三波长高效液相色谱指纹图谱、紫外指纹图谱及燃烧热联合鉴定银翘解毒丸质量

目的 建立银翘解毒丸(Yinqiao Jiedu Wan,YQJDW)三波长HPLC指纹图谱(HPLC-FP)联合紫外指纹图谱( JVFP)及燃烧热值谱(CH),从整体角度监控其全部化学物质组成的含量分布情况.方法 采用DAD检测器记录YQJDW在203、246和300 nm的HPL(指纹图谱,用六级系统指纹定量法(level-6 systematic qualified fingerprint method,L6-SQFM)综合评价药品质量等级;测定YQJDW (190～400 nm)紫外吸收光谱建立UVFPs突出反映中药中具有不饱和化学键及共轭体系物质的整体信息;用ZDHW6000型微机全自动量热仪测定YQJDW热含量相似度,从整体上表征该制剂中全部化学成分整体质量.最后对三者进行平均整合.结果 综合评价结果表明S2～S9质量(1或2级)极好或好;WS1质量(4级)较好;S1和DS1质量(5级)中等;其余质量(6级)-般.结论 把HPLC-FP.UVFP和燃烧热3种技术综合联用可覆盖中药化学物质总体信息全貌,具有准确、便捷、快速、重现、有效和可控的特点,是中药质量控制和评价的一种创新模式.从能量角度提供评价中药质量参数是中药质量控制研究和代谢研究的一种新思路和新方法.     

基于指纹图谱、化学模式识别及多成分定量评价十一方药酒质量

目的:基于HPLC指纹图谱、化学模式识别及多指标同时定量的方法研究不同批次十一方药酒,为该制剂的质量评价提供参考。方法:建立11批十一方药酒样品的HPLC指纹图谱,并对其进行相似度评价、主成分分析(principal component analysis,PCA),采用偏最小二乘-判别分析(partial least square-discriminate analysis,PLS-DA)考察不同批次十一方药酒的差异性成分。采用HPLC多波长法对6种化学成分进行含量测定。结果:建立的指纹图谱标定33个共有色谱峰,相似度0.977~0.997,共指认12个色谱峰。PCA将样品分成2类,通过PLS-DA,表明差异性成分共16个,包含定量分析的6个成分。含量测定中各色谱峰分离度较好,线性关系良好(r≥0.999 4),平均加样回收率95.34%~102.41%,RSD≤2.90%。结论:该研究建立的HPLC指纹图谱及含量测定方法准确、简单,可为十一方药酒提供质量评价。     

基于代谢组学的天舒胶囊质量评价与控制

目的:建立基于代谢组学的天舒胶囊高效液相色谱(HPLC)指纹图谱考察方法。方法:采用代谢组学的主成分分析(PCA)及偏最小二乘法(PLS)模型对54份天舒胶囊内容物提取液的HPLC指纹图谱进行整体观察和评价,找出并初步确证可能与相似度强相关的标志物,最后探讨代谢组学用于中药质量评价的可行性和价值。结果:该方法能从代谢组学的层面上区分各样品的质量情况,并以超HPLC-串联质谱法找到并确证标志物为洋地黄内酯Ⅰ,其可作为天舒胶囊的质量控制重点。结论:该HPLC中药指纹图谱-代谢组学平台能较好地应用于中药及中药材的质量标准研究。     

蒙药三子散HPLC指纹图谱结合化学模式识别研究

目的 建立蒙药三子散高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,通过化学模式识别方法综合评价其内在质量.方法 采用HPLC法,以京尼平苷色谱峰为参照峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》绘制15批三子散的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,标定并指认共有峰.结合聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析对1...     

Chromatographic fingerprint analysis of Cephalotaxus sinensis from various sources by high-performance liquid chromatography-diodearray detection-electrospray ionization-tandem mass spectrometry

Selective and efficient analytical methods are required not only for quality assurance but also for authentication of Chinese herbal medicine. A simple, rapid and valid fingerprint method has been first carried out for the quality control of Cephalotaxus sinensis by using high-performance liquid chromatography (HPLC) coupled with photodiode array detection (DAD) and electrospray ionisation-tandem mass spectrometry (ESI-MS). The characteristic analytical fingerprints of this plant extract showed 18 common peaks, and out of these, 10 compounds involving 2 new compounds were identified by comparing the retention time, UV and ESI-MS/MS spectrum of each standard with those of each peak separated by on-line HPLC-DAD-MS/MS. Moreover, the effects of collecting locations, harvesting time, storage time, drying methods, and medicinal portions on herbal chromatographic fingerprints were examined by similarity analysis and principal component analysis (PCA) along with markers. Using the reference fingerprint along with markers, the best harvesting time, cultivation location and medicinal part were determined. The results obtained suggest that the chromatographic fingerprint combining similarity evaluation and PCA along with markers or pharmacologically active constituents can efficiently identify raw herb of Cephalotaxus sinensis from different sources, which provide helpful clues to the study of plant's secondary metabolites and benefit quality control.     

龙生蛭胶囊的HPLC指纹图谱及其化学模式识别研究

目的 建立龙生蛭胶囊的HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法进行质量评价。方法 采用HPLC法建立龙生蛭胶囊的指纹图谱,进行相似度评价,确定共有峰;对测定结果进行层次聚类分析和主成分分析,并结合正交偏最小二乘–判别分析对样品进行模式识别,以VIP值大于1为标准筛选影响龙生蛭胶囊质量的差异性成分。结果 19批龙生蛭胶囊样品的HPLC指纹图谱共标定了20个共有峰,相似度均大于0.95,指认了9个共有峰,分别为槲皮素、没食子酸、原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸、芍药苷、刺五加苷E、异嗪皮啶、毛蕊异黄酮葡萄糖苷。19批样品可分为2类;前4个主成分的累积方差贡献率为85.504%;以VIP值大于1为标准,筛选出8个主要峰,13、8、2（没食子酸）、3（原儿茶酸）、1（槲皮素）、14（芍药苷）、10、11号峰。结论 建立了龙生蛭胶囊更全面、系统的质量评价和分析方法,为龙生蛭胶囊的质量标准提高提供理论依据。     

指纹图谱和主成分分析法评价杜仲叶的质量

目的采用主成分分析法(PCA)和指纹图谱法,对4个不同产地20个批次杜仲叶的质量进行评价。方法采用Aichrom AQ C18色谱柱(250 mm×4.5 mm,5μm),流动相为甲醇与0.1%甲酸的梯度洗脱系统,检测波长323 nm;检测并确定了20个批次药材指纹图谱的14个共有峰,采用二维双指标评价法和PCA统计分析法,统计出杜仲叶组分的分布特点。结果 2号(绿原酸)、3号(咖啡酸)、7号(未知)、10号(未知)组分为显著贡献的主成分组分。结论不同产地杜仲叶样品中指纹组分各异,确定的主组分能显著区别药材的不同产地,可为杜仲叶药材质量的整体控制及其制剂的质量研究提供依据。     

基于指纹图谱结合多成分定量分析的视疲宁片质量评价研究

目的:建立视疲宁片(SPN)的HPLC特征指纹图谱,结合聚类分析、主成分分析、多成分定量分析,为其质量评价提供依据。方法:采用Agilent C18柱(250mm×4.60mm,5μm),以流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱(0～15min,20%～25%乙腈,20～25min,25%～45%乙腈,25～30min,45%～95%乙腈);体积流量为1mL·min-1;检测波长为280nm;柱温30℃。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012年版)对10批SPN指纹图谱进行相似度评价,对共有峰进行聚类分析与主成分析,并对指认的6种指标成分进行定量分析。结果:10批SPN HPLC指纹图谱相似度均大于0.90,共20个共有峰,各峰分离度较好。10批SPN样品聚类分析与主成分分析结果具有一致性,且经主成分分析20个共有峰可综合分为6个主成分,累积方差贡献率为95.91%;通过与对照品比对确定6种指标成分,分别为绿原酸(3号峰)、阿魏酸(5号峰)、橙皮苷(7号峰)、淫羊藿苷(12号峰)、橙黄决明素(18号峰)、大黄酚(20号峰),所建立的成分分析方法可用于6种成分的含量测定。结论:HPLC特征指纹图谱结合模式识别可反映SPN的内在质量,建立的多成分定量分析方法对SPN的质量控制具有参考价值。     

符合中医药特点的中药新药评价思路探讨

目的:探讨中药新药区别于化学药新药的评价思路。方法:以真实世界证据为工具,以整体证据评价为方法,以电子化的患者报告结局为技术支持,创新中药新药评价思路。结果:1)提出中药新药质量控制中的质量一致性评价思路。在单一角度对中药新药质量一致性无法评价的前提下,采用整体证据方法这种多角度的审评观念,用真实世界证据评价多批次药品的疗效一致性,适当放宽中药新药质量一致性的要求,使中药新药的疗效一致性评价作为质量一致性评价的有力补充。2)提出中药新药临床疗效评价思路。在传统临床试验的评价基础上,以患者为中心进行临床试验设计,创建电子化的患者报告结局,关注患者生活质量改善,形成临床疗效的支持性证据。结论:鼓励采用新工具、新方法、新技术、新思路,在中药新药评价中充分体现中药临床疗效评价方法的开创性,创新中药新药评价思路。     

用双定性双定量混批勾兑技术控制玄参-地黄渗漉液质量

目的应用双定性双定量混批勾兑技术控制玄参-地黄渗漉液质量。方法采用反相高效液相色谱法，以Century SIL C18 BDS（200mm×4．6mm，5μm）色谱柱，1％HAC-水和1％HAC-乙腈为流动相，梯度洗脱，流速1．0mL·min^-1柱温（30．00±0．15）℃，进样量5μL，紫外检测波长280nm。结果以哈巴俄苷为参照物峰，确定17个共有峰，建立了玄参-地黄渗漉液的HPLC指纹图谱。用孙国祥等研制的“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件计算获得其双定性相似度（SF和S＇F）和双定量相似度（C和P）结果。10批玄参-地黄渗漉液的含量除S1与S3完全合格外，S2与S4含量明显偏高，其余6批次含量明显偏低。以双定量相似度的均值为控制指标经混批勾兑后所得15批样品的双定性相似度和双定量相似度都符合要求，混批勾兑后15批样品的双定性相似度的RSD〈2．4％，双定量相似度的RSD〈C4％。结论以双定性双定量相似度理论为基础的混批勾兑技术能够消除药材、制剂或其提取物中间体的批间化学成分数量、分布比例和含量差畀，可从宏观角度准确有效地控制中药材、提取物、中间体和制剂质量。     

指纹图谱结合模式识别、一测多评的连翘质量评价

目的建立连翘药材的指纹图谱并结合模式识别、一测多评技术对其进行系统、全面的质量评价。方法采用HPLC测定10批次连翘样品的指纹图谱,建立指纹图谱共有模式,通过相似度分析,结合聚类分析、主成分分析等模式识别技术对其进行定性评价。以连翘苷为内参物,建立连翘酯苷A、(+)松脂醇-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘酯素与内参物的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评的定量评价;同时采用外标法测定10批连翘中4个成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证一测多评法的准确性。结果建立的指纹图谱共标定13个共有峰,并对其中4个进行了归属,分别是连翘酯苷A、(+)松脂醇-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘苷、连翘酯素,10批次连翘样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均>0.98,通过聚类分析及主成分分析将其分为3类。建立的相对校正因子重现性良好,采用校正因子计算的含量值与实测值之间相关系数均>0.99,相对误差均<3%。结论本研究建立的分析方法直观、准确、简便、可行。指纹图谱结合模式识别、一测多评技术进行定性定量分析可以为连翘的质量控制提供科学依据。     

HPLC指纹图谱结合化学计量学分析不同企业心脑健胶囊(片)的差异

目的 建立心脑健胶囊(片)质量评价方法,比较不同企业心脑健胶囊(片)的质量差异。方法 将中国药典2020年版一部心脑健胶囊项下特征图谱转化为指纹图谱,并进行方法学考察。与对照品进行比较,确定特征峰成分。测定3个厂家的21批产品,通过相似度分析其指纹图谱的异同,进一步使用聚类分析和主成分分析进行模式识别。结果 3家企业之间心脑健胶囊(片)指纹图谱存在差异,聚类分析和主成分分析结果基本一致,样品按厂家各自聚为一类,其中峰10(表没食子儿茶素没食子酸酯),13(没食子酸儿茶素没食子酸酯)、16(表儿茶素没食子酸酯)等特征峰对指纹图谱影响较大。在企业H样品中表没食子儿茶素没食子酸酯含量较低,仅为企业N样品中相应成分含量的60.08%,而没食子酸儿茶素没食子酸酯含量较高。在企业S样品中没食子酸儿茶素没食子酸酯含量较低,为企业N样品中相应成分含量的42.47%,而表儿茶素没食子酸酯含量相对较高。另外,各企业样品所含主要成分的比例均不相同。结论 化学计量学辅助的HPLC指纹图谱具有简便、客观、可数字化的优点,可直观地区别不同企业心脑健胶囊(片)成分及其比例的差异。     

酒萸肉超高效液相色谱指纹图谱的建立及化学计量分析

目的建立酒萸肉的超高效液相色谱指纹图谱,并进行聚类分析和主成分分析。方法色谱柱为ACE3 C18-AR柱(100 mm×2.1 mm,3μm),流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.2 m L/min,检测波长为254 nm,柱温为25℃,进样量为1μL。以马钱苷为参照峰绘制76批酒萸肉药材样品的指纹图谱,并与10批山萸肉药材样品的指纹图谱进行比较。采用Chempattern化学计量学软件进行相似度评价,并进行聚类分析和主成分分析。结果76批酒萸肉药材指纹图谱共确定7个共有峰、6种成分,分别为没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷、山茱萸新苷;76批酒萸肉药材样品中有60批次的相似度大于0.8;76批酒萸肉药材样品和10批山萸肉药材样品聚为两大类,两大类的5-羟甲基糠醛含量差异明显;经主成分分析,峰6和峰2均是导致药材样品质量差异的重要因素。结论所建立的超高效液相色谱指纹图谱可用于酒萸肉的质量评价。     

Chromatographic fingerprint analysis and quantitative evaluate the rhizomes of Alpinia officinarum Hance (lesser galangal)

The rhizome of Alpinia officinarum Hance is a well-known traditional Chinese medicine (TCM) and has been widely used for the remedy of gastrointestinal diseases. In the present study, a simple and rapid HPLC-DAD was developed for the qualitycontrol of the rhizomes of A. officinarum. Its chemical fingerprint was established using raw material of 15 different origins in China. Similarity analysis (SA) and hierarchical clusting analysis (HCA) were applied to select the qualitative markers. Principal components analysis (PCA) was conducted to select the quantitative markers of the rhizomes of A. officinarum samples from different origins. The constituents were confirmed by (+) electrospray ionization LC-MS. 12constituents were selected as common peaks and 10 of them were confirmed by (+) electrospray ionization LC-MS. Six bioactive constituents including DPHA, galangin flavanone, galangin, galangin 3-methylether, DPHB and DPHC were simultaneous determination by using the HPLC-DAD analysis. The developed method was able to determine the bioactive components with excellent resolution, precision and recovery. The results indicated that chromatographic fingerprint combination with multi-components determination method is suitable for quality assessment of the rhizomes of A. officinarum.     

多元多维定量指纹图谱交叉评价防风通圣丸

目的建立防风通圣丸五波长(246、254、265、280、300 nm)高效液相色谱指纹图谱(HPLC-FP)、紫外光谱指纹图谱(UV-FP)、红外光谱指纹图谱(IR-FP)和热值谱(HVF),形成多元多维方法交叉定量评价FFTSP质量。方法用系统指纹定量法(SQFM)评价五波长指纹图谱并用指纹熵权整合评价FFTSP质量。用190⁴00 nm区间UV-FP表达π→π*,n→π*和n→σ*的化学组分,用4 000400 nm区间UV-FP表达π→π*,n→π*和n→σ*的化学组分,用4 000⁴00 cm-1 IR-FP表达单键、双键和三键等的振动(或转动)对中红外线的吸收,均以光谱点为评价单元。用燃烧焓衡量中药有机物达到高价氧化态的热释放度,从而揭示有机组分总量。结果将五波长HPLC指纹图谱、光谱指纹谱和热值谱交叉定量评价出S1质量劣(8级),其余样品质量均在中等以上。4种检测信息相互补充、相应对照,描绘出FFTSP多元化学成分的分布状况,最终鉴定S7可作为FFTSP的标准制剂和标准指纹对照物。结论此4种多元多维指纹图谱的交叉整合能监测中药各类化学成分的分布情况,为中药质量控制提供了一种简单,价廉的探索性方法。多元多维指纹图谱技术在原理上优势互补,其合理交叉整合定性定量信息具备综合鉴定中成药质量全貌的技术基础,这为寻找中成药大复方体系的标准制剂提供了一种探索模式,具有现实性、有效性、可靠性和可操作性。     

An approach to develop binary chromatographic fingerprints of the total alkaloids from Caulophyllum robustum by high performance liquid chromatography/diode array detector and gas chromatography/mass spectrometry

An approach was proposed to develop binary chromatographic fingerprints by means of high performance liquid chromatography/diode array detector (HPLC/DAD) and gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS). HPLC fingerprint and GC/MS fingerprint that, respectively, represent chemical characteristics of aporphinoid and quinolizidine alkaloids of the total alkaloids from Caulophyllum robustum were developed, which were used to construct binary chromatographic fingerprints of the total alkaloids. Moreover, the authentication and validation of the binary fingerprints were performed. Then, a data-level information fusion method was employed to capture the chemical information encoded in two chromatographic fingerprints. Finally, based on the fusion results, the quality of 10 batches of the total alkaloids samples was further evaluated by similarity measure and cluster analysis method. In comparison with conventional fingerprint, the binary chromatographic fingerprints which represent the characteristics of more constitutions can comprehensively and properly reveal the quality characteristics of the total alkaloids. The binary chromatographic fingerprints can reach more objective conclusions in the practice of quality control of the total alkaloids. In conclusion, the binary chromatographic fingerprints are suitable for quality control of the total alkaloids. The presented approach is a powerful and meaningful tool to comprehensively conduct the quality control of traditional Chinese medicine (TCM).     

关于中药指纹图谱用于枸杞子质量控制的探讨

目的:探讨建立在现代分析手段基础上的中药指纹图谱用于枸杞子内在质量控制的可行性。方法:在总结中药指纹图谱研究成就的基础上,结合目前化学指纹图谱、DNA指纹图谱等在中药枸杞子方面的研究,将其作为枸杞子内在质量控制的可行性进行了分析、探讨。结果与结论:在保证取样方法科学性和样品代表性的基础上,中药指纹图谱可以用于枸杞子内在质量评价,实际运用中尽可能采用西医质量判定标准,以提高国际认可度。     

不同产地多伞阿魏挥发油成分GC-MS指纹图谱研究

目的建立多伞阿魏药材的GC-MS指纹图谱。方法采用水蒸气蒸馏法提取8个产地44份多伞阿魏挥发油,通过GC-MS分析其成分。运用中药色谱指纹图谱相似度建立共有模式,以2种方法计算相似度评价图谱的相似性,同时利用聚类分析法和主成分分析法分析结果。结果建立了多伞阿魏挥发油GC-MS指纹图谱分析方法;对44份多伞阿魏挥发油样品进行了分析,确立了12个共有峰。GC-MS指纹图谱的相似度>0.90的有37个。44份多伞阿魏药材的挥发油可通过系统聚类归为2类,该结果与指纹图谱的相似度分析结果非常相似,不同产地多伞阿魏药材的挥发油相似度较高。主成分分析表明愈创木醇在多伞阿魏挥发油的质量控制中起着比较重要的作用。结论该方法简便、准确、重现性好,可用于多伞阿魏药材的质量综合评价。     

Combinative method using HPLC fingerprint and quantitative analyses for quality consistency evaluation of an herbal medicinal preparation produced by different manufacturers

A combinative method using HPLC-DAD fingerprint and quantitative analysis was developed and validated for manufacturer-to-manufacturer quality consistency evaluation of Yiqing preparations. For fingerprint analysis, 22 peaks were selected as the characteristic peaks to evaluate the similarities of different samples collected from different manufacturers. The similarities of 12 Yiqing samples were beyond 0.90, indicating that samples from different manufacturers were, to some extent, consistent. Additionally, simultaneous quantification of nine markers including berberine, aloe-emodin, rhein, emodin, chrysophanol, baicalin, baicalein, wogonoside, and wogonin in Yiqing was performed to interpret the quality consistency. The results from the quantitative data showed that the contents of these nine marker compounds were quite consistent for batches produced within one manufacturer and significantly different from manufacturer-to-manufacturer. This study demonstrated that a combination of the chromatographic fingerprint and quantitative analysis offers an efficient way to quality consistency evaluation of herbal preparation.     

固相微萃取/气-质联用法分析香连制剂中挥发性成分

目的： 利用固相微萃取/气相色谱-质谱联用法（SPME/GC-MS）分析香连制剂（水丸/浓缩丸/片/胶囊）中的挥发性成分。方法： 采用SPME法提取挥发性成分,GC-MS法对挥发性成分进行分离鉴定,建立其指纹图谱,并对香连制剂样品进行相似度评价和主成分分析。结果： 对24批不同剂型香连制剂进行分析,确定了15个共有峰,构成了香连制剂挥发性成分的指纹图谱,其中6个共有峰得到了确认,分别为去氢木香内酯,β-榄香烯,β-石竹烯,氧化石竹烯,α-紫罗兰酮和β-紫罗兰酮。结论： 水丸、浓缩丸与片剂、胶囊中挥发性成分组成相似,但在相对含量上存在差异。