ELISA检测HBsAg中阴性对照吸光值的探讨

为了探讨酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性对照吸光值（Ｎ）小于０．０５时，以０．０５作Ｎ值对实验结果的影响，用实际阴性对照吸光值（Ｎ实）和０．０５分别计算阳性对照吸光值（Ｐ）与Ｎ的比值（Ｐ／Ｎ），并用放射免疫法（ＲＩＡ）和聚合酶链法（ＰＣＲ）作进一步检测。结果：ＥＬＩＳＡ所测３３例标本中，Ｐ／０．０５小于２．１的标本１８例，Ｐ／Ｎ实小于２．１的８例，ＲＩＡ检测上述Ｐ／０．０５小于２．１的１８例标本中，５例阳性，ＰＣＲ检测的ＨＢＶＤＮＡ７例阳性。结论：ＥＬＩＳＡ检测ＨＢｓＡｇ，当Ｎ小于０．０５时，以０．０５计算Ｐ／Ｎ值，可导致结果的假阴性     

多普勒超声联合孕妇血清 ＮＳＥ 检测在胎儿脑损伤风险评估中的价值

目的：探讨多普勒超声联合孕妇血清神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）检测对胎儿脑损伤的评估价值, 为其风险预测和治疗提供合理临床依据。方法：回顾性分析 ２０１６－１０～ ２０１８－０３ 我院 ２０２ 例胎儿的临床资料,根 据是否发生脑损伤分为脑损伤组（ｎ＝ ３０）,正常组（ｎ＝ １７２）。采用多普勒超声检查胎儿胎儿大脑中动脉（ＭＣＡ） 血流动力学参数,并探讨其与孕妇血清 ＮＳＥ 值相关性,分析血流动力学参数、ＮＳＥ 值与脑损伤临床症状相关性; 采用 Ｌｏｇｉｓｔｉｃ 回归分析发生脑损伤高危因素;建立 ＲＯＣ 曲线探讨超声检查联合 ＮＳＥ 水平对预测胎儿脑损伤的价 值。结果：脑损伤组胎儿 ＰＩ、ＲＩ、Ｓ ／ Ｄ 值高于正常组（Ｐ＜０．０５）;晚孕期母体血清 ＮＳＥ 值与 ＰＩ、ＲＩ、Ｓ ／ Ｄ 值呈显著相 关性（Ｐ＜０．０５）;ＮＳＥ、ＰＩ、ＲＩ、Ｓ ／ Ｄ 值是脑损伤高危因素（Ｐ＜０．０５）;ＮＳＥ、ＰＩ、ＲＩ、Ｓ ／ Ｄ 联合检测对脑损伤预测价值高 于单独检测（Ｐ＜０．０５）。结论：晚孕期超声血流动力学监测联合孕妇血清 ＮＳＥ 监测,可有效预测胎儿脑损伤 风险。     

儿童Graves病IFN-γ/IL一4水平失衡及意义

采用ＥＬＩＳＡ法对４２例Ｇｒａｖｅｓ病病儿细胞因子失衡及其与发病的关系进行研究。结果：（１）与正常组相比，初诊组ＩＦＮ－γ水平、ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值明显升高，ＩＬ－４水平明显降低（Ｐ＜０．００１或０．００２）；ＩＦＮ－γ抗体阳性组与阴性组相比；ＩＦＮ－γ水平、ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值明显降低（Ｐ＜０．０５），而ＩＬ－４水明显升高（Ｐ＜０．００１）；且ＩＦＮ－γ／ＩＬ一４比值与血清Ｔ３和Ｔ４水平呈显著正相关（ｒ＝０．５４、０．５６和０．５５、０．６３，Ｐ＜０．０５）；（２）复诊组中，治疗效果好组ＩＦＮ一γ水平、ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值明显降低（Ｐ＜０，０５），ＩＬ－４水平无明显变化（Ｐ＜０．０５）；而治疗效果差组细胞因子水平无显著变化（Ｐ＞０．０５）。提示：Ｇｒａｖｅｓ病体内存在以Ｔｂ１类占优势的细胞因子水平的失衡；抗体阳性病儿其细胞因子类型向Ｔｈ２转化；异常的细胞因子可导致甲状腺功能受损；细胞因子的监测对于Ｇｒａｖｅｓ病的病情估价、协助诊断及判断预后有一定的指导意义。     

儿童Graves病IFN—γ／IL—4水平失衡及意义

采用ＥＬＩＳＡ法对４２例Ｇｒａｖｅｓ病病儿细胞因子失衡及其与发病的关系进行研究。结果：（１）与正常组相比，初诊组ＩＦＮ－γ水平、ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值明显升高，ＩＬ－４水平明显降低（Ｐ〈０．００１或０．００２）；ＩＦＮ－γ抗体阳性组与阴性组相比，ＩＦＮ－γ水平、ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值明显降低（Ｐ〈０．０５），而ＩＬ－４水明显升高（Ｐ〈０．００１）；且ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值与血清Ｔ３和Ｔ４水平     

酶免疫淋球菌快速检测与涂片法比较

应用ＥＬＩＳＡ法检测淋球菌抗原，灵敏度可达１×１０５／ｍｌ，具有快速、简便、准确的特点，并与涂片法进行对照。结果显示，ＥＬＩＳＡ法检测淋球菌阳性率为５１．２２％（１２６／２４６），涂片法找淋球菌阳性率为３１．７１％（７８／２４６），两法结果比较，差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。两法检测男性患者，结果差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；女性患者用ＥＬＩＳＡ法检测淋球菌阳性率为３８．２１％（９４／２４６），涂片法找淋球菌阳性率为１９．５１％（４８／２４６），两法结果差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。结果表明酶免疫淋球菌快速检测非常适用于临床检测女性病人及无症状带菌者，能够提高女性病人的淋菌检出率，可在４０ｍｉｎ内完成一次检测，方法快速、简便，同时也为合理选择检查方法提供了较客观的参考数值     

双抗体C—ELISA测定人血清胰岛素的实验研究

我们建立了双抗体免疫抑制法ＥＬＩＳＡ（Ｃ－ＥＬＩＳＡ）测定人血清胰岛素的方法，第１抗体和第２抗体的最佳工作浓度分别为１：５和１：１２８０；胰岛素浓度经过平方根对数变换后与吸光度呈良好的直接关系（ｒ＝－０．９９，Ｐ＝０．０１）线性范围为１～６４０ｍＵ／Ｌ，灵敏度为１ｍＵ／Ｌ；批内和批间变异分别为９．５％和１２．５％，与ＲＩＡ法相关良好，Ｃ－ＥＬＩＳＡ测定人血清胰岛素勿需特殊设备，无放射性污染，操作简     

ＲＮＡｉ沉默ＰＥＬＰＩ／ＭＮＡＲ基因对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的作用

【目的】 构建脯氨酸－谷氨酸－亮氨酸富集蛋白１（ＰＥＬＰ１）基因慢病毒表达载体,研究沉默ＰＥＬＰ１／雌激素受体非基因组活性辅助调节因子（ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ）基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和周期的作用及机制。【方法】 构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体,并转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞,Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ和ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达。使用普通培养基和加入Ｅ２的培养基培养各组细胞,ＭＴＴ检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期情况;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＥＲ下游靶基因ｃ－ｆｏｓ,ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的蛋白表达水平。【结果】 成功构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体,转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞,转染后 ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ的表达和蛋白的表达分别下降８６％和６５％（Ｐ ＜ ０．０５）。转染后Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞与对照组相比增殖抑制（Ｐ ＜ ０．０５）, 细胞周期Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增加,Ｓ期细胞比例减少 （Ｐ ＜ ０．０５）。加入雌激素后,三组细胞的生长速度加快,细胞Ｓ期的比例增加,转染组增殖抑制明显（Ｐ ＜ ０．０５）,Ｓ期比例降低（Ｐ ＜ ０．０５）。转染组ＥＲ下游基因ｃ－ｆｏｓ、ｃｙｃｌｉｎ－Ｄ１蛋白水平均显著降低（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 在子宫内膜癌细胞中沉默ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ的表达能能抑制细胞生长、使细胞阻滞在Ｇ１期,下调ＥＲ靶基因蛋白表达,ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ有望成为子宫内膜癌治疗的潜在靶点。     

p16,CDK4和PCNA蛋白在滋养细胞肿瘤中的表达

用ＳＰ法检测滋养细胞肿瘤，葡萄胎和正常绒毛中ｐ１６蛋白，ＣＤＫ４及ＰＣＮＡ的表达，发现：（１）ｐ１６蛋白在肿瘤表达低于绒毛中（Ｐ〈０．０５），ｐ１６蛋白阳性标本的ＰＣＮＡ表达率低于ｐ１６阴性者（Ｐ〈０．０５）。（２）ＣＤＫ４表达在滋养细胞肿瘤，葡萄胎和绒毛三者间及与ＰＣＮＡ表达间无差异（Ｐ〉０．０５）。（３）ｐ１６阳性肿瘤患者３年存活率较高，提示ｐ１６基因突变可能是滋养细胞癌变的重要原因，检测ｐ１     

微波辐射ELISA法快速检测乙肝五项指标

为提高检测速度,缩短酶联免疫反应时间,并能有效地避免ＥＬＩＳＡ一步法检测乙肝五项指标时高浓度的ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢＣ出现的假阴性。利用微波能加速分子间运动的原理,将酶联免疫反应过程用微波辐射２５－３０ｓ其余担任与ＥＬＩＳＡ一步法同。对１ｎｇ／ｍｌ、２ｎｇ／ｍｌ的ＨＢｓＡｇ定值质控品分别用微波ＥＬＩＳ ＥＬＩＳＡ一步法重复２０次测定,其结果ＯＤ值经ｔ检验无显著性差异（Ｐ〉０．０５）;对ＥＬＩＳＡ一步     

二种滤纸血滴片SPA—ELISA诊断囊虫病的应用

要快速ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ和ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ一步法检测囊虫病人的滤纸血滴片和血清,前者阳性率分别为８３．０５％和８６．４％,后者分别为９６．６７％和９４．９１％,均无统计学差异（Ｐ〉０．０５）;两法的假阳性率均为３．３３％。实验条件的研究表明：血滤纸４℃浸泡过液和室温浸泡２ｈ的阳性率为８３．０５％和８４．３８％,直径１．２ｃｍ和０．６ｃｍ阳性率为８３．０５％和８５．２９％,亦均无显著性差异（Ｐ〉０     

SPA—ELISA检测抗弓形虫抗体的实验研究

我们用弓形虫ＮＴ株虫体抗原包被聚苯乙烯酶标板，建立了葡萄球菌Ａ蛋白－酶联免疫吸附试验（ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ）检测抗弓形虫抗体的方法。经与弓形虫可溶性抗原包被结果对照，Ｐ＞０．０５两法无显著性差异。在方法学比较研究中，与间接血凝试验及免疫酶染色试验检测符合率分别为７６．６％及９２．５％。ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ法检出率显著高于间接血凝法。ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ为目前公认的一种较好的检测方法。敏感性高，假阴性率低     

ELISA与PCR方法检测HBV结果对比

为探讨检测ＨＢＶ的有效方法，对１２８例乙型肝炎患者血清采用酶联免疫（ＥＬＩＳＡ）及聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法进行二对半及ＨＢＶ－ＯＮＡ测定，其阳性检出率分别为５９．３８％、７１．８８％，经统计学处理，ｘ＾２＝４．４３，Ｐ〈０．０５，差别有显著性意义，ＰＣＲ法比ＥＬＩＳＡ法检测灵敏度高，特异性强，值得推广。     

血清肌酸激酶同功酶BB和神经元特异性烯醇酶用于小细胞肺癌的临床价值

用层析荧光法和ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测了２０例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ），３０例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ），２５例良性肺疾病和３０例正常对照者血清中肌酸激酶同功酶ＢＢ（ＣＫ－ＢＢ）和神经元特异性烯醇酶（ＮＳＥ）。结果表明：ＳＣＬＣ组血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ含量高于其它３组（Ｐ＜０．００１）；４组血清的ＣＫ－ＢＢ均值分别为３０．２、８．４、６．３和４．３ＩＵ／Ｌ，ＮＳＥ分别为５２．２、１２．７、１０．３、和９．２ｎｇ／ｍｌ．以９．５ＩＵ／Ｌ（ＣＫ－ＢＢ）和２０．８ｎｇ／ｍｌ（ＮＳＥ）为正常值上限，ＳＣＬＣ组的阳性率分别是７０％（ＣＫ－ＢＢ）和８０％（ＮＳＥ），高于ＮＳＣＬＣ组（Ｐ＜０．００５）。ＳＣＬＣ血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ显著相关（ｒ＝０．７９３４，Ｐ＜０．００１），联合检测可使敏感性提高到９０％，特异性提高到９４％。因此，作者认为血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ可以作为ＳＣＬＣ的诊断指标，联合检测可提高临床应用价值。     

SLE病人外周血T淋巴细胞Fas的表达及其与ANA的关系

应用流式细胞仪检测系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）２０例正常人外周血新鲜分离的Ｔ淋巴细胞Ｆａｓ抗原的表达，并采用ＥＬＩＳＡ法检测病人血浆中抗核抗体（ＡＮＡ）的含量，结果发现，ＳＬＥ病人外周血Ｔ淋巴细胞Ｆａｓ的表达明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０１），且活动期明显非活动期（Ｐ〈０．０１）。活动期血浆ＡＮＡ含量明显高非活动期（Ｐ〈０．０５）。外周血Ｔ淋巴细胞Ｆａｓ阳性率与血浆ＡＮＡ含量呈正相关。结果提示：在ＳＬ     

ELISA法和免疫印迹法检测抗ENA抗体的比较

目的：将目前国内新开展的两种检测ＥＮＡ技术,即免疫印迹法（ＩＢＴ）和酶免疫法（ＥＬＩＳＡ）进行对比、分析。方法：用 ＩＢＴ法及 ＥＬＩＳＡ法同时检测 １３０例各种结缔组织病、非结缔组织病人及健康人血清中的抗ＥＮＡ抗体。结果：２０例健康人,两法均为阴性;８０例结缔组织病患者,两法检出抗 Ｓｍ抗体的符合率为 ９１．３％,检测抗 ＲＮＰ抗体的符合率为 ８２．５％,以上抗体两法的敏感性无显著差异（Ｐ＞０．０５）。检测抗ＳＳＡ抗体,ＩＢＴ法检出率低。抗ＳＳＢ抗体检出率两法亦无显著差异（Ｐ＞０．０５）,符合率为８７．５０％,在１２例ＳＳ的检测中符合率比较低,为５０％。结论：两种方法在检测抗Ｓｍ、ＲＮＰ、ＳＳＢ抗体时,敏感性无显著差异,ＥＬＩＳＡ法检测抗ＳＳＡ抗体优于ＩＢＴ法。上述两种方法在临床应用于抗ＥＮＡ抗体的检测中于可互相验证和补充。     

癫痫患者血清可溶性白细胞介素2受体测定及临床意义

目的 探讨ＳＩＬ－２Ｒ在癫痫患者血清中含量及临床意义。用ＥＬＩＳＡ检测了１５８例癫痫患者血清ＳＩＬ－２Ｒ含量。结果癫痫患者血清ＳＩＬ－２Ｒ含量明显高于对照组（Ｐ〈０．０５），癫痫患者男女之间血清ＳＩＬ－２Ｒ含量无差异（Ｐ〉０．０５），癫痫大发作型，精神运动型，婴儿痉挛症和癫痫持续状态ＳＩＬ－２Ｒ均高于对照组（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１），其他类型与对照组无差异（Ｐ〉０．０５），原发性癫痫和未服ＡＥ     

应用生物素—亲和素系统检测类风湿因子

目的 研究准确定量检测ＩｇＭ，ＩｇＧ，ＩｇＡ型类风湿因子（ＲＦ）的方法。方法 应用生物素－亲和素结合ＥＬＩＳＡ法（ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ）对５７例类风湿关节炎患者及１００例正常人血清进行检测，并与胶乳凝集试验（ＬＡＴ）及常规ＥＬＩＳＡ法测定的ＲＦ作对比。结果 ５７例病人ＩｇＭＲＦ阳性率在ＡＢＣ，ＥＬＩＳＡ法及ＬＡＴ法分别为８９．５％，８０．７％和６３．２％（Ｐ〈０．０１）。在ＬＡＴ法ＩｇＭＲＦ阴性的１     

石楠藤提取物对急性出血坏死性胰腺炎大鼠治疗作用的实验研究

作者报道中药石楠藤提取物对急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）大鼠治疗作用的实验研究。将１００只ＳＤ大鼠随机分为三组：①假手术组（ＳＯ组）；②ＡＨＮＰ组（ＡＰ组），该组动物在ＡＨＮＰ诱发后，不做特殊治疗；③石楠藤提取物治疗组（ＳＮ组）。该组动物在ＡＨＮＰ诱发后１０分钟经腹腔内注射石楠藤提取物（１％石楠藤提取物５ｍｌ／ｋｇ体重）。结果表明：ＳＮ组血清淀粉酶值明显下降（ＳＮ组１６１３０±５０３０Ｕ／Ｌ６ｈ、１９２９０±５３８０Ｕ／Ｌ１２ｈｖｓＡＰ组２３７８０±３９６０Ｕ／Ｌ、２８４７０±４１５０Ｕ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）。血中ＰＡＦ含量明显降低（ＳＮ组１．３±０．３０ｎｇ／ｍｌ１ｈ、２．０±０．３４ｎｇ／ｍｌ６ｈ、２．１±０．３２ｎｇ／ｍｌ１２ｈｖｓＡＰ组２．２±０．２５ｎｇ／ｍｌ、６．１±０．４２ｎｇ／ｍｌ、１０．１±０．５３ｎｇ／ｍｌ，ｐ＜０．０１）。血浆内毒素含量明显下降（ＳＮ组６９．９±７．２ＥＵ／Ｌ、６ｈ、９１．１±８．４ＥＵ／Ｌ、１２ｈｖｓＡＰ组９８．４±６．９ＥＵ／Ｌ、１５１．７±９．１ＥＵ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）。石楠藤提取物治疗组术后平均存活时间明显长于ＡＰ组（ＳＮ组：４３．５ｈ，ＡＰ组１１．５ｈ，ｐ＜０     

ICA、RIA和ELISA法测定甲胎蛋白的比较

目的比较测定甲胎蛋白（ＡＦＰ）的３种方法：磁粒子捕获免疫发光法（ＩＣＡ）、放射免疫法（ＲＩＡ）与酶联免疫吸附法 （ＥＬＩＳＡ）。方法　分别进行线性、精密度、对比试验比较。结果３种方法曲线相似但线性范围不同,ＩＣＡ法最宽。精密度 试验中ＩＣＡ法批内为２．５％,批间为５．８％;ＲＩＡ法批内为５．０％,批间为９．２％;ＥＬＩＳＡ法批内为１０．３％,批间为１４．６％。比 较试验显示ＲＩＡ与ＩＣＡ的结果相关性比ＲＩＡ与ＥＬＩＳＡ好。结论ＩＣＡ法测定ＡＦＰ优于ＲＩＡ和ＥＬＩＳＡ法。     

抗中性粒细胞胞浆抗体对溃疡性结肠炎诊断价值的研究

目的：建立固定中性粒细胞－ＥＬＩＳＡ,分析血清抗中性粒细胞胞浆抗体（ＡＮＣＡ）对溃疡性结肠炎（ＵＣ）的诊断价值。方法：采用固定中性粒细胞－ＥＬＩＳＡ法检测２５份溃疡性结肠炎血清,２６份细菌性结肠炎血清、１５份混合类型腹泻血清和５０份正常对照血清中的ＡＮＣＡ,对各组血清的吸光度（Ａ值）进行统计分析。结果：ＵＣ组ＡＮＣＡ与其它对照组ＡＮＣＡ之间的差异非常显著（Ｐ〈０．００５）。ＵＣ组Ａ值超过正常对照组