姜黄素对人前列腺增生间质细胞凋亡及Bcl-2,Bax表达的影响

目的：研究姜黄素对人前列腺增生间质细胞凋亡的诱导作用。方法：通过MTT法测定姜黄素抑制间质细胞的增殖效应；TUNEL法检测细胞凋亡；RT-PCR技术检测Bcl-2和Bax mRNA的表达;流式细胞术测定凋亡细胞周期的分布。结果：10，20，40 μmol·L^-1浓度的姜黄素对增生间质细胞的生长均有抑制作用，这种抑制作用具有时间/剂量依赖性(P<0.05)。TUNEL结果：与阴性组相比，10，20，40 μmol·L^-1浓度的姜黄素可以诱导间质细胞发生凋亡，凋亡率依次为(20.52±2.52)%，(48.33±0.75)%，(84.60±0.57)%(P<0.01)。RT-PCR结果：姜黄素作用于间质细胞24 h,Bcl-2/Bax mRNA的水平下降(P<0.05)。流式细胞检测发现姜黄素可以诱导人前列腺增生间质细胞周期阻滞于G₁期，10，20，40 μmol·L^-1浓度的姜黄素组细胞G₁期分别为(59.3±4.9)%，(65.2±5.1)%和(71.0±4.7)%。结论：姜黄素可以诱导人良性前列腺增生间质细胞发生凋亡，其机制可能与姜黄素改变凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA的表达有关。     

仙甲汤对前列腺增生大鼠前列腺组织bcl-2及bax表达影响的研究

目的　观察实验性前列腺增生大鼠前列腺组织bcl- 2及bax的表达及仙甲汤对其的影响。方法　去势加丙酸睾酮注射法复制大鼠前列腺增生模型 ,采用免疫组织化学法检测各组大鼠前列腺组织bcl- 2及bax的表达。结果　bcl- 2表达率模型组显著高于正常组 (P <0 .0 5 ) ,bax表达率模型组显著低于正常组 (P <0 .0 5 ) ;仙甲汤中剂量组、高剂量组及癃闭舒组的bcl- 2 ,bax表达率均接近正常组 (P均 >0 .0 5 )。结论　模型大鼠前列腺组织bcl- 2和bax调控失衡 ,仙甲汤可通过调节凋亡基因的平衡而起到抑制前列腺增生的作用     

前列回春对实验性大鼠前列腺组织Fas表达及细胞凋亡的影响

目的 :探讨前列回春对实验性大鼠前列腺组织Fas表达及细胞凋亡的影响。方法 :采用大鼠去势后注射丙酸睾酮引起前列腺增生法造模 ,灌胃给药 30d后 ,处死大鼠取前列腺组织并称湿重 ,用免疫组化方法检测前列腺组织中Fas阳性细胞的表达率 ,用流式细胞术检测细胞凋亡率和观察细胞凋亡峰。结果 :前列回春各组前列腺组织湿重与模型组比较差异非常显著 (P<0.01) ;前列回春各组和雌二醇组前列腺组织中Fas表达率明显高于模型组 (P<0.05,P<0.01) ;与正常组和模型组比较 ,前列回春和雌二醇组的细胞凋亡率明显提高 ,差异有显著性(P<0.01)。结论 :前列回春可增加实验性大鼠前列腺组织中Fas的表达 ,促进大鼠前列腺组织细胞凋亡 ,降低大鼠前列腺组织的重量 ,而且呈明显量效关系 ,表明前列回春可抑制前列腺增生。     

姜黄素对前列腺增生动物模型PCNA、Ki67、bcl-2和bax表达的影响

目的：研究姜黄素对实验性前列腺增生的影响及机理。方法：大鼠去势后皮下注射丙酸睾酮引起前列腺增生法造模，腹腔注射不同剂量姜黄素60天后，处死大鼠观察大鼠前列腺湿重，前列腺指数的变化；HE染色光镜观察前列腺病理改变；免疫组织化学方法检测PCNA、Ki67、bax和bcl-2的表达变化。结果：姜黄素可以明显降低大鼠的前列腺湿重和前列腺指数；减少前列腺组织中PCNA、Ki67和bcl-2表达。而上调bax的表达。结论：姜黄素可以抑制实验性大鼠前列腺增生细胞的增殖。其机理可能与下调细胞增殖蛋白PCNA、Ki67和凋亡抑制蛋白bcl-2的表达，增加bax的表达量相关。     

姜黄素对人肝癌细胞SNU475增殖及凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对人肝癌细胞SNU475增殖及凋亡的影响机制。方法:MTT法测定姜黄素对肝癌肿瘤细胞SNU475的增殖抑制率,进一步的利用Western blot法检测相关蛋白的表达,并利用荧光染色法检测姜黄素存在下,肝癌细胞SNU475形态的变化,最后对肝癌细胞凋亡蛋白Caspase 3活性进行了探讨。结果:姜黄素(0.5~1.5μmol/L)能够诱导了肝癌细胞SNU475的凋亡,且存在时间和剂量依赖性;Western blot法检测相关蛋白的表达结果表明,姜黄素(0.5、1.0μmol/L)能够诱导肝癌细胞SNU475中Akt、Bcl-2、组蛋白H3、H4和Cyclin D1的表达下降,有显著性差别,p21WAF1/CIP1蛋白表达水平显著上调;荧光染色法检测结果显示,在姜黄素(1.0μmol/L)药物作用后24h、48h、72h,肝癌细胞SNU475的形态均可见明显改变;Caspase 3活性检测结果表明,姜黄素(0.5、1.0μmol/L)能显著提高肝癌细胞SNU475中凋亡蛋白Caspase 3活性。结论:姜黄素作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂能够诱导肝癌细胞SNU475的凋亡,并对相关蛋白的表达和Caspase 3活性造成影响,最终对肝癌细胞SNU475的凋亡起到重要作用。     

姜黄素对人骨肉瘤MG63细胞凋亡的影响

目的探讨姜黄素诱导人骨肉瘤细胞株MG63凋亡的机制。方法不同浓度(0、25、50和75μM)姜黄素作用MG63细胞24 h后,CCK8法检测细胞体外增殖,TUNEL染色法检测细胞凋亡,Western blotting检测AKT/Bax-Bcl-2/Caspase 3等内源性凋亡途径相关蛋白表达水平。结果 CCK8实验结果显示在0~75μM范围内,50μM以上浓度的姜黄素能显著抑制MG63增殖,诱导细胞凋亡、p-AKT蛋白水平明显降低,而Bax蛋白及剪切的Caspase 3蛋白水平则显著增高。结论姜黄素通过影响AKT/BaxBcl-2/Caspase 3途径诱导MG63细胞凋亡。     

姜黄素对人白血病K562细胞凋亡的影响

Ｋ５６２细胞对多种化疗药物诱导凋亡具有抗性，本文以ＡＯ／ＥＢ染色法、细胞分光光度术、ＤＮＡ凝胶电泳及电镜观察等方法，发现姜黄素可显著诱导Ｋ５６２细胞凋亡，提示该药对治疗慢性粒细胞性白血病可能有价值。     

姜黄素对人肾癌786-O细胞凋亡和侵袭的影响

目的:通过体外实验研究姜黄素对人肾癌786-O细胞凋亡和侵袭影响的可能机制,为肾癌的临床药物治疗提供理论依据.方法:体外培养人肾癌786-O细胞,以5、10、20、40 μmol/L姜黄素处理48 h后,采用流式细胞技术(FCM)、DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL技术等方法观察786-O细胞凋亡率;用Western blot法研究不同浓度姜黄素对786-O细胞的MMPs表达影响.结果:不同浓度姜黄素处理的人肾癌786-O细胞,细胞的凋亡率随姜黄素浓度的增大而增加;DNA琼脂糖凝胶电泳分析,随浓度增大可见凋亡特征性的DNA梯形条带更加清晰.Western blot蛋白电泳条带显示,随姜黄素浓度的逐渐增加,MMP2和MMP9条带的灰度逐渐降低.结论:姜黄素可以诱导人肾癌786-O细胞的凋亡,细胞凋亡率随姜黄素浓度的增大而增加;姜黄素可以通过下调MMP2和MMP9的蛋白表达,发挥抗侵袭作用.     

姜黄素对血管瘤内皮细胞凋亡的诱导作用及对Bcl-2和Bax蛋白表达的调控

目的:研究姜黄素对血管瘤内皮细胞凋亡的影响。方法:在培养液体系中加入不同浓度的姜黄素进行不同时间长度的诱导,以MTT法检测细胞增殖,流式细胞术,TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blotting分析Bcl-2和Caspase-9蛋白表达。结果:1～50μmol/姜黄素均能抑制血管瘤内皮细胞增殖。5、10、50μmol/L姜黄素作用细胞4天后的凋亡率分别为(11.98±2.13)%、(17.96±1.25)%、(26.86±2.08)%,与对照组(4.03±1.16)%比较差异均有显著性意义(均P<0.05)。姜黄素浓度越高,诱导凋亡作用越明显,呈明显的剂量依赖效应。50μmol/L姜黄素作用细胞1、2、3、4天后的凋亡率分别为(6.93±1.06)%、(10.15±1.35)%、(17.21±2.06)%、(26.83±2.02)%,与对照组(3.98±1.03)%比较差异均有显著性意义(均P<0.05)。姜黄素作用时间越长,抑制血管瘤内皮细胞增殖作用和诱导凋亡的作用也越明显,呈明显的时间依赖效应。同时姜黄素浓度越大、作用时间越长,血管瘤内皮细胞细胞中Bcl-2蛋白的表达明显减少,而Caspase-9蛋白的表达明显增加。结论:姜黄素能够抑制血管瘤内皮细胞增殖、诱导血管瘤内皮细胞发生凋亡,并呈时间和剂量依赖效应,可能是通过下调凋亡抑制基因bcl-2表达,上调Caspase-9表达而实现的。     

姜黄素对人胃腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨姜黄素对人胃腺癌SGC－7901细胞增殖的影响及作用机制。方法：应用MTT试验观察不同浓度姜黄素作用后人胃腺癌SCC一7901细胞增殖的改变；应用HE染色光镜及电子显微镜下观察姜黄素作用36小时后SGC－7901细胞形态改变；流式细胞仪检测姜黄素作用12、24、36小时后SGC－7901细胞凋亡情况。结果：不同浓度姜黄素对人胃腺癌SGC－7901细胞增殖均有抑制作用，且其抑制作用在其实验浓度范围内随着浓度增加而增强。姜黄素能明显诱导SGC－7901细胞凋亡，镜下可见肿瘤细胞典型的凋亡改变，流式细胞仪分析可见典型的凋亡峰。结论：姜黄素对人胃腺癌SGC－7901细胞增殖有抑制和诱导其凋亡的作用。     

Ganoderma lucidum extract induces G1 cell cycle arrest, and apoptosis in human breast cancer cells

Ganoderma lucidum (Fr.) Karst is a traditional Chinese herb that has been widely used for centuries to treat various diseases including cancer. Herein, an ethanol-soluble and acidic component (ESAC), which mainly contains triterpenes, was prepared from G. lucidum and its anti-tumor effects in vitro were tested on human breast cancer cells. Our results showed that ESAC reduced the cell viability of MCF-7 and MDA-MB-231 cells in a concentration-dependent manner with IC(50) of about 100 μg/mL and 60 μg/mL, respectively. DNA damage was detected by Comet assay and the increased expression of γ-H2AX after ESAC treatment was determined in MCF-7 cells. Moreover, ESAC effectively mediated G1 cell cycle arrest in both concentration- and time-dependent manners and induced apoptosis as determined by Hoechst staining, DNA fragment assay and Western blot analysis in MCF-7 cells. In conclusion, ESAC exerts anti-proliferation effects by inducing DNA damage, G1 cell cycle arrest and apoptosis in human breast cancer cells.     

Atractylenolide II induces G1 cell-cycle arrest and apoptosis in B16 melanoma cells

Ethnopharmacological relevance

Atractylenolide II (AT-II) is a sesquiterpene compound isolated from the dried rhizome of Atractylodes macrocephala (Baizhu in Chinese), which is traditionally prescribed for melanoma treatment by Chinese medicine practitioners. Our previous study showed that AT-II can inhibit B16 cells proliferation. Here we investigate the mechanistic basis for the anti-proliferative activity of AT-II in B16 melanoma cells.

Materials and methods

Cell viability was examined by MTT assay. Cell cycle distribution and apoptosis were determined by flow cytometry. Protein expression was determined by Western blotting.

Results

AT-II treatment for 48 h dose-dependently inhibited cell proliferation with an IC₅₀ of 82.3 μM, and induced G1 phase cell cycle arrest. Moreover, treatment with 75 μM AT-II induced apoptosis. These observations were associated with the decrease of the expression of Cdk2, phosphorylated-Akt, phosphorylated-ERK and Bcl-2, the increase of the expression of phosphorylated-p38, phosphorylated-p53, p21, p27, and activation of caspases-8, -9 and -3. In addition, a chemical inhibitor of p53, PFTα, significantly decreased AT-II-mediated growth inhibition and apoptosis.

Conclusions

We demonstrated that the G1-arresting and apoptotic effects of AT-II in B16 cells involve p38 activation as well as ERK and Akt inactivation, and the cytotoxic/apoptotic effects of AT-II are potentially p53 dependent. These findings provided chemical and pharmacological basis for the traditional application of Baizhu in melanoma treatment.     

Methanol extract of the seaweed Gloiopeltis furcata induces G2/M arrest and inhibits cyclooxygenase-2 activity in human hepatocarcinoma HepG2 cells

It was previously reported that a methanol extract of Gloiopeltis furcata (MEGF), a kind of edible seaweed, inhibited the growth of several human cancer cell lines. In the present study, the effect of MEGF on the growth of human hepatocarcinoma HepG2 cells and its effect on the cyclooxygenases (COXs) expression were investigated. MEGF markedly reduced the viability of HepG2 cells and induced the G2/M arrest of the cell cycle in a concentration dependent manner. These effects were associated with the down-regulation of cyclin A, up-regulation of cyclin-dependent kinase (Cdk) inhibitor p21 (WAF1/CIP1) and dephosphorylation of Cdc25C. Furthermore, it was found that MEGF decreased the levels of COX-2 mRNA and protein expression without significant changes in the levels of COX-1, which was correlated with a decrease in prostaglandin E(2) (PGE(2)) synthesis. These findings indicate that MEGF may have a possible therapeutic potential in hepatoma cancer patients.     

苦参碱调节Bax和Bcl-2蛋白表达诱导肺腺癌A549细胞凋亡的机制

目的:探讨Bax和Bcl-2蛋白在苦参碱诱导A549细胞凋亡中的作用。方法:MTT法检测苦参碱对A549细胞生长的抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达情况。结果:不同浓度的苦参碱对肺腺癌细胞生长均有抑制作用,抑制率与浓度呈正相关。苦参碱随时间进行性降低Bcl-2蛋白的表达,相应地稳步提高Bax蛋白的表达,同时促进Bax从胞浆内向线粒体移位,紧接着降解Caspase-3蛋白。结论:苦参碱通过调节细胞内Bax和Bcl-2蛋白的表达经线粒体信号转导途径诱导A549细胞的凋亡。     

As2O3对大鼠生精细胞凋亡及其Bcl-2/Bax 表达的变化

目的；观察不同剂量的染砷(As2O3)大鼠生精细胞凋亡及其Bcl-2/Bax表达的变化。方法：40只健康雄性SD大鼠随机分成4组，分别为0.375，0.75，1.5 mg·kg-1 3个染毒组和正常正常组,灌胃法连续给药16周后处死，对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数,并计算每日精子生成量(DSP)。采用TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡，免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2/Bax的表达。结果：①与正常组相比,中剂量组(0.75 mg·kg-1)和高剂量组(1.5 mg·kg-1)睾丸精子头计数和DSP均显著降低(P＜0.01)，生精细胞凋亡指数(AI)显著升高(P＜0.01)，生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低(P＜0.01)，Bax表达明显升高(P＜0.01)；②DSP与生精细胞AI呈负相关(r=-0.563，P＜0.01)；③生精细胞凋亡与Bcl-2表达呈负相关(r=-0.825，P＜0.01)，与Bax表达呈正相关(r=0.710，P＜0.01)。结论：一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2和促进Bax的表达，诱导生精细胞凋亡增加而导致精子生成量的减少，产生雄性生殖毒性。     

Buddlejasaponin IV induces cell cycle arrest at G2/M phase and apoptosis in immortalized human oral keratinocytes

Buddlejasaponin IV (BS-IV), a major component of Pleurospermum kamtschaticum, exerts antiinflammatory and cytotoxic effects against cancer cells. The study investigated whether BS-IV could prevent oral carcinogenesis by inhibiting the growth of immortalized human oral keratinocytes (IHOKs). BS-IV reduced cell viability and induced cell cycle arrest at G2/M phase and apoptotic morphological changes in IHOKs. BS-IV inhibited the levels of cyclin B1, Cdc2 and Cdc25C, but enhanced Chk2 phosphorylation. The increased levels of pRb and p21 protein and the activation of p53 were also noted in BS-IV-treated IHOKs. In addition, BS-IV induced cytochrome c release from mitochondria by reducing antiapoptotic Bcl-2 levels and increasing pro-apoptotic Bax levels. BS-IV treatment resulted in the activation of caspase-9 and caspase-3. PARP cleavage was also clearly observed in the BS-IV-treated IHOKs. Furthermore, the expression of the Fas death receptor and Fas ligand was induced and procaspase-8 level was suppressed by BS-IV treatment. Taken together, BS-IV treatment inhibited the growth of IHOK cells via the induction of p53-dependent cell cycle arrest at the G2/M phase and apoptosis via both mitochondrial-dependent and death receptor-mediated pathways. Thus, BS-IV can be considered an excellent candidate for a chemopreventive agent to block the progression of HPV-induced oral carcinogenesis.     

山茱萸多糖对肺癌细胞的凋亡作用及Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨山茱萸多糖对人肺癌A549细胞凋亡的作用及凋亡相关基因表达的影响.方法 采用MTT法、DNA琼脂糖凝胶电泳法、免疫组化SP法检测山茱萸多糖对A549细胞凋亡作用及Bcl-2、Bax蛋白表达的变化.结果 山茱萸多糖对A549细胞抑制作用明显,抑制程度与质量浓度呈正相关;DNA琼脂糖凝胶电泳出现相差约200 bp的DNA梯形条带,免疫组化SP法染色显示Bcl-2的表达下降,Bax的表达上升.结论 山茱萸多糖对人肺癌A549细胞的增殖有较强抑制作用,能诱导细胞凋亡,其机制与下调Bcl-2的表达,上调Bax的表达有关.     

苦参碱对肺腺癌细胞凋亡及bcl-2、bax表达的影响

目的探讨中药提取物苦参碱对人肺腺癌细胞系SPC-A-1的凋亡诱导作用及其发生的机制。方法用不同浓度的苦参碱对体外培养的SPC-A-1细胞进行干预。分别采用MTT、免疫细胞化学染色、流式细胞仪检测的方法,观察其对SPC-A-1细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用;并对凋亡相关bcl-2与bax蛋白表达的变化进行定性检测。结果经不同浓度的苦参碱处理后的SPC-A-1细胞,其生长受到明显的抑制,细胞凋亡指数随药物浓度增加而明显增加;实验组bax表达明显高于对照组。结论一定浓度的苦参碱能抑制SPC-A-1细胞的增殖,促进其凋亡;其机制可能与调控bcl-2、bax表达有关。     

黄芩素通过激活Caspases和Bcl-2家族蛋白诱导卵巢癌HO-8910细胞凋亡

目的研究黄芩素对卵巢癌HO-8910细胞凋亡的调控作用及其可能的作用机制。方法选取人卵巢癌细胞系HO-8910细胞,经黄芩素不同浓度及不同时间处理后,分别采用噻唑蓝(MTT)法测定对细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;采用Westernblotting法检测Bcl-2家族蛋白表达情况。结果黄芩素对HO-8910细胞有明显的增殖抑制作用,呈浓度-时间依赖性。与对照组比较,黄芩素组细胞凋亡率明显升高(P0.05、0.01)。黄芩素上调Bax/Bcl-2值,上调cleaved Caspase-3及cleaved Caspase-9的蛋白表达量,呈浓度依赖性。结论黄芩素通过激活Caspase和Bcl-2家族蛋白对卵巢癌HO-8910细胞发挥抗增殖及诱导凋亡活性。