T淋巴细胞在异种鼠肝移植免疫排斥反应中的作用

目的：探讨Ｔ淋巴细胞是否参与了异种肝移植免疫排斥反应。方法：建立仓鼠到大鼠原位肝移植模型,用免疫组织化学染色方法检测异种肝移植免疫排斥反应中Ｔ淋巴细胞浸润情况及其Ｆａｓ抗原配体（Ｆａｓ－Ｌ）的表达,并用普通组织学及原位末端标记方法检测移植肝中细胞凋亡。结果：异种肝移植免疫排斥过程中,移植肝中Ｔ淋巴细胞,包括ＣＤ４,ＣＤ８亚型大量浸润,术后第４天开始表达Ｆａｓ－Ｌ,随着排斥反应的加重,Ｆａｓ－Ｌ表达越高,细胞凋亡数量也越多。结论：Ｔ淋巴细胞参与了异种肝移植免疫排斥反应。     

T淋巴细胞在异种鼠肝移植免疫排斥反应中的作用

目的 探讨Ｔ淋巴细胞是否参与了异种肝移植免疫排斥反应。方法 建立仓建到大鼠原全肝移植模型,用免疫组织化学染色方法检测异种肝移植免疫排斥反应中Ｔ淋巴细胞浸润情况及其Ｆａｓ抗原配体（Ｆａｓ－Ｌ）的表达,并用普通组织学及原位末端标记方法检测移植肝中细胞凋亡。结果 异种肝移植免疫排斥过程中,移植肝中Ｔ淋巴细胞,包括ＣＤ４、ＣＤ８亚型大量浸润,术后４天开始表达Ｆａｓ－Ｌ,随着排斥反应的加重,Ｆａｓ－Ｌ表达越     

虫草菌丝提取物对二甲基亚硝胺大鼠肝窦内皮细胞损伤和表型改变的影响

目的 探讨虫草菌丝提取物(CME)对二甲基亚硝胺(DMN)肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞(SECs)损伤和表型改变的影响.方法 采用DMN复制大鼠肝纤维化模型,分别于3 d、2周、4周作为观察时相点;透射电镜观察肝组织超微结构,免疫组织化学法观察肝窦壁CD44、Ⅷ因子相关抗原(vWF);放射免疫法测定血清透明质酸(HA)含量.造模同时给予CME 0.74 g/kg灌胃,每日1次,共4周.结果 DMN造模后第3天,CD44染色减弱、vWF阳性染色明显增强,SECs窗孔减少,血清HA含量显著升高(P<0.05),4周时可见SECs失窗孔和SECs下基底膜形成;CME早期(3 d)能够使SECs失窗孔减轻;CME灌胃2周、4周后,大鼠血清HA水平下降(P<0.05),肝窦壁CIM4表达增强、vWF阳性染色减弱(P<0.05),SECs失窗孔和SECs下基底膜形成减轻.结论 CME能够减轻DMN大鼠肝窦内皮细胞损伤和表型改变,抑制肝窦毛细血管化形成.     

C4d在肝移植排斥反应中表达的意义

目的:研究肝移植排斥反应中C4d沉积的部位和意义。方法:对肝移植患者的肝穿刺标本作C4d免疫组化染色,观察C4d阳性沉积情况与肝脏病理改变的关系。结果:急性细胞性排斥反应中的69.2%肝移植标本,在肝小叶汇管区小血管壁及肝血窦壁上有C4d的沉积,33.3%移植后乙肝复发和28.6%乙型肝炎的标本中,仅汇管区小血管壁有C4d的沉积,而无肝血窦壁上C4d的沉积.12倒器官保存性损伤的肝标本中1例汇管区小血管壁及肝血窦壁上有C4d的沉积,此例1mo后再次穿刺发现急性细胞性排异反应.肝移植后胆管阻塞的标本中没有发现C4d的沉积。结论:结论:C4d在肝血窦壁的沉积可以作为肝移植急性排斥反应鉴别诊断一个比较特异的免疫组化指标。     

血脾屏障的形态学研究

目的 确立血脾屏障的组成及形态构筑,探讨血脾屏障在脾功能中的作用。方法 采用健康昆明株小白鼠１００只,随机分成１０组经尾静脉注射５％墨汁混悬液（０．２￣０．３ｍＬ／只）分别在１,３,６,１２ｈ及１,３,５,７,１４,２８ｄ取脾进行组织学、免疫组化第Ⅷ因子相关抗原染色,在光镜、电镜下观察,同时检测内皮细胞、巨噬细胞天噬墨汁颗粒的数量。结果 脾血窦内皮细胞、巨噬细胞对第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应,注射墨     

外周血淋巴细胞LFA—1水平与肝移植急性排斥的关系

[目的]探讨大鼠原位肝脏移植（OLTx）后外 因淋巴细胞表面淋巴细胞功能相关抗原－1（LFA－1）与急性排斥的关系。[方法]实验动物分为两组,非排斥对照组供体、受体均为SD大鼠,各20只,排斥组供体为Wistar大鼠,受体为SD大鼠,各20只,受体大鼠分别于原位肝知名人士移植术前1天及及后第1、3、5、7天从尾静脉采血,经免疫荧光抗体－流式细胞术检测淋巴细胞表面LFA－1的表达。[结果]原位肝移植术后,受体大鼠外周血淋巴细胞LFA－1呈低水平表达,与术前相比差异具显性意义（P＜0.01）;受体大鼠发生急性排斥反应时,外周血淋巴细胞LFA－1水平显提高,与对照组相比差异具显性意义（P＜0.01）。[结论]检测外周血淋巴细胞LAF－1表达水平有助于移植肝脏急性排斥的诊断。     

建立近交系大鼠肝移植急性排斥模型的体会

目的:探讨近交系大鼠原位肝移植模型的建立并判断排斥反应发生的强度.方法:采用Kamada二袖套法,利用封闭群大鼠SD和Wistar进行建模技能训练,在此基础上建立近交系大鼠DA→LEW肝移植模型,根据临床表现和Banff标准判断排斥反应发生的强度.结果:共施行DA→LEW大鼠肝移植模型15例,手术成功率86.7%,死亡原因为肝上下腔静脉漏血、肝下下腔静脉血栓、胆道梗阻.术后第3天开始出现Ⅰ级排斥反应,7 d以后逐渐达到高峰,除术后并发症致死外,剩余均在12 d内死于Ⅲ级排斥反应.结论:DA→LEW为稳定、强烈的大鼠肝移植急排模型,是研究肝移植排斥及免疫耐受的理想动物模型.但近交系大鼠在组织结构上有其自身特点,给建模带来一定难度.     

肿瘤坏死因子在大鼠原位肝移植急性排斥反应中的作用

测定原位肝移植大鼠术后血清肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）浓度，探讨其在原位肝移植急性排斥反应中的作用。方法利用ＲＴ－ＰＣＲ检测大鼠移植肝组织内ＴＮＦαｍＲＮＡ的表达，并观察移植肝病理形态变化。结果术后３、６天异基因大鼠血清ＴＮＦα浓度都显著高于同期同基因肝移植大鼠和正常对照鼠血清ＴＮＦα浓度。在异基因原位肝移植大鼠术后第６天，肝标本中检测到ＴＮＦαｍＲＮＡ表达，而在同基因原位肝移植大鼠同期肝标本和正常大鼠肝标本中均未检测到ＴＮＦαｍＲＮＡ的表达。结论ＴＮＦα在排斥反应中发挥重要作用，术后监测ＴＮＦα浓度变化对急性排斥反应的发生有一定预测和早期诊断作用。     

大鼠肝移植技术改进及免疫排斥初步观察

目的：对大鼠肝移植模型进行技术改进,并观察将SD大鼠肝脏移植至Wistar大鼠时免疫斥发生的规律,方法：将“二袖套法”肝称植技术在袖套管制作,受体麻醉,肝上下腔静脉,门静脉及肝下下腔静脉吻合等方面进行,行供肝取自SD大鼠的Wistar大鼠肝移植30例,并随机分为环孢霉素（CsA,2mg/kg,术后第1天至第7天皮下注射）治疗组和对照组,观察移植术后免疫排斥情况,结果：肝上下腔静脉吻合时间为6．5－10．0mg/kg,术后第1天到第7天皮下注射）治疗组和对照组,观察移植术后免疫排斥情况,结果：肝上下腔静脉吻合时间为6．5－10.0min,无肝期为8．5－12．0min,93%以上的移植大鼠生存超过7天,对照组大鼠术后9－13天全部死亡,组织病理学提示有典型的免疫排斥,而CsAI治疗组到目前为止生存良好,结论：对大鼠肝移技术进行了可明显提高移植大鼠的生存率,SD大鼠移植对Wistar大鼠的肝移植组合为高排异组合,是较理想的研究肝移植排斥及移植免疫耐受的动物模型。     

自体移植脾组织脾血窦内皮细胞吞噬功能的实验研究

目的 探讨自体移植脾组织脾血窦内皮细胞的吞噬功能，评价自体脾组织移植术后移植脾组织的功能。方法 采用健康昆明种小白鼠90只，随机分为对照组每组5只，手术组每组10只，手术组在无菌条件下行脾切除自体脾组织移植术，分别在术后14、30、60、90、120、180d经尾静脉注射5％墨汁混悬液(0．3～0．4ml／只)，注射后24h取脾组织进行组织学免疫组化第Ⅷ因子染色，在光镜、电镜下观察，同时检测脾血窦内皮细胞吞噬墨汁颗粒的数量。结果 自体移植脾组织脾血窦内皮细胞对第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应。自体脾组织移植术后30d、60d组脾血窦内皮细胞可见吞噬的墨汁颗粒，在90d、120d组逐渐增多，180d组接近正常脾，墨汁颗粒主要集中在红髓及边缘区。结论 自体脾组织移植术后，移植脾组织再生的脾血窦内皮细胞具有吞噬的功能，于自体脾组织移植术后30d、60d开始出现，术后90d、120d逐渐增强，术后180d接近正常脾。     

ICAM-1在同种大鼠肝移植物中的表达及其意义

目的细胞粘附现象与移植免疫排斥的关系愈来愈为人们所关注,本研究通过对细胞间粘附分子-1（ICAM-1）在大鼠同种肝移植物中的表达情况的分析,探讨ICAM-1与急性肝移植排斥反应的关系.方法采用免疫组织化学技术ABC法检测大鼠移植肝组织ICAM-1的表达.结果30例移植肝组织中,均见肝细胞膜、胆管上皮及炎性细胞有大量的ICAM-1表达,中央静脉内皮细胞呈低表达,而正常大鼠肝细胞无一例有ICAM-1表达.结论大鼠肝移植后ICAM-1在移植肝组织中的诱导表达可能是产生急性排斥的主要步骤,其机制可能是通过促进移植物浸润细胞的粘附而加剧移植排斥反应的进程.     

ICAM-1在同种大鼠肝移植物中的表达及其意义

目的细胞粘附现象与移植免疫排斥的关系愈来愈为人们所关注,本研究通过对细胞间粘附分子-1（ICAM-1）在大鼠同种肝移植物中的表达情况的分析,探讨ICAM-1与急性肝移植排斥反应的关系.方法采用免疫组织化学技术ABC法检测大鼠30例移植肝组织ICAM-1的表达.结果肝细胞膜、胆管上皮及炎性细胞均有大量的ICAM-1表达,中央静脉内皮细胞呈低表达,而正常大鼠肝细胞无ICAM-1表达.结论大鼠肝移植后ICAM-1在移植肝组织中的诱导表达可能是产生急性排斥的主要步骤,其机制可能是通过促进移植物浸润细胞的粘附而加剧移植排斥反应的进程.     

外周血淋巴细胞LFA-1水平与肝移植急性排斥的关系

【目的】探讨大鼠原位肝脏移植(OLTx)后外周血淋巴细胞表面淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）与急性排斥的关系。【方法】实验动物分为两组,非排斥对照组供体、受体均为SD大鼠,各20只,排斥组供体为Wistar大鼠,受体为SD大鼠,各20只。受体大鼠分别于原位肝移植术前1天及术后第1、3、5、7天从尾静脉采血,经免疫荧光抗体-流式细胞术检测淋巴细胞表面LFA-1的表达。【结果】原位肝移植术后,受体大鼠外周血淋巴细胞LFA-1呈低水平表达,与术前相比差异具显著性意义（P<0.01）;受体大鼠发生急性排斥反应时,外周血淋巴细胞LFA-1水平显著增高,与对照组相比差异具显著性意义（P<0.01）。【结论】检测外周血淋巴细胞LFA-1表达水平有助于移植肝脏急性排斥的诊断。     

EXPRESSION OF ICAM-1 AND LFA-1 MOLECULES IN RELATION TO RENAL ALLOGRAFT REJECTION IN RATS

Objective.The purpose of this study was to assess the renal graft expression of ICAM-1(intercellular adhesion molecule-1) nd LFA-1(lymphocyte function-associated antigen-1)molecule with relation to graft rejection.Methods.Rat kiney transplantation was performed according to the procedure of Kamada with some modification.Experimental rats were divided into 5 groups.The survival time of recipient rats and function of grafts after renal transplantation were observed.The sections of renal graft were stained for monoclonal antibody ICAM-1 and LFA-1, and then quantification of ICAM-1 and LFA-1 expression was accomplished by computer image analysis.Results.ICAM-1 and LFA-1 increased significantly in the renal allograft rejection group as compared with the non-rejection groups(P＜0.05).Conluson.Both biopsy of renal graft and monitoring of ICAM-1 and LFA-1 are useful tools in diagnosing and treating acute rejection.     

细胞间黏附分子1与血管细胞黏附分子1在心脏移植慢性排斥反应中的表达及意义

目的研究细胞间黏附分子1（ICAM-1）与血管细胞黏附分子1（VCAM-1）在心脏移植慢性排斥反应中的表达及作用。方法采用供体脾细胞（SPC）和环磷酰胺（CP）预处理移植受体,然后行异位心脏移植术,免疫组织化学检测移植心脏中VCAM-1和ICAM-1的表达。结果SPC和CP预处理后,移植心脏中ICAM-1、VCAM-1的表达水平明显减低,而ICAM-1和VCAM-1在急性排斥反应和环孢素A（CsA）治疗组中的表达明显增强（均P〈0．05）。急性排斥反应与CsA治疗组比较差异无统计学意义。结论ICAM-1和VCAM-1的表达水平与心脏移植排斥反应的程度密切相关。     

ICAM-1和E-selectin在急性胆管炎肝损害中的作用

目的 探讨ＩＣＡＭ－１和Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ在急性胆管炎肝损害中的作用。方法 应用组织学方法观察ＩＣＡＭ－１和Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ对肝组织ＰＭＮ浸润及其肝损害作用的影响。结果 急性胆管炎时ＰＭＮ在肝窦及肝细胞周围大量聚集,大鼠肝细胞变性坏死,动物１２小时存活率仅为５６．６％。抗ＩＣＡＮ－１及Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ单抗预处理使肝组织ＰＭＮ数量明显减少,肝坏死面积减少,动物存活率提高。结果 ＩＣＡＭ－１     

INTRATHYMIC INOCULATION OF LIVER SPECIFIC ANTIGEN ALLEVIATES LIVER TRANSPLANT REJECTION

Objective To study the effects of liver specific antigen (LSA) on liver allotransplantation rejection. Methods Orthotopic liver transplantation was performed in this study. Group Ⅰ: syngeneic control (Wistar-to-Wistar); Group Ⅱ: acute rejection (SD-to-Wistar). Group Ⅲ: thymic inoculation of SD rat LSA day 7 before transplantation. The observation of general condition and survival time, rejection grades and the NF-κB activity of splenocytes were used to analyze severity of acute rejection and immune state of animals in different groups. Results The general condition of group Ⅰ was fair post transplantation with no sign of rejection. All recipients of group Ⅱ died within days 9 to 13 post transplantation with median survival time of 10.7 ±1.37 days. As for group Ⅲ, 5 out of 6 recipients survived for a long period with remarkably better general condition than that of group Ⅱ. Its rejection grades were significantly lower than group Ⅱ (P＜ 0.05).NF-κB activity was only detected in group Ⅰ between days 5 and 7 after transplantation, whereas high activity of NF-κB was detected at all points in group Ⅱ and low NF-κB activity was detected in group Ⅲ which was significantly lower than that of group Ⅱ (P ＜ 0.05). Conclusions LSA is an important transplantation antigen directly involved in the immunorejection of liver transplantation. Intrathymic inoculation of LSA can alleviate the rejection of liver allotransplantation,grafts survive for a period of time thereby, allowing a novel way to liver transplantation immunotolerance.     

肝移植术后近期毛细胆管淤胆性高胆红素血症的激素治疗

目的探讨激素对肝移植术后近期毛细胆管瘀胆性高胆红素血症的治疗作用。方法选择肝移植术后2周～1月出现血清总胆红素超过171μmol/L的13例病例,经检查排除肝脏血供、胆道并发症、急性排斥反应等因素,病理确认为肝内毛细胆管淤胆后,予静滴氢化可的松琥珀酸钠,于治疗前1日、治疗后1日、治疗后1周分别检查肝功能,比较治疗前后胆红素的变化,并于治疗前及治疗后1周分别行肝穿病理检查对照治疗前后的变化。结果经激素治疗后总胆红素水平明显下降,治疗后1周病理提示肝内毛细胆管淤胆消失。结论激素治疗肝移植术后近期毛细胆管淤胆性高胆红素血症是有效的方法。     

异氟烷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时细胞间黏附分子-1表达的影响

目的研究异氟烷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的影响,探讨异氟烷肝脏缺血再灌注保护作用的机制。方法将32只SD成年雌性大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、异氟烷组、异氟烷．缺血再灌注组。假手术组、异氟烷组作为对照;缺血再灌注组和异氟烷-缺血再灌注组阻断支配大鼠肝脏左叶和中叶的门静脉分支,建立肝脏70％缺血再灌注模型,缺血60min再灌注3h后取材,测定大鼠血清ALT、AST;免疫组织化学方法检测ICAM-1蛋白的表达,HE染色进行病理学检查。结果肝脏缺血60min再灌注3h后肝组织ICAM-1蛋白表达水平增高;血清酶ALT和AST升高;肝组织损害严重。异氟烷抑制ICAM-1表达,降低ALT、AST水平,减轻肝细胞损伤。结论肝脏缺血再灌注损伤程度与肝组织内ICAM-1水平有密切的关系,异氟烷可抑制肝脏缺血再灌注期间肝组织ICAM-1的表达,同时减轻伤肝脏损伤。     

肝移植术后趋化因子Mig、IP10、ITAC的变化对早期诊断急性排斥反应的意义

目的:观察趋化因子Mig、IP10、ITAC在肝移植术后的变化,探讨其对肝移植术后急性排斥早期诊断的意义.方法:2005年4～9月30例肝移植患者,根据临床表现及病理学检查分为急性排斥组(AR,n=9)(排除3例术后感染患者),非急性排斥组(NAR,n=18).检测患者术前1 d及术后1、3、5、7 d血清中趋化因子Mig、IP10、ITAC的表达,并与同期住院的肝硬化或肝癌患者(肝癌肝硬化组,n=16)以及健康体检者(正常对照组,n=16)进行比较.AR组患者分别于确诊当天以及经激素冲击治疗后3、7 d检测血清中3种趋化因子的表达,并分析确诊当天3种趋化因子表达与肝脏穿刺活检Banff排斥活动指数(RAI)的相关性.结果:肝移植术前1 d AR组、NAR组患者血清Mig、IP10、ITAC表达与肝癌肝硬化组无明显差异,但高于正常对照组(P<0.01).肝移植术后3 d,AR和NAR组Mig、IP10、ITAC的表达水平均有上升,高于术前1 d的表达(P<0.05).AR组9例患者分别在术后11、12和14 d确诊AR发生,术后各时间点患者血清Mig、IP10、ITAC表达明显高于NAR组(P<0.01);确诊AR当天Mig、IP10、ITAC的表达与RAI呈正相关(r=0.88、0.94、0.80).与确诊AR当天相比,经冲击治疗逆转后,3种趋化因子的表达也相应下降(P<0.01).结论:肝移植术后血清中趋化因子Mig、IP10、ITAC的表达可作为早期诊断急性排斥反应辅助特异、敏感的指标.