骨关节炎 (OA)关节滑液中的动态变化 ,并探讨NO在实验性OA软骨细胞凋亡中的作用。方法　用原位末端标记法以及镀铜镉还原法对实验性OA软骨细胞凋亡及关节滑液中的NO含量进行检测。结果　实验性OA中NO水平显著高于正常对照组 ,且随制动时间延长 ,NO水平逐渐升高 ,6周达高峰。此时也出现较多软骨细胞凋亡现象 ,应用一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂L NAME后 ,关节液中NO含量降低 ,软骨细胞凋亡现象减轻。结论　NO是引起实验性OA中软骨细胞凋亡的重要介质之一。     

动脉粥样硬化家兔主动脉左旋精氨酸/一氧化氮途径的变化

目的　通过观察动脉粥样硬化家兔主动脉一氧化氮 (NO)产生及主动脉左旋精氨酸 (L Arg)转运的变化 ,探讨动脉粥样硬化疾病发生的可能机制。方法　 12只家兔分为高脂组及对照组 ,每组 6只 ,分别喂以高脂饮食及普通饮食 6周 ,取血测定血浆胆固醇 (T Chol)、甘油三酯 (TG)及低密度脂蛋白 (LDL)水平 ,测定血浆亚硝酸盐 (NO-2 )含量 ,测定主动脉孵育液中NO-2 含量及主动脉L Arg转运变化。结果　 (1)高脂组T Chol、TG及LDL水平明显高于对照组 ,分别是 18.6倍、2 .4倍及 48.8倍 (P <0 .0 1) ;(2 )高脂组血浆NO-2 含量高于对照组约 2 0 0 % (P <0 .0 1)。主动脉孵育液NO-2 含量高于对照组 17% (P <0 .0 1) ;(3)高脂组主动脉L Arg转运低亲和力Vmax较对照组增加 9倍(P <0 .0 1) ,Km较对照组增加 1.8倍 (P <0 .0 1) ;(4)高脂组主动脉总的一氧化氮合酶 (tNOS)活性较对照组显著增强 ,比对照组高 73% ,诱导性合酶 (iNOS)比对照组高约 2 0 0 % ,原生型合酶 (cNOS)比对照组低 40 % (P <0 .0 1) ;(5 )血浆精氨酸水平两组间无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论　动脉粥样硬化时血管组织L Arg/NO系统功能紊乱 ,内皮源性cNOS活性明显降低 ,而非内皮源性的L Arg转运与iNOS活性显著增强 ;血管L Arg/NOS/NO途径的功能紊乱可能参与动脉     

动脉粥样硬化家兔主动脉壁与红细胞L-精氨酸/一氧化氮系统变化

目的 观察动脉粥样硬化时主动脉与循环中红细胞L－精氨酸（L－Arg）／一氧化氮（ＮＯ）系统变化的关系。方法 建立动脉粥样硬化模型，喂养家兔１２只，分为动脉粥样硬化组（ＡＳ组）和对照组，分别喂以高脂饮食和普通饮食，６周后取静脉血，并处死动物，测定主动脉和循环中红细胞Ｌ－Ａrg转运，一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性及一氧化氮生成量。结果 动脉粥样硬化主动脉平滑肌细胞Ｌ－Ａrg/NOS/NO系统活性增强，而其内皮细胞ＮＯＳ活性降低；循环中红细胞Ｌ－Ａrg的跨膜转运速率和亲和力降低，其ＮＯＳ活性下降。结论 循环中红细胞Ｌ－Ａrg／ＮＯ系统变化可能是动脉粥样硬化的表现之一，其有可能成为动脉粥样硬化发生发展的检测指标。     

Blockade of tolerance to morphine but not to kappa opioids by a nitric oxide synthase inhibitor.

The nitric oxide synthase inhibitor NG-nitro-L-arginine (NO2Arg) blocks morphine tolerance in mice. After implantation of morphine pellets the analgesic response decreases from 100% on the first day to 0% on the third. Coadministration of NO2Arg along with the pellets markedly retards the development of tolerance; 60% of mice are analgesic after 3 days, and 50% of mice are analgesic after 5 days. In a daily injection paradigm the analgesic response to morphine is reduced from 60% to 0% by 5 days. Concomitant administration of morphine along with NO2Arg at doses of 2 mg/kg per day prevents tolerance for 4 weeks. A single NO2Arg dose retards morphine tolerance for several days, and dosing every 4 days is almost as effective as daily NO2Arg. NO2Arg slowly reverses preexisting tolerance over 5 days despite the continued administration of morphine along with NO2Arg. NO2Arg also reduces dependence and reverses previously established dependence. NO2Arg does not prevent tolerance to analgesia mediated by the kappa 1 agonist trans-3,4-dichloro-N-methyl-N-[2-(1-pyrrolindinyl)cyclohexyl]- benzene-acetamide (U50,488H) or the kappa 3 agent naloxone benzoylhydrazone, indicating a selective action of NO in the mechanisms of mu tolerance and dependence.     

预处理对肝脏再灌注损伤大鼠肝组织、血液中NO和ET的影响及意义

目的　探讨预处理对肝脏缺血再灌注损伤大鼠肝组织和血液中一氧化氮 (NO)和内皮素 (ET)含量的影响及意义。方法　建立肝脏 70 %缺血再灌注损伤大鼠模型 ,分为对照组、缺血组、缺血预处理组、L -精氨酸组(L - arg)、Nω-硝基 - N -精氨酸甲酯 (L - NAME)组 ,观察各组肝功能变化 ,检测肝组织和血清中 NO和 ET及透明质酸 (HA)水平。结果　预处理可减轻 NO水平的下降和血浆 ET的升高 ,防止肝功酶的升高 (P<0 .0 5 )。结论　预处理可诱导缺血再灌注损伤大鼠 NO产生增加、ET产生减少 ,进而改善其微循环 ,减少再灌注损伤。