丙戊酸钠抑制肺癌细胞株A549增殖的研究

目的研究丙戊酸钠（sodium valproate,VPA）对肺癌细胞株A549细胞增殖的影响。方法体外不同浓度VPA不同作用时间处理人肺癌细胞株A549,倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞技术分析细胞周期与细胞凋亡的改变。结果2.0 mmol/L VPA作用72 h细胞形态明显改变、细胞数明显减少。1.0mmol/L VPA作用72 h后,细胞增殖被抑制,抑制率为（15.8±2.8）%,与同期对照组相比,差异具有统计学意义（P〈0.05）;提高处理浓度或延长作用时间,抑制作用有加强趋势。1.0 mmol/L VPA作用72 h后可改变细胞周期分布,G1期细胞比例为（72.2±3.4）%,与同期对照组相比差异显著;2.0 mmol/LVPA处理24～72 h后G1细胞比例由（64.5±3.7）%增加至（79.8±4.4）%,而S期细胞由（30.7±5.17）%降低至（14.2±3.37）%;提高处理浓度或延长作用时间均使G1期细胞比例增高,S期细胞比例减少。2 mmol/L VPA作用24～72 h可提高细胞凋亡率,由（7.30±1.87）%增加到（19.85±2.40）%。结论VPA可抑制肺癌A549细胞生长,改变细胞周期分布、促进细胞凋亡。     

甲基硒酸对人卵巢癌顺铂耐药细胞株 SKOV3/DDP 耐药的逆转作用及机制

目的：通过用甲基硒酸(methyl-seleninic acid,MSA)作用于卵巢癌顺铂(cisplatin,DDP)耐药细胞株(SKOV3/ DDP),探讨其对卵巢癌耐药株耐药的逆转作用及机制。方法： MTT 法检测不同浓度DDP作用48 h后SKOV3和SKOV3/ DDP细胞增殖抑制率;并用Western印迹法检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞中β-catenin蛋白的表达。MTT法检测2, 6 μmol/L MSA及其联合不同浓度DDP对SKOV3/DDP细胞的抑制作用;采用Western印迹法检测各组细胞中β-catenin蛋 白的表达,并进行定量分析。结果：不同浓度的DDP作用于SKOV3和SKOV3/DDP细胞48 h后,SKOV3/DDP细胞的 抑制率均低于SKOV3细胞(P<0.05);SKOV3/DDP细胞中β-catenin表达高于SKOV3细胞(P<0.05)。不同浓度MSA作用于 SKOV3/DDP细胞48 h后,细胞抑制率随MSA的浓度增高而增加(P<0.05)。2,6 μmol/L MSA联合DDP组SKOV3/DDP细 胞的48 h抑制率均高于单用DDP组而β-catenin的表达均低于单用DDP组(P<0.05)。结论：MSA能够逆转SKOV3/DDP细 胞对DDP的耐药性,此作用可能与其降低β-catenin表达有关。     

姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV3的抗增殖作用

目的:探讨姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV3的抑制增殖作用及其机制.方法:采用MTT法测定姜黄素在不同浓度、不同时间对SKOV3的抑制增殖效应,流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率,透射电镜观察细胞的超微结构变化,免疫细胞化学法检测凋亡相关基因蛋白的表达.结果:姜黄素可抑制SKOV3细胞的生长,其抑制率与药物浓度和作用时间呈依赖关系,72h的中效浓度(IC50)为79.96μmol/L,流式细胞仪分析证实姜黄素能使SKOV3细胞聚积在G2/M,电镜观察发现姜黄素可诱导细胞凋亡,姜黄素作用72h后,免疫细胞化学表明突变型P53蛋白(MTP53)及Bcl-2表达减弱,Bax及Fas表达增强.结论:姜黄素对SKOV3细胞有抑制增殖作用,通过下调MTP53、Bcl-2的表达及上调Bax、Fas的表达而诱导细胞凋亡.     

丙戊酸钠通过p21调控大鼠神经干细胞的增殖

目的 探讨丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对体外培养的成年雌大鼠脊髓神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响.方法 采用不同浓度的VPA(10-5、10-4、10-3、10-2、10-1、1、10 mmol/L)作用于NSCs,CCK-8法检测在不同时间点(0、24、48、72 h)对细胞增殖的影响；VPA(10-5、l mmol/L)作用于NSCs 48 h后,流式细胞仪测定细胞周期分布,PCR测定p21在基因水平的表达,Western blot测定p21在蛋白质水平的表达.结果 CCK-8检测显示,当VPA浓度＞ 10-5 mmol/L时,体外培养的成年大鼠脊髓NSCs的增殖受到明显抑制,且具有时间依赖性.流式细胞仪细胞周期检测显示,同样浓度下,VPA可阻滞NSCs由G0/G1期向S期转换,表现为G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞减少.PCR检测发现VPA可促进p21基因水平的表达.Western blot检测发现VPA可促进p21蛋白质水平的表达,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 VPA可能通过促进p21表达,使NSCs阻滞于G0/G1期,最终抑制NSCs增殖.     

丁酸钠对Hep-2细胞生长、凋亡及细胞周期的影响

目的:观察丁酸钠(SB)对人喉癌Hep-2细胞的生长抑制作用,探讨其对细胞凋亡及细胞周期的影响.方法:以MTT法检测0.625～10.000 mmol/L SB对Hep-2细胞生长的抑制作用;以TUNEL法检测1.250～5.000 mmol/L SB作用24 h、48 h、72 h后的细胞凋亡情况;以琼脂糖凝胶电泳法检测2.500 mmol/L SB作用24 h、48 h、72 h后的细胞DNA片段;应用流式细胞仪分析1.250 mmol/L、2.500 mmol/L、5.000 mmol/L SB作用24 h后细胞凋亡率和细胞周期变化;采用免疫组织化学SP法检测2.500 mmol/L SB作用24 h、48 h、72 h后细胞抗凋亡蛋白Survivin表达的变化.结果:SB对Hep-2细胞的生长抑制作用具有时间和剂量关系(不同时间组、不同剂量组间比较,P均＜0.01);细胞凋亡指数随SB剂量升高、作用时间延长而增加(P均＜0.01);琼脂糖凝胶电泳可见特征性的凋亡细胞DNA梯状条带;流式细胞术显示细胞凋亡率随SB剂量升高而增加(P＜0.01),细胞周期阻滞于G0/G1期;2.500 mmol/L SB作用72 h,Survivin表达阳性细胞的光密度值由作用前的0.164±0.009下降至0.045±0.006(P＜0.01).结论:SB能有效抑制 Hep-2细胞的生长,其机制可能与抑制细胞Survivin蛋白表达进而诱导细胞凋亡以及参与细胞周期调控有关.     

罗格列酮诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡过程中hTERT表达变化的研究

目的探讨罗格列酮对卵巢癌细胞株SKOV3细胞的凋亡作用,及细胞凋亡与端粒酶反转录酶(hTERT)之间的关系。方法使用倒置相差显微镜观察药物作用前后细胞形态变化;不同浓度罗格列酮作用24、48 h后,流式细胞仪分别检测卵巢癌SKOV3细胞凋亡情况;免疫荧光检测hTERT蛋白表达的变化;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTERT mRNA变化。结果罗格列酮处理后,倒置相差显微镜检测到卵巢癌细胞变圆,胞质固缩,细胞间隙增宽,部分细胞脱壁并漂浮。25～200μmol/L罗格列酮作用于细胞24 h后即发生细胞凋亡,48 h后凋亡更加明显,同时存在时间和浓度依赖性。药物作用48 h后免疫荧光检测hTERT蛋白表达下调,RT-PCR检测hTERT mRNA的表达下调,呈浓度依赖性。结论罗格列酮可以诱导卵巢癌SKOV3细胞株凋亡,具有时间浓度依赖性,其机制可能与下调hTERT的表达有关。     

丙戊酸钠对K562细胞的增殖抑制作用

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)对慢性髓系白血病细胞株K562的增殖抑制作用.方法:噻唑蓝比色法(MTT法)检测不同浓度VPA对K562细胞增殖的抑制作用;Western Blot法检测K562细胞Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果:VPA能显著抑制K562细胞的增殖(P＜0.01),VPA处理K562细胞72h的半数抑制浓度(IC50)为(2.34±0.14)mmol/L;3mmol/L VPA处理K562细胞72h后,Bax蛋白的表达明显升高、Bcl-2蛋白的表达明显降低.结论:VPA可通过上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达抑制K562细胞增殖,诱导K562细胞凋亡.     

三氧化二砷诱导卵巢癌细胞株SKOV3和COC1凋亡

目的：对比研究三氧化二砷(As2O3)诱导卵巢癌细胞株SKOV3和COC1凋亡的作用．方法：用不同浓度的As2O3溶液作用人卵巢癌细胞株SKOV3及COC1,于不同时间点收集细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率及分析细胞周期的变化,原位末端标记法观察细胞凋亡形态学特征．结果：不同浓度的As2O3溶液对卵巢癌细胞株SKOV3及COC1均有不同程度的生长抑制作用．随着药物浓度的升高、作用时间的延长,As2O3对COC1细胞的生长抑制率升高．15．0μmol/L(10ppc)浓度组的As203对SKOV3的生长抑制效应最显．低于15．0μmol/L的浓度组对SKOV3细胞株的抑制率之间没有显性差异．As2O3对COC1细胞的生长抑制作用比SKOV3强．6．0μmol/L As2O3作用48 h SKOV3细胞出现凋亡形态学改变,COC1细胞在1．5μmol/L As2O3作用48h就出现了凋亡形态学改变,且随着作用时间的延长凋亡细胞增多．15．0和6．0μmol/L As2O3作用下SKOV3细胞周期的变化出现了随着药物作用时间的延长G1期细胞比例逐渐上升,S期、G2／M期细胞的比例同时降低的现象．在3．0和1．5μmoL／L As2O3作用下COC1细胞周期也出现了相同的改变．结论：As2O3可以诱导卵巢癌细胞株SKOV3和COC1发生凋亡,COC1比SKOV3对砷剂更敏感．诱导细胞发生G1期阻滞是As2O3抑制卵巢癌细胞生长作用的可能机制之一。     

罗格列酮对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的研究

目的 探讨罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对人卵巢癌SKOV3细胞生长和凋亡的影响.方法 在SKOV3细胞培养液中加入不同浓度RSG(0.1、1.0、10和100 μmol/L),采用MTT法测定RSG对SKOV3细胞增殖的影响;流式细胞术检测各组细胞凋亡率和细胞周期的变化;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化;荧光定量RT-PCR技术和免疫细胞化学方法 检测干预前后细胞中PPARγ、c-myc的mRNA和蛋白水平变化.结果 MTT法结果 显示,RSG可抑制SKOV3细胞生长,并呈明显的浓度和时间依赖方式.流式细胞术结果 显示,RSG能明显诱导SKOV3细胞凋亡,在10、100 μmol/L RSG作用于SKOV3细胞24 h后,凋亡率分别为45.75%和51.97%,均明显高于对照组(6.82%,P<0.05);并使细胞周期阻止于G1期,呈浓度依赖方式.Hoechst33258荧光染色显示RSG处理后的SKOV3细胞中出现凋亡小体.免疫细胞化学和荧光定量RT-PCR结果 显示,人卵巢癌SKOV3细胞表达PPARγ,RSG作用于SKOV3细胞24 h后PPARγ的mRNA和蛋白表达水平上调,而c-myc的mRNA和蛋白表达水平下调.结论 RSG具有抑制人卵巢癌SKOV3细胞生长和诱导凋亡作用,使细胞周期阻滞于G1期;并通过活化PPARγ,下调c-myc的mRNA和蛋白表达水平.     

干扰ATF5功能对卵巢癌细胞紫杉醇敏感性影响

目的探讨干扰转录激活因子5(ATF5)功能对卵巢癌细胞SKOV3紫杉醇(PTX)敏感性的影响。方法应用RT-PCR、Western blot方法检测SKOV3细胞中ATF5的表达;WST-8法检测不同浓度PTX(0、10、20、40、80、100nmol/L)与SKOV3细胞作用不同时间(24、48、72h)后细胞增殖情况;将SKOV3细胞分为空质粒组(vector组)、干扰质粒组(dnATF5组)、药物组(PTX组)、联合治疗组(dnATF5+PTX组),对vector组、dnATF5组、dnATF5+PTX组进行质粒转染,转染后24hPTX组和dnATF5+PTX组给予PTX(70nmol/L)作用48h,WST-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖抑制率或细胞凋亡率;Western blot检测干扰质粒转染SKOV3不同时间(0、24、48h)后Bcl-2蛋白的表达。以急性视网膜色素上皮-19(ARPE-19)二倍体细胞作为正常对照。结果卵巢癌SKOV3细胞中高表达ATF5;PTX对SKOV3细胞生长具有明显的抑制作用,呈剂量和时间依赖性(F=497.68～11 286.93,P<0.05);干扰ATF5功能后明显促进PTX诱导的SKOV3细胞增殖抑制或细胞凋亡(t=11.40、13.86,P<0.05);与ARPE-19细胞相比,干扰ATF5功能联合PTX作用对SKOV3细胞增殖和凋亡的影响更明显(t=11.50、13.86,P<0.05);干扰ATF5功能后SKOV3细胞Bcl-2蛋白的表达明显下调(F=158.38,P<0.05)。结论 ATF5在卵巢癌SKOV3细胞中高表达,干扰ATF5能明显增强卵巢癌SKOV3细胞对PTX的敏感性,其机制可能与Bcl-2的下调有关;干扰ATF5功能联合PTX作用对肿瘤细胞的疗效强于二倍体细胞。     

丁酸钠诱导人卵巢癌细胞分化的实验研究

目的观察丁酸钠（NaB）对人卵巢癌细胞生长和分化的影响。方法以人卵巢癌细胞（SKOV3）为实验对象，分对照组、不同浓度的丁酸钠组。采用MTT法检测NaB作用后细胞的生长抑制率，电镜下观察细胞的超微结构，流式细胞仪测定细胞周期变化，放射免疫法测定培养基中CA125的含量。半定量RT-PCR检测癌基因c-erbB-2 mRNA水平的变化。结果丁酸钠4．5mm／L能明显抑制SKOV3细胞增殖，细胞形态呈明显的良性分化，细胞堆积于G1期，培养液中CA125分泌量及c-erbB-2 mRNA水平均降低。结论丁酸钠对人卵巢癌细胞有明显的诱导分化作用，可能通过抑制癌基因c-erbB-2 mRNA的表达实现。     

淫羊藿苷对人卵巢癌细胞株的肿瘤恶性行为的抑制作用研究

目的 探讨淫羊藿苷对人卵巢癌细胞SKOV3及多药耐药细胞株SKVCR增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。 方法 以不同质量浓度淫羊藿苷溶液分别作用于SKOV3细胞和SKVCR细胞,CCK8实验检测其抑制率及半数抑制浓度（IC₅₀）;并以0.8倍IC₅₀质量浓度淫羊藿苷处理细胞,流式细胞仪检测对细胞增殖和凋亡的影响;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,免疫印迹法检测Caspase-3蛋白表达水平。 结果 淫羊藿苷抑制SKOV3及SKVCR细胞增殖,且在5~100 μg/mL质量浓度范围内呈量效正相关趋势;淫羊藿苷分别以19.5 μg/mL和48.4 μg/mL（0.8倍IC₅₀）质量浓度作用于SKOV3细胞及SKVCR细胞后,SKOV3及SKVCR细胞凋亡率均较对照组增加（P<0.05）;同时,与对照组相比,细胞增殖、迁移和侵袭能力均下降（P<0.05）,免疫印迹结果显示,淫羊藿苷可增加卵巢癌细胞Caspase-3蛋白表达（P<0.05）。 结论 淫羊藿苷能抑制人卵巢癌细胞SKOV3及多药耐药细胞株的增殖、迁移和侵袭能力,并上调Caspase-3蛋白表达,诱导细胞凋亡。     

L-NAME调控EMT抑制卵巢癌细胞迁移

目的探讨一氧化氮合酶泛抑制剂左旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)对卵巢癌SKOV3细胞体外增殖、迁移以及对上皮间充质转化(EMT)标志物的影响。方法利用L-NAME抑制卵巢癌SKOV3中一氧化氮合酶(NOS)功能,以L-NAME处理组为实验组,二甲基亚砜(DMSO)组为对照组,采用CCK8增殖实验、平板克隆形成试验、划痕试验和Transwell小室迁移实验检测L-NAME对卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移功能的影响;并利用荧光定量PCR和Western blot检测卵巢癌细胞上皮细胞标志物E-cadherin和间充质细胞标志物N-cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达,观察L-NAME对卵巢癌SKOV3细胞EMT标志物的调控作用。结果 CCK8增殖实验和平板克隆形成实验显示L-NAME抑制SKOV3细胞增殖功能(P0.05);划痕实验和Transwell小室实验显示L-NAME抑制SKOV3细胞迁移功能(P0.05);荧光定量PCR和Western blot结果显示L-NAME上调E-cadherin的表达,下调N-cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达(P0.05)。结论 L-NAME抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移功能,调节EMT标志物变化。     

ISO-1在卵巢癌侵袭中的作用

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子MIF特异抑制剂(S, R)-3-(4-羟苯基)-4, 5-二氢-5-异噁唑乙酸甲酯(ISO-1)对卵巢癌细胞增殖、侵袭的作用以及对血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factorreceptor-2,VEGFR-2)的影响,为卵巢癌CD74靶向治疗奠定基础。方法 不同浓度ISO-1作用于人卵巢癌细胞SKOV3、A2780,对照组以相应浓度的稀释液处理。MTT法检测卵巢癌细胞增殖,L 多巴色素甲酯测定M IF互变异构酶活性,微孔迁移法检测卵巢癌细胞体外侵袭,RT- PCR检测mRNA表达情况。结果 ISO-1能显著抑制人卵巢癌细胞SKOV3、A2780的增殖及其MIF互变异构酶活性(P<0.05),且两者呈正相关性(SKOV3: r=0.841, P<0.01; A2780: r=0.862, P<0.01); 50μmol/L ISO-1作用于卵巢癌细胞SKOV3、A2780细胞24h后,其穿透聚碳酸酯膜的能力显著降低(P<0.05),同时卵巢癌细胞的CD74、VEGFR-2的mRNA水平显著降低(P<0.05)。结论 ISO-1通过抑制CD74的活性下调VEGF、VEGFR-2的表达,从而抑制卵巢癌细胞的增殖及侵袭。     

RNA 干扰bcl-2基因对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖影响的实验研究

目的探讨RNA干扰bcl-2基因对人卵巢癌细胞体外增殖及凋亡的调控作用.方法选用人卵巢癌细胞进行体外培养,以siRNA分别处理SKOV3细胞24～72h后,MTT法检测细胞增殖,SABC免疫组织化学法检测细胞内bcl-2、bcl-xl、bax、caspase-3蛋白表达水平.结果 RNA干扰bcl-2基因对SKOV3细胞增殖有抑制作用.bcl-2表达下调,Caspase-3蛋白表达水平上调.结论 RNA干扰bcl-2对人卵巢癌细胞的增殖具有明显的抑制作用.下调bcl-2的表达,上调Caspase-3蛋白表达水平.特异性地降解抗凋亡基因bcl-2的mRNA是其作用机制.     

抑制ClC-3表达对顺铂诱导人卵巢癌SKOV3/DDP细胞凋亡的促进作用

目的：探讨抑制氯离子通道-3(ClC-3)基因表达对顺铂(DDP)诱导的人卵巢癌SKOV3/DDP细胞凋亡的促进作用,为卵巢癌的治疗提供实验依据。方法：转染pSH1-siRNA-ClC-3 重组质粒至人卵巢癌SKOV3/DDP细胞,Western blotting方法检测转染重组质粒对ClC-3蛋白表达的影响;MTT法检测细胞增殖率;Western blotting方法检测凋亡相关蛋白细胞色素C（Cyt-c）及Caspase-3活化片段蛋白表达。结果：与SKOV3细胞比较,SKOV3/ DDP细胞中ClC-3蛋白表达水平增加( P<0.05);转染pSH1-siRNA-ClC-3 重组质粒后,SKOV3/DDP细胞ClC蛋白表达水平明显降低;ClC-3-siRNA联合DDP作用后,SKOV3/DDP细胞增殖率下降( P<0.05),Cyt-c和Caspase-3活化片段蛋白表达水平增加( P<0.05) 。结论：pSH1-siRNA-ClC-3可有效抑制SKOV3/DDP细胞ClC-3蛋白的表达,并促进DDP诱导SKOV3/DDP细胞凋亡。     

丙戊酸钠联合吡柔比星对儿童急性淋巴细胞白血病细胞株的作用

目的：探讨小剂量丙戊酸钠（valproateacid,VPA）对吡柔比星（pimmbicin,THP）抑制儿童急性B淋巴细胞白血病fB-cellacutelymphoblasticleukemia,B-ALL）细胞株Raji细胞生长的增敏作用及其可能机制。方法：应用WST-1法检测不同浓度的VPA、THP单药及二者联合应用时对Raii细胞增殖的影响：将筛选出最佳联合作用浓度的THP与VPA联合作用于Raii细胞,显微镜下观察细胞的增殖情况．TUNEL法检测细胞凋亡,同时通过Real-timePCR、WestemBlot检测不同组合药物作用前后细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2mRNA和蛋白水平的表达变化。结果：不同浓度VPA（0．25、0．5、1、2、3、4、5mmol／L）、THP（0．1、1．0、2．5、5、10μmol／L）对Raji细胞均有一定的增殖抑制作用,呈时间和剂量依赖性;联合用药对细胞的增殖抑制率明显高于THP单药组．也呈时间和剂量依赖性（P〈0．05）。联合用药组细胞凋亡率明显高于VPA和THP单药组。Real-timePCR、WesternBlot结果显示联合用药组（0．25mmol／LVPA＋2．5μmol／LTHPlBaxmRNA和蛋白表达水平显著高于单药组．Bcl-2mRNA和蛋白表达量显著低于单药组．各组和对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：VPA及THP对Raji细胞增殖有抑制作用,且有浓度和时间依赖性。低浓度的VPA联合不同浓度THP对Raii细胞增殖抑制作用较单药应用显著增强。VPA联合THP一定程度上通过促进凋亡进而抑制了Raii细胞的增殖作用。     

EMT在大肠癌细胞奥沙利铂耐药中的作用及分子机制研究

目的：探讨上皮‐间叶转化（EMT）在大肠癌耐药中的作用及分子机制。方法采用药物浓度递增的方法建立大肠癌LOVO细胞奥沙利铂（L‐OHP）耐药细胞株LOVO／L‐OHP,免疫荧光和蛋白质印迹法（Westernblot）检测LOVO和LOVO／L‐OHP细胞E‐cadherin和Vimentin表达;Westernblot检测核转录因子Snail、Twist表达;噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖。结果与LOVO细胞比较,LOVO／L‐OHP皮表型消失,细胞膜E‐cadherin表达减弱（22．63±3．25）％（P＜0．01）,获得间叶细胞表型,表达Vimentin（475．42±58．36）％（P＜0．01）。LOVO／L‐OHP细胞株Twist表达轻度增加（116．42±18．36）％（P＞0．05）,Snail表达显著增加（382．18±41．33）％（P＜0．01）。siSnail上调E‐cadherin表达（246．82±31．57）％（P＜0．01）,下调Vimentin表达（28．75±3．96）％（P＜0．01）;siSnail显著增强LOVO／L‐OHP细胞株L‐OHP化疗敏感性,对照组和siSnail组的IC50分别为23．75μg／mL和12．42μg／mL。结论EMT在大肠癌细胞L‐OHP耐药中可能起重要作用,抑制EMT可恢复耐药细胞化疗敏感性。     

异甘草素诱导人卵巢癌细胞株SKOV3凋亡及自噬的研究

目的：观察异甘草素（ISL）对人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞株SKOV3体外增殖的抑制作用,并探讨其可能存在的分子机制。方法四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察ISL对SKOV3细胞生长的抑制作用;吖啶橙／溴化乙锭双荧光染色后观察细胞形态变化;流式细胞术AnnexinⅤ‐FITC／PI双染检测ISL对细胞凋亡的影响;Westernblot检测凋亡相关蛋白Bcl‐2、Bax及自噬相关蛋白Beclin1、LC3的表达水平。结果ISL能够抑制SKOV3细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性;荧光染色后可见细胞核变圆,碎裂,染色质浓缩;流式细胞仪检测ISL（5、10、20μg／mL）作用于SKOV3细胞48h后,凋亡率明显高于ISL0μg／mL组,差异具有统计学意义（P＜0．05）;Westernblot结果显示ISL（5、10、20μg／mL）作用于SKOV3细胞48h后Bcl‐2蛋白的表达下调,Bax、Beclin1、LC3蛋白的表达上调,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论ISL对人卵巢癌SKOV3细胞具有明显的抑制增殖和诱导凋亡的作用,其抗体外肿瘤机制可能与激活线粒体凋亡通路及自噬通路相关。     

抗氧化剂PDTC对酸性环境诱导的人卵巢癌SKOV3细胞IL-8表达的作用及机制

目的：探讨二硫氨基甲酸吡啶（PDTC）对酸性环境中培养的人卵巢癌细胞SKOV3的增殖活性及白细胞介素8 (IL-8) 表达的影响,以及细胞核转录因子-κB（NF-κB）在此过程中的作用。方法：将SKOV3细胞分为5组:常规培养液组（对照组）和酸性培养组以及酸性培养液加PDTC组(分别加入终浓度为25、50、100 μmol•L^-1的PDTC);各组培养12 h后,MTT法检测PDTC对SKOV3细胞增殖的影响,ELISA法检测培养上清中IL-8蛋白含量,Western blotting检测核内NF-κB蛋白的表达。结果： SKOV3细胞在酸性环境中IL-8表达水平［(1 384.211±42.320) ng•L^-1］高于对照组［（617.505±47.850） ng•L^-1］ ( P<0.01)。加入不同浓度PDTC（25、50、100 μmol•L^-1） ,IL-8表达逐步降低［（1 239.053±14.490）、（1 113.578±29.140）、（1 014.457±55.490） ng•L^-1］ ,均低于酸性培养组( P<0.05)。在酸性环境中的SKOV3细胞可观察到颜色较深的核内NF-κB蛋白条带,应用PDTC后NF-κB在核内的蛋白条带颜色变浅。结论： PDTC对酸性环境中SKOV3细胞IL-8的表达具有抑制作用,该作用与PDTC抑制NF-κB的活化有关。